一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置制造方法
【专利摘要】本实用新型提供了一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置，该装置包括：离子交换柱、超滤器、脱盐柱和干燥器；其中，在从上游至下游的方向上，所述离子交换柱与所述超滤器之间连接有带阀门的液体管路，所述离子交换柱与所述脱盐柱之间连接有带阀门的液体管路，所述超滤器与所述干燥器之间连接有液体管路，所述脱盐柱与所述干燥器之间连接有液体管路。本实用新型能够高收率地更全地获得大丽轮枝菌分泌蛋白。
【专利说明】 一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及农业生物【技术领域】，具体地，涉及一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置。
【背景技术】
[0002]大丽轮枝菌(Verticillium dahlia),属于半知菌亚门轮枝菌属真菌。大丽轮枝菌的寄主范围极广，可为害38科660种植物，其中农作物184种，杂草153种。在中国，大丽轮枝菌的寄主植物至少涉及20科80种，例如向日葵、爺子、辣子、番茄、烟草、马铃薯、甜瓜、西瓜、黄瓜、花生、菜豆、绿豆、大豆、棉花、芝麻、甜菜等大田作物。其中，大丽轮枝菌能够引发棉花的黄萎病，因此研究大丽轮枝菌的生物学特征具有重大意义。
[0003]在大丽轮枝菌的研究过程中，需要制备大丽轮枝菌分泌蛋白的全蛋白，而大丽轮枝菌的分泌蛋白在其培养液中的含量较低，且粘性较大，现有的制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置都各有优缺，不能够实现分泌蛋白的全息化提取。
实用新型内容
[0004]针对上述存在的问题和解决方法的不足，本实用新型将研发一种新的制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置，其适合用于制备大丽轮枝菌分泌蛋白的全蛋白，以实现高收率地更全地获得大丽轮枝菌分泌蛋白的目的。
[0005]为了实现上述目的，本实用新型提供了一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置，该装置包括:离子交换柱、超滤器、脱盐柱和干燥器；其中，在从上游至下游的方向上，所述离子交换柱与所述超滤器之间连接有带阀门的液体管路，所述离子交换柱与所述脱盐柱之间连接有带阀门的液体管路，所述超滤器与所述干燥器之间连接有液体管路，所述脱盐柱与所述干燥器之间连接有液体管路。
[0006]优选地，所述离子交换柱包括依次连接的阴离子交换柱和阳离子交换柱。
[0007]优选地，所述离子交换柱的入口上连接有至少一个液体管路。
[0008]优选地，所述离子交换柱的入口上连接有至少三个液体管路。
[0009]优选地，所述离子交换柱的入口上连接有至少三个带阀门的液体管路。
[0010]优选地，所述阀门为切断阀。
[0011]优选地，连接所述超滤器与所述干燥器的液体管路连接在超滤器的截留侧。
[0012]优选地，所述干燥器为冷冻干燥器。
[0013]通过上述技术方案，本实用新型能够高收率地更全地获得大丽轮枝菌分泌蛋白。
[0014]本实用新型的其他特征和优点将在随后的【具体实施方式】部分予以详细说明。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1为本实用新型特别优选的一种实施方式的装置结构示意图。
[0016]附图标记说明[0017]I阴离子交换柱2阳离子交换柱
[0018]3超滤器4脱盐柱
[0019]5干燥器11带阀门的液体管路
[0020]12带阀门的液体管路13带阀门的液体管路
[0021]31带阀门的液体管路41带阀门的液体管路
【具体实施方式】
[0022]以下对本实用新型的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的【具体实施方式】仅用于说明和解释本实用新型，并不用于限制本实用新型。
[0023]本实用新型提供了一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置，该装置包括:离子交换柱、超滤器、脱盐柱和干燥器；其中，在从上游至下游的方向上，所述离子交换柱与所述超滤器之间连接有带阀门的液体管路，所述离子交换柱与所述脱盐柱之间连接有带阀门的液体管路，所述超滤器与所述干燥器之间连接有液体管路，所述脱盐柱与所述干燥器之间连接有液体管路。
[0024]优选地，所述离子交换柱包括依次连接的阴离子交换柱和阳离子交换柱。其中，所述离子交换柱可以为蛋白纯化领域常规使用的离子交换柱，例如购自GE公司的Hitrap TMCapto SP/Q离子交换柱。
[0025]其中，所述超滤器可以为蛋白纯化领域常规使用的超滤器，例如购自Millipore公司的Cogent μ Scale超滤器。
[0026]其中，所述脱盐柱可以为蛋白纯化领域常规使用的脱盐柱，例如购自？ GE公司的Sephadex脱盐柱。
[0027]优选地，所述离子交换柱的入口上连接有至少一个液体管路。离子交换柱入口上的液体管路用于通入含有大丽轮枝菌分泌蛋白的样品(例如大丽轮枝菌培养液)、离子交换洗涤液(例如水)和洗脱液(例如高盐溶液)中的至少一种。
[0028]优选地，所述离子交换柱的入口上连接有至少三个液体管路；它们分别用于通入含有大丽轮枝菌分泌蛋白的样品(例如大丽轮枝菌培养液)、离子交换洗涤液(例如水)和洗脱液(例如高盐溶液)。
[0029]优选地，所述离子交换柱的入口上连接有至少三个带阀门的液体管路；它们分别用于通入含有大丽轮枝菌分泌蛋白的样品(例如大丽轮枝菌培养液)、离子交换洗涤液(例如水)和洗脱液(例如高盐溶液)。
[0030]优选地，所述阀门为切断阀。
[0031]优选地，连接所述超滤器与所述干燥器的液体管路连接在超滤器的截留侧。
[0032]其中，所述干燥器可以为蛋白纯化领域常规使用的干燥器，优选地，所述干燥器为冷冻干燥器，如购自德国Christ公司的冷冻干燥器。
[0033]根据本实用新型的一种特别优选的实施方式:如图1所示，在从上游至下游的方向上，阴离子交换柱I的入口上连接有三个带阀门的液体管路，分别为带阀门的液体管路
11、带阀门的液体管路12和带阀门的液体管路13，分别用于通入含有大丽轮枝菌分泌蛋白的样品(例如大丽轮枝菌培养液)、离子交换洗涤液(例如水)和洗脱液(例如高盐溶液);阴离子交换柱I的出口与阳离子交换柱2的入口之间具有液体管路；阳离子交换柱2的出口与超滤器3之间连接有带阀门的液体管路31，阳离子交换柱2的出口与所述脱盐柱4之间连接有带阀门的液体管路41，所述超滤器3与所述干燥器5之间连接有液体管路，所述脱盐柱4与所述干燥器5之间连接有液体管路。
[0034]在使用时，先将带阀门的液体管路12、带阀门的液体管路13和带阀门的液体管路41关闭，将带阀门的液体管路11和带阀门的液体管路31开放；通过带阀门的液体管路11通入含有大丽轮枝菌分泌蛋白的样品(例如大丽轮枝菌培养液)，该样品依次进入阴离子交换柱I和阳离子交换柱2，样品中的蛋白中能与离子交换柱结合的那部分蛋白分别挂载在阴离子交换柱I和阳离子交换柱2上，样品中的蛋白中不能与离子交换柱结合的那部分蛋白通过带阀门的液体管路31进入超滤器3中，超滤器3富集样品中的蛋白中不能与离子交换柱结合的那部分蛋白，并通入干燥器5中；然后关闭带阀门的液体管路11，打开带阀门的液体管路12，在带阀门的液体管路12中通入离子交换洗涤液(例如水)，将残留的不能与离子交换柱结合的那部分蛋白洗涤出来，也进入干燥器5中；然后关闭带阀门的液体管路12和带阀门的液体管路31，打开带阀门的液体管路13和带阀门的液体管路41，在带阀门的液体管路13中通入洗脱液(例如高盐溶液)，将能与离子交换柱结合的那部分蛋白从离子交换柱上洗脱下来，通过带阀门的液体管路41进入脱盐柱4脱去盐分，而后进入干燥器5 ;干燥器5中混合了超滤器3富集得到的蛋白(即不能与离子交换柱结合的那部分蛋白)和脱盐柱4脱盐后的蛋白(即能与离子交换柱结合的那部分蛋白)，进行干燥后即得到了大丽轮枝菌的分泌蛋白。
[0035]以上详细描述了本实用新型的优选实施方式，但是，本实用新型并不限于上述实施方式中的具体细节，在本实用新型的技术构思范围内，可以对本实用新型的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本实用新型的保护范围。
[0036]另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本实用新型对各种可能的组合方式不再另行说明。
[0037]此外，本实用新型的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本实用新型的思想，其同样应当视为本实用新型所公开的内容。
【权利要求】
1.一种制备大丽轮枝菌分泌蛋白的装置，其特征在于，该装置包括:离子交换柱、超滤器、脱盐柱和干燥器；其中，在从上游至下游的方向上，所述离子交换柱与所述超滤器之间连接有带阀门的液体管路，所述离子交换柱与所述脱盐柱之间连接有带阀门的液体管路，所述超滤器与所述干燥器之间连接有液体管路，所述脱盐柱与所述干燥器之间连接有液体管路。
2.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述离子交换柱包括依次连接的阴离子交换柱和阳离子交换柱。
3.根据权利要求1或2所述的装置，其特征在于，所述离子交换柱的入口上连接有至少一个液体管路。
4.根据权利要求3所述的装置，其特征在于，所述离子交换柱的入口上连接有至少三个液体管路。
5.根据权利要求4所述的装置，其特征在于，所述离子交换柱的入口上连接有至少三个带阀门的液体管路。
6.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述阀门为切断阀。
7.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，连接所述超滤器与所述干燥器的液体管路连接在超滤器的截留侧。
8.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述干燥器为冷冻干燥器。
【文档编号】C07K1/34GK203558995SQ201320737389
【公开日】2014年4月23日 申请日期:2013年11月20日 优先权日:2013年11月20日
【发明者】戴小枫, 肖红利, 陈捷胤, 李蕾, 桂月晶, 包郁明 申请人:中国农业科学院农产品加工研究所