抗CXCL13抗体和其使用方法与流程

抗CXCL13抗体和其使用方法用本申请提交的电子提交ASCII文本文件序列表(名称:"sequencelisting_ascii.txt";大小:16,923字节;和创建日期:2011年4月28日)的内容通过引用全文纳入本文。技术背景内稳态B细胞虏获（cell-attracting）趋化因子1(BCA-1)也称为CXCL13(或ANGIE、BLC、BLR1L、ANGIE2或Scyb13)，在次级淋巴器官(如脾、淋巴结和派尔斑)中由滤泡型树突细胞(FDC)和巨噬细胞组成型表达。参见Gunn等，Nature391:799-803(1998)和Carlsen等，Blood104(10):3021-3027(2004)。CXCL13主要通过G蛋白偶联CXCR5受体(伯基特淋巴瘤受体1)作用。例如在成熟的B淋巴细胞、CD4+滤泡型辅助T细胞(Thf细胞)、小部分CD8+T细胞和活化的扁桃体调节性T细胞(Treg)上表达CXCR5。参见Legler等，J.Exp.Med.187:655-660(1998);等,Blood84:830-840(1994);Fazilleau等,Immunity30:324-335(2009);Ansel等,J.Exp.Med.190:1123-1134(1999);Lim等,J.Clin.Invest.114(11):1640-1649(2004);和R.ChapterinAcademicPressCytokineReference,2000年8月。产生有自身抗体(针对自身抗原的抗体)生成潜能的B细胞在正常生理情况下是常见的。然而，这种天然自身抗体是低亲和性IgM抗体，其显示了广谱反应性并且对可溶性自身抗原相比细胞表面抗原有更强优先性(参见例如Dichiero等,J.Immunol.134(2):765-771(1985);Cote等,Proc.Natl.Acad.Sci83:2959-2963(1986))。自身反应的低亲和性B细胞经历细胞凋亡，并且因此不太可能危及健康生物。没有传染和在正常免疫反应中，CXCL13和其受体CXCR5参与B细胞和滤泡型B辅助T细胞归巢到淋巴结和脾中的初级滤泡；生发中心形成；和淋巴器官发生。参见，例如等，Cell87:1037-1047(1996)。CXCL13和CXCR5缺陷小鼠显示了由于缺乏有序滤泡引起的派尔斑和淋巴结的发育损害。参见Ansel等,Nature406:309-314(2000)。另外，在CXCL13敲除表型背景中用T细胞依赖性抗原的免疫引起淋巴结和脾中形成错位和异常小生发中心(Ansel等)。在慢性炎症环境中，在受影响(经常是非淋巴)组织内形成异位生发中心。在这些生发中心中滤泡型树突细胞(FDC)的CXCL13过量表达伴有FDC、B细胞和滤泡型Th细胞之间相互作用失调，降低了自身反应B细胞的消除和随后抗原驱动的亲和性成熟长期浆细胞生成以及生成高亲和性IgG自身抗体的记忆B细胞，能造成自身免疫和炎症疾病发展。参见，例如Vinuesa等，Immunology9:845-857(2009)。再者，报道了某些癌症中CXCR5受体的过度表达提高CXCL13依赖性细胞增殖和转移。在幽门螺旋杆菌（H.pylori）诱导的胃淋巴滤泡和粘膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤上观察到CXCL13(BCA-1)和其受体CXCR5的高水平表达。参见例如Mazzucchelli等,JClinInvest104:R49-R54(1999)。另外，在幽门螺旋杆菌（H.pylori）诱导胃炎的所有样品中发现了CXCL13(BCA-1)表达。同上（Id.）。海尔曼螺杆菌（H.heilmannii）感染的野生型小鼠的胃粘膜中，已知参与淋巴组织(包含MALT)器官发生的CXCL13的mRNA表达水平显著高于未感染的小鼠。参见Nobutani等,FEMSImmunolMedMicrobiol60:156-164(2010)。靶向CXCL13所介导信号通路的治疗需求在近些年中明显增加。这种治疗的作用机制包含例如阻断CXCL13与其受体的相互作用，造成干扰B细胞和滤泡型B辅助T细胞迁移到发炎组织和生发中心形成(如在自动免疫疾病情况中)和抑制癌细胞增殖和在肿瘤疾病中扩散的能力。技术领域本发明涉及CXCL13中和结合分子如抗体和其抗原结合片段例如人源化单克隆抗体，所述结合分子的使用方法，和治疗CXCL13表达细胞相关病症和疾病的方法。

技术实现要素：
一方面，本发明涉及特异性结合与参照单克隆抗体相同CXCL13表位的经分离抗原结合分子，所述参照单克隆抗体选自MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2和3C9。在某些实施方式中，所述抗原结合分子特异性结合与MAb5261和MAb5378相同的CXCL13表位。另一方面，本发明涉及特异性结合CXCL13的经分离抗原结合分子，所述结合分子竞争性抑制参照单克隆抗体特异性结合CXCL13，所述参照单克隆抗体选自MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2和3C9。在某些实施方式中，所述抗原结合分子竞争性抑制MAb5261和MAb5378。在另一个实施方式中，所述抗原或其片段选自MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2和3C9。在本发明的一个实施方式中，所述分离抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13，并且所述抗体或其片段的重链可变区(VH)包含与选自SEQIDNO:13和SEQIDNO:3的序列至少90％相同的氨基酸序列。在另一个实施方式中，所述抗体或其片段的轻链可变区(VL)包含与选自SEQIDNO:15、SEQIDNO:17和SEQIDNO:8的序列至少90％相同的氨基酸序列。在另一个实施方式中，所述分离的抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13，并且所述抗体或其片段的VH包含除了20个或更少保守性氨基酸取代外，与选自SEQIDNO：13和SEQIDNO：3的序列相同的氨基酸序列。在另一个实施方式中，所述抗体或其片段的VL包含除了20个或更少保守性氨基酸取代外，与选自SEQIDNO:15、SEQIDNO:17和SEQIDNO:8的序列相同的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述分离抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13，并且所述抗体或其片段的VH和VL包含与选自下组的VH和VL序列至少90%相同的氨基酸序列：(a)分别是SEQIDNO:13和SEQIDNO:15;(b)分别是SEQIDNO:13和SEQIDNO:17;和(c)分别是SEQIDNO:3和SEQIDNO:8。在另一个实施方式中，所述分离抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13，其中所述抗体或其片段的VH和VL包含除了20个或更少保守性氨基酸取代外，与选自下组的VH和VL序列相同的氨基酸序列：(a)分别是SEQIDNO:13和SEQIDNO:15;(b)分别是SEQIDNO:13和SEQIDNO:17;和(c)分别是SEQIDNO:3和SEQIDNO:8。在一个实施方式中，所述分离的抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13，并且所述抗体或其片段的VH包含除了两个或更少的氨基酸取代外，与SEQIDNO：4相同的Chothia-Kabat重链互补决定区-1(VH-CDR1)氨基酸序列；除了四个或更少的氨基酸取代外，与SEQIDNO:5相同的Kabat重链互补决定区-2(VH-CDR2)氨基酸序列；除了两个或更少的氨基酸取代外，与SEQIDNO:6相同的Kabat重链互补决定区-3(VH-CDR3)氨基酸序列；除了四个或更少的氨基酸取代外，与SEQIDNO:16或9相同的Kabat轻链互补决定区-1(VL-CDR1)氨基酸序列；除了两个或更少的氨基酸取代外，与SEQIDNO:10相同的Kabat轻链互补决定区-2(VL-CDR2)氨基酸序列；或者除了两个或更少的氨基酸取代外，与SEQIDNO:11相同的Kabat轻链互补决定区-3(VL-CDR3)氨基酸序列。在某些实施方式中，所述分离的抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13，并且所述抗体或其片段的VH包含VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3氨基酸序列，除了一个或多个所述VH-CDR中的4个或更少氨基酸取代以外，所述VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3氨基酸序列分别包含SEQIDNO：4、5和6。在另一个实施方式中，所述分离的抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13，并且所述抗体或其片段的VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3氨基酸序列，除了一个或多个VL-CDR中的4个或更少氨基酸取代以外，所述VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3氨基酸序列分别包含SEQIDNO：16或9、10和11。在一些实施方式中，本发明的抗体或其片段抑制CXCL13与CXCL13受体结合。在一些实施方式中，所述CXCL13受体是CXCR5。在另一个实施方式中，本发明的抗体或其片段是人源化的、灵长类化的或嵌合的。本发明的另一方面针对包含本发明抗体或其片段、和运载体（carrier）的组合物。本发明的其他方面针对包含抗体VH多肽编码核酸的经分离多核苷酸，其中所述VH多肽的氨基酸序列与选自SEQIDNO:12和SEQIDNO:2的序列至少90%相同。另一个方面，本发明针对包含抗体VL多肽编码核酸的经分离多核苷酸，其中所述VL多肽的氨基酸序列与选自SEQIDNO:7和SEQIDNO14的序列至少90%相同；并且，包含所述VL多肽的抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13。在一个实施方式中，所述分离多核苷酸包含抗体VH多肽的编码核酸，其中所述VH多肽的氨基酸序列除了20个或更少保守性氨基酸取代外，与选自SEQIDNO:2和SEQIDNO:12的序列相同。在另一个实施方式中，所述分离多核苷酸包含抗体VL多肽的编码核酸，其中所述VL多肽的氨基酸序列除了20个或更少保守性氨基酸取代外，与选自SEQIDNO:7、SEQIDNO:14和SEQIDNO:18的序列相同，并且，包含所述VL多肽的抗体或其抗原结合片段特异性结合CXCL13。本发明的其他方面针对包含本发明多核苷酸的载体。另一方面针对包含本发明载体的宿主细胞。本发明还针对生成特异性结合CXCL13的抗体或其片段的方法，所述方法包含培养本发明的宿主细胞和回收所述抗体或其片段。本发明另一方面针对中和动物中CXCL13的方法，所述方法包含给予所述动物含有以下的组合物：本发明的分离抗体或其片段；和药学上可接受的运载体。本发明的其他实施方式针对在需要治疗的动物中治疗自身免疫疾病或炎性疾病的方法，所述方法包含给予所述动物含有以下的组合物：本发明的分离抗体或其片段或组合物；和药学上可接受的运载体。在一些实施方式中，所述自身免疫疾病或所述炎性疾病是多发性硬化、系统性红斑狼疮(SLE)或关节炎，如类风湿性关节炎。本发明其他方面针对降低或抑制动物中胃淋巴滤泡的方法，所述方法包含给予所述动物含以下的组合物：本发明的分离抗体或其片段和药学上可接受的运载体。本发明的其他实施方式针对在需要防止或治疗的动物中防止或治疗粘膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤或者胃或十二指肠溃疡的方法，所述方法包含给予所述动物含以下的组合物：本发明的分离抗体或其片段和药学上可接受的运载体。在一个实施方式中，用螺杆菌（Heliobacter）感染所述动物。在一个实施方式中，所述螺杆菌是幽门螺旋杆菌（H.pylori）或海尔曼螺杆菌（H.heilmannii）。附图简要说明图1。特异性ELISA结果显示了与抗体对照(小鼠MAb801和/或大鼠MAb470)相比，小鼠抗人CXCL13抗体(3D2和3C9)与重组人CXCL13(1A)、重组小鼠CXCL13(1B)、和重组短尾猴CXCL13(1C)的结合。显示的EC50值从四参数S形曲线拟合中获得(曲线显示在图中；生成EC50值的所述曲线的R2是0.99)。图2。表位竞争ELISA结果显示了与没有竞争物或MAb801的结果相比，对小鼠抗人CXCL13抗体(3C9和3D2)而言，生物素化3D2与人CXCL13结合的抑制百分比。图3。捕获表位竞争性ELISA结果显示了3D2抑制生物素-3C9与天然或重组人CXCL13的结合(3A)和生物素-3D2与天然或重组小鼠CXCL13的结合(3B)。使用四参数S形曲线拟合来拟合曲线(曲线在图中显示;所述R2=0.99)。使用非配对t检验分析EC50值的差异，并且发现P>0.05。图4。B细胞迁移结果显示了3D2和3C9对人CXCL13诱导的人前-B-697-hCXCR5细胞迁移(4A)和人SDF-1α诱导的前-B-697-hCXCR4细胞迁移(4B)的影响。小鼠IgG用作阴性对照。MAb801用作抑制人CXCL13迁移的阳性对照，并且MAb87A用作抑制人SDF-1α诱导迁移的阳性对照。图5。在C57Black/6中通过3D2、MAb470、小鼠IgG(对照)或大鼠IgG(对照)(5A)和在SJL/J中通过3D2、3C9、MAb470或小鼠IgG(对照)(5B)的脾细胞迁移的抑制百分比。所述结果表示为两个(C57Black/6迁移)独立实验的平均值+/-SD和三个(SJL/J迁移)独立实验的平均值+/-SEM。通过生成P值>0.05的非配对t检验分析3D2对C57Black/6和SJL/J迁移(5C)影响的比较。使用四参数S形曲线拟合来拟合曲线(曲线在图中显示;R2=0.99)。图6。通过3D2或对照(MAb470和/或小鼠IgG)，对人和小鼠CXCR5受体的人CXCL13所介导胞吞作用(6A)和小鼠CXCL13所介导胞吞作用(6B)而言CXCL13介导的胞吞作用结果。(6C)显示了人和小鼠CXCL13所介导胞吞作用EC50值的比较，所述EC50值从R2值等于1(小鼠胞吞作用)和0.994(人胞吞作用)的S形剂量反应曲线中得出。用生成P值>0.05的非配对t检验分析比较3D2对人和小鼠受体胞吞作用影响的数据。图7。用3D2(第0天开始)、3D2(评分>1开始)、或小鼠IgG对照(RR-EAE-1研究)治疗的小鼠中EAE疾病的进展。各数据点表示取自9只小鼠的平均值。使用单向ANOVA然后Bonferroni多重比较事后检验来比较组平均值(GMS)。图8。用3D2(第0天开始)、3D2(第6天开始)、3D2(>第2天开始)或小鼠IgG对照(RR-EAE-2研究)治疗的小鼠中EAE疾病的进展。各数据点表示取自9只小鼠的平均值。使用单向ANOVA然后Bonferroni多重比较事后检验来比较组平均值(GMS)。图9。3D2或小鼠IgG(对照)治疗(SLE-1研究)后，有晚期狼疮肾炎的小鼠中的肾病理学。对于蛋白尿症评分(9A)和肾小球肾炎、间质性肾炎和血管炎的肾病理学评分(9B)，各数据点表示10次测量的平均值。图10。3D2和小鼠IgG(对照)治疗(SLE-2研究)后，有早期狼疮疾病小鼠中的肾病理学。对于蛋白尿症评分(10A)和肾小球肾炎及间质性肾炎的肾病理学评分(10B)，各数据点表示来自3D2治疗组的7只小鼠和来自小鼠IgG治疗组的9只小鼠。图11：组织学切片显示了3D2对狼疮小鼠脾上生发中心(GC)和初级滤泡的影响。脾切片用GL-7(GC染色)、B220抗体(B细胞标记)、或针对来自3D2治疗(11A)和小鼠IgG治疗(11B)NZB/NZWF1小鼠的滤泡型树突细胞(FDC)的抗体来染色。图12。用3D2治疗的狼疮小鼠脾中的初级滤泡和GC大小。每组5只小鼠，值显示为平均值+/-SEM。当表示为初级:次级(GC)滤泡比率(p=0.19)时，用3D2(“tx”)治疗的小鼠显示了GC数目降低的趋势(12A)，以及GC大小显著降低的趋势(p=0.03)(12B)。图13。3D2可变重链(H1609)和可变轻链(L0293)的多核苷酸和氨基酸序列。互补决定区(CDR)用下划线显示。图14。人源化嵌合3D2的氨基酸序列显示了可变重链H1609到H2177的修饰(14A)和可变轻链L0293到L5055到L5140的修饰(14B)。推定的糖基化位点和互补决定区(CDR)加框表示。图15。MAb5261可变重链和轻链(H2177/L5140)以及MAb5080可变重链和轻链(H2177/L5055)的多核苷酸和氨基酸序列。互补决定区(CDR)用下划线显示。图16。MAb5261、MAb5080、MAb1476和人同种型对照与重组人(16A)、短尾猴(16B)和小鼠(16C)CXCL13结合的特异性ELISA结果。各数据点表示3次重复测量的平均值。从四参数S形曲线拟合中计算出EC50值(曲线显示在图中；生成EC50值的所述曲线的R2是0.99)。NB=没有结合。图17。MAb5261、MAb5080和3D2与天然人(17A)和天然小鼠(17B)CXCL13结合的捕获表位竞争ELISA结果。各数据点表示来自至少三个独立实验之一的双重测量的平均值。使用四参数S形曲线拟合来拟合曲线(曲线在图中显示;R2=0.99)。图18。MAb5261对人前-B-697-hCXCR5(18A)和人扁桃体细胞(18B)迁移的抑制百分比。数据显示来自至少三个实验的三重测量的平均值+/-SEM。使用四参数S形曲线拟合来拟合曲线(曲线在图中显示;R2=0.98-0.99)。图19。MAb5261对SJL/J(19A)和C57Black/6(19B)脾细胞迁移的抑制百分比。代表性实验的数据显示为双重测量的平均值+/-SD。图20。MAb5261和同种型对照对人CXCR5受体的人CXCL13介导内化的抑制百分比。数据是来自至少三个独立实验的三重测量的平均值。使用四参数S形曲线拟合来拟合曲线(曲线在图中显示;R2=0.99)。图21。MAb5378可变重链(H5188)和可变轻链(L5153)的多核苷酸和氨基酸序列。互补决定区(CDR)用下划线显示。图22。MAb5378、MAb5261和MAb470的表位竞争ELISA结果。图23。对MAb5378、3D2和小鼠同种型对照与重组人(23A)、短尾猴(23B)和小鼠(23C)CXCL13结合的特异性ELISA结果。各数据点表示三重测量的平均值。从四参数S形曲线拟合中计算出EC50值(曲线显示在图中；生成EC50值的所述曲线的R2是0.99)。图24。MAb5261或MAb5378(24A-B)和MAb5378或3D2(24C)对人前-B-697-hCXCR5(24A)、人扁桃体细胞(24B)和C57Black6小鼠脾细胞(24C)迁移的抑制百分比。数据显示来自至少三个实验的三重测量的平均值+/-SEM。使用四参数S形曲线拟合来拟合曲线(曲线在图中显示;R2=0.99)。图25。MAb5378、MAb5261、3D2、小鼠同种型对照、或人同种型对照对人CXCR5受体的人CXCL13介导内化的抑制百分比。5261和5378的数据点表示来自两个独立实验的平均测量。3D2和同种型对照的数据点表示来自单个实验的三重测量的平均值。使用四参数S形曲线拟合来拟合曲线(曲线在图中显示;R2=0.99)。NE=没有影响。图26。用MAb5376、依那西普或小鼠IgG(对照)(CIA-1研究)治疗的小鼠中胶原性关节炎(CIA)疾病的进展。各数据点表示取自10只小鼠的平均评分。使用单向ANOVA然后Bonferroni多重比较事后检验来比较组平均值。图27。用MAb5378、依那西普、MAb470或小鼠IgG(对照)(CIA-2研究)治疗的小鼠中胶原性关节炎(CIA)疾病的进展。各数据点表示取自10只小鼠的平均评分。使用单向ANOVA然后Bonferroni多重比较事后检验来比较组平均值。图28。用MAb5378、小鼠同种型对照治疗或没有治疗(GC-1研究)的NP-CGG免疫小鼠中的生发中心形成。各脾数据点表示来自三只小鼠的平均值。各淋巴结数据点表示获自从三只小鼠收集的汇集细胞的单个值。图29。海尔曼螺杆菌（H.heilmannii）感染小鼠和给予抗体的治疗方案。图30。在获自包含同种型对照抗体治疗和抗CXCL13抗体治疗的海尔曼螺杆菌感染小鼠的所有胃样品中扩增海尔曼螺杆菌特异性16srRNA基因。也显示了阳性对照(P)和阴性对照(N)。图31。如实时定量PCR所测定，海尔曼螺杆菌（HH）感染野生型（WT）小鼠在感染后1个月(31A)和3个月(31B)的胃粘膜中CXCL13的mRNA表达水平(值根据各样品中小鼠β肌动蛋白表达水平标准化)。图32。同种型对照抗体或抗CXCL13抗体治疗后，海尔曼螺杆菌感染小鼠胃中CXCL13mRNA和β肌动蛋白的表达(上图)。未感染小鼠的胃中CXCL13mRNA和β肌动蛋白的表达(下图)。也显示了阳性对照(P)和阴性对照(N)。图33。海尔曼螺杆菌感染后三个月，来自同种型对照抗体治疗小鼠（上面左图）和抗CXCL13抗体治疗小鼠（上面右图）的经苏木精和伊红(H&E)染色胃样品。所述下图显示了在来自同种型对照抗体和抗CXCL13抗体治疗小鼠的胃样品中鉴定的胃淋巴滤泡数目。发明详述I．定义需要注意，术语“一个”或“一种”实体指一种或多种该实体；例如，“一种抗-CXCL13抗体”应理解为代表一种或多种抗-CXCL13抗体。如此，术语“一个”(或“一种”)、“一个或多个”和“至少一个”在本文中可互换使用。本文所用的术语“肿瘤”是指无论恶性或良性的所有赘生性细胞生长和增殖，以及所有的癌和癌前期细胞和组织。术语“癌症”和“癌”指或描述哺乳动物的生理病症，其典型特征是细胞生长失控。癌症的例子包括但不限于癌、淋巴瘤和白血病。本文所用的术语“多肽”意在包括单数形式“多肽”和复数形式“多肽”，指酰胺键(也称肽键)线性连接的单体(氨基酸)所组成的分子。术语“多肽”指两个或多个氨基酸的任何一条链或多条链，而非具体长度的产物。因此，肽、二肽、三肽、寡肽、“蛋白质”、“氨基酸链”或其它任何用于指两个或多个氨基酸的一条或多条链的术语均包含于“多肽”的定义内，术语“多肽”可与任意这些术语替代或互换使用。术语“多肽”还指多肽表达后修饰的产物，所述修饰包括但不限于糖基化、乙酰基化、磷酸化、酰胺化、通过已知保护/阻断基团衍生化、蛋白酶切割或非天然产生氨基酸修饰。多肽可能由天然生物来源衍生或由重组技术产生，但不必定由指定核酸序列翻译而来。可以任何方式产生多肽，包括化学合成。本发明多肽的大小可以是约3个或更多个、5个或更多个、10个或更多个、20个或更多个、25个或更多个、50个或更多个、75个或更多个、100个或更多个、200个或更多个、500个或更多个、1,000个或更多个或者2,000个或更多个氨基酸。多肽可具有确定的三维结构，但它们不必定具有这种结构。具有确定三维结构的多肽称为折叠多肽，不具有确定三维结构、但可采用大量不同构象的多肽称为非折叠多肽。本文所用的术语糖蛋白指偶联于至少一个糖部分的蛋白质，所述糖部分通过某一氨基酸残基如丝氨酸残基或天冬酰胺残基的含氧或含氮侧链连接于蛋白质。“分离的”多肽或其片段、变体或衍生物指不在其天然环境中的多肽。不要求特定的纯化水平。例如，可从其自然或天然环境中移出分离多肽。就本发明目的而言，在宿主细胞中表达的重组产生多肽和蛋白质被认为是分离的，通过任何合适技术分离、分级、部分或基本上纯化的天然或重组多肽也如此。本发明多肽也包括上述多肽的片段、衍生物、类似物或变体，及其任何组合。提到本发明抗-CXCL13抗体或抗体多肽时，术语“片段”、“变体”、“衍生物”和“类似物”包括保持相应的本发明抗体或本发明抗体多肽的至少一部分抗原结合特性的任何多肽。除本文他处讨论的具体抗体片段外，本发明多肽的片段还包括蛋白酶水解片段以及缺失片段。本发明抗CXCL13抗体和抗体多肽的变体包括上述片段，以及具有因氨基酸取代、缺失或插入而改变氨基酸序列的多肽。变体可以是天然产生或非天然产生的。可使用本领域已知的诱变技术生成非天然产生变体。变体多肽可包含保守或非保守性氨基酸取代、缺失或添加。多肽变体在本文中也称作“多肽类似物”。本文所用抗CXCL13抗体或抗体多肽的“衍生物”指具有官能性侧链基团反应化学所衍生的一个或多个残基的对象多肽。“衍生物”还包括那些含有一个或多个20种标准氨基酸的天然产生氨基酸衍生物的肽。例如，4-羟基脯氨酸可取代脯氨酸；5-羟基赖氨酸可取代赖氨酸；3-甲基组氨酸可取代组氨酸；高丝氨酸可取代丝氨酸；鸟氨酸可取代赖氨酸。本发明抗CXCL13抗体和抗体多肽的衍生物可包括经改变以具有本发明参照抗体或抗体多肽上不存在的额外特征的多肽。术语“多核苷酸”意在包括单个核酸和多个核酸，指分离的核酸分子或构建物，例如信使RNA(mRNA)或质粒DNA(pDNA)。多核苷酸可包含常规磷酸二酯键或非常规键(如酰胺键，如肽核酸(PNA)中发现的酰胺键)。术语“核酸”指多核苷酸中存在的任何一种或多种核酸区段，如DNA或RNA片段。“分离的”核酸或多核苷酸指从其天然环境中移出的核酸分子，DNA或RNA。例如，就本发明目的而言，包含在载体中的编码抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段的重组多核苷酸被认为是分离的。经分离多核苷酸的其它例子包括保持于异源宿主细胞中的重组多核苷酸或溶液中的纯化(部分或基本上纯化)多核苷酸。分离的RNA分子包括本发明多核苷酸的体内或体外RNA转录物。根据本发明的经分离多核苷酸或核酸还包括合成产生的此类分子。此外，多核苷酸或核酸可以是或可包括调控元件，如启动子、核糖体结合位点或转录终止子。本文所用的术语“编码区”是由翻译成氨基酸的密码子组成的核酸部分。虽然“终止密码子”(TAG、TGA或TAA)不翻译成氨基酸，但它可被认为是编码区的一部分，而任何侧接序列如启动子、核糖体结合位点、转录终止子、内含子等均不是编码区的一部分。本发明的两个或多个编码区可存在在单一多核苷酸构建物中，例如在单一载体上，或者在分开的多核苷酸构建物中，例如在单独(不同)载体上。而且，任何载体可包含单个编码区，或者可包含两个或多个编码区，例如，单一载体可单独编码免疫球蛋白重链可变区和免疫球蛋白轻链可变区。此外，本发明的载体、多核苷酸或核酸可编码与抗CXCL13抗体或其片段、变体或衍生物的编码核酸融合或不融合的异源编码区。异源编码区包括但不限于专用的元件或基序，如分泌信号肽或异源功能结构域。在某些实施方式中，所述多核苷酸或核酸是DNA。在DNA的情况中，包含多肽编码核酸的多核苷酸通常包含启动子和/或其它转录或翻译控制元件，这些元件与一个或多个编码区可操作连接。可操作连接指当基因产物如多肽的编码区与一个或多个调控序列以此方式连接时，将该基因产物的表达置于该调控序列的影响或控制下。如果启动子功能的诱导使编码所需基因产物的mRNA转录，且如果两个DNA片段间连接的属性不干扰表达调控序列指导基因产物表达或不干扰转录DNA模板的能力，则两个DNA片段(如多肽编码区及其相连的启动子)“可操作连接”。因此，如果启动子能够影响核酸的转录，则启动子区域与多肽编码核酸可操作连接。启动子可以是仅在预定细胞中指导DNA实质转录的细胞特异性启动子。启动子以外的其它转录控制元件如增强子、操纵子、阻遏物和转录终止信号，能与多核苷酸可操作连接以指导细胞特异性转录。本文公开了合适的启动子和其它转录控制区。许多转录控制区是本领域技术人员已知的。它们包括但不限于在脊椎动物细胞中发挥作用的转录控制区，例如但不限于，来自巨细胞病毒(立即早期启动子，与内含子-A联用)、猿病毒40(早期启动子)和逆转录病毒(如劳氏肉瘤病毒)的启动子和增强子区段。其它转录控制区包括衍生自脊椎动物基因例如肌动蛋白、热激蛋白、牛生长激素和兔β-珠蛋白的那些，以及能够在真核细胞中控制基因表达的其它序列。其它合适的转录控制区包括组织特异性启动子和增强子，以及淋巴因子诱导型启动子(如干扰素或白介素诱导的启动子)。类似地，本领域普通技术人员了解各种翻译控制元件。它们包括但不限于：核糖体结合位点、翻译起始和终止密码子以及衍生自小核糖核酸病毒的元件(特别是内部核糖体进入位点或IRES，也称为CITE序列)。在其它实施方式中，本发明多核苷酸是RNA，例如，采用信使RNA(mRNA)形式。本发明的多核苷酸和核酸编码区可与编码分泌或信号肽的其它编码区联合，所述分泌或信号肽指导本发明多核苷酸编码的多肽分泌。根据信号假说，哺乳动物细胞分泌的蛋白质具有信号肽或分泌前导序列，一旦生长的蛋白质链向粗面内质网外的输出过程启动，所述序列从成熟蛋白质上切除。本领域普通技术人员了解，脊椎动物细胞分泌的多肽通常具有融合于所述多肽N末端的信号肽，它们从完整或“全长”多肽上切割产生分泌或“成熟”形式的多肽。在某些实施方式中，使用天然信号肽，例如免疫球蛋白重链或轻链信号肽，或者使用仍然能够指导与其操作性相连多肽分泌的该序列的功能衍生物。或者，可采用异源哺乳动物信号肽或其功能衍生物。例如，野生型前导序列可以用人组织纤溶酶原激活物(TPA)或小鼠β-葡糖醛酸糖苷酶的前导序列取代。广义来说，本发明的"结合分子"或"抗原结合分子"指特异性结合抗原决定簇的分子。在一个实施方式中，所述结合分子特异性结合CXCL13(也称为BCA-1)。在另一实施方式中，本发明结合分子是抗体或其抗原结合片段，如抗CXCL13抗体。在另一个实施方式中，本发明结合分子包括抗体分子的至少一个重链或轻链CDR。在另一个实施方式中，本发明结合分子包括来自一种或多种抗体分子的至少两个CDR。在另一个实施方式中，本发明结合分子包括来自一种或多种抗体分子的至少三个CDR。在另一个实施方式中，本发明结合分子包括来自一种或多种抗体分子的至少四个CDR。在另一个实施方式中，本发明结合分子包括来自一种或多种抗体分子的至少五个CDR。在另一个实施方式中，本发明结合分子包括来自一种或多种抗体分子的至少六个CDR。在某些实施方式中，一个或多个CDR来自MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2或3C9。本发明针对某些抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物。除非特别提到完整大小的抗体如天然产生的抗体，术语“抗CXCL13抗体”包括完整大小的抗体以及这种抗体的抗原结合片段、变体、类似物或衍生物，例如天然产生的抗体或免疫球蛋白分子，或以类似于抗体分子的方式结合抗原的经工程改造抗体分子或片段。本文所用的“人”或“完全人”抗体包括具有人免疫球蛋白氨基酸序列的抗体，包括分离自人免疫球蛋白文库的抗体或不表达内源性免疫球蛋白的一种或多种人免疫球蛋白转基因动物，如下文所述，例如，Kucherlapati等的美国专利号5,939,598。“人”或“完全人”抗体也包括至少含重链可变区或至少重链和轻链可变区的抗体，其中所述可变区具有人免疫球蛋白可变区的氨基酸序列。“人”或“完全人”抗体还包括如上所述包含本文所述抗体分子(如VH区和/或VL区)的变体(包括衍生物)或基本由其组成或由其组成的“人”或“完全人”抗体，所述抗体或其片段免疫学特异性结合于CXCL13多肽或其片段或变体。可利用本领域技术人员已知的标准技术在编码人抗CXCL13抗体的核苷酸序列中引入突变，包括但不限于，引起氨基酸取代的定点诱变和PCR介导的诱变。优选地，相对于参照VH区、VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VL区、VLCDR1、VLCDR2或VLCDR3，该变体(包括衍生物)编码少于50个氨基酸取代、少于40个氨基酸取代、少于30个氨基酸取代、少于25个氨基酸取代、少于20个氨基酸取代、少于15个氨基酸取代、少于10个氨基酸取代、少于5个氨基酸取代、少于4个氨基酸取代、少于3个氨基酸取代或少于2个氨基酸取代。在某些实施方式中，氨基酸取代是保守性氨基酸取代，如下所详述。或者，也可沿所有或一部分编码序列随机引入突变，例如通过饱和诱变引入，可筛选所得突变体的生物学活性以鉴定保持活性(例如，结合CXCL13多肽，如结合人CXCL13、鼠CXCL13或同时结合人和鼠CXCL13的能力)的突变体。“人”或“完全人”抗体的这类变体(或其衍生物)也可称为“优化”或“就抗原结合优化”的人或完全人抗体，包括对抗原亲和性提高的抗体。术语“抗体”和“免疫球蛋白”在本文中可互换使用。抗体或免疫球蛋白至少包括重链可变区，通常至少包括重链和轻链的可变区。脊椎动物系统中的基本免疫球蛋白结构相对较好理解。参见例如，Harlow等(1988)Antibodies:ALaboratoryManual(《抗体：实验室手册》)(第2版；冷泉港实验室出版社(ColdSpringHarborLaboratoryPress))。正如下文中更详细讨论，术语“免疫球蛋白”包括可通过生化性质区分的各种类型多肽。本领域技术人员应理解，重链分为gamma、mu、alpha、delta或epsilon(γ，μ，α，δ，ε)，其中还有一些亚类(如γ1-γ4)。该链的特性决定抗体“类别”分别为IgG、IgM、IgA、IgG或IgE。免疫球蛋白亚类(同种型)如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1等已被良好表征，且已知赋予功能特化。根据本文公开内容，本领域技术人员不难区分这些类别和同种型的修饰形式，因此，它们涵盖在本发明范围内。所有免疫球蛋白类别明显属于本发明范围，以下讨论通常针对免疫球蛋白分子的IgG类。在IgG中，标准的免疫球蛋白分子包括分子量约为23,000道尔顿的两个相同轻链多肽和分子量为53,000-70,000的两个相同重链多肽。这四条链通常在“Y”构型中由二硫键连接起来，其中轻链从Y的口部开始托起重链，并延续通过可变区。轻链分类为卡帕(kappa)或拉姆达(lambda)(κ、λ)。各重链类可与κ或λ轻链结合。通常，通过杂交瘤、B细胞或遗传工程改造的宿主细胞产生免疫球蛋白时，轻链和重链互相共价结合，两条重链的“尾部”通过共价二硫键或非共价连接互相结合。在重链中，氨基酸序列从Y构型的分叉末端的N末端走向每条链底部的C末端。轻链和重链都可以分成结构和功能同源的区域。术语“恒定”和“可变”从功能角度使用。在这方面，应理解轻链(VL或VK)和重链(VH)部分的可变区决定抗原识别和特异性。相反，轻链(CL)和重链(CH1、CH2或CH3)的恒定区产生重要的生物学特性，例如分泌、跨胎盘移动、Fc受体结合、补体结合等。通常，恒定区结构域的编号越大，离抗体的抗原结合位点或氨基末端越远。N-末端部分是可变区，C-末端部分是恒定区；CH3和CL结构域实际上分别包括重链和轻链的羧基末端。如本文所述，可变区允许抗体选择性识别和特异性结合抗原上的表位。也就是说，抗体的VL和VH结构域、或这些可变区内的互补决定区(CDR)亚组组合形成确定三维抗原结合位点的可变区。这种四联抗体结构形成在Y的每条臂末端存在的抗原结合位点。更具体地，所述抗原结合位点由各VH和VL链上的三个CDR确定。在一些情况下，例如在衍生自羊驼种类或根据羊驼免疫球蛋白工程改造的某些免疫球蛋白分子中，完整的免疫球蛋白分子可仅由重链构成而不含轻链。参见例如，Hamers-Casterman等，Nature363:446-448(1993)。在天然产生的抗体中，每个抗原结合域上出现的六个“互补决定区”或“CDR”是短的非毗连氨基酸序列，随着抗体在水性环境中确定其三维构型时，它们特别定位以形成抗原结合域。抗原结合域中的其余氨基酸称为“框架”区，显示较小的分子间变化。框架区主要采用β-片层构象，CDR形成连接β-片层结构和某些情况下形成部分β-片层结构的环。因此，框架区用于通过链间非共价相互作用形成为CDR提供正确方向位置的支架。通过定位CDR形成的抗原结合域能确定与免疫反应性抗原上表位互补的表面。这种互补表面促进抗体与其关联表位的非共价结合。就任何给定的重链或轻链可变区而言包含CDR和框架区的氨基酸能由本领域普通技术人员容易鉴定，因为它们已被精确定义(见下)。除非明确陈述相反，在本领域内所使用和/或接受的某一术语有两种或多种定义的情况下，本文所用的该术语定义应包括所有这些含义。具体例子是使用术语“互补决定区”(CDR)描述在重链和轻链多肽的可变区内发现的非毗连抗原结合位点。这一特定区域的描述可参见Kabat等(1983)美国卫生与公众服务部(U.S.Dept.ofHealthandHumanServices)，“SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(免疫学上感兴趣的蛋白质序列)”以及Chothia和Lesk，J.Mol.Biol.196:901-917(1987)，其通过引用全文纳入本文，其中所述定义在互相比较时包括重叠的氨基酸残基或氨基酸残基亚组。尽管如此，应用任一定义指抗体或其变体的CDR均应落入本文所定义和使用的术语范围。合适氨基酸残基包括上文引用的各参考文献中定义的CDR，所述氨基酸残基列于下表1以作比较。包括特定CDR的准确残基编号取决于CDR的序列和大小而变化。考虑到抗体的可变区氨基酸序列，本领域技术人员可常规确定哪些残基包含具体CDR。表1.CDR定义1KabatChothiaVHCDR131-3526-32VHCDR250-6552-58VHCDR395-10295-102VLCDR124-3426-32VLCDR250-5650-52VLCDR389-9791-961表1中所有CDR定义的编号均根据Kabat等所述的编号规则(见下)。Kabat等也定义了适用于任何抗体的可变区序列的编号系统。本领域普通技术人员能明确地将所述“Kabat编号”系统应用于任何可变区序列，而不依赖序列本身外的任何实验数据。本文所用的“Kabat编号”指Kabat等(1983)美国卫生与公众服务部，“SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(免疫学上感兴趣的蛋白质序列)”中所述的编号系统。除非另有说明，提到本发明抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物中具体氨基酸残基位置的编号时，均按照Kabat编号系统。本发明的抗体或抗原结合片段、变体、或其衍生物包括但不限于：多克隆、单克隆、多特异性、人、人源化、灵长类化或嵌合抗体，单链抗体，表位结合片段如Fab、Fab'和F(ab')2、Fd、Fv、单链Fv(scFv)、二硫键连接的Fv(sdFv)、包含VL或VH结构域的片段、Fab表达文库产生的片段和抗独特型(抗-Id)抗体(包括例如，本文所述抗CXCL13抗体的抗-Id抗体)。ScFv分子为本领域已知，描述于例如美国专利号5,892,019。本发明的免疫球蛋白或抗体分子可以是任何类型(如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类别(如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2等)或亚类的免疫球蛋白分子。本文所用的术语“重链部分”包括衍生自免疫球蛋白重链的氨基酸序列。包含重链部分的多肽包括下组中的至少一个：CH1结构域、铰链(如上部、中部和/或下部绞链区)结构域、CH2结构域、CH3结构域或者其变体或片段。例如，本发明所用的结合多肽可包括含有CH1结构域的多肽链；含有CH1结构域、至少一部分绞链区和CH2结构域的多肽链；含有CH1结构域和CH3结构域的多肽链；含有CH1结构域、至少一部分绞链区和CH3结构域的多肽链，或者含有CH1结构域、至少一部分绞链区、CH2结构域和CH3结构域的多肽链。在另一实施方式中，本发明多肽包括含有CH3结构域的多肽链。另外，本发明所用的结合多肽可能缺少CH2结构域的至少一部分(例如，所有或部分CH2结构域)。如上所述，本领域普通技术人员应理解，可修饰这些结构域(例如重链部分)，从而其氨基酸序列不同于天然产生的免疫球蛋白分子。在本文公开的某些抗CXCL13抗体，或其抗原结合片段、变体或衍生物中，多聚体的一条多肽链的重链部分与该多聚体的第二条多肽链相同。或者，本发明含有重链部分的单体不同。例如，各单体可包含不同的靶结合位点，形成例如双特异性抗体。本文公开的诊断和治疗方法中所用结合分子的重链部分可衍生自不同的免疫球蛋白分子。例如，多肽的重链部分可包含衍生自IgG1分子的CH1结构域和衍生自IgG3分子的绞链区。在另一个示例中，重链部分可包含部分衍生自IgG1分子、部分衍生自IgG3分子的绞链区。在另一个示例中，重链部分可包含部分衍生自IgG1分子、部分衍生自IgG4分子的嵌合铰链。本文所用的术语“轻链部分”包括衍生自免疫球蛋白轻链，如κ或λ轻链的氨基酸序列。优选地，所述轻链部分包含VL或CL结构域中的至少一个。本文所述的抗CXCL13抗体，或其抗原结合片段、变体或衍生物可根据它们识别或特异性结合的抗原如本文所述靶标多肽(如CXCL13)的表位或部分进行描述或说明。靶标多肽与抗体的抗原结合域特异性相互作用的部分是“表位”或“抗原决定簇”。靶标多肽可包含单个表位，但通常包含至少两个表位，并可包括任意数量的表位，这取决于抗原的大小、构象和类型。而且，应该注意到，靶标多肽上的“表位”可以是或可包括非多肽元件，例如表位可包括糖侧链。认为抗体的肽或多肽表位的最小尺寸是约4-5个氨基酸。肽或多肽表位优选包含至少七个，更优选至少九个，最优选至少约15-约30个氨基酸。由于CDR能以三联形式识别抗原性肽或多肽，所以包含表位的氨基酸不必定是毗连的，在某些情况下甚至可不在同一肽链上。本发明抗CXCL13抗体识别的肽或多肽表位可包含CXCL13中至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、更优选至少8个、至少9个、至少10个、至少15个、至少20个、至少25个、或约15-约30个毗连或非毗连的氨基酸序列。“特异性结合”通常指该抗体通过其抗原结合域结合于表位，并且该结合需要抗原结合域和表位之间某种程度的互补。按照这一定义，抗体通过其抗原结合域与表位结合比结合随机无关表位更容易时，称该抗体“特异性结合”该表位。本文中使用术语“特异性”定性分析某一抗体与某一表位结合的相对亲和性。例如，可认为抗体“A”对某给定表位的特异性高于抗体“B”，或者可以说抗体“A”结合表位“C”的特异性高于它对相关表位“D”的特异性。“优选结合”指与结合相关、相似、同源或类似的表位相比，该抗体更容易特异性结合某表位。因此，与相关表位相比，“优选结合”给定表位的抗体更可能结合该表位，即便这种抗体可能与相关表位发生交叉反应。作为非限制性示例，如果抗体与第一表位结合的解离常数(KD)低于抗体与第二表位的KD，则可认为抗体优选结合第一表位。在另一个非限制性例子中，如果抗体与第一表位结合的KD比抗体与第二表位的KD低至少一个数量级，则可认为抗体优选结合第一抗原。在另一个非限制性例子中，如果抗体与第一表位结合的KD比抗体与第二表位的KD低至少两个数量级，则可认为抗体优选结合第一表位。在另一个非限制性例子中，如果抗体与第一表位结合的解离速率(k(off))比抗体与第二表位的k(off)低，则可认为抗体优选结合第一表位。在另一个非限制性例子中，如果抗体与第一表位结合的k(off)抗体与第二表位的k(off)低至少一个数量级，则可认为抗体优选结合第一表位。在另一个非限制性例子中，如果抗体与第一表位结合的k(off)比抗体与第二表位的k(off)低至少两个数量级，则可认为抗体优选结合第一表位。可以说，本文所述的抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物结合本文公开的靶标多肽(如CXCL13，如人、鼠或者人和鼠CXCL13)或其片段或变体，其解离速率(k(off))低于或等于5X10-2s-1、10-2s-1或5X10-3s-1。在某些实施方式中，所述k(off)小于或等于约3X10-2，如其中所述抗体是3D2和所述CXCL13是人或小鼠的。在另一个实施方式中，所述k(off)小于或等于约3X10-3，如其中所述抗体是MAb5261和所述CXCL13是人或小鼠的。在另一个实施方式中，所述k(off)小于或等于约4X10-3，如其中所述抗体是MAb5378和所述CXCL13是人或小鼠的。在一个实施方式中，可以说，本发明抗体结合本文公开的靶标多肽(如CXCL13，如人、鼠、或者人和鼠CXCL13)或其片段或变体，其解离速率(k(off))低于或等于5X10-4s-1、10-4s-1、5X10-5s-1、或10-5s-1、5X10-6s-1、10-6s-1、5X10-7s-1或10-7s-1。可以说，本文所述的抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物结合本文公开的靶标多肽(如CXCL13，如人、鼠或者人和鼠CXCL13)或其片段或变体，其结合速率(k(on))大于或等于103M-1s-1、5X103M-1s-1、104M-1s-1、5X104M-1s-1、105M-1sec-1、5X105M-1s-1、106M-1s-1或5X106M-1s-1。在某些实施方式中，所述k(on)大于或等于约5X105，如其中所述抗体是3D2和所述CXCL13是人的；或者所述k(on)大于或等于约1X105，如其中所述抗体是3D2和所述CXCL13是小鼠的。在另一个实施方式中，所述k(on)大于或等于约1X106，如其中所述抗体是MAb5261和所述CXCL13是人或小鼠的。在另一个实施方式中，所述k(on)大于或等于约1X106，如其中所述抗体是MAb5378和所述CXCL13是人或小鼠的。在一个实施方式中，可以说本发明抗体结合本文公开的靶标多肽(如CXCL13，如人、鼠或者人和鼠的CXCL13)或其片段或变体，其结合速率(k(on))大于或等于105M-1s-1、5X105M-1s-1、106M-1s-1或5X106M-1s-1或107M-1s-1。如果抗体优选结合所述表位并以某种程度阻断所述参照抗体与所述表位的结合，认为抗体竞争性抑制参照抗体与给定表位的结合，所述参照抗体如本文公开的抗CXCL3抗体，如MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2、或3C9。竞争性抑制可通过本领域已知的任何方法确定，例如竞争ELISA实验。可以说，抗体将参照抗体与给定表位的结合竞争性抑制至少90%、至少80%、至少70%、至少60%或至少50%。本文所用的术语“亲和性”指单独表位与免疫球蛋白分子的CDR结合的强度量度。参见例如，Harlow等(1988)Antibodies:ALaboratoryManual(《抗体：实验室手册》)(冷泉港实验室出版社(ColdSpringHarborLaboratoryPress)，第2版)，第27-28页。本文所用的术语“亲合力”指免疫球蛋白群体和抗原间复合物的总体稳定性，即免疫球蛋白混合物与抗原的功能性结合强度。参见例如，Harlow，第29-34页。亲合力既与群体中单独免疫球蛋白分子与特定表位的亲和性相关，也与免疫球蛋白分子和抗原的价态相关。例如，二价单克隆抗体和具有高度重复表位结构的抗原例如多聚体之间的相互作用是具有高亲合力的一个例子。本发明的抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或其衍生物也可按照其交叉反应性进行描述或说明。本文所用的术语“交叉反应性”指抗体对某一种抗原具有特异性、与第二种抗原发生反应的能力；它是两种不同抗原性物质之间相关性的量度。因此，如果抗体与诱导其形成的表位以外的其他表位结合，则具有交叉反应性。交叉反应性表位通常含有许多与诱导表位相同的互补结构特征，在某些情况下甚至比原始表位更适用。例如，某些抗体具有一定程度的交叉反应性，因为它们结合相关但不相同的表位，例如，与参照表位至少95%、至少90%、至少85%、至少80%、至少75%、至少70%、至少65%、至少60%、至少55%和至少50%相同(按照本领域已知方法和本文所述方法计算)的表位。如果抗体不结合与参照表位少于95%、少于90%、少于85%、少于80%、少于75%、少于70%、少于65%、少于60%、少于55%和少于50%相同性(按照本领域已知方法和本文所述方法计算)的表位，则可以说该抗体具有很小或没有交叉反应性。如果某抗体不结合某表位的任何其它类似物、直向同源物或同源物，则可认为该抗体对该表位“高度特异”。本发明的抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可根据与本发明多肽的结合亲和性进行描述或说明，所述多肽例如CXCL13，如人、鼠或者人和鼠的CXCL13。在一些实施方式中，本发明结合亲和性包括解离常数或Kd低于或不高于5x10-2M、10-2M、5x10-3M、10-3M、5x10-4M、10-4M、5x10-5M、10-5M、5x10-6M、10-6M、5x10-7M、10-7M、5x10-8M、10-8M、5x10-9M、10-9M、5x10-10M、10-10M、5x10-11M、10-11M、5x10-12M、10-12M、5x10-13M、10-13M、5x10-14M、10-14M、5x10-15M或10-15M的那些。在一个实施方式中，本发明的抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段结合人CXCL13的Kd小于约5x10-9M–约5x10-10M，如其中所述抗体是MAb5261和所述Kd小于或等于约5x10-9M。在另一个实施方式中，本发明的抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段结合鼠CXCL13的Kd小于约5x10-7M–约9x10-9M，如其中所述抗体是MAb5261和所述Kd小于或等于约8x10-9M。本发明的抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可能是“多特异性”，例如是双特异性、三特异性或更高特异性，这意味着它能同时识别和结合一种或多种不同抗原(如蛋白质)上出现的两种或更多种不同表位。因此，抗CXCL13抗体是“单特异性”还是“多特异性”如“双特异性”，指与结合多肽发生反应的不同表位数量。多特异性抗体可以对本文所述靶标多肽的不同表位有特异性，或对靶标多肽以及异源表位例如异源多肽或固体支持材料有特异性。本文所用的术语“价态”指结合多肽或CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段中存在的潜在结合域如抗原结合域的数量。各结合域特异性结合一种表位。当结合多肽或CXCL13结合分子包含一个以上结合域时，对具有两个结合域的抗体来说各结合域可特异性结合同一表位时，称为“二价单特异性”，或对具有两个结合域的抗体来说特异性结合不同表位时，称为“二价双特异性”。抗体或其抗原结合片段也可以是双特异性，每种特异性为二价(称为“双特异性四价抗体”)。在另一实施方式中，可制备四价小抗体或结构域缺失抗体。双特异性二价抗体及其制备方法描述于例如美国专利号5,731,168；5,807,706；5,821,333；以及美国专利申请公开号2003/020734和2002/0155537，其所有公开内容通过引用纳入本文。双特异性四价抗体及其制备方法描述于例如WO02/096948和WO00/44788，其公开内容通过引用纳入本文。一般参见，PCT公开WO93/17715、WO92/08802、WO91/00360、WO92/05793；Tutt等，J.Immunol.147:60-69(1991)；美国专利号4,474,893、4,714,681、4,925,648、5,573,920和5,601,819；以及Kostelny等，J.Immunol.148：1547-1553(1992)。如前所述，各种免疫球蛋白类别的恒定区的亚基结构和三维构型是众所周知的。本文所用的术语“VH结构域域”包括免疫球蛋白重链的氨基末端可变区，术语“CH1结构域”包括免疫球蛋白重链的第一(最靠氨基末端)恒定区结构域。CH1结构域邻近VH结构域，并且位于免疫球蛋白重链分子绞链区的氨基末端。本文所用的术语“CH2结构域”包括用常规编号方案例如从抗体的约残基244延伸至残基360的重链分子部分(残基244-360，Kabat编号系统；和残基231-340，EU编号系统；参见KabatEA等)。CH2结构域是独特的，因为它与其它结构域不是紧密配对的。相反，两个N-连接的分支糖链间插在完整天然IgG分子的两个CH2结构域之间。已有充分记载显示CH3结构域从IgG分子的CH2结构域延伸至C末端，并包含大约108个残基。本文所用的术语“绞链区”包括连接CH1结构域和CH2结构域的重链分子部分。该绞链区包括约25个残基并具有挠性，因此使两个N-末端抗原结合区能独立移动。绞链区可细分成三个不同结构域：上部、中部和下部绞链区(Roux等，J.Immunol.161:4083(1998))。本文所用的术语“二硫键”包括两个硫原子之间形成的共价键。氨基酸半胱氨酸包括可形成二硫键或与第二个巯基桥接的巯基。在大部分天然产生的IgG分子中，CH1和CL区域通过二硫键相连，两条重链通过对应于Kabat编号系统239和242位(EU编号系统是226或229位)的两个二硫键相连。本文所用的术语“嵌合抗体”指任何抗体，其中免疫反应性区域或位点获自或衍生自第一物种，而恒定区(根据本发明，可能是完整、一部分或修饰的)获自第二物种的任何抗体。在某些实施方式中，靶结合区域或位点来自非人来源(如小鼠或灵长动物)而恒定区是人的(例如，本文所述的单克隆抗体(MAb)1476)。本文所用的术语“工程抗体”指通过从具有已知特异性的抗体至少部分置换一个或多个CDR和必要时通过部分框架区置换和序列变化，来改变重链或轻链或二者中可变区的抗体。虽然CDR可衍生自与产生框架区的抗体属于同一类或甚至亚类的抗体，但设想CDR衍生自不同类别的抗体，优选衍生自不同物种的抗体。将具有已知特异性的非人抗体的一个或多个“供体”CDR移植到人重链或轻链框架区内形成的工程抗体在本文中称为“人源化抗体”。可能不必定用来自供体可变区的完整CDR代替所有CDR以将一种可变区的抗原结合能力转移至另一可变区。相反，可能只需要转移维持靶结合位点活性所必需的那些残基。在某些实施方式中，所述人源化抗体包含来自供体可变重结构域的1、2或3个CDR。在另一个实施方式中，所述人源化抗体包含来自供体可变轻结构域的1、2或3个CDR。进一步认识到，人源化抗体的重链或轻链或二者中可变区内的框架区可仅包含人来源的残基，在这种情况下人源化抗体的这些框架区(例如，MAb5080或5261)称为“完全人构架区”。或者，如果需要维持与CXCL13抗原的适当结合或提高结合，可以在人源化抗体的重链或轻链或二者可变区中人框架区的相应位置内工程改造供体可变区中框架区的一个或多个残基。因此，以此方式工程改造的人框架区包含人和供体框架区残基的混合物，在本文中称为“部分人框架区”。例如，抗CXCL13抗体的人源化过程可基本按照Winter和同事所述方法进行(Jones等，Nature321:522-525(1986)；Riechmann等，Nature332:323-327(1988)；Verhoeyen等，Science239:1534-1536(1988))，即用啮齿动物或突变型啮齿动物CDR或CDR序列取代人抗CXCL13抗体的相应序列。也参见美国专利号5,225,539；5,585,089；5,693,761；5,693,762；和5,859,205；通过引用纳入本文。所得的人源化抗CXCL13抗体将在人源化抗体的重链和/或轻链可变区的完全人框架区内包含至少一个啮齿动物或突变型啮齿动物CDR。在一些情况下，人源化抗CXCL13抗体的一个或多个可变区的构架区内残基被相应非人(例如，啮齿动物)残基代替(参见例如，美国专利号5,585,089；5,693,761；5,693,762；和6,180,370)，在这种情况下所得的人源化抗CXCL13抗体将在重链和/或轻链的可变区内包含部分人框架区。而且，人源化抗体可包含在受体抗体或供体抗体中未发现的残基。进行这些修饰以进一步改善抗体性能(例如，获得所需亲和性)。通常，人源化抗体将包含几乎所有的至少一个、通常两个可变区，其中全部或基本上全部的CDR对应于非人免疫球蛋白的CDR，全部或基本上全部的框架区是人免疫球蛋白序列的框架区。人源化抗体还任选包含至少一部分免疫球蛋白恒定区(Fc)，一般是人免疫球蛋白的Fc。更多的细节参见Jones等，Nature，331:522-525(1986)；Riechmann等，Nature，332:323-329(1988)；和Presta，Curr.Op.Struct.Biol.，2:593-596(1992)，通过引用纳入本文。因此，所述“人源化”抗体可包括其中明显小于完整的人可变区被来自非人物种的相应序列所取代的抗体。实践中，人源化抗体通常是一些或所有CDR残基和可能的一些框架残基被啮齿动物抗体中相似位点的残基所取代的人抗体。参见例如，美国专利号5,225,539；5,585,089；5,693,761；5,693,762；和5,859,205。也参见美国专利号6,180,370和国际公开号WO01/27160，其中公开了人源化抗体和用于产生对预定抗原亲和性提高的人源化抗体的技术。本文所用的术语“连接”、“融合的”和“融合”可以互换使用。这些术语指通过包括化学偶联或重组在内的方式将两个或更多元件或组件连接在在一起。“框内融合”指以维持原始ORF正确翻译读框的方式，将两个或多个多核苷酸开放阅读框(ORF)连接形成连续的较长ORF。因此，重组融合蛋白是包含两个或多个片段的单一蛋白质，所述片段对应原始ORF编码的多肽(这些片段在自然条件下通常不如此连接)。尽管阅读框在融合片段中延续，但片段仍可被物理或空间分隔，如框内接头序列。例如，编码免疫球蛋白可变区CDR的多核苷酸可框内融合，但用编码至少一个免疫球蛋白框架区或额外CDR区的多核苷酸间隔开，只要“融合的”CDR作为连续多肽的一部分共同翻译。在多肽的情况下，“线性序列”或“序列”是多肽中从氨基到羧基末端方向上氨基酸的顺序，在序列中彼此相邻的残基是多肽一级结构中的毗连残基。本文所用的术语“表达”指基因生成生化物质如多肽的过程。该过程包括在细胞内基因功能存在的任何表现，包括但不限于，基因敲除以及瞬时表达和稳定表达。它包括但不限于，基因转录成信使RNA(mRNA)和这类mRNA翻译成多肽。若最终期望产物是生化物质，则表达包括产生该生化物质和任何前体。基因表达产生“基因产物”。本文所用的基因产物可以是核酸，如基因转录产生的信使RNA，或由转录物翻译得到的多肽。本文所述的基因产物还包括具有转录后修饰的核酸，例如聚腺苷酸化，或具有翻译后修饰的多肽，如甲基化、糖基化、加入脂质、连接其它蛋白质亚基、经蛋白酶水解切割等。本文所用的术语“治疗”或“处理”都指治疗性处理和预防性或预防措施，其中目的是防止或减缓（缓解）不期望的生理改变或失调，例如多发性硬化、狼疮、关节炎或癌症的进展。有益或所需的临床结果包括但不限于可检测或不可检测的缓解症状、减轻疾病程度、疾病状态稳定(即不恶化)、延迟或减缓疾病进展、改善或减轻疾病状态和缓解(部分或完全)。“治疗”也可以指与不接受治疗的期望存活相比延长生存期。需要治疗的人包括已经患有病症或失调的人，以及倾向于患有病症或失调的人或需预防病症或失调的人。“对象”或“个体”或“动物”或“患者”或“哺乳动物”指需要诊断、预防或治疗的任何对象，特别是哺乳动物对象。哺乳动物对象包括人、家养动物、家畜和动物园动物、运动型动物或宠物，如犬、猫、豚鼠、兔、大鼠、小鼠、马、奶牛等等。本文所用的术语“给予抗CXCL13抗体时能够获益的对象”和“需要治疗的动物”包括能够从给予抗CXCL13抗体和/或从抗CXCL13抗体治疗，即减轻或预防疾病的治疗中获益的对象，如哺乳动物对象，该抗体可用于(例如)检测抗CXCL13多肽(如用于诊断方法)。如本文更详细所述，抗-CXCL13抗体可以非偶联形式使用，或者可偶联于(例如)药物、前药或同位素。II.靶标多肽描述本文所用的术语“CXCL13”和“CXCL13多肽”可互换使用。在某些实施方式中，CXCL13可包括全长CXCL13或其片段，或者CXCL13变体多肽，其中CXCL13的片段或CXCL13变体多肽保持全长CXCL13的一些或全部功能特性。描述了所述人CXCL13多肽和多核苷酸序列(分别为SEQIDNO:19和20)，参见例如Legler等，J.Exp.Med.187(4):655-660(1998)。描述了所述小鼠CXCL13多肽和多核苷酸序列(分别为SEQIDNO:21和22)，参见例如Gunn等，Nature391(6669):799-803(1998)。另外，描述了所述短尾猴CXCL13多肽序列，如SEQIDNO:23所示。III.抗CXCL13抗体本领域公开了结合CXCL13的市售抗体，如大鼠抗小鼠MAb470(R&D系统公司（R&DSystems）)和小鼠抗人MAb801(R&D系统公司)。另外，鼠抗CXCL13抗体公开于美国专利申请公开号20080227704A1。本发明抗体包含结合于CXCL13的抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物，如MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2或3C9。在某些实施方式中，抗CXCL13抗体结合人、灵长动物、鼠或者人和鼠的CXCL13。在某些实施方式中，本发明的抗CXCL13抗体是人源化的。在其它实施方式中，抗CXCL13抗体阻断CXCL13结合其受体如CXCR5。在某些实施方式中，本发明的抗CXCL13抗体是MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2、3C9或其抗原结合片段、变体或衍生物。在一个实施方式中，本发明提供了分离的结合分子如抗体或其抗原结合片段、变体和衍生物，所述分子特异性结合与参照抗体相同的CXCL13表位，如MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2或3C9。在另一个实施方式中，本发明提供了分离的结合分子如抗体或其抗原结合片段，所述分子特异性结合CXCL13并且竞争抑制参照抗体（如MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2或3C9）与CXCL13（如人、灵长动物、鼠、或者人和鼠的CXCL13）的特异性结合。在某些实施方式中，本发明结合分子的氨基酸序列与参照抗CXCL13抗体分子的氨基酸序列有至少约80%、约85%、约88%、约89%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%或约95%序列相同性。在另一个实施方式中，所述结合分子与参照抗体共有至少约96%、约97%、约98%、约99%或100%序列相同性。在某些实施方式中，所述参照抗体是MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2或3C9。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白重链可变区(VH结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VH结构域的至少一个CDR具有与SEQIDNO：3或13的CDR1、CDR2或CDR3至少约80%、约85%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%相同或完全相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白重链可变区(VH结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VH结构域的至少一个CDR具有与SEQIDNO：4、5或6至少约80%、约85%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%相同或完全相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白重链可变区(VH结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VH结构域具有与SEQIDNO：3或13至少约80%、约85%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%相同或完全相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白重链可变区(VH结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VH结构域的至少一个CDR具有除了1、2、3、4或5个保守氨基酸取代外，与SEQIDNO：3或13的CDR1、CDR2或CDR3相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白重链可变区(VH结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VH结构域的至少一个CDR具有除了1、2、3、4或5个保守氨基酸取代外，与SEQIDNO：4、5或6相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含VH结构域、基本由其组成或由其组成，该VH结构域具有与SEQIDNO:3或13至少约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%或100%相同的氨基酸序列，其中包含所编码VH结构域的抗CXCL13抗体特异性或优选结合CXCL13。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白轻链可变区(VL结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VL结构域的至少一个CDR具有与SEQIDNO：8、15或17的CDR1、CDR2或CDR3至少约80%、约85%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%相同或完全相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白轻链可变区(VL结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VL结构域的至少一个CDR具有与SEQIDNO：9、16、10或11至少约80%、约85%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%相同或完全相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白轻链可变区(VL结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VL结构域具有与SEQIDNO：8、15或17至少约80%、约85%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%相同或完全相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白轻链可变区(VL结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VL结构域的至少一个CDR具有除了1、2、3、4或5个保守氨基酸取代外，与SEQIDNO：8、15或17的CDR1、CDR2或CDR3相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明提供分离的抗体或其抗原结合片段，包含免疫球蛋白轻链可变区(VL结构域)、基本由其组成或由其组成，其中所述VL结构域的至少一个CDR具有除了1、2、3、4或5个保守氨基酸取代外，与SEQIDNO：9、16、10或11相同的氨基酸序列。在另一实施方式中，本发明包括分离的抗体或其抗原结合片段，包含VL结构域、基本由其组成或由其组成，该VL结构域具有与SEQIDNO:8、15或17至少约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%或100%相同的氨基酸序列，其中包含所编码VL结构域的抗CXCL13抗体特异性或优选结合CXCL13。本发明抗CXCL13抗体的合适生物活性变体可用于本发明方法。这种变体将保持母体抗CXCL13抗体的所需结合性质。制备抗体变体的方法一般在本领域可获得。诱变和改变核苷酸序列的方法为本领域熟知。参见例如，Walker和Gaastra编(1983)TechniquesinMolecularBiology(《分子生物学技术》)(纽约麦克米兰出版公司(MacMillanPublishingCompany))；Kunkel，Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:488-492(1985)；Kunkel等，MethodsEnzymol.154:367-382(1987)；Sambrook等(1989)MolecularCloning:ALaboratoryManual(《分子克隆：实验室手册》)(纽约州冷泉港(ColdSpringHarbor，N.Y.))；美国专利号4,873,192；和其中引用的参考文献；通过引用全文纳入本文。有关不影响感兴趣多肽生物学活性的合适氨基酸取代的指南可参见下述文献中的模型：Dayhoff等(1978)，AtlasofProteinSequenceandStructure(《蛋白质序列和结构图册》)(华盛顿特区的国家生物医学研究基金会(Natl.Biomed.Res.Found.，Washington，D.C.))，第345-352页，通过引用全文纳入本文。Dayhoff等的模型利用单点可接受突变(PointAcceptedMutation，PAM)氨基酸相似矩阵(PAM250矩阵)来确定合适的保守性氨基酸取代。可能优选保守取代，如用具有相似特性的另一氨基酸交换某种氨基酸。Dayhoff等的模型中PAM250矩阵教导的保守氨基酸取代示例包括但不限于：和构建所述抗CXCL13结合分子的变体如抗体或其抗原结合片段、感兴趣多肽时，生成修饰，从而变体持续拥有所需属性，如能特异性结合CXCL13，如人、灵长动物、鼠、或者人和鼠的CXCL13。显然，编码变体多肽的DNA中产生的任何突变一定不能将序列置于阅读框外，优选不产生可生成二级mRNA结构的互补区。参见例如EP专利号EP0075444B1。测定抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段的结合特异性的方法包括但不限于：标准竞争结合实验、T细胞或B细胞的免疫球蛋白分泌的监测试验、T细胞增殖实验、凋亡实验、ELISA实验等。参见例如，WO93/14125；Shi等，Immunity13:633-642(2000)；Kumanogoh等，JImmunol169:1175-1181(2002)；Watanabe等，JImmunol167:4321-4328(2001)；Wang等，Blood97:3498-3504(2001)；和Giraudon等，JImmunol172(2):1246-1255(2004)公开的实验，其都通过引用纳入本文。本文在讨论本文公开的任何具体多肽（包括恒定区、CDR、VH结构域或VL结构域）是否与另一多肽至少约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%或者甚至约100%相同时，相同性%可采用本领域已知的方法和计算机程序/软件测定，例如但不限于BESTFIT程序(威斯康星序列分析软件包，用于Unix系统的第8版，遗传学计算机团队(GeneticsComputerGroup)，威斯康星州麦迪逊科学大道575大学研究园(UniversityResearchPark)，53711)。BESTFIT利用Smith和Waterman(1981)Adv.Appl.Math.2:482-489的局部同源性算法，找到两条序列之间的最佳同源性区段。使用BESTFIT或任何其它序列比对程序来确定某具体序列是否与本发明所述参照序列(例如)95%相同时，当然要设定参数从而在参照多肽序列的全长上计算相同性百分数，并且在参照序列的氨基酸总数中允许多至5%的同源性缺口。出于本发明目的，可采用史密斯-沃特曼(Smith-Waterman)同源性搜索算法测定序列相同性百分数，该算法使用仿射缺口搜索，其中缺口开放罚12分，缺口延伸罚2分，BLOSUM矩阵计62分。Smith和Waterman(1981)Adv.Appl.Math.2:482-489中公开了史密斯-沃特曼同源性搜索算法。变体与参照抗CXCL13抗体(如MAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2或3C9)可以差异例如，少至1-15个氨基酸残基，少至1-10个氨基酸残基，如6-10个，少至5个，少至4、3、2、或者甚至1个氨基酸残基。能够特异性结合CXCL13并保留所需CXCL13阻断活性的多肽的准确化学结构取决于多种因素。由于分子中存在可离子化的氨基和羧基，可获得酸盐或碱盐或中性形式的特定多肽。置于合适环境条件时保持生物学活性的所有这类制品均落入本文所用的抗CXCL13抗体的定义范围内。另外，可利用糖部分(糖基化)或其它补充分子如脂质、磷酸酯(盐)、乙酰基等通过衍生化来扩充所述多肽的一级氨基酸序列。也可通过与糖偶联进行扩充。这种扩充的某些方面通过生产宿主的翻译后加工系统实现；其它这类修饰可在体外引入。在任何情况下，这类修饰均包括在本文所用抗CXCL13抗体的定义范围内，只要抗CXCL13抗体的所需特性不被破坏。在不同实验中，预计这类修饰可通过提高或降低多肽活性来定量或定性地影响活性。而且，可通过氧化、还原或其它衍生化方法修饰链内单独氨基酸残基，可切割所述多肽以获得保留活性的片段。不破坏所需特性(如对CXCL13的结合特异性、结合亲和性和/或CXCL13阻断活性)的这类改变不会使该多肽序列从本文所用的感兴趣抗CXCL13抗体定义中去除。本领域提供有关制备和使用多肽变体的大量指南。在制备抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段、变体时，本领域技术人员不难确定对天然蛋白质核苷酸或氨基酸序列的哪种修饰将产生适用作本发明方法所用药物组合物的治疗活性组分的变体。可以多种方式使抗CXCL13抗体的恒定区突变从而改变效应物功能。例如，参见美国专利号6,737,056B1和美国专利申请公开号2004/0132101A1，其公开了优化抗体与Fc受体结合的Fc突变。在某些抗CXCL13抗体中，可利用本领域已知技术突变Fc部分以降低效应物功能。例如，恒定区结构域的缺失或失活(通过点突变或其它方式)可降低循环修饰抗体与Fc受体的结合，从而提高肿瘤定位。在其它情况下，与本发明相一致的恒定区修饰可能降低互补物结合，从而缩短所偶联细胞毒素的血清半衰期和非特异性结合。可利用恒定区的其它修饰来改变二硫键连接或寡糖部分，能因抗原特异性或抗体灵活性提高而加强定位。无需过多实验，即可容易地利用熟知的免疫学技术测定或定量分析修饰所得的生理学概况、生物利用度和其它生化作用，如肿瘤定位、生物分布和血清半衰期。本发明抗CXCL13抗体也包括修饰的衍生物，例如通过将任何类型的分子共价连接到抗体上，从而该共价连接不会防止抗体特异性结合其关联表位。例如但不限于，抗体衍生物包括通过，例如糖基化、乙酰化、PEG化、磷酸化、酰胺化、由已知保护/阻断基团衍生、蛋白水解切割、连接细胞配体或其它蛋白质等方法修饰的抗体。通过已知技术可进行多种化学修饰，包括但不限于：特异性化学切割、乙酰化、甲酰化等。此外，衍生物可包含一种或多种非经典氨基酸。“保守性氨基酸取代”是氨基酸残基被具有带相似电荷的侧链的氨基酸残基取代。本领域已定义具有带相似电荷的侧链的氨基酸残基家族。这些家族包括：具有碱性侧链的氨基酸(如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、具有酸性侧链的氨基酸(如天冬氨酸、谷氨酸)、具有不带电极性侧链的氨基酸(如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、具有非极性侧链的氨基酸(如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)、具有β-分支侧链的氨基酸(如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和具有芳族侧链的氨基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。或者，也可沿所有或一部分编码序列随机引入突变例如通过饱和诱变，可筛选所得突变体的生物学活性，以鉴定保持活性(例如，对CXCL13的结合特异性、结合亲和性和/或CXCL13阻断活性)的突变体。例如，可能仅在抗体分子的框架区内或仅在CDR区内引入突变。引入的突变可能是沉默或中性错义突变，即对抗体的抗原结合能力没有影响或影响很小。可使用这些突变类型来优化密码子使用，或提高杂交瘤的抗体生成。或者，非中性错义突变可改变抗体的抗原结合能力。大部分沉默和中性错义突变的位置可能位于框架区内，而大部分非中性错义突变的位置可能在CDR内，但这不是必然的要求。本领域技术人员能够设计和检测具有所需特性，例如抗原结合活性无改变或结合活性有改变(如抗原结合活性提高或抗体特异性改变)的突变分子。诱变后，可通过常规方式表达编码蛋白，并可利用本文所述技术或本领域已知的常规修饰技术测定该编码蛋白的功能和/或生物学活性(例如，免疫特异性结合CXCL13多肽的至少一个表位的能力)。在某些实施方式中，本发明抗CXCL13抗体包含至少一个优化的互补决定区(CDR)。“优化CDR”指该CDR已被修饰，并且根据对包含该优化CDR的抗CXCL13抗体赋予维持或提高的结合亲和性和/或抗CXCL13活性来选择优化序列。“抗CXCL13活性”或“CXCL13阻断活性”可包括调节下列一种或多种CXCL13相关活性的活性：阻断CXCL13与其受体的相互作用，造成干扰B细胞和滤泡型B辅助T细胞迁移到发炎组织和生发中心形成(如在自身免疫疾病情况中);和抑制癌细胞增殖和在肿瘤疾病中扩散的能力;或任何其他与CXCL13表达细胞有关的活性。抗CXCL13活性也能归因于CXCL13表达相关疾病的发生率或严重性下降，包括但不限于某些类型自身免疫疾病(如多发性硬化、关节炎(如类风湿性关节炎)、慢性胃炎、胃淋巴瘤、移植排斥、干燥综合征(SS)、系统性红斑狼疮(SLE)、丙型肝炎病毒感染中的活性混合冷球蛋白血症(MC)血管炎、幼年型皮肌炎和重症肌无力)和某些癌症(如伯基特淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、MALT淋巴瘤(如胃MALT淋巴瘤)、癌(如结肠、前列腺、乳腺、胃、食道和胰腺)、和慢性淋巴细胞白血病(CLL))以及其他炎性疾病如螺杆菌（Helicobacter）感染诱导的炎性疾病如胃炎、溃疡和胃粘膜损伤。IV.编码抗CXCL13抗体的多核苷酸本发明还提供编码本发明抗CXCL13抗体，或其抗原结合片段、变体或衍生物的核酸分子。在一个实施方式中，本发明提供分离的多核苷酸，其包含免疫球蛋白重链可变区(VH结构域)的编码核酸、基本由其组成或由其组成，其中所述VH结构域的至少一个CDR具有与选自SEQIDNO：2或12的CDR1、CDR2或CDR3的多核苷酸序列至少约80%、约85%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%相同或完全相同的氨基酸序列。在其它实施方式中，本发明提供分离的多核苷酸，其包含免疫球蛋白VH结构域的编码核酸、基本由其组成或由其组成，其中所述VH结构域的至少一个CDR选自下组：(a)包含SEQIDNO：4所示氨基酸序列的CDR1；(b)包含SEQIDNO：5所示氨基酸序列的CDR2；和(c)包含SEQIDNO：6所示氨基酸序列的CDR3。在另一个实施方式中，本发明包括分离的多核苷酸，其包含VH结构域的编码核酸、基本由其组成或由其组成，所述VH结构域具有与包含SEQIDNO：3或SEQIDNO：13的参照VH结构域多肽序列至少约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%或100%相同的氨基酸序列，其中包含所编码VH结构域的抗CXCL13抗体特异性或优选结合CXCL13。在另一个实施方式中，本发明包括分离的多核苷酸，其包含VH结构域的编码核酸、基本由其组成或由其组成，其中所述多核苷酸序列具有与包含SEQIDNO：2或SEQIDNO：12的序列至少约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%或100%相同的氨基酸序列，其中包含所编码VH结构域的抗CXCL13抗体特异性或优选结合CXCL13。在一个实施方式中，本发明提供分离的多核苷酸，其包含免疫球蛋白轻链可变区(VL结构域)的编码核酸、基本由其组成或由其组成，其中所述VL结构域的至少一个CDR具有与SEQIDNO：8、SEQIDNO：15或SEQIDNO：17的CDR1、CDR2或CDR3多核苷酸序列至少约80%、约85%、约90%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%相同或完全相同的氨基酸序列。在其它实施方式中，本发明提供分离的多核苷酸，其包含免疫球蛋白VL结构域的编码核酸、基本由其组成或由其组成，其中所述VL结构域的至少一个CDR选自下组：(a)包含SEQIDNO：9或16所示氨基酸序列的CDR1；(b)包含SEQIDNO：10所示氨基酸序列的CDR2；和(c)包含SEQIDNO：11所示氨基酸序列的CDR3。在另一个实施方式中，本发明包括分离的多核苷酸，其包含VL结构域的编码核酸、基本由其组成或由其组成，其中所述VL结构域具有与包含SEQIDNO：8、15或17的参照VL结构域多肽序列至少约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%或100%相同的氨基酸序列，其中包含所编码VL结构域的抗CXCL13抗体特异性或优选结合CXCL13。在另一个实施方式中，本发明包括分离的多核苷酸，其包含VL结构域的编码核酸、基本由其组成或由其组成，其中所述多核苷酸序列具有与包含SEQIDNO：7、SEQIDNO：14或SEQIDNO:18的序列至少约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%或100%相同的氨基酸序列，其中包含所编码VL结构域的抗CXCL13抗体特异性或优选结合CXCL13。上述任何多核苷酸还可包含额外核酸，所述核酸编码例如信号肽以指导编码多肽、本文所述抗体恒定区或本文所述其它异源多肽的分泌。另外，如本文他处所详述，本发明包括含一种或多种上述多核苷酸的组合物。在一个实施方式中，本发明包括含第一多核苷酸和第二多核苷酸的组合物，其中所述第一多核苷酸编码本文所述的VH结构域，其中所述第二多核苷酸编码本文所述的VL结构域。具体地，组合物包含编码VH结构域的多核苷酸和编码VL结构域的多核苷酸、基本由其组成或由其组成，其中编码VH结构域的多核苷酸如SEQIDNO：2或12所示，编码VL结构域的多核苷酸如SEQIDNO：7、14或18所示。如本文另述，本发明还包括本发明多核苷酸的片段。此外，本发明还考虑编码本文所述融合多肽、Fab片段和其它衍生物的多核苷酸。所述多核苷酸可通过本领域已知的任何方法产生或生产。例如，如果抗体的核苷酸序列已知，则可由化学合成的寡核苷酸组装编码该抗体的多核苷酸(如Kutmeier等，BioTechniques17:242(1994)所述)，简言之，该方法包括合成含有编码该抗体的序列部分的重叠寡核苷酸，使这些寡核苷酸退火和连接，然后通过PCR扩增连接的寡核苷酸。或者，编码本发明抗CXCL13抗体，或其抗原结合片段、变体或衍生物的多核苷酸可由合适来源的核酸产生。如果无法获得含有编码特定抗体的核酸的克隆，但该抗体分子的序列已知，则可通过化学合成或利用可与该序列3'和5'端杂交的合成引物进行PCR扩增、或利用具体基因序列的特异性寡核苷酸探针进行克隆以鉴定cDNA文库中编码该抗体或其它抗CXCL13抗体的cDNA克隆，由合适来源(如抗体cDNA文库，或由表达该抗体或其它抗CXCL13抗体的任何组织或细胞如选择表达抗体的杂交瘤细胞产生的cDNA文库，或从中分离的核酸，优选聚A+RNA)获得编码该抗体的核酸。然后，可利用本领域熟知的任何方法将PCR产生的扩增核酸克隆到可复制克隆载体中。一旦确定抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的核苷酸序列和相应氨基酸序列，就可利用本领域熟知的操作核苷酸序列的方法，例如重组DNA技术、定点诱变、PCR等操作其核苷酸序列。(参见例如，Sambrook等(1990)MolecularCloning，ALaboratoryManual(《分子克隆，实验室手册》)(第2版；纽约州冷泉港的冷泉港实验室公司(ColdSpringHarborLaboratory，ColdSpringHarbor，N.Y.))和Ausubel等编(1998)CurrentProtocolsinMolecularBiology(《新编分子生物学实验指南》)(纽约州的约翰韦利森公司(JohnWiley&Sons，NY))所述技术，其通过引用全文纳入本文)，以产生具有不同氨基酸序列的抗体例如用于产生氨基酸取代、缺失和/或插入。编码抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的多核苷酸可由任何多核糖核苷酸或多脱氧核糖核苷酸构成，可以是未修饰的RNA或DNA或修饰的RNA或DNA。例如，编码抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的多核苷酸可由以下构成：单链和双链DNA、作为单链和双链区域混合物的DNA、单链和双链RNA以及作为单链和双链区域混合物的RNA、杂交分子，所述杂交分子包含可以是单链或更常见是双链、或是单链和双链区混合物的DNA和RNA。此外，编码抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的多核苷酸可由包含RNA或DNA、或者RNA和DNA的三链区域构成。编码抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的多核苷酸也可含有一个或多个修饰碱基，或者就稳定性或其它原因修饰的DNA或RNA主链。“修饰的”碱基包括，例如三苯甲基碱基和非常见碱基如肌苷。可对DNA和RNA进行多种修饰；因此“多核苷酸”涵盖化学、酶或代谢修饰形式。编码衍生自免疫球蛋白(如免疫球蛋白重链部分或轻链部分)的非天然多肽变体的分离多核苷酸可通过将一个或多个核苷酸取代、添加或缺失引入免疫球蛋白的核苷酸序列来产生，从而将一个或多个氨基酸取代、添加或缺失引入编码蛋白。突变可通过标准技术引入，例如定点诱变和PCR介导的诱变。优选在一个或多个非必需氨基酸残基处完成保守性氨基酸取代。V．融合蛋白和抗体偶联物如本文他处详述，抗CXCL13结合分子如本发明抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物还可与异源多肽的N-或C-末端重组融合，或与多肽或其它组合物化学偶联(包括共价和非共价偶联)。例如，抗CXCL13抗体可与用作检测实验标签和效应分子如异源多肽、药物、放射性核素或毒素的分子重组融合或偶联。参见例如，PCT公开WO92/08495；WO91/14438；WO89/12624；美国专利号5,314,995；和EP396,387。本发明的抗CXCL13抗体，或其抗原结合片段、变体或衍生物可包括修饰的衍生物，即通过将任何类型的分子与抗体共价连接，从而该共价连接不防止抗体结合抗CXCL13。例如但不限于，抗体衍生物包括通过，例如糖基化、乙酰化、PEG化、磷酸化、酰胺化、由已知保护/阻断基团衍生、蛋白水解切割、连接于细胞配体或其它蛋白质等方法修饰的抗体。通过已知技术可进行任意多种化学修饰，包括但不限于：特异性化学切割、乙酰化、甲酰化等。此外，衍生物可包含一种或多种非经典氨基酸。抗CXCL13结合分子，如本发明抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可由通过肽键或经修饰肽键即肽等构物而彼此结合的氨基酸组成，并可包含20种基因编码氨基酸以外的氨基酸。例如，可通过天然方法如翻译后加工，或通过本领域熟知的化学修饰技术修饰抗CXCL13抗体。这些修饰在基础教材和更具体的专著以及大量研究文献中已有深入描述。可以在抗CXCL13结合分子的任何位置进行修饰，包括在肽主链、氨基酸侧链和氨基或羧基末端、或者在某部分如糖上进行修饰。应当了解相同类型的修饰可以在给定抗CXCL13结合分子的多个位置以相同或不同程度出现。并且，给定的抗CXCL13结合分子可包含许多类型的修饰。抗CXCL13结合分子可以是分支的，例如因泛素化造成，它们可以为有或没有分支的环状。环状、分支、和分支环状的抗CXCL13结合分子可以由翻译后的天然过程产生也可通过合成方法产生。修饰包括乙酰化、酰基化、ADP-核糖基化、酰胺化、共价结合黄素、共价结合血红素部分、共价结合核苷酸或核苷酸衍生物、共价结合脂质或脂质衍生物、共价结合磷脂酰肌醇、交联、环化、二硫键形成、去甲基化、形成共价交联、形成半胱氨酸、形成焦谷氨酸、甲酰化、γ羧化、糖基化、GPI锚形成、羟基化、碘化、甲基化、十四烷基化、氧化、聚乙二醇化、蛋白水解加工、磷酸化、异戊二烯化、外消旋化、硒化、硫化、转移RNA介导的氨基酸加入蛋白质如精氨酰化、以及泛素化。(参见例如，Proteins--StructureandMolecularProperties(《蛋白质—结构和分子特性》)，T.E.Creighton，纽约的W.H.弗里曼公司(W.H.FreemanandCompany)；第2版(1993)；Johnson编(1983)PosttranslationalCovalentModificationofProteins(《蛋白质的翻译后共价修饰》)(纽约学术出版社(AcademicPress))，第1-12页；Seifter等，Meth.Enzymol.182:626-646(1990)；Rattan等，Ann.NYAcad.Sci.663:48-62(1992))。本发明也提供包含抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物，以及异源多肽的融合蛋白。与抗体融合的异源多肽可用于某种功能或用于靶向表达抗CXCL13多肽的细胞。在一个实施方式中，本发明融合蛋白包含某一多肽、基本由其组成或由其组成，所述多肽具有本发明抗体的任何一个或多个VH结构域的氨基酸序列、本发明抗体或其片段或变体的任何一个或多个VL结构域的氨基酸序列、以及异源多肽序列。在另一实施方式中，用于本文所述诊断和治疗方法的融合蛋白包含某一多肽、基本由其组成或由其组成，所述多肽具有抗CXCL13抗体、或其片段、变体或衍生物的VH结构域中任何一个、两个、三个CDR的氨基酸序列，和/或抗CXCL13抗体、或其片段、变体或衍生物的VL结构域中任何一个、两个、三个CDR的氨基酸序列，以及异源多肽序列。在一个实施方式中，融合蛋白包含某一多肽，所述多肽具有本发明抗CXCL13抗体的至少一个VH结构域的氨基酸序列和本发明抗CXCL13抗体或其片段、衍生物或变体的至少一个VL结构域的氨基酸序列，以及异源多肽序列。优选地，所述融合蛋白的VH和VL结构域对应于特异性结合CXCL13中至少一个表位的单一来源抗体(或scFv或Fab片段)。在又一实施方式中，用于本文所述诊断和治疗方法的融合蛋白包含某一多肽，所述多肽具有抗CXCL13抗体的VH结构域的任何一个、两个、三个或更多个CDR的氨基酸序列和抗CXCL13抗体或其片段或变体的VL结构域中任何一个、两个、三个或更多个CDR的氨基酸序列，以及异源多肽序列。优选地，VH结构域或VL结构域的两个、三个、四个、五个、六个或更多个CDR对应于本发明单一来源抗体(或scFv或Fab片段)。本发明也涵盖编码这些融合蛋白的核酸分子。文献中报道的示范性融合蛋白包括以下的融合：T细胞受体(Gascoigne等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:2936-2940(1987))；CD4(Capon等，Nature337:525-531(1989)；Traunecker等，Nature339:68-70(1989)；Zettmeissl等，DNACellBiol.USA9:347-353(1990)；和Byrn等，Nature344:667-670(1990))；L-选择素(归巢受体)(Watson等，J.Cell.Biol.110:2221-2229(1990)；和Watson等，Nature349:164-167(1991))；CD44(Aruffo等，Cell61:1303-1313(1990))；CD28和B7(Linsley等，J.Exp.Med.173:721-730(1991))；CTLA-4(Lisley等，J.Exp.Med.174:561-569(1991))；CD22(Stamenkovic等，Cell66:1133-1144(1991))；TNF受体(Ashkenazi等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:10535-10539(1991)；Lesslauer等，Eur.J.Immunol.27:2883-2886(1991)；和Peppel等，J.Exp.Med.174:1483-1489(1991))；和IgE受体a(Ridgway和Gorman，J.Cell.Biol.卷115，摘要号1448(1991))。如本文它处所述，抗CXCL13结合分子，如本发明抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可与异源多肽融合，以提高所述多肽的体内半衰期或在使用本领域已知方法的免疫实验中应用。例如，在一个实施方式中，可将PEG偶联于本发明抗CXCL13抗体，以提高其体内半衰期。参见Leong等，Cytokine16:106(2001)；Adv.inDrugDeliv.Rev.54:531(2002)；或Weir等，Biochem.Soc.Transactions30:512(2002)。此外，抗CXCL13结合分子，如本发明抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可融合标记物序列如肽，以利于其纯化或检测。在某些实施方式中，标记物氨基酸序列是六组氨酸肽，例如pQE载体(凯杰公司(QIAGEN,Inc.)，加利福尼亚州查茨沃斯(Chatsworth)伊顿大街9259号，91311)提供的标签等，其中许多标记可市售获得。如Gentz等，1989，Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:821-824所述，六组氨酸提供了方便的融合蛋白纯化方法。用于纯化的其它肽标签包括但不限于：对应于流感血凝素蛋白衍生表位的“HA”标签(Wilson等，Cell37:767(1984))，以及“flag”标签。可采用本领域熟知方法制备融合蛋白(参见例如，美国专利号5,116,964和5,225,538)。可凭经验选择进行融合的准确位点，以优化融合蛋白的分泌或结合特性。然后，将编码融合蛋白的DNA转染到宿主细胞中以用于表达。抗CXCL13结合分子如本发明抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物，可以非偶联形式使用，或者可偶联于各种分子中的至少一种，例如，以改善该分子的治疗特性、促进靶标检测、或用于患者成像或治疗。可以在纯化前或纯化后，或者在进行纯化时标记或偶联抗CXCL13结合分子，如本发明抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物。具体地，本发明抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可偶联于治疗剂、前药、肽、蛋白质、酶、病毒、脂质、生物反应修饰剂、药物试剂或PEG。本领域技术人员应理解，根据所选的待偶联物质还可采用各种技术组装偶联物。例如，可通过使结合多肽与生物素的活化酯如生物素N-羟基琥珀酰亚胺酯反应，制备有生物素的偶联物。相似地，可以在偶联剂如本文所列偶联剂存在下或通过与异硫氰酸酯优选荧光素-异硫氰酸酯反应来制备有荧光标记的偶联物。以类似方式制备本发明抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的偶联物。本发明还包括偶联于诊断剂或治疗剂的抗CXCL13结合分子，如本发明抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物。可将本发明抗CXCL13抗体(包括其抗原结合片段、变体和衍生物)用于诊断目的，例如，作为临床测试步骤的一部分监测疾病的发展或进展，从而(例如)确定给定治疗和/或预防方案的功效。例如，将抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物偶联于可检测物质能促进检测。可检测物质的例子包括各种酶、辅基、荧光材料、发光材料、生物发光材料、放射性材料、使用各种正电子发射断层显像术的正电子发射金属和非放射性顺磁金属离子。参见例如，美国专利号4,741,900中的金属离子，可根据本发明将其与抗体偶联用于诊断。合适酶的例子包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶或乙酰基胆碱酯酶；合适的辅基复合物的例子包括链霉亲和素/生物素和亲和素/生物素；合适的荧光材料的例子包括：伞形花内酯、荧光素、荧光素异硫氰酸酯、罗丹明、二氯三嗪胺荧光素、丹磺酰氯或藻红蛋白；发光材料的例子包括鲁米诺；生物发光材料的例子包括：萤光素酶、萤光素和发光蛋白；合适的放射性物质的例子包括125I、131I、111In、90Y或99Tc。抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可偶联治疗部分，如细胞毒素、治疗剂或放射性金属离子。细胞毒素或细胞毒性剂包括对细胞有害的任何物质。抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物还可通过偶联于化学发光化合物进行可检测标记。然后，通过检测化学反应过程中产生的发光存在，确定化学发光标记的抗CXCL13结合分子的存在。特别有用的化学发光标记化合物的例子是鲁米诺、异鲁米诺、热性(theromatic)吖啶酯、咪唑、吖啶盐和草酸酯。对抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物进行可检测标记的一种方式是将其连接于酶，并在酶促免疫实验(EIA)中使用连接产物(Voller,A.,TheEnzymeLinkedImmunosorbentAssay(ELISA)(“酶联免疫吸附实验”)，微生物协会季刊(MicrobiologicalAssociatesQuarterlyPublication)，马里兰州沃克斯维尔(Walkersville，Md.)；DiagnosticHorizons2:1-7(1978)；Voller等，J.Clin.Pathol.31:507-520(1978)；Butler，Meth.Enzymol.73:482-523(1981)；Maggio编(1980)EnzymeImmunoassay(《酶促免疫实验》)，佛罗里达州伯克莱屯的CRC出版社(CRCPress,BocaRaton,Fla.)；Ishikawa等编(1981)EnzymeImmunoassay(《酶促免疫实验》)(KgakuShoin，东京)。结合于抗CXCL13抗体的酶会与合适底物例如发色底物反应，其反应方式产生可通过(例如)分光光度法、荧光测定法或目测法检测的化学部分。能用于可检测标记抗体的酶包括但不限于：苹果酸脱氢酶、葡萄球菌核酸酶、δ-5-类固醇异构酶、酵母醇脱氢酶、α甘油磷酸脱氢酶、磷酸丙糖异构酶、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、天冬酰胺酶、葡萄糖氧化酶、β半乳糖苷酶、核糖核酸酶、脲酶、过氧化氢酶、葡萄糖-6磷酸脱氢酶、葡糖淀粉酶和乙酰胆碱酯酶。此外，可通过利用酶发色底物的比色法完成检测。也可通过目测比较底物与类似制备标准品的酶反应程度完成检测。也可利用各种其它免疫实验进行检测。例如，通过放射性标记抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物，可以使用放射性免疫实验(RIA)检测结合分子(参见例如，Weintraub(1986年3月)PrinciplesofRadioimmunoassays(《放射性免疫实验原理》)，第七届放射性配体实验技术培训课程(SeventhTrainingCourseonRadioligandAssayTechniques)(内分泌协会(TheEndocrineSociety))，通过引用纳入本文)。放射性同位素可通过包括但不限于以下的方式检测：γ计数器、闪烁计数器或放射自显影。也可利用荧光发射金属如152Eu或其它镧系元素对抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物进行可检测标记。可用诸如二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)或乙二胺四乙酸(EDTA)的金属螯合基团将这些金属连接于结合分子。将不同部分偶联于抗体如抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的技术是众所周知的，参见例如，Amon等(1985)MonoclonalAntibodiesforImmunotargetingofDrugsinCancerTherapy(“癌症治疗中用于免疫靶向药物的单克隆抗体”)，收录于MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy(《单克隆抗体和癌症治疗》)，Reisfeld等编(ARL公司(AlanR.Liss，Inc.))，第243-56页；Hellstrom等(1987)AntibodiesforDrugDelivery(“用于药物递送的抗体”)，收录于ControlledDrugDelivery(《控制药物递送》)，Robinson等编(第2版；马塞尔德克尔公司(MarcelDekker，Inc.))，第623-53页)；Thorpe(1985)AntibodyCarriersofCytotoxicAgentsinCancerTherapy:AReview(“癌症治疗中细胞毒性剂的抗体运载体：综述”)，收录于MonoclonalAntibodies'84:BiologicalandClinicalApplications(《单克隆抗体'84：生物学和临床应用》)，Pinchera等编，第475-506页；Analysis,Results,andFutureProspectiveoftheTherapeuticUseofRadiolabeledAntibodyinCancerTherapy(“在癌症治疗中治疗性应用放射性标记抗体的分析、结果和展望”)，收录于MonoclonalAntibodiesforCancerDetectionandTherapy(《用于检测和治疗癌症的单克隆抗体》)，Baldwin等编，学术出版社(AcademicPress)，第303-16页(1985)；和Thorpe等，Immunol.Rev.62:119-58(1982)。VI.抗体多肽的表达编码抗体的轻链和重链的DNA序列可根据熟知方法利用逆转录酶和DNA聚合酶同时或单独制备。可根据公开的重链和轻链DNA和氨基酸序列，用共有恒定区引物或更具特异性的引物启动PCR。如上所述，也可利用PCR分离编码抗体轻链和重链的DNA克隆。在这种情况下，可通过共有引物或较大的同源探针，如小鼠恒定区探针筛选文库。DNA通常是质粒DNA，可利用本领域已知技术从细胞中分离，按照例如涉及重组DNA技术的上面文献中详述的标准熟知技术进行限制性作图和测序。当然，可以在分离过程或后续分析期间的任何时间点按照本发明合成DNA。操作分离的遗传物质以提供本发明抗CXCL13抗体，或其抗原结合片段、变体或衍生物后，通常将编码该抗CXCL13抗体的多核苷酸插入表达载体，以便引入可用于产生所需量抗CXCL13抗体的宿主细胞中。重组表达抗体或其片段、衍生物或类似物，例如结合本文所述靶分子如CXCL13的抗体重链或轻链，需要构建含有一个或多个编码该抗体多核苷酸的表达载体。一旦获得编码本发明抗体分子、或抗体的重链或轻链、或其一部分(优选含有重链或轻链可变区)的多核苷酸，可使用本领域熟知方法通过重组DNA技术生成产生抗体分子的载体。因此，本文描述了通过表达含抗体编码核苷序列的多核苷酸来制备蛋白质的方法。可利用本领域技术人员熟知的方法构建含有抗体编码序列和合适转录和翻译控制信号的表达载体。这些方法包括例如，体外重组DNA技术、合成技术和体内遗传重组。因此，本发明提供可复制载体，其包含操作性连接启动子的编码本发明抗体分子、或其重链或轻链、其重链或轻链可变区的核苷酸序列。这种载体可包括，编码抗体分子恒定区的核苷酸序列(参见例如，PCT公开WO86/05807；PCT公开WO89/01036；和美国专利号5,122,464)，可将抗体可变区克隆到这类载体中以便表达完整的重链或轻链。本文所用的术语“载体”或“表达载体”指根据本发明用作运载体以在宿主细胞中引入和表达所需基因的载体。如本领域技术人员所知，这种载体可容易地选自质粒、噬菌体、病毒和逆转录病毒。通常，与本发明相容的载体包含选择标记物、有利于克隆所需基因的合适限制性位点和进入真核或原核细胞和/或在其中复制的能力。出于本发明目的，可采用多种表达载体系统。例如，一类载体利用衍生自动物病毒如牛乳头瘤病毒、多瘤病毒、腺病毒、牛痘病毒、杆状病毒、逆转录病毒(RSV、MMTV或MOMLV)或SV40病毒的DNA元件。其它包括使用具有内部核糖体结合位点的多顺反子系统。此外，通过引入能够选择已转染宿主细胞的一种或多种标记物，可选择将DNA整合入染色体中的细胞。该标记物可向营养缺陷型宿主提供原营养，以及杀生体抗性(如抗生素)或对重金属如铜的抗性。选择标记基因可直接连接于待表达的DNA序列，或者通过共同转化引入同一细胞内。mRNA的优化合成也可能需要其它元件。这些元件可包括信号序列、剪接信号以及转录启动子、增强子和终止信号。在某些实施方式中，将克隆的可变区基因以及如上所述合成的重链和轻链恒定区基因(例如人)插入表达载体内。当然，能够在真核细胞中引发表达的任何表达载体均可用于本发明。合适载体的例子包括但不限于：质粒pcDNA3、pHCMV/Zeo、pCR3.1、pEF1/His、pIND/GS、pRc/HCMV2、pSV40/Zeo2、pTRACER-HCMV、pUB6/V5-His、pVAX1和pZeoSV2(可获自加州圣地亚哥的英杰公司(Invitrogen,SanDiego,Calif.))和质粒pCI(可获自威斯康星州麦迪逊的普洛麦格公司(Promega,Madison,Wis.))。通常，筛选大量转化细胞以选出表达适当高水平免疫球蛋白重链和轻链的转化细胞是可通过(例如)机器人系统进行的常规实验。更一般地，一旦制备得到编码抗CXCL13抗体单体亚基的载体或DNA序列，可将表达载体引入合适的宿主细胞内。可通过本领域技术人员熟知的各种技术将质粒引入宿主细胞内。这些技术包括但不限于：转染(包括电泳和电穿孔)、原生质体融合、磷酸钙沉淀、细胞与包膜DNA融合、显微注射和用完整病毒感染。参见Ridgway(1988)MammalianExpressionVectors(“哺乳动物表达载体”)，收录于Vectors(《载体》)，Rodriguez和Denhardt编(马萨诸塞州波士顿的巴特沃思公司(Butterworths，Boston，Mass.))，第24.2章，第470-472页。通常，通过电穿孔将质粒引入宿主。在适合产生轻链和重链的条件下培养携带表达构建物的宿主细胞，并测定重链和/或轻链蛋白的合成。示范性实验技术包括酶联免疫吸附实验(ELISA)、放射性免疫实验(RIA)或荧光活化的细胞分选分析(FACS)、免疫组化等。通过常规技术将该表达载体转移到宿主细胞中，然后通过常规技术培养该转染细胞以产生用于本文所述方法的抗体。因此，本发明包括含有操作性连接异源启动子的本发明抗体或其重链或轻链的编码多核苷酸的宿主细胞。在表达双链抗体的优选实施方式中，可以在宿主细胞中共同表达编码重链和轻链的载体以表达整个免疫球蛋白分子，如下详述。本文所用的“宿主细胞”指携带用重组DNA技术构建并编码至少一种异源基因的载体的细胞。在描述从重组宿主中分离抗体的方法时，除非另有明确说明，术语“细胞”和“细胞培养物”可互换使用来指示抗体来源。换言之，从“细胞”回收多肽可以指从瞬时离心的全细胞或含有培养基和悬浮细胞的细胞培养物回收。可利用各种宿主-表达载体系统来表达用于本文所述方法的抗体分子。这类宿主-表达系统代表可产生并随后纯化感兴趣编码序列的载体，但也代表用合适的核苷酸编码序列转化或转染时，可原位表达本发明抗体分子的细胞。它们包括但不限于微生物，例如用含有抗体编码序列的重组噬菌体DNA、质粒DNA或粘粒DNA表达载体转化的细菌(如大肠杆菌(E.coli)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis))；用含有抗体编码序列的重组酵母表达载体转化的酵母(如毕赤酵母(SaccharomycesPichia))；用含有抗体编码序列的重组病毒表达载体(如杆状病毒)感染的昆虫细胞系统；用重组病毒表达载体(如花椰菜花叶病毒，CaMV；烟草花叶病毒，TMV)感染的或用含有抗体编码序列的重组质粒表达载体(如Ti质粒)转化的植物细胞系统；或者哺乳动物细胞系统(如COS、CHO、BLK、293和3T3细胞)，其携带含有衍生自哺乳动物细胞基因组启动子(如金属硫蛋白启动子)或哺乳动物病毒启动子(如腺病毒晚期启动子；牛痘病毒7.5K启动子)的重组表达构建物。在某些实施方式中，利用细菌细胞如大肠杆菌(Escherichiacoli)，并且在其他实施方式中用真核细胞(特别是表达完整重组抗体分子时)表达重组抗体分子。例如，哺乳动物细胞如中华仓鼠卵巢细胞(CHO)与某载体如来自人巨细胞病毒的主要中间早期基因启动子元件联用，是抗体的有效表达系统(Foecking等，Gene45:101(1986)；和Cockett等，Bio/Technology8:2(1990))。用于表达蛋白质的宿主细胞系常常是哺乳动物来源的；本领域技术人员能够优先确定最适合所需基因产物在其中表达的具体宿主细胞系。示范性宿主细胞系包括但不限于：CHO(中华仓鼠卵巢)、DG44和DUXB11(中华仓鼠卵巢细胞系、DHFR-)、HELA(人宫颈癌)、CVI(猴肾细胞系)、COS(具有SV40T抗原的CVI衍生物)、VERY、BHK(幼仓鼠肾)、MDCK、293、WI38、R1610(中华仓鼠成纤维细胞)BALBC/3T3(小鼠成纤维细胞)、HAK(仓鼠肾细胞系)、SP2/O(小鼠骨髓瘤)、P3.times.63-Ag3.653(小鼠骨髓瘤)、BFA-1c1BPT(牛内皮细胞)、RAJI(人淋巴细胞)和293(人肾)。宿主细胞系通常可从商业服务来源如美国组织培养物保藏中心或公开文献获得。此外，可选择以所需的特定方式调节插入序列表达、或修饰和加工该基因产物的宿主细胞株。对蛋白质产物的这种修饰(如糖基化)和加工(如切割)可能对蛋白质功能重要。不同宿主细胞对蛋白质和基因产物的翻译后加工和修饰具有特征性和特定的机制。可选择合适的细胞系或宿主系统，以保证对所表达的外来蛋白进行正确的修饰和加工。为此，可采用具有适当加工初始转录物、对基因产物进行糖基化和磷酸化的细胞机器的真核宿主细胞。为了长期、高产率地生产重组蛋白，优选稳定的表达。例如，可工程改造稳定表达抗体分子的细胞系。用合适表达控制元件(如启动子、增强子、序列、转录终止子、聚腺苷酸化位点等)控制的DNA和选择标记来转化宿主细胞,而不是使用含有病毒复制起点的表达载体。引入外来DNA后，使工程改造细胞在富集培养基中生长1-2天，然后换到选择性培养基中。重组质粒中的选择标记提供对选择的抗性，使得细胞能够将该质粒稳定整合入染色体，生长形成细胞灶，进而可克隆并扩增成细胞系。可有利地使用这种方法工程改造稳定表达该抗体分子的细胞系。可采用许多选择系统，包括但不限于可分别用于tk-、hgprt-或aprt-细胞的单纯疱疹病毒胸苷激酶(Wigler等，Cell11:223(1977))、次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(Szybalska和Szybalski，Proc.Natl.Acad.Sci.USA48:202(1992))和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶(Lowy等，Cell22:817(1980))基因。另外，抗代谢剂抗性可用作选择以下基因的基础：dhfr，产生甲氨蝶呤抗性(Wigler等，1980，Natl．Acad．Sci．USA，77:357；O’Hare等，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，78:1527)；gpt，产生霉酚酸抗性(Mulligan和Berg，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，78:2072)；neo，产生氨基糖苷G-418抗性(ClinicalPharmacy12:488-505；Wu和Wu，1991，Biotherapy3:87-95；Tolstoshev，1993，Ann．Rev．Pharmacol．Toxicol．32:573-596；Mulligan，1993，Science260:926-932；和Morgan和Anderson，Ann.Rev.Biochem.62:191-217(1993)；TIBTECH11(5):155-215(1993年5月))；和hygro，产生潮霉素抗性(Santerre等，1984，Gene，30:147)。重组DNA技术领域已知的可使用方法描述于Ausubel等，CurrentProtocolsinMolecularBiology(《新编分子生物学实验指南》)，纽约州的约翰韦利父子公司(JohnWiley&Sons，NY)(1993)；Kriegler，GeneTransferandExpression，ALaboratoryManual(“基因转移和表达，实验室手册”)，纽约的斯托克顿出版社(StocktonPress)(1990)；Dracopoli等(编)(1994)CurrentProtocolsinHumanGenetics(《新编人类遗传学实验指南》)(纽约州的约翰韦利父子公司)，第12和13章；Colberre-Garapin等(1981)J.Mol.Biol.150:1，通过引用全文纳入本文。可通过载体扩增提高抗体分子的表达水平(综述参见Bebbington和Hentschel，“TheUseofVectorsBasedonGeneAmplificationfortheExpressionofClonedGenesinMammalianCellsinDNACloning”(在DNA克隆中使用基于基因扩增的载体在哺乳动物细胞中表达克隆的基因)，(纽约州的学术出版社(AcademicPress)))，第3卷。当表达抗体的载体系统中的标记可扩增时，提高宿主细胞培养物中存在的抑制剂水平会增加标记基因的拷贝数。由于扩增区域与抗体基因相连，抗体产量也会提高(Crouse等，Mol.Cell.Biol.3:257(1983))。体外生产允许按比例放大规模产生大量所需多肽。本领域已知在组织培养条件下培养哺乳动物细胞的技术，包括均一悬浮培养，例如在气升式反应器或在连续搅拌反应器中培养，或者固定或捕获式细胞培养，例如在中空纤维中、微囊中、琼脂糖微珠上或陶瓷筒上培养。如果必要和/或需要，多肽溶液可通过常规色谱法进行纯化，例如，在优选生物合成合成绞链区多肽之后或者在本文所述的HIC色谱步骤之前或之后，进行如凝胶过滤、离子交换色谱、DEAE-纤维素色谱或(免疫-)亲和性色谱。编码本发明抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的基因也可在非哺乳动物细胞，如昆虫细胞、细菌细胞、酵母细胞或植物细胞中表达。易于摄入核酸的细菌包括肠杆菌科成员，例如大肠杆菌(Escherichiacoli)或沙门菌属(Salmonella)菌株；芽孢杆菌科(Bacillaceae)，如枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)；肺炎球菌(Pneumococcus)；链球菌(Streptococcus)和流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenzae)。还应理解，在细菌中表达时，异源多肽通常是包含体的一部分。异源多肽必须被分离、纯化、然后组装成功能分子。需要抗体的四价形式时，亚基随后会自组装成四价抗体(WO02/096948A2)。在细菌系统中，可根据所表达抗体分子的指定应用对许多表达载体进行有利地选择。例如，要生成大量这类蛋白质时，为了产生抗体分子的药物组合物，可能需要能够指导易于纯化的融合蛋白产物高水平表达的载体。这类载体包括但不限于：大肠杆菌表达载体pUR278(Ruther等，EMBOJ.2:1791(1983))，其中抗体编码序列可单独连接到载体内，与lacZ编码区位于同一读框内，从而产生融合蛋白；pIN载体(Inouye和Inouye，NucleicAcidsRes.13:3101-3109(1985)；VanHeeke和Schuster，J.Biol.Chem.，24:5503-5509(1989))；等等。也可采用pGEX载体表达外来多肽作为有谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的融合蛋白。通常，这类融合蛋白可溶，并可通过吸附和结合于基质谷胱甘肽琼脂糖珠然后在游离谷胱甘肽存在下洗脱而从裂解细胞中容易地纯化。pGEX载体设计成包含凝血酶或因子Xa蛋白酶切割位点，从而能从GST部分释放克隆的靶基因产物。除原核生物外，还可使用真核微生物。酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)或常见的面包酵母是最常使用的真核微生物，尽管许多其它菌株市售可得，例如巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)。为了在酵母(Saccharomyces)中表达，常常使用质粒YRp7，例如(Stinchcomb等，Nature282:39(1979)；Kingsman等，Gene7:141(1979)；Tschemper等，Gene10:157(1980))。这种质粒已经含有TRP1基因，其为缺乏在色氨酸中生长能力的酵母突变菌株如ATCC编号44076或PEP4-1(Jones，Genetics85:12(1977))提供选择标记物。然后，酵母宿主细胞基因组特征性trp1损伤的存在提供了用于通过在无色氨酸环境下生长来检测转化的有效环境。在昆虫系统中，苜蓿银纹夜蛾(Autographacalifornica)核多面体病病毒(AcNPV)通常用作表达外来基因的载体。该病毒在草地贪夜蛾(Spodopterafrugiperda)细胞中生长。可将抗体编码序列单独克隆到病毒的非必需区(如多角体蛋白基因)中，并置于AcNPV启动子(如多角体蛋白启动子)的控制下。本发明抗体分子一旦重组表达后，可通过本领域已知的任何免疫球蛋白分子纯化方法进行纯化，例如，通过色谱(如离子交换色谱，亲和性色谱，特别是在蛋白A之后对特定抗原的亲和性色谱，以及大小筛分柱色谱)、离心、差异溶解度或任何其它蛋白质纯化标准技术。或者，提高本发明抗体亲和性的方法公开于美国专利申请公开号20020123057A1。VII.使用治疗性抗CXCL13抗体的治疗方法滤泡型树突细胞(FDC)和巨噬细胞表达淋巴趋化因子CXCL13。通过在各种免疫细胞(如B细胞、滤泡型辅助T细胞、和近期活化T细胞)中发现的其受体CXCR5，CXCL13诱导了胞内改变，所述改变对维持免疫系统内稳态、淋巴器官发生、白细胞运输和趋化迁移以及次级淋巴组织(如生发中心)的发育是必需的。CXCL13和其受体CXCR5的过量表达参与了各种自身免疫疾病(如多发性硬化(参见例如Corcione等,PNAS101(30):11064–11069(2004);Serafini等,BrainPathol.14:164-174(2004);Magliozzi等,Brain130:1089-1104(2007))、关节炎(如类风湿性关节炎(参见例如Rioja等,Arthritis&Rheumatism58(8):2257–2267(2008);Shi等,J.Immuno.166:650-655(2001);Schmutz等,ArthritisRestearchandTherapy7:R217-R229(2005);等,J.LeukocyteBio.69:331-339(2001))、慢性胃炎(参见例如等;Mazzucchelli等,Brain130:1089-1104(2007))、胃淋巴瘤(参见例如同上;Nobutani等,FEMSImmunolMedMicrobiol60:156-164(2010))、移植排斥(参见如Steinmetz等,KidneyInternational67:1616-1621(2005))、干燥综合征(SS)(参见如Barone等,J.Immuno.180:5130-5140(2008);等)、系统性红斑狼疮(SLE)(参见如Steinmetz等,Lee等,J.Rheum.37(1):45-52(2010);Schiffer等,J.Immun.171:489-497(2003))、丙型肝炎病毒感染中的活性混合冷球蛋白血症(MC)血管炎(参见如Sansonno等,Blood112(5):1620-1627(2008))、幼年型皮肌炎(参见如dePadilla等,Arthritis&Rheumatism60(4):1160–1172(2009))、和重症肌无力(参见如Matsumoto等,J.Immuno.176:5100-5107(2006);Meraouna等,Blood108(2):432-440(2006);Saito等,J.Neuroimmunol170:172-178(2005))和某些癌症(如伯基特淋巴瘤(参见如等,Blood84:830-840(1994);等,Cell87:1037-1047(1996))、非霍奇金淋巴瘤(参见如Trentin等,Ann.Rev.Immunol.6:251-81(1988);Gong等,J.Immunol.174:817-826(2005);Hamaguchi等,J.Immunol.174:4389-4399(2005))、癌(如结肠和胰腺)(参见如Günther等,Int.J.Cancer116:726–733(2005);Meijer等,CancerRes.66:9576-9582(2006))、乳腺癌(参见如Panse等,BritishJournalofCancer99:930–938(2008))、慢性淋巴细胞白血病(CLL)(参见如Bürkle等,Blood110:3316-3325(2007))、和前列腺癌(参见如Singh等,CancerLetters283(1):29-35(2009))。可以期望本发明抑制CXCL13活性的方法对上述疾病有治疗作用。本发明的某些方法涉及使用抗CXCL13结合分子如抗体治疗患者，所述抗体包括其抗原结合片段、变体和衍生物，所述患者有与CXCL13表达细胞如CXCL13过量表达细胞相关的疾病。“表达CXCL13的细胞”指表达CXCL13抗原的正常和恶性细胞。本领域熟知检测细胞内CXCL13表达的方法，包括但不限于：PCR技术、免疫组化、流式细胞术、Western印迹、ELISA等。虽然下述讨论涉及用本发明抗CXCL13抗体的多种疾病和失调的诊断方法和治疗，但本文所述方法也可应用于保持本发明抗CXCL13抗体的所需特性，例如能够特异性结合CXCL13，如人、灵长动物、小鼠或者人和小鼠的CXCL13，并具有CXCL13中和活性的抗CXCL13抗体的抗原结合片段、变体和衍生物。在一个实施方式中，治疗包括将本发明抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段应用于或给予患者，或将抗CXCL13结合分子应用于或给予由患者分离的组织或细胞系，其中所述患者有疾病、疾病症状或疾病倾向。在另一实施方式中，治疗还意在包括将含抗CXCL13结合分子如本发明抗体或其抗原结合片段的药物组合物应用于或给予患者，或将包含抗CXCL13结合分子的药物组合物应用于或给予由患者分离的组织或细胞系，其中所述患者有疾病、疾病症状或疾病倾向。本发明的抗CXCL13结合分子，如抗体或其结合片段可用于治疗各种恶性和非恶性肿瘤。“抗肿瘤活性”指表达CXCL13的恶性细胞增殖或累积速率降低，因此已有肿瘤或在治疗期间出现的肿瘤的生长速率降低，和/或已有的赘生性(肿瘤)细胞或新形成的赘生性细胞被破坏，因而治疗期间肿瘤总体尺寸缩小。例如，用至少一种抗CXCL13抗体进行治疗引起生理响应，这对人体中CXCL13表达细胞相关性疾病状态的治疗有益。在一个实施方式中，本发明涉及用作药物，具体是用于治疗或预防癌症或用于癌前病症或病损的本发明所述抗CXCL13结合分子，如抗体或其结合片段。在某些实施方式中，用抗CXCL13结合分子，如本发明抗体或其结合片段如MAb5261治疗过度表达CXCL13的癌症。在某些实施方式中，用本发明的抗CXCL13结合分子，如抗体或其结合片段治疗表达或过量表达CXCL13的白血病、淋巴瘤(如MALT淋巴瘤)、结肠癌、胰腺癌、胃癌、食道癌、乳腺癌或前列腺癌。在一个实施方式中，用本发明的抗CXCL13结合分子，如抗体或其结合片段用于治疗癌症，如结肠或前列腺癌。在一个实施方式中，本发明的抗CXCL13结合分子，如抗体或其结合片段用于治疗表达或过量表达CXCR5的癌症。能使用动物模型显示抗CXCL13结合分子如抗体或其结合片段对治疗或预防癌症的有效性。例如本发明抗CXCL13结合分子如抗体或其结合片段对治疗或预防前列腺癌的有效性能使用前列腺癌动物模型显示，所述动物模型例如用PC3-luc人前列腺癌细胞注射并且用本发明抗CXCL13结合分子治疗的小鼠。在另一个示例中，本发明抗CXCL13结合分子如抗体或其结合片段对治疗或预防结肠癌的有效性能使用结肠癌动物模型显示，所述动物模型例如用CT26结肠癌细胞注射并且用本发明抗CXCL13结合分子治疗的小鼠。在另一个示例中，本发明抗CXCL13结合分子如抗体或其结合片段对治疗或预防MALT淋巴瘤的有效性能使用胃MALT淋巴瘤动物模型显示，所述动物模型例如用螺杆菌感染(参见Nobutani等(2010))并且用本发明抗CXCL13结合分子治疗的小鼠。所述Nobutani等模型也可以用于评价本发明抗CXCL13结合分子如抗体或其结合片段对降低螺杆菌感染组织的胃淋巴滤泡的有效性。按照本发明方法，对于恶性人细胞，利用至少一种抗CXCL13结合分子如本文另述的抗体或其抗原结合片段提高阳性治疗响应。癌症治疗的“阳性治疗响应”指与这些结合分子如抗体或其片段的抗肿瘤活性有关的疾病改善，和/或与疾病相关症状的改善。也就是说，可观察到抗增殖作用、防止肿瘤进一步扩散、肿瘤尺寸缩小、肿瘤血管减少、癌细胞数量减少和/或一种或多种疾病相关症状减轻。因此，例如，疾病改善的特征可以是完全响应。“完全响应”指归一化任何之前异常的射线照片研究、骨髓和脑脊液(CSF)时，不存在临床上可检测的疾病。这种响应必须在本发明方法治疗后，持续至少一个月。或者，疾病改善可分类为部分响应。“部分响应”指不存在新病损的情况下，所有可检测的肿瘤负荷(即，对象中存在的肿瘤细胞数量)降低至少约50%，并持续至少一个月。这种响应仅适用于可检测的肿瘤。可采用筛选技术如生物发光成像，例如荧光素酶成像、骨扫描成像和包括骨髓抽吸(BMA)在内的肿瘤生物活检采样，通过肿瘤形态改变(即总体肿瘤负荷、肿瘤细胞计数等)评估肿瘤响应。除这些阳性治疗响应外，接收抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段治疗的对象可产生疾病相关症状改善的有益效果。例如，所述对象可出现所谓的B症状，如夜汗、发热、体重降低和/或荨麻疹减轻。抗CXCL13结合分子，如本文所述抗体或其抗原结合片段也可用于治疗或防止与CXCL13表达细胞有关的炎性疾病和免疫系统缺陷或失调。炎性疾病的特征是炎症和组织破坏，或其组合。“抗炎活性”指减轻或预防炎症。“炎性疾病”包括任何炎症免疫介导的过程，其中免疫应答的启动事件或靶标包括非自身抗原，包括例如，同种抗原、异种抗原、病毒抗原、细菌抗原、未知抗原或变应原。在一个实施方式中，所述炎性疾病是与细菌感染有关的疾病，例如螺杆菌感染如幽门螺旋杆菌（H.pylori）、海尔曼螺杆菌（H.heilmannii）、豹螺杆菌（H.acinonychis）、鹅螺杆菌（H.anseris）、金仓鼠螺杆菌（H.aurati）、棒状螺杆菌（H.baculiformis）、胆型螺旋杆菌(H.bilis）、H.bizzozeronii、白雁螺杆菌(H.brantae）、加拿大螺杆菌(H.candadensis）、犬螺杆菌(H.canis）、胆囊螺杆菌(H.cholecystus）、辛氏螺杆菌（H.cinaedi）、犬胃螺杆菌（H.cynogastricus）、马螺杆菌(H.equorum）、猫螺杆菌（H.felis）、芬奈尔螺杆菌（H.fenelliae）、H.ganmani、肝螺杆菌（H.hepaticus）、仓鼠螺杆菌(H.mesocricetorum）、旱獭螺杆菌（H.marmotae）、小家鼠螺杆菌（H.muridarum）、雪貂螺杆菌（H.mustelae）、巴梅河螺杆菌（H.pametensis）、雏螺杆菌（H.pullorum）、羊螺杆菌（H.rappini）、啮齿类螺杆菌（H.rodentium）、所罗门螺杆菌（H.salomonis）、猪螺杆菌（H.suis）、H.trogontum、盲肠螺杆菌（H.typhlonius）和H.winghamensis感染。在某些实施方式中，所述螺杆菌感染是幽门螺杆菌或海尔曼螺杆菌感染。在其他实施方式中，所述螺杆菌相关炎性疾病是MALT淋巴瘤、胃癌(如食道或胃癌)、胃或十二指肠溃疡、胃炎(胃内壁炎症)、或胃损伤(参见例如Chen等,JClinPathol55(2):133-7(2002);Genta等,HumPathol24(6):577-83(1993);Okiyama等,PatholInt55(7):398-404(2005))。在一个实施方式中，炎性疾病是外周或中枢神经系统的炎性疾病。另外，出于本发明目的，术语“炎性疾病”包括但不限于“自身免疫病”。本文所用的术语“自身免疫病”通常理解为包括涉及“自身抗原”的炎症免疫介导的过程。在自身免疫病中，自身抗原引发宿主免疫应答。在一个实施方式中，利用本发明抗CXCL13结合分子，如抗体或抗原结合片段治疗多发性硬化(MS)。MS也称为弥散性硬化症或弥散性脑脊髓炎，是免疫系统攻击中枢神经系统从而导致脱髓鞘的自身免疫病症。“多发性硬化”这个名称指神经系统中形成的疤痕(硬化，也称为斑块或病损)。MS病损通常包括接近小脑脑室、脑干、基底神经节和脊髓以及视神经的白质区域。MS导致少突胶质细胞破坏，该细胞负责产生和维持髓鞘。MS导致髓磷脂变薄或完全消失，随着疾病进展，还导致轴突横断。神经系统症状可随着MS改变，该疾病常常发展到身体和认知障碍。MS有多种形式，新症状独立发作(复发形式)或随时间缓慢累积(渐进形式)。在发作之间，症状可能完全消失，但常常产生永久的神经损伤，特别是随着疾病进展。实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)是广泛接受的多发性硬化的动物模型。EAE是CNS的脱髓鞘性疾病，逐步造成主要靶向脊髓炎症的上行性麻痹程度增加。所述疾病能采用急性、慢性或复发缓解过程，所述过程依赖于诱导方法和使用的动物类型。Bagaeva等显示了在有复发缓解EAE的小鼠发炎脑膜中形成包含B细胞和CXCL13表达树突细胞的滤泡，CXCL13表达水平在整个疾病过程中稳定上升。CXCL13缺陷型小鼠经历了复发率下降的轻微疾病，并且用抗CXCL13MAb阻断CXCL13引起B10.PL小鼠中被动诱导EAE的疾病衰减。Bagaeva等,J.Immuno.176:7676-7685(2006)。使用本发明抗CXCL13单克隆抗体或其抗原结合片段如MAb5261来中和CXCL13，可以通过数种不同机制用于降低MS的严重性，所述机制如阻断CXCL13与其受体的相互作用，造成如干扰B和滤泡型B辅助T细胞迁移到发炎组织和生发中心形成。在一个实施方式中，利用本发明抗CXCL13结合分子，如抗体或抗原结合片段治疗或预防系统性红斑狼疮(SLE或狼疮)。SLE是涉及多种器官的自身免疫疾病，其表性为异位生发中心的自发形成和针对大量核抗原的自动抗体生成。SLE最经常影响所述心脏、关节、皮肤、肺、血管、肝、肾和神经系统。活化的T细胞、B细胞和其促迁移趋化因子CXCL13在多种自身免疫疾病（包含SLE）的发炎异常位点中所见有序淋巴组织形成中起重要作用。狼疮-俯卧新西兰黑色品系（NewZealandBlack）X新西兰白色品系（NewZealandWhite）F1(NZB/NZWF1)小鼠自发发展出高效价抗dsDNA抗体和肾小球中免疫复合物形成造成的严重增殖型肾小球性肾炎。这些小鼠中狼疮样症状的发展伴随着肾和胸腺中树突细胞的CXCL13表达增加(Ishikawa等,J.Exp.Med.193(12):1393-1402(2001);Schiffer等,J.Immun.171:489-497(2003))。使用本发明抗CXCL13单克隆抗体或其抗原结合片段如MAb5261来中和CXCL13，可以通过数种不同机制用于降低SLE的严重性，所述机制如阻断CXCL13与其受体的相互作用，造成如干扰B和滤泡型B辅助T细胞迁移到发炎组织和生发中心形成。在一个实施方式中，利用本发明抗CXCL13结合分子，如抗体或抗原结合片段治疗或预防关节炎如类风湿性关节炎。类风湿性关节炎(RA)是影响美国2-4%人的最常见自身免疫疾病之一。其是慢性、累进性、系统炎性疾病，表征为滑膜关节融合、软骨侵蚀和骨破坏。在RA中，T细胞、B细胞、巨噬细胞和树突细胞(DC)在形成血管翳的滑膜层(溶蚀到软骨和骨的滑膜侵入性区域)中聚集。另外，所述滑膜损伤中的T和B细胞组织成淋巴生发中心样结构，所述结构支持自体抗体(类风湿因子)生成，并且因此直接对疾病发病机制起作用(Takemura等,J.Immuno.167:1072-1080(2001);Shi等,J.ofImmuno.166:650-655(2001))。滑膜成纤维细胞生成的淋巴趋化因子CXCL13、选定内皮细胞、滑膜抗原致敏T辅助细胞和FDC(Takemura等(2001);Shi等(2001);Manzo等,Arthritis&Rheumatism58(11):3377-3387(2008))，通过指导CXCR5阳性淋巴细胞(主要是B细胞和滤泡型T辅助细胞)迁移进入所述发炎滑膜而在所述滑膜组织的生发中心形成中起重要作用。临床上，RA患者中CXCL13的血浆水平与疾病严重性相关，因为相较对照和有静息疾病的患者，在有活性RA患者的血浆中发现了显著更高水平的CXCL13(Rioja等,Arthritis&Rheumatism58(8):2257-2267(2008))。另外，CXCR5受体在RA患者滑膜中上调，和在浸润B和T细胞以及巨噬细胞和内皮细胞中存在(Schmutz等,ArthritisResearchTherapy7:R217-R229(2005))。小鼠和大鼠中胶原性关节炎(CIA)是完善的人类风湿性关节炎(RA)模型。所述疾病通常由肌肉注射完全弗氏佐剂(CFA)中乳化的牛II型胶原诱导，并且特性为生成小鼠胶原抗体，和随后爪中逐步发展关节炎。Stannard等显示了用大鼠抗鼠CXCL13抗体中和CXCL13引起关节炎DBA/1小鼠中关节炎评分和关节破坏严重性的显著降低。Stannard等,"NeutralizationofCXCL13impactsB-celltraffickingandreducesseverityofestablishedexperimentalarthritis（中和CXCL13影响B细胞运输和降低已建立实验性关节炎的严重性）"美国风湿病学会2008年科学年会(2008)。使用本发明抗CXCL13单克隆抗体或其抗原结合片段如MAb5261来中和CXCL13，可以通过数种不同机制用于降低关节炎如类风湿性关节炎的严重性，所述机制如阻断CXCL13与其受体的相互作用，造成如干扰B和滤泡型B辅助T细胞迁移到发炎组织和生发中心形成。另外，本发明抗CXCL13单克隆抗体或其抗原结合片段如MAb5261，可以用于降低如过量表达RANKL的对象中的RANKL表达和骨质损失。按照本发明方法，利用至少一种抗CXCL13结合分子，如本文另述的抗体或其抗原结合片段提高对自身免疫病症和/或炎性疾病的治疗或预防的阳性治疗响应。提及自身免疫病和/或炎性疾病时，“阳性治疗响应”指与这些抗体的抗炎活性、抗血管新生活性、抗凋亡活性等相关的疾病改善，和/或疾病相关症状的改善。也就是说，可观察到抗增殖作用、防止CXCL13表达细胞的进一步增殖、减轻炎症反应，包括但不限于：炎性细胞因子、粘着分子、蛋白酶、免疫球蛋白(在携带CXCL13的细胞是B细胞的情况下)、其组合等的分泌减少，抗炎蛋白产量增加，自身反应性细胞数量减少，免疫耐受提高，自身反应性细胞存活被抑制，凋亡减少，内皮细胞迁移减少，自发性单核细胞迁移增加，通过刺激CXCL13表达细胞介导的一种或多种症状减轻和/或降低。这种阳性治疗响应不仅限于给药途径，可包括给予供体、供体组织(如器官灌注)、宿主、其任何组合等。可利用筛选技术评估临床响应，如磁共振成象(MRI)扫描、x-射线成像、计算机断层成像(CT)扫描、流式细胞术或荧光活化细胞分选仪(FACS)分析、组织学分析、大体病理学分析和血液化学分析，包括但不限于可通过ELISA、RIA、色谱等检测到的改变。除这些阳性治疗响应外，接受抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段治疗的对象可产生疾病相关症状改善的有益效果。本发明的另一实施方式是使用抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段诊断性监测组织中的蛋白质水平作为临床测试步骤的一部分，例如用于确定给定治疗方案的功效。例如，将抗体与可检测物质偶联可利于探测。可检测物质的例子包括各种酶、辅基、荧光材料、发光材料、生物发光材料和放射性材料。合适酶的例子包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶或乙酰胆碱酯酶；合适的辅基复合物的例子包括链霉亲和素/生物素和亲和素/生物素；合适荧光材料的例子包括：伞形花内酯、荧光素、荧光素异硫氰酸酯、罗丹明、二氯三嗪胺荧光素、丹磺酰氯或藻红蛋白；发光材料的例子包括鲁米诺；生物发光材料的例子包括：萤光素酶、萤光素和发光蛋白；合适的放射性材料的例子包括125I、131I、35S或3H。VIII.药物组合物和给药方法本领域技术人员熟知或不难确定制备和给予本发明抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的方法。抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的给药途径可以是(例如)，口服、胃肠道外、吸入或外用。本文所用的术语“胃肠道外”包括例如，静脉内、动脉内、腹膜内、肌肉内、皮下、直肠或阴道给药。虽然所有这些给药形式均明确认为在本发明范围内，但给药形式的例子是注射液，特别是用于静脉内或动脉内注射或滴注。通常，合适的注射用药物组合物可包含缓冲剂(如乙酸盐、磷酸盐或柠檬酸盐缓冲剂)、表面活性剂(如聚山梨酯)，以及任选的稳定剂(如人白蛋白)等。然而，在与本文所教授内容相符的其它方法中，本发明抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可直接递送到不良细胞群的位点，从而提高患病组织与治疗剂的接触。如本文所用，本发明抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可以药学有效量给予以在体内治疗CXCL13表达细胞介导的疾病，如某些类型的癌症、自身免疫病、炎性疾病，包括中枢神经系统(CNS)和周围神经系统(PNS)炎性疾病。在这方面，应理解，将配制本发明公开的结合分子以利于给药并提高活性物质的稳定性。在某些实施方式中，本发明药物组合物包含药学上可接受的无毒无菌运载体，如生理盐水、无毒缓冲液、防腐剂等。出于本申请目的，偶联或未偶联的抗CXCL13结合分子如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的药学有效量应认为指足以实现有效结合靶标和足以实现某一益处例如改善疾病或失调症状或者检测物质或细胞的量。本发明所用的药物组合物包含药学上可接受的运载体，包括例如，离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂，血清蛋白质如人血清白蛋白，缓冲物质如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素基物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。胃肠道外给药制剂包括无菌的水性或非水性溶液、混悬液和乳液。非水性溶剂的例子是丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油和可注射有机酯如油酸乙酯。水性运载体包括例如，水、醇/水溶液、乳液或悬液，包括盐水和缓冲介质。在本发明中，药学上可接受的运载体包括但不限于：0.01-0.1M例如0.05M的磷酸盐缓冲液或0.8%盐水。其它常见的胃肠道外载体包括磷酸钠溶液、林格右旋糖、右旋糖和氯化钠、乳酸林格溶液或固定油。静脉内载剂包括液体和营养补充剂、电解质补充剂，例如基于林格右旋糖的那些物质等。也可包含防腐剂和其它添加剂，例如，抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂和惰性气体等。更具体地，适于注射应用的药物组合物包括无菌水溶液(水溶性时)或分散液，以及用于临时制备无菌注射液或分散液的无菌粉末。在这种情况下，该组合物必须无菌，并应该是达到存在注射容易性(easysyringability)程度的流体。它应该在制造和储存条件下稳定，并且优选抵抗微生物如细菌和真菌的污染作用而保存。运载体可以是包含如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)及其合适混合物的溶剂或分散介质。可通过使用涂覆材料如卵磷脂、分散液情况下通过保持所需粒度以及使用表面活性剂，来维持合适的流动性。用于本文所述治疗方法的合适制剂可参见Remington'sPharmaceuticalSciences(《雷明顿药物科学》)(马克出版公司(MackPublishingCo.))第16版(1980)。也可通过各种抗菌剂和抗真菌剂，如对羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞等实现防止微生物的作用。在某些情况下，组合物中优选包含等张剂，例如糖、多元醇如甘露醇、山梨醇或氯化钠。通过组合物中包含延迟吸收的试剂如单硬脂酸铝和明胶能延长可注射组合物的吸收。在任何情况下，制备无菌注射溶液可通过将所需量的活性化合物(如抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物，本身或与其它活性剂联合)掺入含有本文所列一种成分或多种成分组合的合适溶剂，然后如需要进行过滤除菌。通常，将活性活化物掺入含有碱性分散介质和上述其它所需成分的无菌载体中制备分散液。在制备无菌注射液制备所需的无菌粉末时，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥，由之前无菌过滤的溶液得到活性组分和任何其它所需组分的粉末。注射制剂在无菌条件下按照本领域已知方法加工，装入容器如安瓿、袋、瓶、注射器或小管中，并密封。另外，可包装该制剂，并以药盒形式出售，如美国专利申请系列号09/259,337所述。这类制品优选具有标签或药品说明书，表明相关组合物可用于治疗患有或倾向于患有疾病或失调的对象。胃肠道外制剂可以是单次推注剂量，输注或负荷推注剂量，随后是维持剂量。这些组合物可以特定的固定间隔或可变间隔给予，例如每天一次，或“按需”给予。本发明所用的某些药物组合物可以可接受的剂型口服给予，包括例如，胶囊、片剂、水性悬液或溶液。某些药物组合物也可通过鼻喷雾或吸入方式给予。这类组合物可制备成盐水溶液，其中采用苄醇或其它合适的防腐剂、吸收促进剂以提高生物利用度，和/或采用其它常规的增溶剂或分散剂。可与载体材料组合生成单一剂型的抗CXCL13结合分子，如抗体或其片段、变体或衍生物的量可以根据治疗宿主以及具体的给药模式而变化。该组合物可作为单一剂量、多个剂量或在确定时间段通过输注给予。也可调整给药方案，以提供最优所需响应(例如，治疗或预防性响应)。在本发明范围内，本发明抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物可按照上述治疗方法给予人或其它动物，其给予量足以产生疗效。本发明抗CXCL13抗体，或其抗原结合片段、变体或衍生物可以常规剂型给予所述人或其它动物，该剂型根据已知技术将本发明抗体如MAb5261与常规的药学上可接受运载体或稀释剂混合来制备。本领域技术人员应认识到，药学上可接受运载体或稀释剂的形式和特点由混合的活性成分含量、给药途径和其它熟知变量决定。本领域技术人员还应理解，包含一种或多种抗CXCL13结合分子，如本发明抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的混合物可证明为特别有效。“治疗有效剂量或治疗有效量”或者“有效量”指给予时，在患有待治疗疾病患者的治疗方面带来阳性治疗响应的抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段的用量。用于治疗CXCL13表达细胞所介导疾病的本发明组合物的治疗有效剂量取决于多种不同因素而变化，所述疾病例如某些类型的癌症，如白血病、淋巴瘤(如MALT淋巴瘤)、结肠癌、乳腺癌、食道癌、胃癌和前列腺癌；自身免疫病，如狼疮、关节炎、多发性硬化、和炎性疾病，包括中枢神经系统(CNS)和周围神经系统(PNS)炎性疾病，所述因素包括给药方式、目标部位、患者生理状态、患者是人或是动物、给予的其它药物和该治疗是预防性治疗或是治疗性治疗。通常，患者是人，但也可治疗非人哺乳动物，包括转基因哺乳动物。可采用本领域技术人员已知的常规方法确定治疗剂量，以优化安全性和效能。鉴于本发明的公开内容，本领域普通技术人员无需过多实验即可确定至少一种抗CXCL13结合分子如抗体或其结合片段的给予量。影响给药方式以及至少一种抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物各自用量的因素包括但不限于：接受治疗的个体的疾病严重程度、病史、年龄、身高、重量、健康和身体状况。类似地，抗CXCL13结合分子，如抗体或其片段、变体或衍生物的给予量取决于给药方式、对象是否接受单一剂量或多剂量的此种药剂。本发明还提供抗CXCL13结合分子，如抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物在制造治疗自身免疫病和/或炎性疾病的药物中的应用，所述疾病包括例如MS、关节炎、狼疮、胃炎、溃疡或癌症。IX.诊断本发明还提供可用于诊断CXCL13表达细胞介导的疾病的诊断方法，所述疾病例如某些类型的癌症和炎性疾病，包含自身免疫病，所述方法包括测定来自个体的组织或其它细胞或体液中CXCL13蛋白或转录物的表达水平，并将所测表达水平与正常组织或体液中的标准CXCL13表达水平作比较，从而相较标准的表达水平上升表明存在疾病。在某些实施方式中，本发明的抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体和衍生物如MAbMAb5261、MAb5378、MAb5080、MAb1476、3D2或3C9，用于诊断癌症、多发性硬化、关节炎或狼疮。通过本领域技术人员已知的经典免疫组织学方法，可利用本发明抗CXCL13抗体及其抗原结合片段、变体和衍生物测定生物样品中的CXCL13蛋白水平(参见例如Jalkanen等，J.Cell.Biol.101:976-985(1985)；Jalkanen等，J.CellBiol.105:3087-3096(1987))。用于检测CXCL13蛋白表达的其它基于抗体的方法包括免疫实验，如酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫沉淀或蛋白质印迹。合适的实验在本文中另有详述。“测定CXCL13多肽表达水平”指对第一生物样品中的CXCL13多肽水平以直接(例如，通过测定或估计绝对蛋白质水平)或相对(例如，通过与第二生物样品中的疾病相关多肽水平作比较)方式进行定性或定量测定或估计。在一个实施方式中，测定或估计第一生物样品中的CXCL13多肽表达水平，并与标准CXCL13多肽水平作比较，该标准取自未患该疾病的个体所得的第二生物样品或通过未患该疾病的个体群的平均水平确定。本领域技术人员应理解，一旦“标准”CXCL13多肽水平已知，可以重复地用作比较标准。“生物样品”指由可能表达CXCL13的个体、细胞系、组织培养物或其它细胞来源获得的任何生物样品。从哺乳动物获得组织活检样品和体液的方法为本领域熟知。X．免疫实验可通过本领域的任何已知方法测定本发明抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的免疫特异性结合。可使用的免疫实验包括但不限于，使用如下技术的竞争和非竞争实验系统，如蛋白质印迹、放射性免疫实验、ELISA(酶联免疫吸附实验)、“夹心”免疫实验、免疫沉淀实验、沉淀素反应、凝胶扩散沉淀素反应、免疫扩散实验、凝集实验、补体固定实验、免疫放射测定实验、荧光免疫实验、蛋白A免疫实验等等。这类实验是本领域常规且熟知的(参见例如，Ausubel等编，(1994)，CurrentProtocolsinMolecularBiology(《新编分子生物学实验指南》)，纽约约翰韦利父子公司(JohnWiley&Sons，Inc.,NY)，第1卷，通过引用全文纳入本文)。可通过竞争性结合实验测定抗体与抗原的结合亲和性和抗体-抗原相互作用的解离速率。竞争性结合实验的一个例子是放射性免疫实验，包括在含量递增的未标记抗原存在下用感兴趣抗体培育标记抗原(如3H或125I)和检测结合于标记抗原的抗体。可通过Scatchard作图分析的数据确定感兴趣的抗体与特定抗原的亲和性和结合解离速率。也可利用放射性免疫实验确定与第二抗体的竞争。在这种情况下，在含量递增的未标记第二抗体存在下，将抗原与偶联于标记化合物(如3H或125I)的感兴趣抗体一起培育。可以按照熟知方法确定给定批次的抗CXCL13抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物的结合活性。本领域技术人员能够利用常规实验确定每次测定的操作和优化实验条件。有各种方法可用于测定抗体-抗原相互作用的亲和性，但测定速率常数的相对较少。大部分方法依赖于标记抗体或抗原，其不可避免地使常规测定复杂化并在测定量中引入不确定性。与测定抗体-抗原相互作用亲和性的常规方法相比，用进行的表面等离振子共振(SPR)提供若干优点：(i)无需标记抗体或抗原；(ii)抗体不需要事先纯化，细胞培养物上清液可直接使用；(iii)实时测定，能够快速半定量地比较不同单克隆抗体相互作用，能够且足以用于许多评价目的；(iv)生物特异性表面可再生，从而能容易地在相同条件下比较一系列不同单克隆抗体；(v)分析步骤完全自动化，大量测定可以在没有操作人员干预的情况下进行。BIAapplicationsHandbook(《BIA应用手册》)，AB版(1998再版)，编号BR-1001-86；BIAtechnologyHandbook(《BIA技术手册》)，AB版(1998再版)，编号BR-1001-84。基于SPR的结合研究需要将结合对的一个成员固定到传感器表面上。固定的结合伙伴称为配体。溶液中的结合伙伴称为分析物。在某些情况下，配体通过结合被称为捕获分子的另一固定分子而间接地连接于表面。SPR响应反映出随着分析物结合或解离，检测器表面上质量浓度的改变。根据SPR，实时测定直接监测正在发生的相互作用。该技术非常适合测定动力学参数。比较亲和性排序简单易行，动力学和亲和性常数都可获自传感图数据。以独立脉冲在配体表面上注射分析物时，所得的传感器图可分成三个基本相：(i)样品注射期间分析物与配体的结合；(ii)样品注射期间平衡或稳态，其中分析物结合速率通过从复合物解离达到平衡；(iii)缓冲液流动期间分析物与表面解离。结合和解离相提供有关分析物-配体相互作用的动力学信息(ka和kd是复合物形成和解离的速率，kd/ka=KD)。平衡相提供有关分析物-配体相互作用亲和性(KD)的信息。BIA评估软件提供综合的曲线拟合工具，其采用数值积分和全局拟合算法。通过对数据进行适当的分析，可由简单研究获得相互作用的分离速率和亲和性常数。可通过此种技术测定的亲和性范围非常宽泛，从mM级到pM级。表位特异性是单克隆抗体的重要特征。与采用放射性免疫实验、ELISA或其它表面吸附方法的常规技术不同，用进行表位作图不需要标记或纯化的抗体，并允许用若干单克隆抗体的序列进行多位点特异性测试。此外，大量分析可自动进行。逐对结合实验测试两种MAb同时结合同一抗原的能力。针对单独表位的MAb将独立结合，而针对相同或紧密相关表位的MAb将互相干扰结合。采用的这些结合实验简单易行。例如，可使用捕获分子结合第一Mab，随后依次加入抗原和第二MAb。传感器图将揭示：(1)多少抗原结合第一Mab，(2)第二MAb结合表面连接抗原的程度，(3)如果第二MAb不结合，逆转逐对测试的顺序是否会改变结果。肽抑制是用于表位作图的另一项技术。抗原的一级序列已知时，这种方法可补充逐对抗体结合研究，并可将功能表位与结构特征相关联。测定肽或抗原片段对不同MAb与固定抗原结合的抑制作用。假定干扰给定MAb结合的肽与该MAb限定的表位在结构上相关。除非另有说明，本发明的实施将采用细胞生物学、细胞培养、分子生物学、转基因生物学、微生物学、重组DNA和免疫学的常规技术，它们均在本领域技术范围内。这些技术在文献中已有充分描述。参见例如，Sambrook等编(1989)MolecularCloningALaboratoryManual(《分子克隆：实验室手册》)(第2版；冷泉港实验室出版社(ColdSpringHarborLaboratoryPress))；Sambrook等编(1992)MolecularCloning:ALaboratoryManual(《分子克隆：实验室手册》，(纽约州的冷泉港实验室出版社(ColdSpringsHarborLaboratory，NY))；D.N.Glover编，(1985)DNACloning(《DNA克隆》)，第I和II卷；Gait编(1984)OligonucleotideSynthesis(《寡核苷酸合成》)；Mullis等，美国专利号4,683,195；Hames和Higgins编(1984)NucleicAcidHybridization(《核酸杂交》)；Hames和Higgins编(1984)TranscriptionAndTranslation(《转录和翻译》)；Freshney(1987)CultureOfAnimalCells(《动物细胞培养》)(ARL公司(AlanR.Liss，Inc.))；ImmobilizedCellsAndEnzymes(《固定的细胞和酶》)(IRL出版社(IRLPress))(1986)；Perbal(1984)APracticalGuideToMolecularCloning(《分子克隆实践指南》)；论文，MethodsInEnzymology(《酶学方法》)(纽约州的学术出版社公司(AcademicPress，Inc.))；Miller和Calos编(1987)GeneTransferVectorsForMammalianCells(《哺乳动物细胞的基因转移载体》)(冷泉港实验室出版社(ColdSpringHarborLaboratory))；Wu等编，MethodsInEnzymology(《酶学方法》)，第154和155卷；Mayer和Walker编(1987)ImmunochemicalMethodsInCellAndMolecularBiology(《细胞和分子生物学中的免疫化学方法》)(伦敦的学术出版社(AcademicPress，London))；Weir和Blackwell编(1986)HandbookOfExperimentalImmunology(《实验免疫学手册》)，第I-IV卷；ManipulatingtheMouseEmbryo(《小鼠胚胎操作》)，纽约州冷泉港的冷泉港实验室出版社，(1986)；和Ausubel等(1989)CurrentProtocolsinMolecularBiology(《新编分子生物学实验指南》)(马里兰州巴尔的摩的约翰韦利父子公司(JohnWiley&Sons，Baltimore，Md.))。抗体工程的一般原理可参见Borrebaeck编(1995)AntibodyEngineering（《抗体工程》)(第2版；牛津大学出版社(OxfordUniv.Press))。蛋白质工程的一般原理可参见Rickwood等编(1995)ProteinEngineering，APracticalApproach（《蛋白质工程，实践方法》)，(英国牛津的牛津大学出版社的IRL出版公司(IRLPressatOxfordUniv.Press，Oxford，Eng.))。抗体和抗体-半抗原结合的一般原理可参见：Nisonoff(1984)MolecularImmunology（《分子免疫学》)(第2版；马萨诸塞州桑德兰的辛奥尔联合公司(SinauerAssociates，Sunderland，Mass.))；和Steward(1984)Antibodies,TheirStructureandFunction（《抗体的结构和功能》)(Chapman和Hall，纽约州纽约市)。此外，本领域已知且没有具体描述的免疫学标准方法通常按照下述文献所述进行：CurrentProtocolsinImmunology（《新编免疫学实验指南》)，纽约州的约翰韦利父子公司(JohnWiley&Sons)；Stites等编(1994)，BasicandClinicalImmunology（《基础和临床免疫学》)(第8版；Appleton和Lange，康涅狄格州的诺沃克(Norwalk，Conn.))和Mishell和Shiigi(编)(1980)SelectedMethodsinCellularImmunology（《细胞免疫学的选用方法》)(纽约州的W.H.弗里曼公司(W.H．FreemanandCo.，NY))。列出免疫学一般原理的标准参考文献包括：CurrentProtocolsinImmunology（《新编免疫学实验指南》)，纽约州的约翰韦利父子公司(JohnWiley&Sons)；Klein(1982)J.，Immunology:TheScienceofSelf-NonselfDiscrimination（《免疫学：自身-非自身区分的科学》)(纽约州的约翰韦利父子公司)；Kennett等编(1980)MonoclonalAntibodies,Hybridoma:ANewDimensioninBiologicalAnalyses（《单克隆抗体，杂交瘤：生物学分析的新领域》)(纽约州普莱努公司(PlenumPress，NY))；Campbell(1984)"MonoclonalAntibodyTechnology"inLaboratoryTechniquesinBiochemistryandMolecularBiology"（《生化和分子生物学实验室技术》中的“单克隆抗体技术”)，Burden等编(阿姆斯特丹的埃尔斯威尔公司(Elsevere，Amsterdam))；Goldsby等编(2000)KubyImmunnology（《酷比免疫学》)(第4版；H.弗里曼公司(H.Freemand&Co.))；Roitt等(2001)Immunology(《免疫学》)(第6版；伦敦：莫斯比公司(Mosby))；Abbas等(2005)CellularandMolecularImmunology(《细胞和分子免疫学》)(第5版；埃尔斯威尔健康科学分公司(ElsevierHealthSciencesDivision))；Kontermann和Dubel(2001)AntibodyEngineering(《抗体工程》)(施普林格公司(SpringerVerlan))；Sambrook和Russell(2001)MolecularCloning:ALaboratoryManual(《分子克隆：实验室手册》)(冷泉港出版社(ColdSpringHarborPress))；Lewin(2003)GeneVIII(《基因VIII》)(普伦蒂斯霍尔出版社(PrenticeHall)2003)；Harlow和Lane(1988)Antibodies:ALaboratoryManual(《抗体：实验室手册》)(冷泉港出版社)；Dieffenbach和Dveksler(2003)PCRPrimer(《PCR引物》)(冷泉港出版社)。将上文中引用的所有参考文献以及其中引用的所有参考文献通过引用全文纳入本文。通过说明的方式、而非限制性方式提供以下实施例。实施例实施例1选择和定性对人CXCL13特异的小鼠抗体生成杂交瘤用钥孔血蓝素(KLH)偶联的人CXCL13免疫SwissWebster小鼠。三次免疫后，从有最高抗CXCL13效价的小鼠中收集脾，并且使用标准方法通过融合脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞生成杂交瘤。通过ELISA筛选结合人和小鼠CXCL13蛋白的杂交瘤克隆。使用约100nM人(派普罗泰克公司(Peprotech):#300-47)或小鼠(派普罗泰克公司:#250-24)CXCL13蛋白室温(RT)过夜涂层ELISA板在洗涤和封闭所述板后，加入标准抗CXCL13抗体溶液(R&D系统公司（R&DSystems）:大鼠抗小鼠MAb470和小鼠抗人MAb801)或杂交瘤上清液并且室温孵育1小时。洗涤所述板，并且加入第二抗体(用于杂交瘤上清液和MAb801的山羊抗小鼠IgG-HRP；用于MAb470的驴抗大鼠IgG-HRP)并且室温孵育1小时。洗涤所述板，并且避光等体积混合15分钟的四甲基联苯胺(TMB)底物试剂A和B(BD生物科学公司（BDBiosciences）:#555214)来显影，并在450/570波长读数。选择都是小鼠IgG1抗体的两个阳性杂交瘤克隆（标记为"3D2"和"3C9"）用于进一步定性。杂交瘤生成的小鼠抗人抗体3D2和3C9的特异性用ELISA(如上述)在包含以下的组上评估：重组趋化因子(派普罗泰克公司:小鼠和人CXCL13、人IL-8/CXCL8(#200-08)、人IP-10/CXCL10(#200-10)、人MIG/CXCL9(#300-26)、人SDF-1α/CXCL12(#300-28A)和短尾猴CXCL13)以及数种非特异性对照抗原(重组人C35、链霉亲和素(赛默公司（Thermo）:#21122)、牛血清白蛋白(BSA)(SC公司（SeraCore）:#AP-4510-01))、人血清白蛋白(HAS)(西格玛公司（Sigma）:#A8763)、胰岛素(吉布可公司（Gibco）:#12585-014)和血红蛋白(西格玛公司:#H7379)。市售抗体MAb470和MAb801(R&D系统公司)分别用作小鼠和人/短尾猴CXCL13结合的阳性对照。3D2和3C9显示特异性结合CXCL13。由于其结合重组人、小鼠和短尾猴CXCL13，3D2和3C9克隆都显示了多物种CXCL13特异性(图1A-1C)。图1显示了至少三个实验的两重测量结果。3D2抗体显示了强烈结合重组人、小鼠和猴CXCL13。特别地，相较3C9和MAb801，3D2更强烈结合重组小鼠CXCL13。在体外和体内进一步定性3D2(结果如下所示)。所述3D2抗体也用作生成嵌合和人源化CXCL13抗体(结果如下所示)的原型。相较3D2、MAb470和MAb801，3C9抗体显示最强烈结合重组人CXCL13。3C9和3D2用作生物试验显影（Bioassaydevelopment）的试剂(如下述表位竞争ELISA)。通过测量3D2亲和性通过测量3D2、3C9、MAb801和MAb470对重组人和小鼠CXCL13的亲和性。趋化因子固定于C1芯片上的乙酸盐缓冲液(pH=5)，其中人CXCL13是1μg/ml，小鼠CXCL13是0.3μg/ml和阴性对照SDF-1α是0.5μg/ml。3D2和3C9在HBS-EP缓冲液中两倍稀释，从100nM到0.78nM和从38nM到0.594nm。MAb801和MAB470两倍稀释，从50nM到0.78nM和从19nM到0.594nm。所述结果显示人和小鼠CXCL13上3D2的亲和性测量(nM)分别显著低于市售抗体MAb801和MAb470。结果示于表2。表2.亲和性测量11亲和性是针对重组人和小鼠CXCL13;NB=没有结合3D2表位制图。使用表位竞争ELISA进行表位制图研究。用100nM重组人CXCL13涂层板并用0.033nM生物素化3D2孵育，然后加入超过3D2量的不同浓度的竞争性未标记抗体。代表性实验的结果见图2。所述结果显示3C9与3D2竞争结合人CXCL13，但是MAb801不与3D2竞争结合人CXCL13。3D2与天然CXCL13结合。捕获表位竞争ELISA用于评估3D2与天然人和小鼠CXCL13的结合。这个试验中，天然人CXCL13获自从人IFN-γ刺激的THP-1细胞收集的上清液。用6.6nMMAb801捕获人CXCL13(1:4稀释THP1上清液或者0.097nM(1ng/ml)rhuCXCL13)，并用0.66nM生物素-3C9检测。对于合适的抗原呈递，通过MAb801在ELISA板上捕获来自组织培养上清液的所述趋化因子(或用作对照的重组人CXCL13)。所述板然后与生物素化3C9在各种量的未标记3D2存在下孵育。通过链霉亲和素-HRP检测与人CXCL13结合的竞争，所述竞争造成生物素化3C9结合的降低。由图3A明显可见，3D2强烈结合天然和重组人CXCL13，生成统计学相似的EC50值。来自TNF-α转基因小鼠的小鼠富CXCL13器官提取物用作天然小鼠CXCL13的来源。用33nMMAb470捕获小鼠CXCL13(1:40稀释TNF-Tg器官提取物或0.5nMrmuCXCL13)，并用3.3nM生物素-3D2检测。用MAb470在ELISA板上捕获来自所述提取物的趋化因子(和用作对照的重组小鼠CXCL13)。所述板然后与生物素化3D2在各种量的未标记3D2存在下孵育。然后通过链霉亲和素-HRP检测与小鼠CXCL13结合的竞争，所述竞争造成生物素化3C9结合的降低。由图3B可见，3D2能与自身生物素化形式（version）竞争，并且以相同效能结合天然和重组小鼠CXCL13。对图3A和3B而言，各数据点表示来自至少三个独立实验之一的两重测量的平均。使用四参数S型曲线拟合来拟合曲线(R2=0.99)。使用非配对t检验分析EC50值的差异，并且不显著（P>0.05）。这些结果显示所述小鼠抗人3D2抗体不仅结合所述针对其生成的重组趋化因子，而且结合天然人和小鼠趋化因子。实施例2抗CXCL13抗体抑制人B细胞迁移使用确立的模型评价对CXCL13功能如B细胞迁移的抑制，所述模型刺激人和小鼠系统中的B细胞迁移。趋向非CXCL13趋化因子、SDF-1α(也称作CXCL12)迁移用作对照以确证抗CXCL13抗体对抑制B细胞迁移的特异性。因此，就抑制人CXCL13诱导的迁移和缺失对SDF-1α-诱导迁移的影响来检测抗CXCL13抗体。抑制人B细胞趋向人CXCL13的迁移。测试3D2、3C9和MAb801对人CXCL13诱导的B细胞迁移的影响。两个克隆细胞系即人前B-697-hCXCR5和人前-B-697-hCXCR4，分别用于评价抗CXCL13抗体对重组人CXCL13依赖性迁移和重组人SDF-1α-依赖性迁移的影响。使用有8μm孔径和6.5mm直径的Transwell组织培养处理板(康宁克斯公司（CorningCostar）:3422)。人前B-697-hCXCR5细胞用于rhCXCL13诱导的迁移，和人前B-697-hCXCR4用于rhSDF-1诱导的迁移(阴性对照)。细胞以5x106/ml重新悬浮于趋化缓冲液((有l-谷氨酰胺、10mMHEPES、青霉素链霉素和0.5%BSA的RPMI1640)预热到RT)，并且回到37℃持续30分钟。稀释的趋化因子(溶于趋化缓冲液的97nm(1μg/ml)rhCXCL13或12.5nM(0.1μg/ml)rhSDF-1α)+/-抗体以590μl/孔加入到下室，并且RT预孵育30分钟。所述细胞以100μl(5x105)细胞/上室加入。37℃孵育平板过夜。移除插入物并且以60μl每孔加入阿拉马蓝，并且所述板在37℃孵育4小时。荧光在波长530nm和590nm测量。对下面各情况计算迁移指数：((迁移指数[同种型对照]–迁移指数[抗体])*100)/(迁移指数[同种型对照])。迁移抑制百分比针对log[nM抗体]使用GraphpadPrism5作图，以获得滴定曲线。所述对人CXCL13诱导迁移的结果示于图4A。所述结果表示为两个hCXCL13诱导迁移和三个hSDF-1诱导迁移独立实验的平均值+/-SEM。在3D2、3C9和MAb801中抑制人CXCL13诱导迁移程度的差异对应于人CXCL13亲和性的差异(见上表2)。因此，对趋化因子(3D2)亲和性最低的所述抗体似乎是人前B-hCXCR5趋化作用的最弱抑制剂，而有更高、几乎相同亲和性的抗体(MAb801和3C9)产生高百分比的细胞迁移抑制(图4A)。抗人CXCL13抗体(3D2、3C9或MAb801)无一对人前B-hCXCR4(5)细胞的人SDF-1α-介导的趋化作用产生任何影响(图4B)。然而，阳性对照山羊抗人SDF-1α抗体(MAb87A)强烈抑制SDF-1α依赖性迁移。小鼠脾细胞的小鼠CXCL13依赖性迁移的抑制。就抑制小鼠脾细胞(获自机械分离的脾)的重组小鼠CXCL13所介导趋化作用的能力测试抗CXCL13抗体。使用如上述与人CXCL13依赖性B细胞迁移试验基本相同的方案进行所述试验，有较小改动，包含使用485nM(5μg/ml)rmuCXCL13，使用孔径更小的transwell板(即用5μm孔径和直径6.5mm的Transwell组织培养处理板(康宁克斯公司:#3421))，和每孔使用更高量的细胞(106)。测试抗体对来自两个不同小鼠品系C57/BL6和SJL的脾细胞迁移的影响分别示于图5A和5B。MAb470用作阳性对照。包含大鼠和小鼠IgG以及人CXCL13特异性小鼠抗体3C9作为阴性对照。如图5A和5B所示，MAb470和3D2之间的抑制模式不同。特别地，3D2以可滴定方式抑制趋化作用，然而MAb470的效果仅在最高抗体浓度396nM时明显。生成P值>0.05的非配对t检验分析比较3D2对C57Black/6和SJL/J迁移影响的数据，指示了两个曲线之间没有显著区别。使用四参数S型曲线拟合来拟合曲线(R2=0.99)。3D2对SJL/J和C57Black/6脾细胞迁移影响的比较示于图5C。显示了两个小鼠品系之间3D2抑制概况没有显著区别。实施例3抗CXCL13抗体抑制CXCL13介导的人CXCR5胞吞作用使用人CXCL13所介导人CXCR5受体胞吞作用的确立模型通过抗CXCL13抗体评价CXCL13趋化因子功能的抑制，例如CXCL13介导的CXCR5受体胞吞作用(Burke等,Blood110:2216-3325(2007))。抑制CXCL13介导的人CXCR5受体胞吞作用。趋化因子与其趋化因子受体的结合造成所述配体-受体复合物的内化，随后活化胞内信号级联(Neel等,ChemokineandGrowthFactorReviews16:637-658(2005))。修改Burkle等所述基于流动的方法以测定人和小鼠细胞中，3D2抑制CXCL13介导的CXCR5受体内化的能力。对人CXCL13介导的胞吞作用而言，hCXCL13与3D2、MAb470或小鼠IgG(浓度为0、33、66、132、264和528nM)组合，并且在4℃孵育过夜。第二天，所述细胞在稀释液(RPMI+0.5%BSA)中以107细胞/ml重新悬浮。用10μg/ml抗人Fc阻断物在37℃预先阻断所述细胞15分钟。所述细胞然后用所述CXCL13/抗体混合物(50μl细胞:50μl混合物)在37℃孵育2小时。所述细胞然后用抗人CXCR5抗体(BD法敏公司（BDPharmingen）:#558113)在4℃染色30分钟，并通过流式细胞仪分析。类似地，联用mCXCL13和3D2或小鼠IgG(浓度为0、20、59、198和528nM)测试小鼠CXCL13介导的胞吞作用。如下计算胞吞作用的抑制:%抑制=100-[100*(0CXCL13-几何平均数)/(0CXCL13-0mAB)]。图6显示了来自代表性人和小鼠CXCL13实验的数据。图6A显示了3D2抗体对485nM(5μg/ml)人CXCL13治疗的人前B-697-hCXCR5细胞表面上CXCR5受体表达的影响。图6B显示了在用1000nM(10μg/ml)小鼠CXCL13预培养的Wehi-231细胞中，3D2介导的小鼠CXCR5受体内化抑制。在两个示例中，3D2有效并以可滴定方式干扰所述CXCL13诱导的CXCR5受体下调。图6C显示了从R2值等于1(小鼠胞吞作用)和0.994(人胞吞作用)的S型剂量反应曲线(如图所示)中计算的EC50值。用生成P值>0.05的非配对t检验分析比较3D2对人和小鼠受体胞吞作用影响的数据，指示了在人CXCL13和小鼠CXCL13曲线之间没有显著区别。实施例4对多发性硬化的小鼠疾病模型中抗CXCL13抗体的评价多发性硬化的鼠模型。实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)是广泛接受的多种硬化的动物模型。EAE是CNS的脱髓鞘性疾病，逐步造成主要靶向脊髓炎症的上行性麻痹程度增加。所述疾病能呈现急性、慢性或复发缓解过程，所述过程依赖于诱导方法和使用的动物类型。因此，EAE能用CNS成分、肽诱导(主动诱导)，并且也通过从一个动物向另一动物的细胞转移诱导(被动诱导)。完全弗氏佐剂(CFA)与所述提取物或肽一起使用，并且经常与百日咳毒素一起使用。RR-EAE-1:3D2对SJL小鼠中复发缓解EAE的影响。使用EAE主动免疫模型测试3D2抗体。在“RR-EAE-1”研究中，在SJL/J小鼠中通过5mg热灭活结核分枝杆菌株H37RA增强的1mg/mlCFA中蛋白脂质蛋白质(PLP)139-151肽表位(HSLGKWLGHPDKF;SEQIDNO:1)皮下免疫来诱导复发缓解(RR)疾病。所述研究包含下列治疗组:A.对照(小鼠IgG)，在第0天开始B.3D2，在第0天开始C.3D2，在评分≥1时开始给予所述小鼠腹膜内注射0.3mg(15mg/kg)抗体，每周两次。所述治疗在第0天对组A和B开始，并且在临床评分≥1时对组C(所述评分系统在下表3描述)开始。表3.评价EAE临床症状的总结评分症状说明0正常行为无神经学症状。1远端尾无力尾巴的远端部分无力且下垂。1.5完全尾无力全尾松弛且下垂。2翻正反射动物背卧时翻正困难。3共济失调行走不稳定-小鼠行走时后腿不稳。4早期瘫痪小鼠难以靠其后腿站立，但仍能作少许移动。5完全瘫痪小鼠完全无法移动四肢，表观较瘦且衰弱。6垂死/死亡在图7所示，用3D2治疗引起疾病缓解。各数据点表示取自9只小鼠的平均评分。使用单向ANOVA然后接Bonferroni多重比较事后检验来比较组平均值(GMS)。在对照组(小鼠IgG)和各3D2治疗组(P<0.05)之间观察到统计学显著差异，但是在两个3D2治疗组(P>0.05)之间没有观察到。甚至当直到小鼠显示了活性疾病（组C）才开始治疗时，观察到所述疾病衰减。RR-EAE-2:3D2对SJL小鼠中复发缓解EAE的影响。在诱导方案中使用百日咳毒素完成第二研究("RR-EAE-2")，以在更严重疾病模型中测试3D2。对于所述第二复发缓解EAE研究，用5mg热灭活结核分枝杆菌株H37RA增强的1mg/mlCFA中PLP139-151皮下免疫SJL/J小鼠，并且在第0天和免疫后第2天腹膜内给予100纳克百日咳毒素。治疗包含分别向下列组每两周腹膜内注射0.3mg(15mg/kg)抗体：A.对照(小鼠IgG)，在第0天开始B.3D2，在第0天开始C.3D2，在第7天开始D.3D2，在EAE发作(评分≥2)时开始RR-EAE-2的结果列于图8。各数据点表示取自9只小鼠的平均评分。使用单向ANOVA然后Bonferroni多重比较事后检验来比较组平均值。在对照(小鼠IgG)和各3D2治疗组(P<0.05)之间观察到统计学显著差异，但是在三个3D2治疗组(P>0.05)之间没有观察到。再次，甚至当治疗在EAE症状发作（评分≥2）(组D)时开始，3D2治疗对所述疾病严重性有统计学显著影响。实施例5对狼疮的小鼠疾病模型中抗CXCL13抗体的评价系统性红斑狼疮(SLE)的鼠模型。SLE是涉及多种器官的自身免疫疾病，其特性为异位生发中心的自发形成和针对大量核抗原的自身抗体生成。在狼疮的鼠模型中测试抗CXCL133D2抗体的影响。狼疮-俯卧新西兰黑色品系（NewZealandBlack）X新西兰白色（NewZealandWhite）品系F1(NZB/NZWF1)小鼠自发发展出高效价抗dsDNA抗体和肾小球中免疫复合物形成造成的严重增殖型肾小球性肾炎。SLE-1:治疗晚期疾病。在研究"SLE-1"中，在蛋白尿症≥2(蛋白尿症评分系统在下表4中描述)的24-30周龄NZB/NZWF1小鼠中开始治疗，并且所述治疗持续8周。所述治疗包含每两周腹膜内注射0.3mg(15mg/kg)3D2或小鼠IgG(对照)。表4.蛋白尿症评分蛋白尿症评分尿中[蛋白],mg/dl1+302+1003+300如图9A所示，3D2治疗使蛋白尿症停止发展。使用良好确立的评分系统对肾进行组织学分析(表5)也显示了抗CXCL13治疗的有益影响，因为3D2治疗组的肾小球肾炎(GN)、间质性肾炎(IN)、和血管炎(VI)病理学评分比对照组(小鼠IgG)低。参见图9B。表5.肾病理学评分对于蛋白尿症评分(图9A)和肾病理学评分(图9B)，各数据点表示十次测量的平均值。用双向ANOVA然后Bonferroni多重比较事后检验（用于鉴定统计学显著差异(P<0.05)）没有观察到统计学显著差异(P>0.05)。SLE-2:在有早期疾病(自体抗体诱导后，但是显著蛋白尿症前)的小鼠中的预防试验。在研究"SLE-2"中，治疗在24周龄NZB/NZWF1小鼠中开始，并且持续12周。所述治疗包含每两周腹膜内注射0.3mg(15mg/kg)3D2或小鼠IgG(对照)。如图10A所示，3D2治疗产生统计学上显著的蛋白尿症进展抑制，特别是在前8周治疗中。8周后，3D2治疗组中七分之零(0%)的小鼠和对照组中九分之四(44%)的小鼠有>2+蛋白尿症评分。在12周治疗结束时，平均尿蛋白为3D2治疗的2.1+/-0.2对比小鼠IgG(对照)抗体的3.1+/-0.15。也在3D2治疗组和小鼠IgG治疗组的小鼠中测量肾病理学评分。肾小球肾炎(GN)和间质性肾炎(IN)病理学评分的总结示于图10B。在7只3D2治疗组小鼠和9只小鼠IgG治疗组小鼠中测量蛋白尿症水平(图10A)和肾病理学评分(图10B)。组之间的蛋白尿症评分显著不同(P=0.0042;有Bonferroni多重比较测试的双向ANOVA)。肾病理学评分没有显著区别(P>0.05)。尽管，平均病理学评分没有显著区别，在七分之二(29%)3D2治疗组小鼠中有严重肾疾病的病理学证据，而九分之四(44%)对照组小鼠中显示严重疾病的证据。注意到3D2阻断CXCL13没有防止自体抗体的发展(数据未显示)。评价了3D2治疗对狼疮小鼠肾中生发中心(GC)和初级滤泡数目的影响。脾切片用GL-7(GC染色)、B220抗体(B细胞标记)、或针对来自3D2治疗和小鼠IgG治疗(对照)NZB/NZWF1小鼠的滤泡型树突细胞(FDC)的抗体来染色。图11A-B中显示了CXCL13抑制对脾淋巴结构的影响。所述初级滤泡保持完整。用3D2治疗的小鼠显示了脾中自发生发中心(GC)尺寸和频率的显著下降。当表示为初级:次级(GC)滤泡比率(p=0.19)时，用3D2(“tx”)治疗的小鼠显示了GC数目降低的趋势(图12A)，以及GC大小的显著降低(p=0.03)(图12B)。每组5只小鼠，值显示为平均值+/-SEM。上述SLE结果显示了3D2抗体对CXCL13的抑制引起狼疮NZB/NZWF1小鼠模型中肾炎的下降，特别是在疾病的更早阶段，并且可以影响脾结构。实施例6嵌合和人源化抗CXCL13单克隆抗体的制备分离3D2杂交瘤V基因和克隆嵌合3D2抗体。小鼠3D2抗体用作生成嵌合抗CXCL13单克隆抗体的原型。使用标准方法从3D2杂交瘤中分离所述可变(V)基因。3D2的所述重链(H1609)和所述轻链(L0293)的多核苷酸和氨基酸序列示于图13。所述VH和VK互补决定区(CDR)以下划线显示(分别是SEQIDNO:4、5、6、9、10和11)。所述可变重链（VH）基因克隆到含有人γ1重链基因的哺乳动物表达载体中，产生全长嵌合重链。所述可变链（VK）克隆到具有人κ恒定区基因的哺乳动物表达载体中，产生全长嵌合轻链。为了制备嵌合抗体，将含有嵌合重链和嵌合轻链的表达载体共转染到CHO-S细胞内。产生的单克隆抗体(MAb)由细胞分泌，3-6天表达期之后收获。利用蛋白质A色谱纯化所得MAb并进行表征。所得嵌合IgG1抗体("MAb1476")通过ELISA显示对人和小鼠CXCL13的特异性，显示对小鼠和人CXCL13有相似的亲和性，并且显示有与亲本小鼠抗体3D2相似的功能活性(数据未显示)。另外，在表位竞争ELISA中，MAb1476能与生物素化3D2和3C9竞争结合小鼠和人CXCL13(数据未显示)。嵌合3D2的人源化(MAb1476)。嵌合3D2抗体的人源化概括如下。从嵌合MAb1476引入重链(H1609)和轻链(L0293)框架区(FWR)的修饰分别示于图14A和14B。H1609中的推定N连接糖基化位点(Asn-Leu-Thr)用Ser-Leu-Thr取代(图14A)。所述突变不影响抗体亲和性(见表6)并且引起"MAb5080"生成。为了提高MAb5080亲和性和功能，生成很多可变区突变，并且通过人CXCL13上的IC50ELISA筛选。L5055-CDR1位点31处的单个丝氨酸(S)-甲硫氨酸(M)突变以及所述轻链框架区的改变(见图14B和15)引起"MAb5261"生成，其显示了相较3D2和MAb5080的亲和性显著提高(表6)。所述氨基酸序列H1609(SEQIDNO:3)和H2177(SEQIDNO:13)的比较示于图14A，并且L0293(SEQIDNO:8)、L5055(SEQIDNO:17)和L5140(SEQIDNO:15)的比较示于图14B。表6.重组人和小鼠CXCL13的抗体亲和性MAb5080VH和VK:H2177(SEQIDNO:13)和L5055(SEQIDNO:17)；以及MAb5261VH和VK:H2177(SEQIDNO:12)和L5140(SEQIDNO:15)的多核苷酸和氨基酸序列分别示于图15。MAb5261对CXCL13的特异性:与3D2相似，MAb5261的特异性通过组中特异性ELISA和捕获表位竞争ELISA评价，所述组包含重组趋化因子(重组小鼠、人和短尾猴CXCL13、人IL-8/CXCL8;人IP-10/CXCL10、人MIG/CXCL9和人SDF-1α/CXCL12);天然人和小鼠CXCL13;和各种非特异性抗原(重组人C35、链霉亲和素、牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HAS)、胰岛素和血红蛋白)。对特异性ELISA而言，重组人、短尾猴和小鼠CXCL13各以100nM涂层。MAb5261显示了对CXCL13的多物种特异性(图16A-C)。重组人(图16A)和短尾猴CXCL13(图16B)上MAb5261的结合与其直接“亲本”MAb5080的结合相当，但是比MAb1476的结合更强(嵌合3D2)。相较MAb1476和MAb5080，MAb5261在结合重组小鼠CXCL13上显著优越(图16C)。各趋化因子的数据点表示三重测量的平均值。从四参数S形曲线拟合中计算出EC50值(生成EC50值的所述曲线的R2是0.99)。MAb5261与天然人和小鼠CXCL13的结合通过捕获表位竞争ELISA测定。对人ELISA而言，用6.6nMMAb801捕获人CXCL13(1:4稀释THP1上清液或者0.097nM)，并用0.66nM生物素-3C9检测。对小鼠ELISA而言，用33nMMAb470捕获小鼠CXCL13(1:40稀释TNF-Tg器官提取物)，并用3.3nM生物素-3D2检测。各数据点表示来自至少三个独立实验之一的两重测量的平均值。当在天然人(图17A)和小鼠CXCL13(图17B)上进行捕获表位竞争ELISA测试时，MAb5261显示了就结合人和小鼠天然CXCL13而言，比3D2和5080抗体更优越。图17A-B所示曲线使用四参数S型曲线拟合来拟合(R2=0.99)。实施例7抗CXCL13MAb5261的功能定性抑制人和小鼠B细胞迁移在稳定细胞系人前B-697-hCXCR5和原代人扁桃体细胞上测试MAb5261抑制人CXCL13诱导人B细胞趋化的能力。使用上面实施例2所述的方案在稳定细胞系人前B-697-hCXCR5上测试MAb5261对人CXCL13诱导人B细胞趋化的抑制。通过MAb5261抑制人前-B-697-hCXCR5细胞迁移示于图18A。对人原代扁桃体细胞研究而言，所述扁桃体细胞获自组织的机械分离。使细胞(106/5-μmTranswell板上室)在37℃向5μg/ml人CXCL13迁移2小时。通过MAb5261抑制人原代扁桃体细胞迁移示于图18B。图18A-B所示的结果表示来自至少三个实验的三重测量的平均值+/-SEM。使用四参数S型曲线拟合来拟合曲线(R2=0.98-0.99)。如上面实施例2所述，在来自C57Black/6和SJL/J小鼠的小鼠脾细胞上评价MAb5261对小鼠CXCL13介导的小鼠B细胞趋化作用的影响。向人或鼠SDF-1α(0.1μg/ml)的迁移再次用作阴性对照以确保抗体效果的CXCL13特异性(数据未显示)。通过MAb5261抑制脾细胞迁移示于图19(来自代表性实验的数据显示为两次重复测量平均值+/-SD)。基于用相应同种型对照获得的值计算迁移抑制值。如图18和19所示，MAb5261抑制人和小鼠CXCL13依赖性趋化作用。在培养和原代细胞之间EC50值差异(见图18)可能归因于人CXCL13浓度的区别，如97nM(1μg/ml)用于人前-B-697-hCXCR5细胞迁移和485nM(5μg/ml)用于人扁桃体细胞迁移。抑制人CXCL13介导的人CXCR5受体胞吞作用。根据实施例3所述的方法，使用人CXCL13治疗的人前B-697-hCXCR5细胞完成这个实验，以诱导人CXCR5受体的胞吞作用。人CXCL13的量是2μM，高于实施例3所示3D2胞吞作用试验中使用的量(即0.485μM)，因此观察到EC50值的区别。通过MAb5261抑制CXCR5受体胞吞示于图20。所示结果显示为来自至少三个独立实验的三重测量的平均值。使用四参数S型曲线拟合来拟合曲线(R2=0.99)。实施例8生成和定性抗CXCL13MAb5261的鼠样式MAb5261包含人重和轻可变区，与人IgGamma1-F同种异型以及人κ。用小鼠IgG2a(γ2a链)工程改造鼠对应物("MAb5378")。IgG2a同种型有与人IgG1紧密的相似性，包含固定补体和结合Fc受体的能力。MAb5378分别包含与MAb5261相同的重和轻链可变基因以及小鼠IgG2a恒定区和小鼠κ。所述重链和轻链表达质粒中的常见限制性位点能用于改变同种型。通过限制性消化、连接和转化实现所述同种型物质生成。特别地，对MAb5261重链而言，所述基因的可变区用限制性内切核酸酶消化并且连接到表达质粒的可比较位点，所述质粒包含小鼠IgG2a恒定区从而生成MAb5378的重链(H5188)。相似地，对MAb5261轻链而言，所述基因的可变区用限制性内切核酸酶消化并且连接到表达质粒的可比较位点，所述质粒包含小鼠Igκ恒定区从而生成MAb5378的轻链(L5153)。所述MAb5378轻链和重链可变区的多肽和氨基酸序列与MAb5261相同，并且示于图21。所述VH和VK互补决定区(CDR)以下划线显示(分别是SEQIDNO:4、5、6、16、10和11)。MAb5378亲和性测量。对重组人和小鼠CXCL13的MAb5378亲和性测量通过使用与实施例1所述相似的方法测量。将Mab5378对重组人和小鼠CXCL13的亲和性与MAb5261和3D2作比较。如表7所示，MAb5261和MAb5378对人和小鼠趋化因子的亲和性测量(nM)相较3D2显著提高。表7.5261、5378和3D2对重组人和小鼠CXCL13的亲和性MAb5378表位作图。进行表位竞争ELISA实验以测定MAb5378是否在小鼠CXCL13上与MAb5261共有结合表位。用1μg/mlMAb470、5378或5261(对照)在板上捕获重组小鼠CXCL13。用0.5μg/ml(3.3nM)生物素化MAb5261然后链霉亲和素-HRP检测抗体/趋化因子相互作用。所述研究也包含市售大鼠抗小鼠抗体MAb470。使用表位竞争ELISA评价经MAb470或5378预培养小鼠CXCL13结合生物素化MAb5261的能力。显示（图22）MAb5378与MAb5261而不是MAb470，共有小鼠CXCL13结合表位。因此，MAb5378显示了保留表位结合和亲和性，对MAb5378而言需要这些以用作动物模型研究中MAb5261的替代物。另外，实施例通篇所述的表位结合结果能概括成：3D2、3C9、MAb1476、MAb5080、MAb5261和MAb5378都结合人CXCL13的相同表位。MAb5378对CXCL13的特异性。在重组人、小鼠和短尾猴CXCL13(图23)和一组重组趋化因子和各种抗原(重组趋化因子(小鼠、人和短尾猴CXCL13、人IL-8/CXCL8、人IP-10/CXCL10、人MIG/CXCL9和人SDF-1α/CXCL12)；天然人和小鼠CCL13;和各种非特异性抗原(重组人C35、链霉亲和素、牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HAS)、胰岛素、血红蛋白)上评价MAb5378的特异性(数据未显示)。如实施例1所述进行特异性ELISA。特别地，以100nM涂层各趋化因子。如图23所示，MAb5378与小鼠抗体3D2和对照(小鼠IgG)作比较。在结合来自所有三个种类的趋化因子方面，MAb5378以各种程度优于3D2。在小鼠CXCL13上观察到最显著的结合差异，显示了动物研究中MAb5378比3D2的潜在优势。各数据点表示三重测量的平均值。从四参数S形曲线拟合中计算出EC50值(生成EC50值的所述曲线的R2是0.99)。对MAb5378测试人和小鼠B细胞迁移的抑制。在迁移试验中分别使用实施例2、7和2所述的方法，测试MAb5378干扰小鼠和人B细胞的CXCL13依赖性趋化能力，所示试验涉及培养的(人前-B-697-hCXCR5细胞;图24A)和原代(人扁桃体细胞;图24B)人细胞以及小鼠脾细胞(图24C)。所述趋化因子浓度是:用于人前B-697-huCXCR5迁移的97nMhuCXCL13;用于人扁桃体细胞迁移的485nMhuCXCL13;和用于小鼠脾细胞迁移的500nMmuCXCL13。向人或鼠SDF-1α的迁移用作阴性对照(未显示)。基于用相应同种型对照获得的值计算迁移抑制值。图24A-C所示的结果显示来自至少三个实验的三重测量的平均值+/-SEM。使用四参数S型曲线拟合来拟合曲线(R2=0.99)。在人迁移试验中，将MAb5378与MAb5261作比较，和在小鼠迁移试验中，将MAb5378与3D2作比较。在两个示例中，MAb5378成功抑制CXCL13诱导的人和小鼠细胞迁移，程度与MAb5261相当并且略微优于3D2。抑制人CXCL13介导的人CXCR5受体胞吞作用。使用实施例3所述的方法在人CXCL13介导人CXCR5受体内化试验中，将MAb5378与其原型MAb5261和小鼠抗人CXCL13抗体3D2作比较。如图25所示，在其抑制人CXCR5受体内化能力上，MAb5378与MAb5261相同，并且显著优于3D2。MAb5261和MAb5378的数据点表示来自两个独立实验的平均测量。3D2和同种型对照的数据点表示来自单个实验的三重测量的平均值。使用四参数S型曲线拟合来拟合曲线(R2=0.99)。实施例8对类风湿性关节炎的小鼠疾病模型中抗CXCL13抗体的评价类风湿性关节炎的鼠模型。小鼠和大鼠中胶原性关节炎(CIA)是人类风湿性关节炎(RA)的充分确立模型。所述疾病通常由皮内注射完全弗氏佐剂(CFA)中乳化的牛II型胶原诱导，并且特性为生成小鼠抗体和随后爪中关节炎的逐步发展。CIA-1:MAb5378在使用DBA1/J小鼠的CIA模型中的抗关节炎功效。所述疾病在DBA1/J小鼠中诱导，所述诱导通过用100μg热灭活结核分枝杆菌（M.tuberculosis）H37Ra增强的CFA中100μg牛II型胶原皮下免疫，然后在第21天用不完全福氏佐剂(IFA)中100μg牛II型胶原加强免疫。所述动物每周三次对关节炎的目测症状进行评分(见表8)，并且所述关节炎指数(AI)通过加入个体爪评分来计算(在给定动物中能实现的所述最大关节炎指数是16)。表8.小鼠中CIA的目测症状关节炎评分说明0没有可见的关节炎效应11个足趾出现水肿和/或红斑22个足趾出现水肿和/或红斑3多于2个足趾出现水肿和/或红斑4整个爪和全部足趾出现严重关节炎在加强免疫的前一天开始预防治疗，即有2-6低AI的动物诱导后第20天，并且由下列治疗组组成(每组10只小鼠):A.小鼠IgG同种型（对照）B.MAb5378C.依那西普（etenercept）(TNF抑制剂;阳性对照)给予所述小鼠腹膜内(小鼠IgG和MAb5378)或皮下(依那西普（etenercept）)注射0.6mg(30mg/kg)抗体，每周两次持续三周。在诱导后第41天终止所述研究。如图26所示，MAb5378预防治疗引起疾病发展速度减慢和显著抑制疾病严重性，这在研究终点变得明显。在研究终点(第41天)，在小鼠IgG和MAb5378治疗组之间(P<0.05)与小鼠IgG和依那西普治疗组(P<0.05)之间观察到统计学显著差异。所述MAb5378的抑制影响与阳性对照试剂依那西普的抑制影响没有统计学显著差异(P>0.05)。CIA-2:MAb5378在CIA模型DBA1/J小鼠中的抗关节炎功效。进行用MAb5378的第二CIA研究，“CIA-2”。在这个研究中，如上就CIA-1所述，在DBA1/J小鼠中诱导所述疾病。在诱导后第20天有低AI2-6值的动物中，在加强免疫前1天再次开始预防性治疗。除了依那西普，市售大鼠抗鼠CXCL13抗体MAb470用作对照。因此所述研究包含下列组:A.小鼠IgG同种型对照B.MAb5378C.依那西普（etenercept）(TNF抑制剂;阳性对照)D.MAb470给予所述小鼠腹膜内(小鼠IgG、MAb470和MAb5378)或皮下(依那西普（etenercept）)注射0.6mg(30mg/kg)抗体，每周两次持续三周。在诱导后第42天终止所述研究。如图27所示，在整个研究以及所述终点(第42天)，MAb5378预防性治疗再次引起疾病发展速度减慢和显著抑制疾病严重性。在小鼠IgG和MAb5378治疗组之间(P<0.05)与小鼠IgG和MAb470治疗组(P<0.05)之间观察到统计学显著差异。所述MAb5378的抑制影响与阳性对照试剂依那西普和大鼠抗鼠CXCL13抗体MAb470的抑制影响没有统计学显著差异(P>0.05)。GC-1:MAb5378对免疫BALB/c小鼠中生发中心形成的影响。鉴于抗CXCL13抗体在自身免疫的动物模型中的成功表现，测试了涉及破坏异位生发中心形成的可能作用机制。检测了用沉淀于100ul明矾的100μg4-羟基-3-硝基苯乙酰-鸡-g-球蛋白(NP-CGG)所免疫的MAb5378治疗BALB/C小鼠中的生发中心。所述动物用总共0.6mg(30mg/kg)小鼠同种型对照(0.6-mg每周注射)或MAb5378(0.3-mg每两周注射)腹膜内注射一周。所述注射在NP-GCC免疫前一周开始，并且在NP-GCC免疫后持续一周。在攻击后第10天评价生发中心形成。就各种B细胞(活化的GCB细胞;滤泡和边缘区B细胞)和T细胞(CD4+和CD8+)亚组的存在而言，通过流式细胞仪分析获自脾和淋巴结的单个细胞悬液。尽管MAb5378对T细胞或滤泡和边缘区B细胞没有产生影响(数据未显示)，生发中心B细胞(B220+/CD38low/PNA+)分别在脾和淋巴结中下降43%和41%(图28)。使用未配对学生t检验比较脾组平均值。MAb5378治疗脾相较小鼠IgG治疗组有统计学显著的GC-B细胞下降(P<0.05)。从淋巴结恢复的所述细胞数目非常低，并且因而积聚(结果，没有用来自淋巴结的数据进行统计学分析)。实施例9对螺杆菌感染的小鼠模型中抗CXCL13抗体的评价螺杆菌感染的鼠模型。螺杆菌物种如海尔曼螺杆菌和幽门螺旋杆菌诱导患者中的胃MALT淋巴瘤。螺杆菌诱导的胃淋巴滤泡的小鼠模型描述于Nobutani等,FEMSImmunolMedMicrobiol60:156-164(2010)，其通过引用全文纳入本文。本文使用所述Nobutani等小鼠模型以测试抗CXCL13抗体在减少胃淋巴滤泡中的影响。用于此实施例的海尔曼螺杆菌感染小鼠的治疗方案和抗体给予示于图29。特别地，用海尔曼螺杆菌感染C57BL/6J小鼠。感染后一周开始，每周给予所述小鼠同种型抗体对照或抗CXCL13抗体(MAb5378)，共12周。抗CXCL13MAb5378(小鼠IgG2a同种型)在PBS,pH7.2中以3mg/ml配制。在感染后第7天开始并在其后每周，用200微升(600微克)腹膜内注射小鼠。所述同种型对照是非依赖性单克隆小鼠IgG2a抗体。通过PCR评价小鼠胃样品的海尔曼螺杆菌特异性16srRNA基因的表达以确证感染。PCR扩增反应包括1x反应缓冲液[20mMTris/HCl(pH8.0)、100mMKCl、0.1mMEDTA、1mMDTT、0.5%吐温（Tween）-20、0.5%NonidetP40和50%甘油]，其含有1单位TaqDNA聚合酶(日本大阪的东洋有限公司(TOYOBO));10nmol各脱氧核苷三磷酸;10pmol各寡核苷酸引物;和1μl稀释DNA，通过用DNA浓度约20-100ng/μl的1:10稀释的原始样品来制备，终体积为50μl。16srRNA反应的循环条件包括35轮循环的94℃30秒、56℃30秒、和72℃30秒。所述海尔曼螺杆菌特异性16srRNA基因PCR引物如下所示：F:5’-TTGGGAGGCTTTGTCTTTCCA-3’(SEQIDNO:24)R:5’-GATTAGCTCTGCCTCGCGGCT-3’(SEQIDNO:25)获自海尔曼螺杆菌感染小鼠的所有胃样品中扩增的海尔曼螺杆菌特异性16srRNA基因的表达结果示于图30。这些结果显示所有经治疗小鼠对海尔曼螺杆菌感染都为阳性。海尔曼螺杆菌感染小鼠的胃粘膜中CXCL13的表达。通过实时定量PCR测定海尔曼螺杆菌感染和未感染小鼠的胃粘膜中CXCL13mRNA表达的水平。海尔曼螺杆菌感染小鼠相较未感染野生型对照小鼠在感染1个月或3个月后胃粘膜中CXCL13mRNA表达的水平分别示于图31A和31B。这些结果显示了海尔曼螺杆菌感染小鼠中CXCL13表达的增加。抗体治疗的海尔曼螺杆菌感染小鼠的胃粘膜中CXCL13的表达。通过逆转录PCR测定用同种型对照和抗CXCL13抗体治疗后，海尔曼螺杆菌感染小鼠的胃粘膜中CXCL13的表达水平。所述胃的粘膜和粘膜下层从肌层和绒毛膜中除去，并且然后用1mlTRIZOLRegent(英杰公司)匀质化。根据生产商说明书，从匀浆物中提取RNA。根据生产商方案，使用高容量cDNA逆转录试剂盒(美国加利福尼亚州福斯特城的应用生物系统公司（AppliedBiosystems）)对RNA进行逆转录反应。PCR扩增反应包括1x反应缓冲液[20mMTris/HCl(pH8.0)、100mMKCl、0.1mMEDTA、1mMDTT、0.5%吐温-20、0.5%NonidetP40和50%甘油]，其含有1单位TaqDNA聚合酶(日本大阪的东洋有限公司);10nmol各脱氧核苷三磷酸;10pmol各寡核苷酸引物;和1μl稀释DNA，通过用DNA浓度约100ng/μl的1:10稀释的原始样品来制备，终体积为50μl。所述CXCL13和β肌动蛋白反应的循环条件包括94℃2分钟，35轮循环的94℃30秒、55℃30秒和72℃1分钟。图32显示同种型对照或抗CXCL13抗体治疗后，海尔曼螺杆菌感染小鼠胃中CXCL13和β肌动蛋白对照mRNA的表达。这些结果显示CXCL13在未感染的野生型小鼠中不表达，但是在所有海尔曼螺杆菌感染小鼠中表达。抗CXCL13抗体治疗减少螺杆菌感染小鼠中的胃淋巴滤泡。海尔曼螺杆菌感染后三个月，切除小鼠胃，并且在较大弯部打开。半个胃包埋入石蜡中，所述石蜡包埋组织进行切片并且用苏木精和伊红(H&E)染色。图33显示来自同种型对照（左图）和抗CXCL13抗体（右图）治疗小鼠胃的H&E染色图片。对同种型对照和抗CXCL13抗体样品计数胃淋巴滤泡的数目。所述结果示于图33的下图。这些结果显示相对于对照治疗，抗CXCL13抗体治疗的海尔曼螺杆菌感染小鼠中胃滤泡降低。以上具体实施方式的描述完全揭示了本发明的一般性质，通过应用本领域技术范围内的知识，他人无需过多实验即能很容易地就各种应用改良和/或修改这些具体实施方式而不背离本发明总体理念。因此，基于本文所列出的教导和指南，这些修改和改良意在包括于所公开实施方式的含义和等同物范围之内。应当理解本文中的措词和术语仅仅是描述性的而非限制性的,从而本说明书的术语或措词可由本领域技术人员根据所述教导和指南解读。本发明的宽度和范围不应受限于任何上述示例性实施方式，而应仅根据下列权利要求书和其等同项来定义。