本发明属于新药设计及合成领域，具体地，涉及一种肟类衍生物、其制备方法及将其作为FXR拮抗剂的应用。
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：心脑血管疾病是当前危害人类生命和健康最严重的病症之一，为中老年人的常见病和多发病，在许多国家是发病率和死亡率的首位。动脉粥样硬化是许多心脑血管疾病的基础，大量的实验和临床资料证明动脉粥样硬化和血脂代谢的异常密切相关。因此，血脂调节成为当前该类新药研究的重要领域。通过前瞻性、随即和对照的临床研究，已经证明一些他汀类药物可以减少动脉粥样硬化和冠心病的发生，降低了冠心病所致的死亡率，降低了心肌梗死的发生率。进一步研究还证明降脂药物的治疗可以减少粥样硬化斑块内脂质的含量，加固纤维脂而稳定斑块，减少斑块破裂而引发的心肌梗死和脑梗死等等严重事件。此外，调血脂药还可恢复受损血管内皮细胞的功能，加强纤溶性和防止血栓形成，并且延缓人的动脉粥样硬化的进展并消退已形成的斑块。因此，积极使用调血脂药物治疗是减轻动脉粥样硬化和减少冠心病的发生的重要措施。目前临床和常用的调节血脂的药物品种较多，例如他汀类，苯氧芳酸类，离子交换树脂或胆酸螯合剂，烟酸类以及其他调血脂类药物。其中他汀类药物尤为引人注意。他汀类药物是胆固醇合成酶的抑制剂。3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(简称：HMG-CoA)在HMG-CoA还原酶的作用下转变为甲氧龙酸，他汀类药为化学结构的开放酸部分与HMG-CoA相似，它可竞争性抑制甲氧龙酸的形成，从而降低了胆固醇的合成，因而可以降低血液中胆固醇和低密度脂蛋白(简称：LDL-C)水平。临床研究证明，冠心病患者即使血清中胆固醇和低密度脂蛋白的水平不很高或正常，他汀类药物可以预防动脉粥样硬化斑块的发生、发展和减少冠心病的严重临床事件。然而，长期服用除了他汀类药物有上腹不适等消化系统症状外，相当部分病人还会产生肝功能损害，转氨酶升高，肌肉疼痛，肌酸激酶升高等副反应。法尼醇X受体(简称：FXR)是配体激活的转录因子，调节靶基因的表达；研究发现胆汁酸为其天然配体，参与胆汁酸的代谢,因此也被称为胆汁酸受体，而鹅脱氧胆酸(简称：CDCA)为其最合适的天然配体。GW4064是第一个人工合成的FXR配体。FXR除参与机 体内胆汁酸的代谢，还对脂代谢和糖代谢等起着重要的调节作用。胆固醇代谢成胆汁酸主要有两条通路:1.经典通路是由胆固醇-7α-羟化酶(简称：CYP7A1)催化，而且受胆汁酸的负反馈调节；2.替代通路是由胆固醇-27α-羟化酶(简称：CYP27A1)催化，占人体总胆汁酸合成的18％，且作为经典通路的补充。经典代谢通路过程是胆固醇的氧化产物与肝X受体(简称：LXR)结合并诱导其与维甲酸X受体(简称：RXR)形成二聚体，结合到DNA的LXR的反应原件上，激CYP7A1的表达，然后CYP7A1催化胆固醇生成胆汁酸，胆汁酸与FXR结合并诱导其与RXR形成二聚体，结合到DNA的FXR反应原件上，激活小异源二聚体配体(SHP)的表达，而SHP与肝受体类似物-1(LRH-1)结合抑制CYP7A1的表达，从而维持胆固醇的代谢平衡。FXR对甘油三酯代谢的调控机制体现在抑制甘油三酯的合成：FXR经SHP途径下调固醇调节元件结合蛋白1c(简称：SREBP-1c)，而SREBP-1c是参与脂肪合成基因的主要转录因子，可激活多种参与脂肪酸和甘油三酯合成的酶的转录，包括脂肪酸合成酶(简称：FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(简称：ACC)等。最近的研究发现，FXR可以诱导脂肪细胞的分化，从而促进TG在脂肪细胞的储存。也有文献报道FXR拮抗剂降低甘油三酯(TG)的作用是通过下调SREBP-1c的方式实现的。目前，报道的FXR拮抗剂大部分为甾体类化合物，包括Z-guggulsterone(简称GS)、CDRI/80-574、sulfatedsterol和scalaranesesterterpene等。迄今为止，非甾体类FXR拮抗剂包括AGN34、取代的异噁唑衍生物。其中天然产物GS是FXR的一个高效拮抗剂，它能够减少小鼠体内低密度脂蛋白(LDL)和甘油三酯(TG)的水平但不能够改善高胆固醇病人的血浆脂密度。FXR作为近几年来调节血脂领域出现的新靶点，凭借其独特的调节血脂机制，吸引了众多科研工作者的目光。因此，针对FXR研发出对混合型高脂血症有效的药物具有很大意义。前期的酰胺类化合物、其制备方法及应用(专利CN102838505A)和酯类化合物、其制备方法和应用(专利CN102093246A)两篇专利中已发明了大量化合物并证实体内降血脂作用，其中候选药物-化合物SIPI-7623(即专利CN102838505A说明书第4页的化合物5)表现出较好的降血脂作用，本专利中的发明以前期为基础，发明了一种肟类衍生物，重点进行了体外FXR拮抗活性的研究，证实具有FXR拮抗作用，而大鼠体内实验证实具有降血脂作用，且优于对比化合物SIPI-7623。技术实现要素：为开拓临床药物的资源，本发明以SIPI-7623为先导物，合成了一系列其类似物，通 过与相应的盐酸羟胺及其衍生物进行肟化反应，从而提供了一种肟类FXR拮抗剂，用于降血脂药物的开发。本发明的第一方面是提供了如式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐，其中：虚线Cy表示不稠合苯环或稠合苯环；R1、R2独立地选自氢、卤素、苯基、苄基、苄氧基、C1-C3的烷基或C1-C3的烷氧基；R3选自氢、甲基；X选自O、S。一种优选的实施方式，上述式(I)所示化合物，其R1、R2独立地选自氢、卤素、苯基、苄基或苄氧基。更优选地，R1、R2独立地选自卤素、苄基。一种优选的实施方式，上述式(I)所示化合物，所述卤素选自氟、氯、溴或碘。一种优选的实施方式，上述式(I)所示化合物，虚线Cy为不稠合苯环，其结构式如式(I-A)，一种优选的实施方式，上述式(I)所示化合物，虚线Cy为稠合苯环，其结构式如式(I-B)，在本发明的第一方面中，更优先发明的化合物为：上述式(I)所示化合物的结构中，包含有酚羟基，此酚羟基具有弱酸性，其可以与适当的碱形成盐；所述的适当的碱选自碱金属或碱土金属的氢氧化物；较佳地可以选自氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钙等。上述式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐容易分离，可采用常规分离方法提纯；例如式(I)所示化合物可经柱层析纯化，式(I)所示化合物与碱性化合物所成的盐经重结晶纯化。在本发明第二方面，本发明提供了如上式(I)所示化合物的制备方法，包括以下步骤：步骤a)、将式(II)所示化合物与式(III)所示化合物在碱存在下反应得式(IV)所示化合物；步骤b)、最后将式(IV)所示化合物与R3-NH2·HCl在弱碱性条件和一定温度下反应得式(I)所示化合物。反应式见以下路线1：路线1上述路线1的反应式中，所述的虚线Cy，R1，R2及R3的定义同上述式(I)所示化合物定义的一致。上述路线1中，步骤a)中所述的碱选自碳酸钠、碳酸钾、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺； 优选无水碳酸钾。在一种优选的操作方式中，步骤a)选用无水K2CO3作为碱，四氢呋喃作为溶剂下反应。上述路线1中，步骤b)所用弱碱为三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、无水碳酸钾、吡啶、N-甲基吗啉、乙酸钠等，优先选用无水乙酸钠。式(II)所示化合物的合成，可以通过路线2制备：步骤c)、式(V)所示酚化合物在碱性条件下和式(VI)所示氯化物反应后得式(VII)所示化合物；步骤d)、将式(VII)所示化合物碱性条件下水解及得式(II-A)所示羧酸化合物；步骤e)、将式(II-A)所示化合物通入H2S后制得式(II-B)所示巯基羧酸化合物；路线2上述路线2中，各步骤的反应条件优选为，步骤c).无水K2CO3、DMF、80℃；步骤d).NaOH、醇类溶剂、80℃；步骤e).H2S、DMF、CDI。上述路线2中，所述步骤d)中所述醇类溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇等，优先选用甲醇。在本发明的第三方面，本发明提供了降血脂药物组合物，其中包括第一方面所述的式(I)所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。根据治疗目的，可将药物组合物制成各种类型的给药单位剂型，如片剂、丸剂、粉剂、液体、悬浮液、乳液、颗粒剂、胶囊、栓剂和针剂(溶液及悬浮液)等。在本发明的第四方面，本发明提供了将如式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐、或其药物组合物作为FXR拮抗剂的应用。此外，本发明提供了将如式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐、或其药物组合物在调节血脂中的应用。本发明的如式(I)所示的化合物及其药学上可接受的盐在药物组合物中的含量无特殊限制，可在很宽的范围内进行选择，通常可为质量百分比1-70％，较佳的为质量百分比1-30％。本发明中，所述的药物组合物的给药方法没有特殊限制。可根据病人年龄、性别和其它条件及症状，选择各种剂型的制剂给药。例如，片剂、丸剂、溶液、悬浮液、乳液、颗粒剂和胶囊是口服给药；针剂可以单独给药，或者和注射用输送液(如葡萄糖溶液及氨基酸溶液)混合进行静脉注射，如有必要可以单纯用针剂进行肌肉、皮内、皮下或腹内注射；栓剂为给药到直肠。本发明中，可以根据服药方法、病人年龄、性别和其它条件以及症状适当地选择用药剂量。通常的给药剂量可为：约0.1～300mg药物活性成分/kg体重/天。一般来说，每个给药单位剂型可含1～200mg的药物活性成分。以下将通过具体实施例进一步阐述本发明，但并不用于限制本发明的保护范围。在不脱离本发明构思的前提下，本领域技术人员可在权利要求范围内对制备方法和使用仪器作出改进，这些改进也应视为本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。附图说明图1-4显示是本发明的化合物1的降血脂药效学研究的实验结果。实验选用了正常大鼠作为空白对照，同时选用高脂大鼠模型作为对照；阳性药物选取降脂药-辛伐他汀(Simvastatin，简称Sim)以及本研究课题组前期研究中发现的候选降脂药物-编号为SIPI-7623(专利CN102838505A中的化合物5)的化合物，测定了化合物1对于高脂大鼠的降血脂药效。图1、图2、图3及图4分别显示了采用日立自动生化分析仪7080测定实验大鼠血清中的胆固醇(简称：TC)、甘油三酯(简称：TG)、高密度脂蛋白(简称HDL-C)和低密度脂蛋白(简称LDL-C)的测试结果。具体实施方式实施例1：中间体5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2–二甲基戊酸制备将2,5-二氯苯酚(1.63g，10mmol)、无水K2CO3(1.66g，12mmol)加入含无水DMF(25mL)的100ml圆底烧瓶中，常温搅拌0.5h后，再将5-氯-2，2-二甲基戊酸乙酯(2.32g，12mmol)和四正丁基碘化铵(37mg，0.1mmol)加入混合液中，于90℃下搅拌过夜。冷却后往反应液加入水(150mL)，用DCM(40mL×3)萃取，合并有机相，旋出DCM。将浓缩液中加入乙醇(40mL)和NaOH(0.8g，20mmol)于80℃回流2h，再旋出乙醇，加入水 (150mL)，用DCM(40mL×3)萃取，合并有机相，旋出DCM，经柱层析得中间体5-(4-乙基苯氧基)-2，2–二甲基戊酸(2.0g)，收率76.1％。MS(ESI):m/z＝315.0[M+Na]+；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.28–7.25(m,1H),6.86(dd,J＝7.0,2.2Hz,2H),3.99(t,J＝6.2Hz,2H),1.92–1.70(m,4H),1.26(s,6H).同法制备中间体5-(2,5-二氟苯氧基)-2,2–二甲基戊酸、5-(2-苯基苯氧基)-2,2–二甲基戊酸、5-(3-苯基苯氧基)-2,2–二甲基戊酸、5-(2-苄氧基苯氧基)-2,2–二甲基戊酸、5-(2-萘氧基)-2,2-二甲基戊酸。实施例2：中间体5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2–二甲基戊-S-酸制备将CDI(10.0mmol)和5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2–二甲基戊酸(10.0mmol)溶于DMF(20mL)中，室温搅拌1h后通入H2S反应3h。加入水(100mL)和乙酸乙酯(30mL×3)萃取，经柱层析得中间体5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2–二甲基戊-S-酸，2.41g，MS(ESI):m/z＝308[M+H]+.同法制备中间体5-(2-苯基苯氧基)-2,2–二甲基戊-S-酸、5-(2-萘氧基)-2,2-二甲基戊-S-酸。实施例3：中间体2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2,5－二氯苯氧基)2,2-二甲基戊酸制备将5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2-二甲基戊酸(2.91g,10.0mmol)和K2CO3(1.37g,10.0mmol)加于四氢呋喃(30mL)中室温搅拌0.5h后，向搅拌液中滴加α-溴代-3,5-二羟基苯乙酮(2.31g,10.0mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)，继续搅拌12h。旋出溶剂，稀盐酸酸化，加入乙酸乙酯(25mL×3)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得中间体3.59g，ESI-MSm/z:442[M+H]+.同法制备中间体2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2,5－二氟苯氧基)2,2-二甲基戊酸、2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2-苯基苯氧基)2,2-二甲基戊酸、2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(3－苯基苯氧基)2,2-二甲基戊酸、2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2－苄氧基苯氧基)2,2-二甲基戊酸、2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基-5-(2-萘氧基)-2,2-二甲基戊酸。实施例4：中间体S-(2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基)-5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸的制备将5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2-二甲基戊-S-酸(3.07g,10.0mmol)和K2CO3(1.37g,10.0mmol)加于四氢呋喃(30mL)中室温搅拌0.5h后，向搅拌液中滴加α-溴代-3,5-二羟基苯乙酮(2.31g,10.0mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)，继续搅拌12h。旋出溶剂，稀盐酸酸化，加入乙酸乙酯(25mL×3)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得中间体3.46g，ESI-MSm/z:458[M+H]+.同法制备中间体S-(2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基)5-(2-苯基苯氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸、S-2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基-5-(2-萘氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸。实施例5：化合物1的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2,5－二氟苯氧基)-2,2-二甲基戊酸(0.408g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.28g，收率66.2％。ESI-MSm/z:422[M-H]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ11.57(s,1H),9.32(s,2H),7.23(ddd,J＝11.1,9.0,5.4Hz,1H),7.02(ddd,J＝10.2,6.9,3.0Hz,1H),6.74(td,J＝8.4,3.9Hz,1H),6.40(d,J＝2.2Hz,2H),6.21(t,J＝2.2Hz,1H),5.11(s,2H),3.90(t,J＝7.3Hz,2H),1.53–1.48(m,4H),1.03(s,6H).实施例6：化合物2的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2,5－二氟苯氧基)2,2-二甲基戊酸(0.408g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.30g， 收率68.6％。ESI-MSm/z:436[M-H]+,438[M+H]+,460[M+Na]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ9.37(s,2H),7.23(ddd,J＝11.1,9.0,5.5Hz,1H),7.02(ddd,J＝10.2,6.9,3.1Hz,1H),6.74(ddd,J＝12.0,6.4,3.2Hz,1H),6.40(d,J＝2.2Hz,2H),6.24(t,J＝3.2Hz,1H),5.09(s,2H),3.90(s,5H),1.54–1.44(m,4H),1.02(s,6H).实施例7：化合物3的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2,5－二氯苯氧基)-2,2-二甲基戊酸(0.441g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.31g，收率68.0％。ESI-MSm/z:454[M-H]+,478[M+Na]+.1HNMR(300MHz,DMSO)δ11.55(s,1H),9.30(s,2H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.16(s,1H),7.01(d,J＝8.4Hz,1H),6.40(s,2H),6.21(s,1H),5.10(s,2H),3.93(s,2H),1.60–1.45(m,4H),1.03(s,6H).实施例8：化合物4的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2,5－二氯苯氧基)2,2-二甲基戊酸(0.441g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.26g，收率55.3％。ESI-MSm/z:468[M-H]+,492[M+Na]+.1HNMR(300MHz,DMSO)δ9.36(s,2H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.16(s,1H),7.01(d,J＝8.4Hz,1H),6.40(s,2H),6.24(s,1H),5.08(s,2H),3.93(s,2H),3.89(s,3H),1.62–1.41(m,4H),1.02(s,6H).实施例9：化合物5的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2-苯基苯氧基)2,2-二甲基戊酸(0.448g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.27g，收率58.3％。ESI-MSm/z:462[M-H]+,464[M+H]+,486[M+Na]+.1HNMR(300MHz,DMSO)δ11.56(s,1H),9.31(s,2H),7.47(d,J＝7.2Hz,2H),7.42–7.25(m,5H),7.02(d,J＝7.6Hz,2H),6.40(d,J＝2.0Hz,2H),6.22(s,1H),5.08(s,2H),3.82(t,J＝4.6Hz,2H),1.51–1.32(m,4H),0.96(s,6H).实施例10：化合物6的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2-苯基苯氧基)2,2-二甲基戊酸(0.441g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.35g，收率73.4％。ESI-MSm/z:476[M-H]+,478[M+H]+,500[M+Na]+.1HNMR(300MHz,DMSO)δ9.36(s,2H),7.47(d,J＝6.8Hz,2H),7.43–7.22(m,5H),7.02(d,J＝7.8Hz,2H),6.39(d,J＝2.1Hz,2H),6.25(d,J＝4.2Hz,1H),5.05(s,2H),3.85(s,3H),3.82(t,J＝5.2Hz,2H),1.50–1.26(m,4H),0.95(s,6H).实施例11：化合物7的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(3-苯基苯氧基)2,2-二甲基戊酸(0.448g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.30g，收率64.8％。ESI-MSm/z:462[M-H]+,464[M+H]+,486[M+Na]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ11.60(s,1H),9.34(s,2H),7.69–7.65(m,2H),7.46(t,J＝7.5Hz,2H),7.40–7.33(m,2H),7.21(d,J＝9.0Hz,1H),7.14(d,J＝4.0Hz,1H),6.92–6.85(m,1H),6.43(d,J＝2.2Hz,2H),6.23(t,J＝2.1Hz,1H),5.12(s,2H),3.89(t,J＝5.2Hz,2H),1.59–1.47(m,4H),1.05(s,6H).实施例12：化合物8的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(3-苯基苯氧基)2,2-二甲基戊酸(0.441g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.30g，收率62.9％。ESI-MSm/z:476[M-H]+,478[M+H]+,500[M+Na]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ9.39(s,2H),7.67(d,J＝7.1Hz,2H),7.46(t,J＝7.5Hz,2H),7.41–7.34(m,2H),7.22(d,J＝9.0Hz,1H),7.17–7.12(m,1H),6.89(dd,J＝8.1,2.5Hz,1H),6.42(d,J＝2.2Hz,2H),6.25(t,J＝2.1Hz,1H),5.10(s,2H),3.89(s,5H),1.57–1.46(m,4H),1.04(s,6H).实施例13：化合物9的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2氧代乙基-5-(2-苄氧基苯氧基)2,2-二甲基戊酸(0.478g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.36g，收率73.0％。ESI-MSm/z:494[M+H]+,516[M+Na]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ11.57(s,1H),9.32(s,2H),7.44(d,J＝6.9Hz,2H),7.37(t,J＝7.2Hz,2H),7.31(t,J＝7.2Hz,1H),7.03(d,J＝7.3Hz,1H),6.96–6.84(m,3H),6.41(d,J＝2.2Hz,2H),6.23(t,J＝2.1Hz,1H),5.11(s,2H),5.07(s,2H),3.83(t,J＝5.5Hz,2H),1.63–1.42(m,4H),1.02(s,6H).实施例14：化合物10的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基-5-(2-苄氧基苯氧基)2,2-二甲基戊酸(0.441g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.32g，收率63.1％。ESI-MSm/z:506[M-H]+,508[M+H]+,530[M+Na]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ9.37(s,2H),7.45(d,J＝8.4Hz,2H),7.37(t,J＝7.2Hz,2H),7.32(d,J＝7.2Hz,1H),7.03(d,J＝7.2Hz,1H),6.89(dd,J＝15.0,8.8Hz,3H),6.41(d,J＝2.2Hz,2H),6.26(t,J＝2.2Hz,1H),5.08(s,2H),5.07(s,2H),3.88(s,3H),3.83(t,J＝6.1Hz,2H),1.54–1.44(m,4H),1.00(s,6H).实施例15：化合物11的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基-5-(2-萘氧基)-2,2-二甲基戊酸(0.478g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.27g，收率61.8％。ESI-MSm/z:436[M-H]+,438[M+H]+,460[M+Na]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ11.58(s,1H),9.34(s,2H),7.81(t,J＝8.0Hz,3H),7.46(t,J＝7.4Hz,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,1H),7.24(s,1H),7.13(d,J＝7.4Hz,1H),6.43(d,J＝2.2Hz,2H),6.25(t,J＝2.2Hz,1H),5.12(s,2H),3.92(t,J＝6.4Hz,2H),1.66–1.39(m,4H),1.06(s,6H).实施例16：化合物12的制备将2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基-5-(2-萘氧基)-2,2-二甲基戊酸(0.478g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.27g，收率61.8％。ESI-MSm/z:450[M-H]+,452[M+H]+,474[M+Na]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ9.39(s,2H),7.81(d,J＝15.2Hz,3H),7.46(t,J＝7.4Hz,1H),7.34(t,J＝7.4Hz,1H),7.24(d,J＝2.2Hz,1H),7.13(d,J＝7.4Hz,1H),6.43(d,J＝2.1Hz,2H),6.27(d,J＝4.2Hz,1H),5.10(s,2H),3.92(t,J＝4.1Hz,2H),3.90(s,3H),1.63–1.41(m,4H),1.05(s,6H).实施例17：化合物13的制备将S-(2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基)5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸(0.457g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.29g，收率61.4％,ESI-MSm/z:473[M-H]+.实施例18：化合物14的制备将S-(2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基)5-(2,5-二氯苯氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸(0.457g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.32g，收率65.7％,ESI-MSm/z:487[M-H]+.实施例19：化合物15的制备将S-(2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基)5-(2-苯基苯氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸(0.464g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无 水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.25g，收率52.2％,ESI-MSm/z:479[M-H]+.实施例20：化合物16的制备将S-(2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基)5-(2-苯基苯氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸(0.464g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.28g，收率56.7％,ESI-MSm/z:494[M-H]+.实施例21：化合物17的制备将S-2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基-5-(2-萘氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸(0.438g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入盐酸羟胺(0.076g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.21g，收率46.3％,ESI-MSm/z:454[M-H]+.实施例22：化合物18的制备将S-2-(3,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基-5-(2-萘氧基)-2,2-二甲基硫代戊酸(0.438g，1.0mmol)溶于甲醇(15mL)中，室温搅拌下加入甲氧基胺盐酸盐(0.100g,1.0mmol)和无水乙酸钠(0.090g,1.2mmol)，加毕后60℃反应3h。旋出溶剂，加入乙酸乙酯(25mL)萃取，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤后滤液经硅胶柱层析分离纯化，得目标化合物0.25g，收率53.4％,ESI-MSm/z:468[M-H]+.实施例23：FXR拮抗活性测试实验过程：所用试剂材料供应商如下：试剂材料供应商货号FXR-LBD(GST)InvitrogenPV4835Streptavidin-XL665-5,000testscisbio610SAXLAMAbAntiGST-K-5,000testscisbio61GSTKLASRC1GL-TritonX-100BeyotimeST795KFSigma60240-250GSodiumMolybdateSigmaM1003-100GUltrapure1MTris-HClpH7.5invitrogen15567-0270.5MEDTApH8.0invitrogen15575-020GlycerolFLUKA49780-1LDTTShenggongDB00581.基本缓冲液的配制注：以下实验中，mM为mmol/L，μM为μmol/L，nM为μmol/L。a.准备20mL1x基本缓冲液，混合后待用。缓冲液详细列表如下：材料终浓度(mM)Tris-HCl20EDTA1glycerol10％TritonX-1000.0025％KF400BSA0.01％SodiumMolybdate10DTT5H2O补足到20ml2.化合物溶液的配制a.对于对照化合物Z-guggulsterone(简称GS)，先用100％DMSO稀释成30mM母液，然后按3倍稀释到所需终浓度。b.对于待检测化合物，先用100％DMSO稀释成20mM母液，然后按3倍稀释到所需终浓度。c.对于激活化合物GW4064，用100％DMSO稀释成520μM母液，然后加5nL到384孔板各孔中(不包括低值孔)待用，其终浓度达到130nM。3.1x蛋白混合液的配制a.按每孔需要10μL溶液计算，首先用1x基本缓冲液准备2xFXR-LBD/EuAnti-GST蛋白溶液，使GST-FXR-LBD蛋白溶液终浓度达到3nM。详表如下：材料终浓度(mM)GST-FXR-LBD3EuAnti-GST(nl)50nl/孔b.按每孔需要10μL溶液计算，首先用1x基本缓冲液准备2xFXRBiotin-SRC1/SA-APC多肽溶液，使SRC1多肽溶液终浓度达到500nM。详表如下：材料终浓度(mM)Biotin-Peptide500SA-APC50nl/孔c.把以上两种2xGST-ER/EuAnti-GST溶液和2xpeptide/SA-APC溶液按体积1：1混合均匀，待用。d.将1x蛋白混合溶液加入384孔板每个孔，每孔加20μL。e.将384孔板放入离心机室温1000转离心10秒，取出。f.将384孔板在室温放置3小时后读数。4.TR-FRETassay读数将384板放入EnVision多功能酶标仪读数。5.结果处理a.读数665nm和615nm值，并以615nm值做校正值，最终数值表示为665nm值/615nm值。b.计算抑制率(％)根据以下公式计算抑制率(％)X是每个浓度的“665nm值比615nm值”。Min是只加DMSO的空白对照孔的“665nm值比615nm值”平均值。Max是只加激活化合物和DMSO的高信号对照孔的“665nm值比615nm值”平均值。实验结果：实验结果见表格，其中本课题组前期研究发现的候选降脂药物-编号为SIPI-7623(专利CN102838505A中的化合物5)化合物的IC50为52uM，本发明化合物体外拮抗FXR活性好于对比化合物。实施例24：片剂的制备处方：用量化合物150mg微晶纤维素250mg交联聚乙烯吡咯烷酮50mg预胶化淀粉100mg硬脂酸镁5mg制备方法：按上述配方，将粉碎过筛后的化合物1、微晶纤维素、预胶化淀粉和交联聚乙烯吡咯烷酮均匀混合，然后与5％乙醇溶液混合，制粒、干燥，之后再与润滑剂混合，压片即可。其中，所述的化合物粉碎过筛为过60目筛；所述的微晶纤维素、预胶化淀粉和交联聚乙烯吡咯烷酮粉碎过筛为过80目筛；所述的制粒的颗粒粒径大小为20目；所述的干燥的温度较佳的为90℃控制水分质量百分比3％以内。实施例25：胶囊的制备制备方法：按上表配方，将药物与辅料各原料混匀，填充至胶囊壳中即可。实施例26：注射剂制备制备方法：按上述配方，使用乳钵，将化合物或其盐与润湿剂研磨混合均匀，然后与助悬剂、防腐剂和注射用水均匀混合，再研磨即可。其中，所述的研磨的颗粒大小为0.5μm。实施例27：降血脂药效学研究试剂及批号猪油市售胆固醇上海蓝季科技发展有限公司批号：090720丙基硫氧嘧啶上海蓝季科技发展有限公司批号：090505脱氧胆酸上海蓝季科技发展有限公司批号：090615吐温80CP国药集团化学试剂有限公司批号：F200905071,2-丙二醇国药集团化学试剂有限公司AR批号：T20070125方法脂肪乳剂制备方法：取猪油25g，放在200mL的烧杯里，放在煤气灶上加热,待温度升到100℃时,加入10g胆固醇,溶化,再加入1g丙硫氧嘧啶,充分搅匀,然后加入25mL吐温80,制成油相。同时在另一烧杯中加入30mL蒸馏水和1,2－丙二醇20mL,放在水浴锅中加热至60℃,然后加入2g脱氧胆酸钠,充分搅拌直到完全溶解,制成水相。然后将水相加入油相,充分混匀,即制成脂肪乳剂。大鼠适应性喂养3天，根据体重进行分组，每组6只：分出6只作为空白对照组(Control)，其余大鼠每天上午9:00-11:00灌胃脂肪乳，1mL/100g体重，连续灌胃2周。再根据体重将给予脂肪乳剂的大鼠分为高脂模型组(Model)、阳性药组和测试药组。所有高脂模型组(Model)、阳性药组和测试药组的大鼠在给药测试期间，均同时继续灌胃脂肪乳剂，同时，阳性药组给予辛伐他汀(Sim，10mg/kg)和SIPI-7623(80mg/kg)，测试药组给予剂量分别为80mg/kg及20mg/kg的本发明的化合物1，高脂模型组给予等体积溶剂。于分组当日开始口服给药，每天下午3:00-4:00给药一次。每周一称量体重，观察大鼠情况。连续给药14天，大鼠禁食12小时，眼眶采血1mL。进行血脂测定。采用日立自动生化分析仪7080测定实验大鼠血清中的胆固醇(简称：TC)、甘油三酯(简称：TG)、高密度脂蛋白(简称HDL-C)和低密度脂蛋白(简称LDL-C)，测试结果分别见图1、图2、图3及图4。图中，**代表统计学P<0.01，***代表统计学P<0.001。图1-4显示是本发明的化合物1的降血脂药效学研究的实验结果。实验选用正常大鼠作为空白对照，并通过对大鼠进行持续用脂肪乳进行灌胃，建立高脂大鼠模型。阳性药物选取降脂药-辛伐他汀(Simvastatin，简称Sim)以及本研究课题组前期研究中发现的候选 降脂药物-编号为SIPI-7623(专利CN102838505A中的化合物5)，测定了化合物1对于高脂大鼠的降血脂药效。图1、图2、图3及图4的实验结果显示化合物7在高脂大鼠模型中可显著降低大鼠血脂。实验结果显示了化合物1口服给药80mg/kg时具有明显降血脂效果，在给药80mg/kg时降低血浆TC、TG和LDL-C的效果明显优于本研究课题组前期研究中发现的候选降脂药物-编号为SIPI-7623的化合物；口服给药20mg/kg时降低血浆TC、TG和LDL-C的效果与口服给药80mg/kgSIPI-7623相当。当前第1页1 2 3