基质金属蛋白酶7(MMP‑7)聚集体的单体化方法与流程

文档序号:12140356阅读:来源:国知局

技术特征:

1. 基质金属蛋白酶7(MMP-7)聚集体的单体化方法,所述方法包括用包含130 mM或更低的单价阳离子化合物的溶液或用不包含单价阳离子化合物的溶液处理MMP-7聚集体。

2. 根据权利要求1的单体化方法,其中用包含130 mM或更低的单价阳离子化合物的溶液处理所述MMP-7聚集体。

3.根据权利要求1的单体化方法,其中用不包含单价阳离子化合物的溶液处理所述MMP-7聚集体。

4. 根据权利要求1或2的单体化方法,其中所述单价阳离子化合物是100 mM或更低。

5. 根据权利要求1、2或4的单体化方法,其中所述单价阳离子化合物是80 mM或更低。

6. 根据权利要求1、2、4或5的单体化方法,其中所述单价阳离子化合物是40 mM或更低。

7.根据权利要求1、2、4、5或6的单体化方法,其中所述单价阳离子化合物选自氯化钠、氯化钾、硫酸钠、硫酸钾、碳酸钠、碳酸钾、磷酸钠和磷酸钾。

8.根据权利要求1、2、4、5或6的单体化方法,其中所述单价阳离子化合物来自单价阳离子氯化物。

9.根据权利要求8的单体化方法,其中所述单价阳离子化合物选自氯化钠和氯化钾。

10.根据权利要求1-9中任一项的单体化方法,其中所述溶液还包含氯化钙。

11. 根据权利要求10的单体化方法,其中所述氯化钙是30 mM或更低。

12.根据权利要求1-11中任一项的单体化方法,其中所述溶液是缓冲溶液。

13. 根据权利要求12的单体化方法,其中所述缓冲溶液是5-25 mM Tris缓冲液。

14. 根据权利要求1-13中任一项的单体化方法,其中所述MMP-7是20 mg/ml或更低。

15. 根据权利要求13或14的单体化方法,其中所述溶液是包含30-40 mM氯化钠和5-30 mM氯化钙的5-25 mM Tris缓冲液(pH 6-8)。

16.根据权利要求1-15中任一项的单体化方法,其中所述溶液还包含糖醇和/或糖。

17.根据权利要求16的单体化方法,其中所述糖醇和/或糖选自蔗糖、乳糖、麦芽糖、木糖、海藻糖、甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、拉克替醇和寡糖醇。

18.根据权利要求16或17的单体化方法,其中所述糖醇和/或糖是2%或更高。

19.根据权利要求18的单体化方法,其中所述糖醇和/或糖是2-7%。

20.根据权利要求17-19中任一项的单体化方法,其中所述糖醇和/或糖是甘露糖醇或蔗糖。

21.根据权利要求20的单体化方法,其中所述甘露糖醇是2-5%和所述蔗糖是2-7%。

22. MMP-7的制备方法,所述方法包括由权利要求1-21中任一项所述的单体化方法组成的步骤。

23. 权利要求22的制备方法,其中所述步骤在使用包含130 mM或更高的单价阳离子化合物的溶液处理的步骤后进行。

24.权利要求22或23的制备方法,其中所述方法包括以下步骤(1)-(5):

(1) 破裂产生proMMP-7包涵体的细胞的步骤;

(2) 溶解/重折叠处理proMMP-7包涵体的步骤;

(3) 纯化proMMP-7的步骤;

(4) proMMP-7自活化成MMP-7的步骤;和

(5) 由权利要求1-21中任一项所述的单体化方法组成的步骤。

25.根据权利要求24的制备方法,其中所述步骤(5)是使用超滤膜浓缩的步骤。

26. 包含基质金属蛋白酶7 (MMP-7)的(药物)组合物,其在包含130 mM或更低的单价阳离子化合物的溶液中或在不包含单价阳离子化合物的溶液中包含MMP-7作为活性成分。

27. 根据权利要求26的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述组合物在包含130 mM或更低的单价阳离子化合物的溶液中包含MMP-7作为活性成分。

28.根据权利要求26的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述组合物在不包含单价阳离子化合物的溶液中包含MMP-7作为活性成分。

29.根据权利要求26或27的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述单价阳离子化合物选自氯化钠、氯化钾、硫酸钠、硫酸钾、碳酸钠、碳酸钾、磷酸钠和磷酸钾。

30.根据权利要求26或27的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述单价阳离子化合物来自单价阳离子氯化物。

31.根据权利要求30的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述单价阳离子化合物选自氯化钠和氯化钾。

32.根据权利要求26-31中任一项的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述组合物还包含氯化钙。

33. 根据权利要求32的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述氯化钙是30 mM或更低。

34.根据权利要求26-33中任一项的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述溶液是缓冲溶液。

35. 根据权利要求34的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述缓冲溶液是5-25 mM Tris缓冲液。

36. 根据权利要求26-35中任一项的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述MMP-7是20 mg/ml或更低。

37. 根据权利要求36的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述MMP-7是1 μg/ml-1 mg/ml。

38. 根据权利要求35、36或37的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述溶液是包含30-40 mM氯化钠和5-30 mM氯化钙的5-25 mM Tris缓冲液(pH 6-8)。

39.根据权利要求26-38中任一项的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述溶液还包含糖醇和/或糖。

40.根据权利要求39的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述糖醇和/或糖选自蔗糖、乳糖、麦芽糖、木糖、海藻糖、甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、拉克替醇和寡糖醇。

41.根据权利要求39或40的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述糖醇和/或糖是2%或更高。

42.根据权利要求41的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述糖醇和/或糖是2-7%。

43.根据权利要求40-42中任一项的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述糖醇和/或糖是甘露糖醇或蔗糖。

44.根据权利要求43的包含MMP-7的(药物)组合物,其中所述甘露糖醇是2-5%和所述蔗糖是2-7%。

45.包含MMP-7的固体(药物)组合物,其中所述组合物可在溶剂中溶解,和所述组合物在溶解时是权利要求26-44中任一项所述的组合物。

46.治疗椎间盘移位的药剂,其包含权利要求26-45中任一项所述的包含MMP-7的(药物)组合物。

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