本公开涉及新化学实体和该实体作为trk抑制剂的用途。
背景技术：
trk是由神经营养因子(nt)激活的高亲和力酪氨酸激酶受体。trk受体家族有三个成员：trka、trkb和trkc。神经营养因子是一组可溶性生长因子，激活trka的神经生长因子(ngf)，激活trkb的脑源性神经营养因子(bdnf)和nt-4/5以及激活trkc的神经营养因子-3(nt3)。trk在神经组织中广泛表达，并且参与神经元细胞的维持、信号转导和存活(patapoutian,a.等人，currentopinioninneurobiology,2001,11,272-280)。
已证明trk/神经营养因子通路的抑制剂在许多疼痛的临床前动物模型中是有效的。已证明拮抗ngf和trka抗体在炎性和神经性疼痛动物模型和在人类临床试验中是有效的。(woolf,c.j.等人，neuroscience1994,62,327-331；zahn,p.k.等人，j.pain2004,5,157-163；mcmahon,s.b.等人，nat.med.1995,1,774-780；ma,q.p.和woolf,c.j.neuroreport1997,8,807-810；shelton,d.l.等人，pain2005,116,8-16；delafoy,l.等人，pain2003,105,489-497；lamb,k.等人，neurogastroenterol.motil.2003,15,355-361；jaggar,s.i.等人，br.j.anaesth.1999,83,442-448.)
已证实肿瘤细胞和肿瘤侵袭的巨噬细胞分泌的ngf直接刺激位于外周疼痛纤维上的trka。在小鼠和大鼠二者中使用各种肿瘤模型，证实了用单克隆抗体中和ngf抑制癌症相关的疼痛达到相似于或优于最高耐受剂量的吗啡的程度。bdnf/trkb通路的激活作为包括炎性疼痛(matayoshi,s.,j.physiol.2005,569:685-695)、神经性疼痛(thompson,s.w.proc.natl.acad.sci.usa1999,96:7714-7718)和手术疼痛(li,c.-q.等人，molecularpain,2008,4(28),1-11)的各种类型疼痛的调节剂参与了许多研究。因为trka和trkb激酶可充当ngf驱动的生物反应的介体，因此trka和/或其它trk激酶的抑制剂可以为慢性疼痛状态提供有效的治疗。
如通过在神经母细胞瘤(brodeur,g.m.nat.rev.cancer2003,3,203-216)、卵巢癌(kruettgen等人，brainpathology2006,16:304-310)、前列腺癌(dionne等人，clin.cancerres.1998,4(8),1887-1898)、胰腺癌(dang等人，jofgastroenterologyandhepatology2006,21(5),850-858)、大细胞神经内分泌肿瘤(marchetti等人，humanmutation2008,29(5),609-616)和结肠直肠癌(bardelli,a.science2003,300,949)上进行的研究观察到的，trk激酶的过表达、激活、扩增和/或突变与几种癌症之间的关系，支持有效的trk抑制剂的治疗意义可能远远超出疼痛疗法的推论。在癌症的临床前模型中，trka、b和c的非选择性小分子抑制剂在抑制肿瘤生长和阻止肿瘤转移二者中均有效(nakagawara,a.cancerletters2001,169:107-114；meyer,j.等人，leukemia2007,1-10；pierottia,m.a.和grecoa.cancerletters,2006,232:90-98；ericadriaenssens,e.等人，cancerres2008,68(2),346-351)。
此外，已证实神经营养因子/trk通路的抑制在治疗包括哮喘的炎性肺病(freund-michel,v.等人，pharmacology&therapeutics2008,117(1),52-76)、间质性膀胱炎(huviviany等人，thejournalofurology2005,173(3),1016-1021)、炎性肠病包括溃疡性结肠炎和克罗恩氏病(dimola,f.f,等人，gut2000,46(5),670-678)和炎性皮肤病如特应性皮炎(dou,y.c.等人，archivesofdermatologicalresearch2006,298(1),31-37)、湿疹和牛皮癣(raychaudhuri,s.p.等人，j.investigativedermatology2004,122(3),812-819)中是有效的。
也已证实神经营养因子/trk通路的调控对病因学神经退行性疾病包括多发性硬化症、帕金森氏病和阿尔茨海默氏病有影响(sohrabji,f.等人，neuroendocrinology2006,27(4),404-414)。
最近的文献已经确定了在携带编码高亲和力神经生长因子受体-trka蛋白的ntrk1基因的激酶结构域的肺癌患者中的新基因融合(vaishnavi,a.等人，naturemedisine2013,19(11),1469-1472)。
提供上述信息作为用于理解本发明的特征的背景，并不构成对现有技术的承认。
技术实现要素：
本申请公开了新的化学实体。这些新的化学实体可用作trk抑制剂，并被认为可用于治疗多种类型的急性和慢性疼痛，包括但不限于炎性疼痛、神经性疼痛和与癌症、手术和骨折相关的疼痛。这些化合物也被认为可用于治疗癌症、炎症、神经退行性疾病和某些传染性疾病。
本发明的一个方面提供式i化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物，多晶型物，酯，互变异构体或前药：
在一些实施方案中，式i的r1是任选被一个或多个取代基取代的苯环或任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，其中所述一个或多个取代基独立地选自卤素、-cf3、-chf2、nh2、羟基、线性c1-c4烷基、支链c1-c4烷基、线性c1-c4烷氧基和支链c1-c4烷氧基。此外，在式i中，r2选自氢、线性c1-c4烷基和支链线性c1-c4烷基。此外，在式i中，x选自-ch2-、-ch2ch2-、-ch2o-、-ch2nh-、-ch2n(c1-c4烷基)-、-ch(f)-、-cf2-、-ch(cl)-、-ch(oh)-、-ch(och3)-、-ch(nh2)-或-c(ch3)2-。此外，在式i中，q选自-ch＝cr3c(o)nr4r5、-ch＝cr3nr4c(o)r5、-ch＝cr3nr4c(o)nr4r5、-ch＝cr3r5、-c≡cc(o)nr4r5、-c≡ccr5和
在式i的q中，r3选自氢、卤素、线性c1-c6烷基和支链c1-c6烷基。在式i的q中，-nr4r5形成4-7元杂环或不形成环结构，杂环为杂芳基环或杂环烷基环。当-nr4r5形成4-7元杂环时，4-7元杂环包括除-nr4r5的氮之外的任选的第二杂原子，并且任选地被一个或多个独立地选自线性c1-c6烷基、支链c1-c6烷基、羟基、羧酸、线性c1-c4烷基羧酸和支链c1-c4烷基羧酸支化的取代基取代。当-nr4r5不形成环结构时，r4选自氢、线性c1-c6烷基和支链c1-c6烷基，且r5选自氢、任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的线性c1-c6烷基、任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的支链c1-c6烷基和任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的c1-c6环烷基。此外，在式i的q中，y1、y2、y3和y4各自独立地选自-ch、n、o、s、-cr6和-nr6，其中r6选自氢、线性c1-c4烷基、支链c1-c4烷基、5-6元芳基环、5-6元杂芳基环、3-7元杂环烷基环、3-7元环烷基环、-nhco-(芳基环)和-ch2co-(c3-c6元杂环)。
在其它实施方案中，式i的r1是任选被一个或多个独立地选自卤素、羟基、线性c1-c4烷基、支链c1-c4烷基、线性c1-c4烷氧基和支链c1-c4烷氧基的取代基取代的6-元芳基环或杂芳基环。此外，在式i中，r2是氢、线性c1-c4烷基或支链线性c1-c4烷基；且x是-ch2-、-ch2ch2-、-ch2o-或-ch(z)-，其中z是卤素；且q是-ch＝cr3c(o)nr4r5、-c≡cc(o)nr4r5或
此外，在式i的q中，r3是氢或卤素。此外，在式i的q中，-nr4r5形成4-7元杂环或不形成环结构，且杂环为杂芳基环或杂环烷基环。当-nr4r5形成4-7元杂环时，4-7元杂环包括除-nr4r5的氮之外的任选的第二杂原子，并且任选地被一个或多个独立地选自线性c1-c6烷基、支链c1-c6烷基、羟基、羧酸、线性c1-c4烷基羧酸和支链c1-c4烷基羧酸支化的取代基取代。当-nr4r5不形成环结构时，r4选自氢、线性c1-c6烷基和支链c1-c6烷基，且r5选自氢、任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的线性c1-c6烷基、任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的支链c1-c6烷基和任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的c1-c6环烷基。在式i的q中，y1、y2、y3和y4各自独立地选自-ch、n、o、s、-cr6和-nr6，其中r6选自氢、线性c1-c4烷基、支链c1-c4烷基、5-6元芳基环、5-6元杂芳基环、3-7元杂环烷基环、3-7元环烷基环、-nhco-(芳基环)和-ch2co-(c3-c6元杂环)。
在上述式i化合物中，r1是被一个或多个可独立地选自氟、甲氧基和乙氧基的取代基取代的苯环；r2和r3是h；r5可选自h、甲基、乙基、异丙基、环丙基、叔丁基、甲氧基乙基和羟乙基。在式i的化合物中，r1可以是被选自氟和甲氧基中的至少一个取代的吡啶环；r2和r3是h；r5可选自h、甲基、乙基、异丙基、环丙基、叔丁基、甲氧基乙基和羟乙基。在式i的化合物中，r1可以是任选被一个或多个独立地选自卤素和c1-c4烷基的取代基取代的吡啶-2-酮-3-基环。
在式i的化合物中，当-nr4r5不形成环结构时，r4选自氢、线性c1-c6烷基和支链c1-c6烷基，且r5选自线性c1-c6氟烷基、支链c1-c6氟烷基、线性c1-c6二氟烷基、支链c1-c6二氟烷基、线性c1-c6三氟烷基、支链c1-c6三氟烷基、线性c1-c6羟基烷基、支链c1-c6羟基烷基、线性c2-c6二氟烷基和支链c2-c6二氟烷基。在式i的化合物中，形成4-7元杂环的-nr4r5可以是4-7元杂环烷基环。在式i的化合物中，当-nr4r5形成4-7元杂环时，4-7元杂环中的第二杂原子可选自氮、氧和硫。
式i的化合物是式ii的化合物：
式i的化合物是式iii的化合物：
式i的化合物是式iv的化合物：
式i的化合物的盐可选自乙酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、酸式酒石酸盐、溴化物、碳酸盐、氯化物、依地酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、碘化物、乳酸盐、乳糖醛酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴、硫酸二甲酯、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、水杨酸盐、双水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三乙基碘、三氟乙酸盐和戊酸盐。
本发明的另一方面提供了一种治疗或预防选自甲状腺乳头状癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌、乳腺癌、神经母细胞瘤、疼痛、恶病质、皮炎和哮喘的trk介导的疾病的方法。该方法包括向需要这种治疗的受试者施用药学上有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明的另一方面提供了一种抑制trk酶的方法。该方法包括向需要这种抑制的受试者施用药学上有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐。
具体实施方式
本发明的新特征特别地在所附权利要求中阐述。通过参照以下阐述其中利用本发明的原理的例示性实施方案的详细描述，将获得本发明的特征和优点的更好地理解。虽然本文已经示出和描述了本发明的一些实施方案，但这种实施方案仅通过实施例来提供。应当理解，本文所述的本发明的实施方案的各种替代方案可用于实施本发明。本领域普通技术人员将理解，在不脱离本发明的情况下，许多变化、改变和替换是可能的。以下权利要求旨在限定本发明的各方面的范围，并且由此包括这些权利要求及它们的等同物的范围内的方法和结构。
本文使用的部分标题仅为了组织目的，并且不应被解释为限制所描述的主题。申请中引用的所有文献或文献的部分，包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、手册和论文，均为了任何目的而通过引用它们的全部内容明确地并入本文。
定义
除非另外定义，否则在此使用的所有技术和科学术语具有与由要求保护的主题所属领域的技术人员通常所理解的相同的含义。除非另有说明，否则所有专利、专利申请、本文的整个披露中提及的公开材料通过引用它们的全部内容并入本文。在本文的术语有多个定义的情况下，以本部分的那些定义为准。在对url或其它这样的标识符或地址进行参考的情况下，应当理解，这种标识符可变化，并且因特网上的特定信息可变化不定，但可通过搜索因特网或其它适当的参考源来获悉等同的信息。对其的参考证实了这种信息的可用性和公共传播。
应当理解，上述一般描述和以下详细描述仅是示例性和解释性的，并不限制要求保护的任何主题。在本申请中，除非另有特别说明，单数的使用包括复数。必须注意，如说明书和所附权利要求书中所用的，单数形式“一”和“所述”包括复数指示物，除非上下文另有明确规定。还应注意，除非另有说明，否则“或”的使用表示“和/或”。此外，术语“包含”及其其它形式的使用并不是限制性的。同样地，术语“包括”及其其它形式的使用并不是限制性的。
标准化学术语的定义可在参考著作中获悉，包括carey和sundberg“advancedorganicchemistry第四版。”卷a(2000)和b(2001)，plenumpress，纽约。除非另有说明，否则采用本领域技术范围内的常规的质谱、nmr、hplc、ir和uv/vis光谱学和药理学方法。除非提供具体定义，否则结合本文所述的分析化学、合成有机化学以及药用和药物化学的实验室程序和技术使用的命名法是本领域已知的。标准技术可用于化学合成、化学分析、药物制备、制剂和递送以及患者的治疗。可例如，使用制造商规格或本领域通常实现的或本文所述的试剂盒进行反应和纯化技术。上述技术和程序通常可用本领域熟知的和如遍及整个本说明书引用和讨论的各种一般和更具体的参考文献中描述的常规方法进行。遍及整个说明书，本领域技术人员可选择其基团和取代基，以提供稳定的部分和化合物。
在取代基由它们的从左至右书写的常规化学式指定的情况下，它们同样包含从右至左书写的结构产生的化学上相同的取代基。作为非限制性实例，ch2o等同于och2。除非另有说明，一般化学术语例如但不限于“烷基”、“胺”、“芳基”的使用等同于它们的任意取代的形式。例如，如本文所用，“烷基”包括任选取代的烷基。
本文提供的化合物可具有一个或多个立体中心，并且每个中心可以r或s构型或它们的组合的形式存在。同样地，本文给出的化合物可具有一个或多个双键并且各自可以e(反式)或z(顺式)构型或它们的组合的形式存在。一个特定的立体异构体、区域异构体、非对映异构体、对映异构体或差向异构体的呈现应理解为包括所有可能的立体异构体、区域异构体、非对映异构体、对映体或差向异构体及它们的混合物。因此，本文提供的化合物包括所有单独的构型立体异构、区域异构、非对映异构、对映异构和差向异构形式以及它们相应的混合物。用于反转或保留特定立体中心不变的技术以及用于拆分立体异构体的混合物的技术在本领域中是公知的，并且完全在本领域技术人员在为特定情况选择适当方法的能力的范围内。参见，例如，fumiss等人(编辑)，vogel'sencyclopediaofpracticalorganicchemistry5.sup.thed.,longmanscientificandtechnicalltd.,essex,1991,809-816；和heller,acc.chem.res.1990,23,128。
术语“键”或“单键”是指两个原子之间或当通过键连接的原子被认为是较大子结构的一部分时两个部分之间的化学键。
术语“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，并且该描述包括其中所述事件或情况发生的实例以及其中它不发生的实例。例如，“任选取代的烷基”是指如下定义的“烷基”或“取代的烷基”。此外，任选取代的基团可以是未取代的(例如，ch2ch3)、完全取代的(例如，cf2cf3)、单取代的(例如，ch2ch2f)或在完全取代和单取代之间以任意程度取代的(例如，ch2chf2、cf2ch3、cfhchf2等)。本领域技术人员应当理解，对于包含一个或多个取代基的任何基团，这种基团不意图引入空间上不切实际的和/或合成上不可行的任何取代或取代模式(例如，取代的烷基包括任选取代的环烷基，其又被定义为包括任选取代的烷基，潜在地循环往复)。因此，所描述的任何取代基通常应理解为具有约1,000道尔顿，更典型地高达约500道尔顿的最大分子量(除了在其中明确地意指大分子取代基的那些情况之外，例如多肽、多糖、聚乙二醇、dna、rna等)。
如本文所用，c1-cn包括c1-c2、c1-c3、...c1-cn。仅举例来说，指定为“c1-c4”的基团表示该部分中有1至4个碳原子，即包含1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子或4个碳原子的基团，范围c1-c2和c1-c3亦相同。因此，仅举例来说，“c1-c4烷基”表示烷基中有1至4个碳原子，即烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。无论它在本文何时出现，诸如“1至10”的数值范围是指在给定范围内的各个整数；例如“1至10个碳原子”意指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子、6个碳原子、7个碳原子、8个碳原子、9个碳原子或10个碳原子。
如本文所用，术语“杂原子”或“杂”单独或组合地是指除碳和氢以外的原子。杂原子独立地选自氧、氮、硫、磷、硅、硒和锡，但不限于这些原子。当存在两个或多个杂原子时，两个或多个杂原子可彼此相同，或者两个或多个杂原子中的一些或全部可彼此不同。
如本文所用，术语“烷基”单独或组合地是指具有1至约10个碳原子，更优选1至6个碳原子的任选取代的直链或任选取代的支链饱和烃单价基。示例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、2-甲基-l-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-l-丁基、3-甲基-l-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-l-丙基、2-甲基-l-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-l-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-l-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-l-丁基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基和己基以及诸如庚基、辛基等的较长烷基基团。无论它在本文何时出现，诸如“c1-c6烷基”或“c1_6烷基”的数值范围意指烷基可由1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子，5个碳原子或6个碳原子组成，尽管本定义还包括其中没有指定数值范围的术语“烷基”的出现。
如本文所用，术语“亚烷基”单独或组合地是指衍生自上述定义的单价基-烷基的双基(diradical)。实例包括但不限于亚甲基(-ch2)、亚乙基(-ch2ch2)、亚丙基(-ch2ch2ch2)、异亚丙基(-ch(ch3)ch2)等。
如本文所用，术语“烯基”单独或组合地是指具有一个或多个碳-碳双键并且具有2至约10个碳原子更优选2至约6个碳原子的任选取代的直链或任选取代的支链烃单价基。该基团可以是关于双键的顺式或反式构象，并且应当理解为包括两种异构体。实例包括但不限于乙烯基(ch＝ch2)、1-丙烯基(ch2ch＝ch2)、异丙烯基[c(ch3)＝ch2]、丁烯基、1,3-丁二烯基等。无论它在本文何时出现，诸如“c2-c6烯基”或“c2_6烯基”的数值范围意指烯基可由2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子，5个碳原子或6个碳原子组成，尽管本定义还包括其中没有指定数值范围的术语“烯基”的出现。
如本文所用，术语“炔基”单独或组合地是指具有一个或多个碳-碳三键并且具有2至约10个碳原子更优选2至约6个碳原子的任选取代的直链或任选取代的支链烃单价基。实例包括但不限于乙炔基、2-丙炔基、2-丁炔基、1,3-丁二炔基等。无论它在本文何时出现，诸如“c2-c6炔基”或“c2_6炔基”的数值范围意指炔基可由2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子，5个碳原子或6个碳原子组成，尽管本定义还包括其中没有指定数值范围的术语“炔基”的出现。
如本文所用，术语“脂肪族”单独或组合地是指任选取代的直链或支链、非环状、饱和、部分不饱和或完全不饱和的非芳族烃。因此，该术语包括烷基、烯基和炔基全体。
如本文所用，术语“杂烷基”、“杂烯基”和“杂炔基”单独或组合地是指分别如上所述的任选取代的烷基、烯基和炔基结构，其中一个或多个骨架链碳原子(和任何相关的氢原子，视情况而定)各自独立地被杂原子(即除碳之外的原子，例如但不限于氧、氮、硫、硅、磷、锡或它们的组合)取代。
如本文所用，术语“卤代烷基”、“卤代烯基”和“卤代炔基”单独或组合地是指分别如上定义的任选取代的烷基、烯基和炔基，其中一个或多个氢原子被氟、氯、溴或碘原子或它们的组合取代。当两个或多个氢原子可被彼此相同的卤素原子取代时(例如，二氟甲基)。当两个或多个氢原子可被彼此不完全相同的卤素原子取代时(例如，1-氯-1-氟-1-碘乙基)。卤代烷基的非限制性实例是氟甲基和溴乙基。卤代烯基的非限制性实例是溴乙烯基。卤代炔基的非限制性实例是氯乙炔基。
如本文所用，术语“环”、“环状”和“元环”单独或组合地是指本文描述的任何共价闭环结构，包括脂环族、杂环、芳香族、杂芳族和多环稠合或非稠环体系。环可任选地被取代。环可形成稠环系统的一部分。术语“元”意图是指构成环的骨架原子的数目。因此，仅举例来说，环己烷、吡啶、吡喃和嘧啶为六元环，且环戊烷、吡咯、四氢呋喃和噻吩为五元环。
如本文所用，术语“稠合”单独或组合地是指其中两个或多个环共享一个或多个键的环状结构。
如本文所用，术语“环烷基”单独或组合地是指包含3至约15个环碳原子或3至约10个环碳原子的任选取代的饱和烃单价环，尽管可包括另外的非环碳原子作为取代基(例如，甲基环丙基)。
“环烷基”的非限制性实例包括吖嗪基、氮杂环丁烷基(azetidinyl)、氧杂环丁烷基(oxetanyl)、硫杂环丁烷基(thietanyl)、高哌啶基(homopiperidinyl)、氧杂环庚烷基(oxepanyl)、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、氧氮杂环庚烷基(oxazepinyl)、二氮杂环庚烯基(diazepinyl)、硫杂环庚烯基(thiazepinyl)、1,2,3,6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、2h-吡喃基、4h-吡喃基、二氧杂环乙烷基(dioxanyl)、1,3-二氧戊环基(1,3-dioxolanyl)、吡唑啉基、二噻烷基(dithianyl)、二硫戊环基(dithiolanyl)、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、3-氮杂二环[4.1.0]庚基、3h-吲哚基和喹嗪基(quinolizinyl)等。术语还包括碳水化合物的所有环形式，包括但不限于单糖、二糖和寡糖。
如本文所用，术语“芳香族”是指具有包含4n+2n电子的离域的at-电子体系的平面、环状或多环的环部分，其中n是整数。芳香族环可由五个、六个、七个、八个、九个或大于九个原子形成。芳香族化合物可任选地被取代，并且可以是单环或稠环多环。术语芳香族包括全是碳的环(例如，苯基)和包含一个或多个杂原子的那些环(例如，吡啶)。
如本文所用，术语“芳基”单独或组合地是指任选取代的具有6至约20个环碳原子的芳香族烃基，并且包括稠合和非稠合芳环。稠合芳环基团包含2至4个稠环，其中连接环是芳环，且其它单个环可以是脂环族、杂环、芳香族、杂芳香族或它们的任何组合。此外，术语芳基包括含有6个至约12个环碳原子的稠合和非稠合环，以及含有6个至约10个环碳原子的稠合和非稠合环。单环芳基的非限制性实例包括苯基；稠环芳基包括萘基、菲基、蒽基、薁基；且非稠合双芳基包括联苯基。
如本文所用，术语“杂芳基”单独或组合地是指含有约5至约20个骨架环原子的任选取代的芳族单价基，其中一个或多个环原子是独立地选自氧、氮、硫、磷、硅、硒和锡的杂原子，但不限于这些原子，且条件是所述基团的环不包含两个相邻的o或s原子。当在环中存在两个或多个杂原子时，两个或多个杂原子可彼此相同，或者两个或多个杂原子中的一些或全部可彼此不同。术语杂芳基包括具有至少一个杂原子的任选取代的稠合和非稠合杂芳基。术语杂芳基还包括具有5至约12个骨架环原子的稠合和非稠合杂芳基，以及具有5至约10个骨架环原子的那些。与杂芳基键合可通过碳原子或杂原子。因此，作为非限制性实例，咪唑基可通过其任何碳原子(咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基)或其氮原子(咪唑-1-基或咪唑-3-基)附接至母体分子。同样地，可通过杂芳基的任何或全部碳原子，和/或其任何或全部杂原子将杂芳基进一步取代。稠合的杂芳基可包含2至4个稠合环，其中连接环是杂芳族环，且其它单个环可以是脂环族、杂环、芳香族，杂芳香族或它们的任何组合。单环杂芳基的非限制性实例包括吡啶基；稠环杂芳基包括苯并咪唑基、喹啉基、吖啶基；并且非稠合双杂芳基包括联吡啶基。杂芳基的其它实例包括但不限于呋喃基、噻吩基、噁唑基、吖啶基、吩嗪基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噻吩基、苯并噁二唑基、苯并三唑基、咪唑基、吲哚基、异噁唑基、异喹啉基、吲嗪基、异噻唑基、异吲哚基噁二唑基、吲唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、吡唑基、嘌呤基、酞嗪基、蝶啶基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、三唑基、四唑基、噻唑基、三嗪基、噻二唑基等，以及它们的氧化物，例如像吡啶基-n-氧化物等。
如本文所用，术语“杂环基”单独或组合地共同地是指杂脂环族和杂芳基。在本文，无论何时指示杂环中的碳原子数(例如，c1-c6杂环)时，环中必须存在至少一个非碳原子(杂原子)。诸如“c1-c6杂环”的名称仅指环中的碳原子数，并不指环中的原子总数。诸如“4-6元杂环”的名称是指环中包含的原子总数(即，四、五或六元环，其中至少一个原子是碳原子，至少一个原子是杂原子，其余2至4个原子是碳原子或杂原子)。对于具有两个或多个杂原子的杂环，那些两个或多个杂原子可彼此相同或不同。杂环可任选地被取代。非芳香族杂环基包括在环中只有三个原子的基团，而芳香族杂环基在环中必须具有至少五个原子。与杂环键合(即，与母体分子连接或进一步取代)可通过杂原子或碳原子。如本文所用，术语“烷氧基”单独或组合地是指烷基醚基、o-烷基，包括o-脂族和o-碳环基团，其中烷基、脂族和碳环基团可任选地被取代，且其中术语烷基、脂族和碳环如本文所定义。烷氧基的非限制性实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。
如本文所用，术语“药物组合物”是指任选地与至少一种药学上可接受的化学成分混合的生物活性化合物，例如但不限于载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂和/或赋形剂。
如本文所用，术语“溶剂化物”是指本发明的化合物与溶剂分子通过溶剂化形成的组合。在某些情况下，溶剂化物是指水合物，即溶剂分子是水分子，本发明的化合物与水的组合形成水合物。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指保留特定化合物的游离酸和碱的生物有效性并且不是生物学或其它方面不期望的盐。本文所述的化合物可具有酸性或碱性基团，因此可与许多无机或有机碱、无机和有机酸中的任何一种反应以形成药学上可接受的盐。可在本发明化合物的最终分离和纯化期间原位制备这些盐、或者通过将其游离碱形式的纯化化合物与合适的有机或无机酸单独反应，并分离由此形成的盐。药学上可接受的盐的实例包括通过本文所述的化合物与矿物或有机酸或无机碱反应制备的那些盐，所述盐包括乙酸盐、丙烯酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、溴化物、丁酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、辛酸盐、氯苯甲酸盐、氯化物、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、癸酸盐、二葡糖酸盐、磷酸二氢盐、二硝基苯甲酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、乙醇酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、己炔-1,6-二酸盐、羟基苯甲酸盐、羟基丁酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、碘化物、异丁酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、扁桃酸盐、偏磷酸盐、甲氧基苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、磷酸一氢盐、1-萘磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐(palmoate)、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、焦硫酸盐、焦磷酸盐、丙炔酸盐、邻苯二甲酸盐、苯基乙酸盐、苯基丁酸盐、丙磺酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、磺酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐十一酸盐(tosylateundeconate)和二甲苯磺酸盐。诸如草酸的其它酸虽然本身不是药学上可接受的，但可用于制备可用作获得本发明的化合物及其药学上可接受的酸加成盐的中间体的盐(参见berge等人,j.pharm.sci.1977,66,1-19.)。此外，本文所述的可能包含游离酸基团的那些化合物可与合适的碱例如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，与氨，或与药学上可接受的有机伯胺、仲胺或叔胺反应。代表性的碱金属或碱土金属盐包括锂、钠、钾、钙、镁和铝盐等。碱的示例性实例包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化胆碱、碳酸钠、iv'(c1_4烷基)4等。可用于形成碱加成盐的代表性有机胺包括乙基胺、二乙基胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。应当理解，本文所述的化合物还包括它们可包含的季铵化的任何碱性含氮基团。可通过这种季铵化获得水或油可溶或可分散的产品。参见，例如，berge等人，见上文。
如本文所用，术语“多晶型物”或“多晶型现象”是指以不同晶格形式存在的本发明化合物。
如本文所用，术语“酯”是指衍生自酮酸基团和羟基的本发明化合物的衍生物，其中任一种可存在于本发明的化合物中。
如本文所用，术语“互变异构体”是指通过例如，氢原子或质子的迁移容易地从本发明的化合物相互转化的异构体。
如本文所用，术语“药学上可接受的衍生物或前药”是指本发明的化合物的任何药学上可接受的盐、酯、酯的盐或其它衍生物，其在给予受试者时能够直接或间接地提供本发明的化合物或其药物活性代谢物或残基。特别有利的衍生物或前药是当将这种化合物施用于患者时(例如，通过允许口服施用化合物以更容易被吸收到血液中)增加本发明化合物的生物利用度，或其增强母体化合物递送至生物室(例如，脑或淋巴系统)。
本文所述的化合物的药学上可接受的前药包括但不限于酯、碳酸酯、硫代碳酸酯、n-酰基衍生物、n-酰氧基烷基衍生物、叔胺的季铵衍生物、n-曼尼希碱、席夫碱、氨基酸共轭物、磷酸酯、金属盐和磺酸酯。各种形式的前药是本领域熟知的。参见例如，designofprodrugs,bundgaard,a.ed.,elseview,1985以及methodinenzymology,widder,k.等人编辑；academic,1985,vol.42,p.309-396；bundgaard,h."designandapplicationofprodrugs"inatextbookofdrugdesignanddevelopment,krosgaard-larsen和h.bundgaard编辑,1991,chapter5,p.113-191；和bundgaard,h.,advanceddrugdeliveryreview,1992,8,1-38，其各自通过引用并入本文。本文描述的前药包括但不限于以下基团和这些基团的组合；胺衍生前药：羟基前药包括但不限于酰氧基烷基酯、烷氧基羰基氧基烷基酯、烷基酯、芳基酯和含二硫化物的酯。
如本文所用，术语“trk抑制剂”是指按照本文一般描述的pan-trk激酶测定法测量的，相对于不大于约100μm活性的trk活性，所显示的ic50不大于约50μm的化合物。“ic50”是将酶(例如，trk)的活性降低至半数最大水平的抑制剂的浓度。已经发现本文所述的化合物显示对trk的抑制。本发明的化合物相对于trk，显示优选不大于约10μm，更优选不大于约5μm，优选地不大于约1μm且最优选地不大于约200nm的ic50，如在本文所述的trk激酶测定中测量的。
如本文所用，术语“选择性的”，“选择性地”或“选择性”是指与任何其它酶相比，本发明的化合物对trk酶具有较低的ic50值(例如，低至少2、5、10或更多倍)。
如本文所用，术语“受试者”、“患者”或“个体”是指患有病症、疾病、病况等的个体，包括哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物的实例包括但不限于哺乳动物纲的任何成员：人类、非人灵长类动物如黑猩猩和其它猿类和猴类；农场动物如牛、马、绵羊，山羊、猪；家畜如兔、狗和猫；实验动物包括啮齿动物如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳动物的实例包括但不限于鸟类、鱼类等。在本文提供的方法和组合物的一个实施方案中，哺乳动物是人类。
如本文所用，术语“治疗”或“治疗的”和其它语法等同词包括缓解、减轻或改善疾病或病况症状，预防额外的症状，改善或预防症状的潜在代谢原因，抑制疾病或病况，例如阻止疾病或病况的发展，缓解疾病或病况，引起疾病或病况的消退，缓解由疾病或病况引起的病况或停止疾病或病况的症状，以及旨在包括预防。术语还包括实现治疗益处和/或预防益处。关于治疗益处意指根除或改善正在治疗的潜在病症。此外，根除或改善与潜在病症相关的一种或多种生理学症状，使得在患者中观察到改善，即实现了治疗益处，尽管患者可能仍然患有潜在病症。为了预防性的益处，可将组合物施用于处于发展特定疾病风险的患者，或者施用于报告疾病的一种或多种生理症状的患者，即使可能尚未进行该疾病的诊断。
如本文所用，术语“有效量”，“治疗有效量”或“药学有效量”是指被施用的至少一种药剂或化合物的足够量，其将在一定程度上缓解被治疗的疾病或病况的一种或多种症状。结果可以是减轻和/或缓解疾病的体征、症状或病因或生物系统的任何其它期望的改变。例如，用于治疗用途的“有效量”是包含本文所公开的化合物的组合物需要在疾病中提供临床显著降低的量。任何个案中的适当的“有效”量可使用诸如剂量递增研究的技术来确定。
如本文所用，术语“施用”、“施用的”等是指可用于实现化合物或组合物递送到期望的生物作用位点的方法。这些方法包括但不限于口服途径、十二指肠内途径、肠胃外注射(包括静脉内、皮下、腹膜内、肌内、血管内或输注)、局部和直肠施用。本领域技术人员熟悉可与本文所述的化合物和方法一起使用的施用技术，例如在goodman和gilman，thepharmacologicalbasisoftherapeutics，现行版；pergamon；和remington's,pharmaceuticalsciences(现行版)，mackpublishingco.,easton,pa中讨论的。在优选的实施方案中，本文所述的化合物和组合物是口服施用的。
如本文所用，相对于制剂、组成或成分，术语“可接受的”意指对被治疗的受试者的总体健康没有持续的不利影响。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指不消除本文所述的化合物的生物活性或性质并且相对无毒的材料，例如载体或稀释剂，即可将该物质施用于个体而不会引起不期望的生物效应或者以有害方式与它所包含的组合物的任何成分相互作用。
如本文所用，术语“载体”是指有助于将化合物掺入细胞或组织的相对无毒的化合物或试剂。
如本文所用，术语“激动剂”是指增强另一分子的活性或受体位点的活性的分子，例如化合物、药物、酶激活剂或激素调节剂。
如本文所用，术语“拮抗剂”是指减少或阻止另一分子的作用或受体位点的活性的分子，例如化合物、药物、酶抑制剂或激素调节剂。
如本文所用，术语“调控”意指与靶标直接或间接相互作用以改变靶标的活性，仅举例来说包括增强靶标的活性、抑制靶标的活性、限制靶标的活性或延长靶标的活性。
如本文所用，术语“调节剂”是指与靶标直接或间接相互作用的分子。相互作用包括但不限于激动剂和拮抗剂的相互作用。
如本文所用，术语“增强”或“增强的”意指增加或延长期望效果的效力或持续时间。因此，关于增强治疗剂的效果，术语“增强”是指在效力或持续时间方面增加或延长其它治疗剂对系统的影响的能力。
如本文所用，“增强有效量”是指足以增强另一治疗剂在期望的系统中的效果的量。
如本文所用，术语“药物组合”、“施用额外的治疗”、“施用额外的治疗剂”等是指由混合或组合多于一种活性成分而产生的药物疗法，并且包括活性成分的固定和非固定组合两种。术语“固定组合”意指本文所述的至少一种化合物和至少一种共同试剂以单一实体或剂量的形式被同时施用于患者。术语“非固定组合”意指本文所述的至少一种化合物和至少一种共同试剂以单一实体的形式按可变介入期限被同时、共同或相继地施用于患者，其中这种施用在患者体内提供两种或多种化合物的有效水平。这些也适用于鸡尾酒疗法，例如施用三种或多种活性成分。
如本文所用，术语“共同施用”、“联合施用”及其语法等同词等意在包括将选定的多种治疗剂施用于单个患者，并且旨在包括治疗方案，其中这些药剂通过相同或不同的施用途径或在相同或不同的时间被施用。在一些实施方案中，本文所述的化合物将与其它药剂共同施用。这些术语包括向动物施用两种或多种药剂，使得药剂和/或它们的代谢物同时存在于动物内。它们包括以单独的组合物同时施用，在不同的时间以单独的组合物施用，和/或以存在两种药剂的组合物施用。因此，在一些实施方案中，在单一组合物中施用本发明的化合物和其它(多种)药剂。
如本文所用，术语“代谢物”是指当化合物被代谢时形成的化合物的衍生物。
如本文所用，术语“活性代谢物”是指当化合物被代谢时形成的化合物的生物活性衍生物。
如本文所用，术语“代谢的”是指特定物质由生物体改变的过程(包括但不限于水解反应和由酶催化的反应)的总和。因此，酶可对化合物产生特异性的结构改变。例如，细胞色素p450催化多种氧化和还原反应，而尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶催化活化的葡萄糖醛酸分子转移到芳族醇、脂族醇、羧酸、胺和游离巯基。关于代谢的更多信息可从thepharmacologicalbasisoftherapeutics，第9版，mcgraw-hill(1996)获得。
新型化合物
根据本发明的实施方案，新型化合物包括式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药。
在一些实施方案中，式i的r1是任选被一个或多个取代基取代的苯环或任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，其中所述一个或多个取代基独立地选自卤素、-cf3、-chf2、nh2、羟基、线性c1-c4烷基、支链c1-c4烷基、线性c1-c4烷氧基和支链c1-c4烷氧基。
在一些实施方案中，r2选自氢、线性c1-c4烷基和支链线性c1-c4烷基。此外，在式i中，x选自-ch2-、-ch2ch2-、-ch2o-、-ch2nh-、-ch2n(c1-c4烷基)-、-ch(f)-、-cf2-、-ch(cl)-、-ch(oh)-、-ch(och3)-、-ch(nh2)-或-c(ch3)2-。此外，在式i中，q选自-ch＝cr3c(o)nr4r5、-ch＝cr3nr4c(o)r5、-ch＝cr3nr4c(o)nr4r5、-ch＝cr3r5、-c≡cc(o)nr4r5、-c≡ccr5和
在一些实施方案中，r3选自氢、卤素、线性c1-c6烷基和支链c1-c6烷基。
在一些实施方案中，-nr4r5形成4-7元杂环或不形成环结构，杂环为杂芳基环或杂环烷基环。
在其中-nr4r5形成4-7元杂环的实施方案中，4-7元杂环包括除-nr4r5的氮之外的任选的第二杂原子，并且任选地被一个或多个独立地选自线性c1-c6烷基、支链c1-c6烷基、羟基、羧酸、线性c1-c4烷基羧酸和支链c1-c4烷基羧酸支化的取代基取代。
在其中-nr4r5不形成环结构的实施方案中，r4选自氢、线性c1-c6烷基和支链c1-c6烷基，且r5选自氢、任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的线性c1-c6烷基、任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的支链c1-c6烷基和任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的c1-c6环烷基。
在一些实施方案中，y1、y2、y3和y4各自独立地选自-ch、n、o、s、-cr6和-nr6，其中r6选自氢、线性c1-c4烷基、支链c1-c4烷基、5-6元芳基环、5-6元杂芳基环、3-7元杂环烷基环、3-7元环烷基环、-nhco-(芳基环)和-ch2co-(c3-c6元杂环)。
在一些实施方案中，式i的化合物是式ii、iii或iv的化合物：
在一些实施方案中，一些式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药具有以下结构，其中，
q为5-6元杂芳基环，包括但不限于以下结构：
和前述的互变异构体。
q的另外的实例包括以下结构：
在某些实施方案中，r5选自甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、异丁基、-c(ch3)2ch2f、-chcf2、ch2chf2、cf3、ch2cf3和ch(ch3)cf3。
在某些实施方案中，r5是-(c1-c6)羟基烷基或[(c1-c6)烷氧基](c1-c6)烷基-。实例包括-ch2ch2oh、-ch2ch2ch2oh、-ch2ch2ch2ch2oh、-ch2ch(oh)ch3、-c(ch3)2ch2oh、-ch2c(ch3)2oh、-ch(ch3)ch2oh、-ch2c(ch3)2ch2oh、-ch(ch2oh)ch(ch3)2、-ch(ch2ch3)ch2oh、-ch(ch2oh)c(ch3)3、-ch2ch2och3、-ch2ch2ch2och3、-ch2ch2ch2ch2och3、-ch2ch(och3)ch3、-c(ch3)2ch2och3、-ch2c(ch3)2och3、-ch(ch3)ch2och3、-ch2c(ch3)2ch2och3、-ch(ch2och3)ch(ch3)2、-ch(ch2ch3)ch2och3和-ch(ch2och3)c(ch3)3。特殊实例是-ch2ch2oh或ch2ch2och3。
在一个实施方案中，r5是-(c1-c6)羟基烷基或[(c1-c6)烷氧基](c1-c6)烷基-且r4是氢。
在一个实施方案中，r5是-(c1-c6)羟基烷基或[(c1-c6)烷氧基](c1-c6)烷基-且r4是-(c1-c6)烷基。
在某些实施方案中，r5是-(c2-c6)二羟基烷基。实例包括-ch2ch(oh)ch2oh、-c(ch3)(ch2oh)2、-ch(ch2oh)2和-ch(ch2oh)(chohch3)。特殊实例包括-ch2ch(oh)ch2oh和-c(ch3)(ch2oh)2。在一个实施方案中，r5是-(c2-c6)二羟基烷基且r4是氢。在一个实施方案中，r5是-(c2-c6)二羟基烷基且r4是-(c1-c6)烷基。
在某些实施方案中，r5是任选被oh或(c1-c4)烷氧基取代的-o(c1-c6)烷基，且r4是氢。r5的实例包括-ome、-oet、-och2ch2oh、-och2ch2ch2oh、-och2ch(oh)ch3、-och2c(ch3)2oh、-och2ch2och3、-och2ch2ch2och3和-och2ch(och3)ch3。
在某些实施方案中，r5是：
在某些实施方案中，r5是：
在某些实施方案中，nr4r5形成具有环氮原子且任选具有选自n和o的第二环杂原子的4-7元杂环，其中所述环任选地被一个或多个独立地选自(c1-c6)烷基、oh、cooh和(c1-c3烷基)cooh的取代基取代。在某些实施方案中，杂环任选被一个或两个所述取代基取代。特殊实例包括但不限于以下结构：
在一些实施方案中，r1是任选被一个或多个独立地选自卤素、(c1-c4)烷氧基、-cf3、-chf2、-o(c1-c4烷基)、-(c1-c4)烷基和nh2的取代基取代的苯基，或具有选自n和s的环杂原子的5-6元杂芳基环，其中所述杂芳基环任选地被一个或多个独立地选自卤素、-o(c1-c4烷基)、(c1-c4)烷基和nh2的取代基取代，或任选地被一个或多个独立地选自卤素和(c1-c4)烷基的取代基取代的吡啶-2-酮-3基环。特殊实例包括但不限于以下结构：
在实施方案中，式i、ii、iii和iv包括以下示出的化合物：
当本文公开的化合物具有至少一个手性中心时，它们可以单独的对映异构体和非对映异构体的形式存在，或以这种异构体的混合物包括外消旋体的形式存在。单个异构体的分离或单个异构体的选择性合成通过应用本领域技术人员熟知的各种方法来实现。除非另有说明，所有这种异构体及其混合物都包括在本文公开的化合物的范围内。此外，本文公开的化合物可以一种或多种晶体或无定形形式存在。除非另有说明，所有这种形式都包括在本文公开的化合物的范围内，其包括任何多晶型物形式。此外，本文公开的一些化合物可与水(即水合物)或常用有机溶剂形成溶剂合物。除非另有说明，否则这种溶剂合物包括在本文公开的化合物的范围内。
技术人员将认识到，本文所述的一些结构可以是化合物的共振形式或互变异构体，其可由其它化学结构清楚地表示，即使在动力学上；技术人员认识到，这种结构可能仅代表这种化合物的样品的非常小的一部分。这种化合物被认为在所示结构的范围内，尽管本文未表示这种共振形式或互变异构体。
同位素可存在于所述的化合物中。化合物结构中表示的各个化学元素可包括所述元素的任何同位素。例如，在化合物结构中，可明确地公开或理解氢原子存在于化合物中。在氢原子可能存在的化合物的任何位置处，氢原子可以是氢的任何同位素，包括但不限于氢-1(氕)和氢-2(氘)。因此，除非上下文另有明确规定，否则本文所提及的化合物包括所有潜在的同位素形式。
药物组合物、治疗疾病、施用
上述新型化合物是trka、trkb和/或trkc的抑制剂，并且可用于治疗疼痛、癌症和其它过度增生性疾病。在一个方面中，本发明提供了一种用于治疗疼痛癌(painmcancers)和其它过度增生性疾病的药物组合物，其包含一种或多种式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药。
在实施方案中，药物组合物包含有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药。此外，药物组合物还包含药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂。在一些实施方案中，这种组合物可包含防腐剂、延迟吸收剂、填料、粘合剂、吸附剂、缓冲剂、崩解剂、增溶剂和其它载体、佐剂和/或赋形剂中的至少一种作为惰性成分。组合物可用本领域公知的方法配制。
在一些实施方案中，药物组合物为适合口服施用的形式。在其它或附加的实施方案中，药物组合物为片剂、胶囊剂、丸剂、粉末剂、缓释制剂、溶液剂和悬浮剂的形式。在一些实施方案中，药物组合物为适合肠胃外注射的形式，例如无菌溶液剂、悬浮剂或乳剂；用于局部施用的软膏剂或乳膏剂形式或用于直肠施用的栓剂形式。
在一些实施方案中，通过口服、十二指肠内、胃肠外(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或通过输注)、局部或直肠施用包含式i的化合物的组合物。在一些实施方案中，药物组合物为适合口服施用的形式。在其它或附加的实施方案中，药物组合物为用于口服施用的片剂、胶囊剂、丸剂、粉末剂、缓释制剂、溶液剂和悬浮剂，用于肠胃外注射的无菌溶液剂、悬浮剂或乳剂，用于局部施用的软膏剂或霜剂，或用于直肠施用的栓剂的形式。在其它或附加的实施方案中，药物组合物是适于单次施用精确剂量的单位剂型。在其它或附加的实施方案中，药物组合物还包含药物载体、赋形剂和/或佐剂。
在另一方面中，本发明提供了一种将治疗有效量的药物组合物施用于受试者以治疗哺乳动物包括人类中的疼痛、炎症、神经退行性疾病、某些感染性疾病、癌症、由trk级联调控的其它过度增殖性疾病或病况的方法。
在另一方面中，本发明提供了一种用于抑制trk酶的方法。该方法包括使所述trk酶与一定量的组合物接触，所述组合物包含足以抑制所述酶的式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药，其中所述酶被抑制。在一些实施方案中，本发明涉及一种用于选择性抑制trk酶的方法。
在另一方面中，本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药在制备用于抑制trk酶的药物组合物中的用途。
在实施方案中，trk酶是trk激酶。在一些实施方案中，trk酶是trka。在一些实施方案中，trk酶是trkb。在一些实施方案中，trk酶是trkc。
在一些实施方案中，式i的化合物可选择性地抑制trka酶、trkb酶或trkc酶。在一些其他实施方案中，式i的化合物可能不具有来自trka酶、trkb酶和trkc酶的选择性。
在一些实施方案中，接触发生在细胞内。在其它或附加的实施方案中，细胞是哺乳动物细胞。在其它或附加的实施方案中，哺乳动物细胞是人类细胞。在其它或附加的实施方案中，trk酶被包含式i的化合物的药学上可接受的盐的组合物抑制。
在一些实施方案中，本发明涉及治疗患有trk介导的病症的个体中的所述病症的方法，其包括向所述个体施用有效量的包含式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药在制备用于治疗trk介导的病症的药物组合物中的用途。
在其它或附加的实施方案中，药物组合物是适于单次施用精确剂量的单位剂型。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.001至约1000mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.5至约50mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.001至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.002至约6g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.005至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.01至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.02至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.05至约2.5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.1至约1g/天。
在其它或附加的实施方案中，低于上述范围的下限的剂量水平可能绰绰有余。在其它或附加的实施方案中，可能需要高于上述范围的上限的剂量水平。在其它或附加的实施方案中，以每日一次的单剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日多于一次的多次剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日两次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日三次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日四次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以多于每日四次施用式i的化合物。在一些实施方案中，药物组合物用于施用给哺乳动物。
在其它或附加的实施方案中，药物组合物还包含至少一种治疗剂。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自细胞毒性剂、抗血管生成剂和抗肿瘤剂。
在其它或附加的实施方案中，抗肿瘤剂选自烷基化剂、抗代谢物、表鬼臼毒素；抗肿瘤酶、拓扑异构酶抑制剂、丙卡巴肼、米托蒽醌、铂配位复合物、生物反应调节剂和生长抑制剂、激素/抗激素治疗剂和造血生长因子。在其它或附加的实施方案中，治疗剂是紫杉醇、硼替佐米或两者。在其它或附加的实施方案中，联合另外的治疗施用药物组合物。在其它或附加的实施方案中，另外的疗法是放射治疗、化学疗法或两者的组合。在其它或附加的实施方案中，药物组合物包含式i的化合物的药学上可接受的盐。
在其它或附加的实施方案中，该酶至少约1％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约2％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约3％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约4％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约5％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约10％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约20％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约25％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约30％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约40％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约50％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约60％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约70％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约75％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约80％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶至少约90％被抑制。在其它或附加的实施方案中，该酶基本上被完全抑制。
在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.001至约1000mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.5至约50mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.001至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.01至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.02至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.05至约2.5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.1至约1g/天。
在其它或附加的实施方案中，低于上述范围的下限的剂量水平可能绰绰有余。在其它或附加的实施方案中，可能需要高于上述范围的上限的剂量水平。在其它或附加的实施方案中，以每日一次的单剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日多于一次的多次剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日两次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日三次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日四次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以多于每日四次施用式i的化合物。
在一些实施方案中，患有trk介导的病症的个体是哺乳动物。在其它或附加的实施方案中，个体是人类。在一些实施方案中，联合另外的疗法施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，另外的疗法是放射治疗、化学疗法或两者的组合。在其它或附加的实施方案中，联合至少一种治疗剂施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自细胞毒性剂、抗血管生成剂和抗肿瘤剂的组。
在其它或附加的实施方案中，抗肿瘤剂选自烷基化剂、抗代谢物、表鬼臼毒素；抗肿瘤酶、拓扑异构酶抑制剂、丙卡巴肼、米托蒽醌、铂配位复合物、生物反应调节剂和生长抑制剂、激素/抗激素治疗剂和造血生长因子。
在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自紫杉醇、硼替佐米或两者。在一些实施方案中，trk介导的病症选自炎性疾病、感染、自身免疫性疾病、中风、缺血、心脏病、神经障碍、纤维化疾病、增生性疾病、过度增生性疾病、非癌症过度增生性疾病、肿瘤、白血病、赘生物、癌症、癌、代谢疾病、恶性疾病、血管再狭窄、牛皮癣、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎、骨关节炎、心力衰竭、慢性疼痛、神经性疼痛、干眼症、闭角型青光眼和广角型青光眼。
在其它或附加的实施方案中，trk介导的病症是炎性疾病。在其它或附加的实施方案中，trk介导的病症是过度增生性疾病。在其它或另外的实施方案中，trk介导的病症选自肿瘤、白血病、赘生物、癌症、癌和恶性疾病。在其它或另外的实施方案中，癌症是脑癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、结直肠癌或白血病。在其它或另外的实施方案中，纤维化疾病是硬皮病，多肌炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肝硬化、瘢痕疙瘩形成、间质性肾炎或肺纤维化。在其它或另外的实施方案中，施用有效量的包含式i的化合物的药学上可接受的盐的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及一种用于降解、抑制癌细胞生长或杀死癌细胞的方法，其包括使所述细胞与一定量的有效以降解、抑制所述细胞的生长或杀死所述细胞的组合物接触，所述组合物包含式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药。
在一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药在制备用于降解和/或抑制癌细胞生长或杀死癌细胞的药物组合物中的用途。
在一些实施方案中，癌细胞包括脑、乳腺、肺、卵巢、胰腺、前列腺、肾或结直肠癌细胞。在其它或另外的实施方案中，与至少一种治疗剂一起施用组合物。在其它或附加的实施方案中，治疗剂是紫杉醇、硼替佐米或两者。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自细胞毒性剂、抗血管生成剂和抗肿瘤剂。在其它或附加的实施方案中，抗肿瘤剂选自烷基化剂、抗代谢物、表鬼臼毒素；抗肿瘤酶、拓扑异构酶抑制剂、丙卡巴肼、米托蒽醌、铂配位复合物、生物反应调节剂和生长抑制剂、激素/抗激素治疗剂和造血生长因子。
在一些实施方案中，癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，1％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，2％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，3％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，4％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，5％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，10％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，20％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，25％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，30％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，40％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，50％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，60％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，70％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，75％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，80％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，90％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，100％的癌细胞被降解。在其它或另外的实施方案中，基本上所有的癌细胞被降解。
在一些实施方案中，癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，1％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，2％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，3％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，4％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，5％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，10％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，20％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，25％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，30％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，40％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，50％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，60％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，70％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，75％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，80％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，90％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，100％的癌细胞被杀死。在其它或另外的实施方案中，基本上所有的癌细胞被杀死。
在其它或另外的实施方案中，癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约1％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约2％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约3％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约4％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约5％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约10％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约20％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约25％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约30％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约40％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约50％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约60％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约70％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约75％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约80％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约90％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，约100％的癌细胞的生长被抑制。在其它或另外的实施方案中，使用包含式i的化合物的药学上可接受的盐的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及一种用于治疗或预防个体中增生性疾病的方法，其包括向所述个体施用有效量的包含式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药在制备用于治疗或预防增生性疾病的药物组合物中的用途。
在一些实施方案中，增生性疾病是癌症、牛皮癣、再狭窄、自身免疫性疾病或动脉粥样硬化。在其它或另外的实施方案中，增生性疾病是过度增生性疾病。在其它或另外的实施方案中，增殖性疾病选自肿瘤、白血病、赘生物、癌症、癌和恶性疾病。在其它或另外的实施方案中，癌症是脑癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、结直肠癌或白血病。在其它或另外的实施方案中，纤维化疾病是硬皮病，多肌炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肝硬化、瘢痕疙瘩形成、间质性肾炎或肺纤维化。在其它或另外的实施方案中，癌症是脑癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、结直肠癌或白血病。在其它或另外的实施方案中，癌症是脑癌或肾上腺皮质癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是乳腺癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是卵巢癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是胰腺癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是前列腺癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是肾癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是结直肠癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是骨髓性白血病。在其它或另外的实施方案中，癌症是胶质母细胞瘤。在其它或另外的实施方案中，癌症是滤泡性淋巴瘤。在其它或另外的实施方案中，癌症是前b型急性白血病。在其它或另外的实施方案中，癌症是慢性淋巴细胞性b型白血病。在其它或另外的实施方案中，癌症是间皮瘤。在其它或另外的实施方案中，癌症是小细胞系癌。
在一些实施方案中，联合另外的治疗施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，另外的疗法是放射治疗、化学疗法或两者的组合。在其它或附加的实施方案中，联合至少一种治疗剂施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自细胞毒性剂、抗血管生成剂和抗肿瘤剂的组。在其它或附加的实施方案中，抗肿瘤剂选自烷基化剂、抗代谢物、表鬼臼毒素；抗肿瘤酶、拓扑异构酶抑制剂、丙卡巴肼、米托蒽醌、铂配位复合物、生物反应调节剂和生长抑制剂、激素/抗激素治疗剂和造血生长因子。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自紫杉醇、硼替佐米或两者。在一些实施方案中，通过口服、十二指肠内、胃肠外(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或通过输注)、局部或直肠施用组合物。
在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.001至约1000mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.5至约50mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.001至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.01至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.02至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.05至约2.5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.1至约1g/天。在其它或附加的实施方案中，低于上述范围的下限的剂量水平可能绰绰有余。在其它或附加的实施方案中，可能需要高于上述范围的上限的剂量水平。
在其它或附加的实施方案中，以每日一次的单剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日多于一次的多次剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日两次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日三次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日四次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以多于每日四次施用式i的化合物。在一些实施方案中，患有增生性疾病的个体是哺乳动物。在其它或附加的实施方案中，个体是人类。在其它或另外的实施方案中，施用有效量的包含式i的化合物的药学上可接受的盐的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及一种用于治疗或预防个体中炎性疾病的方法，其包括向所述个体施用有效量的包含式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药在制备用于治疗或预防炎性疾病的药物组合物中的用途。
在其它或附加的实施方案中，炎性疾病选自慢性炎性疾病、类风湿性关节炎、脊柱关节病、痛风性关节炎、骨关节炎、幼年型关节炎、急性风湿性关节炎、肠病性关节炎、神经病性关节炎、银屑病关节炎、化脓性关节炎、动脉粥样硬化、系统性红斑狼疮、炎性肠病、肠易激综合征、溃疡性结肠炎、反流性食管炎、克罗恩病、胃炎、哮喘、过敏、呼吸窘迫综合征、胰腺炎、慢性阻塞性肺病、肺纤维化、牛皮癣、湿疹或硬皮病。在一些实施方案中，联合另外的治疗施用包含式的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，联合至少一种治疗剂施用包含式的化合物的组合物。在一些实施方案中，通过口服、十二指肠内、胃肠外(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或通过输注)、局部或直肠施用组合物。
在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.001至约1000mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.5至约50mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.001至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.01至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.02至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.05至约2.5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.1至约1g/天。在其它或附加的实施方案中，低于上述范围的下限的剂量水平可能绰绰有余。在其它或附加的实施方案中，可能需要高于上述范围的上限的剂量水平。
在其它或附加的实施方案中，以每日一次的单剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日多于一次的多次剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日两次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日三次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日四次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以多于每日四次施用式i的化合物。在一些实施方案中，患有炎性疾病的个体是哺乳动物。在其它或附加的实施方案中，个体是人类。在其它或另外的实施方案中，施用有效量的包含式i的化合物的药学上可接受的盐的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及一种用于治疗或预防个体中的癌症的方法，其包括向所述个体施用有效量的包含式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药在制备用于治疗或预防癌症的药物组合物中的用途。
在其它或另外的实施方案中，癌症是脑癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、结直肠癌或白血病。在其它或另外的实施方案中，纤维化疾病是硬皮病，多肌炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肝硬化、瘢痕疙瘩形成、间质性肾炎或肺纤维化。在其它或另外的实施方案中，癌症是脑癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、结直肠癌或白血病。在其它或另外的实施方案中，癌症是脑癌或肾上腺皮质癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是乳腺癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是卵巢癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是胰腺癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是前列腺癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是肾癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是结直肠癌。在其它或另外的实施方案中，癌症是骨髓性白血病。在其它或另外的实施方案中，癌症是胶质母细胞瘤。在其它或另外的实施方案中，癌症是滤泡性淋巴瘤。在其它或另外的实施方案中，癌症是前b型急性白血病。在其它或另外的实施方案中，癌症是慢性淋巴细胞性b型白血病。在其它或另外的实施方案中，癌症是间皮瘤。在其它或另外的实施方案中，癌症是小细胞系癌。
在一些实施方案中，联合另外的治疗施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，另外的疗法是放射治疗、化学疗法或两者的组合。在其它或附加的实施方案中，联合至少一种治疗剂施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自细胞毒性剂、抗血管生成剂和抗肿瘤剂的组。在其它或附加的实施方案中，抗肿瘤剂选自烷基化剂、抗代谢物、表鬼臼毒素；抗肿瘤酶、拓扑异构酶抑制剂、丙卡巴肼、米托蒽醌、铂配位复合物、生物反应调节剂和生长抑制剂、激素/抗激素治疗剂和造血生长因子。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自紫杉醇、硼替佐米或两者。在一些实施方案中，通过口服、十二指肠内、胃肠外(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或通过输注)、局部或直肠施用组合物。
在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.001至约1000mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.5至约50mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.001至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.01至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.02至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.05至约2.5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.1至约1g/天。在其它或附加的实施方案中，低于上述范围的下限的剂量水平可能绰绰有余。在其它或附加的实施方案中，可能需要高于上述范围的上限的剂量水平。
在其它或附加的实施方案中，以每日一次的单剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日多于一次的多次剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日两次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日三次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日四次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以多于每日四次施用式i的化合物。在一些实施方案中，患有癌症的个体是哺乳动物。在其它或附加的实施方案中，个体是人类。在其它或另外的实施方案中，施用有效量的包含式i的化合物的药学上可接受的盐的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及一种减小肿瘤大小、抑制肿瘤大小增加、减少肿瘤增殖或预防个体中的肿瘤增殖的方法，其包括向所述个体施用有效量的包含式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药在制备用于减小肿瘤大小、抑制肿瘤大小增加、减少肿瘤增殖或预防肿瘤增殖的药物组合物中的用途。
在一些实施方案中，肿瘤的大小被减小。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少1％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少2％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少3％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少4％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少5％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少10％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少20％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少25％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少30％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少40％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少50％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少60％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少70％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少75％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少80％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少85％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少90％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤的大小被减小至少95％。在其它或另外的实施方案中，肿瘤被根除。在一些实施方案中，肿瘤的大小不增加。
在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少1％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少2％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少3％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少4％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少5％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少10％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少20％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少25％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少30％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少40％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少50％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少60％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少70％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少75％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少80％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少90％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被减少至少95％。在一些实施方案中，肿瘤增殖被预防。
在一些实施方案中，联合另外的治疗施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，另外的疗法是放射治疗、化学疗法或两者的组合。在其它或附加的实施方案中，联合至少一种治疗剂施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自细胞毒性剂、抗血管生成剂和抗肿瘤剂的组。
在其它或附加的实施方案中，抗肿瘤剂选自烷基化剂、抗代谢物、表鬼臼毒素；抗肿瘤酶、拓扑异构酶抑制剂、丙卡巴肼、米托蒽醌、铂配位复合物、生物反应调节剂和生长抑制剂、激素/抗激素治疗剂和造血生长因子。在其它或附加的实施方案中，治疗剂选自紫杉醇、硼替佐米或两者。在一些实施方案中，通过口服、十二指肠内、胃肠外(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或通过输注)、局部或直肠施用组合物。
在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.001至约1000mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.5至约50mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.001至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.01至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.02至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.05至约2.5g/天。在其它或另外的实施方案中，式i的化合物的量为约0.1至约1g/天。在其它或附加的实施方案中，低于上述范围的下限的剂量水平可能绰绰有余。在其它或附加的实施方案中，可能需要高于上述范围的上限的剂量水平。
在其它或附加的实施方案中，以每日一次的单剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日多于一次的多次剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日两次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日三次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日四次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以多于每日四次施用式i的化合物。在一些实施方案中，患有癌症的个体是哺乳动物。在其它或附加的实施方案中，个体是人类。在其它或另外的实施方案中，施用有效量的包含式i的化合物的药学上可接受的盐的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及一种用于在患者中实现一定效果的方法，其包括将有效量的包含式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药的组合物施用至患者，其中所述效果选自各种癌症、免疫疾病和炎性疾病的抑制。在一些实施方案中，效果是各种癌症的抑制。在其它或另外的实施方案中，效果是免疫疾病的抑制。在其它或另外的实施方案中，效果是炎性疾病的抑制。
在一些实施方案中，本发明涉及式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药在制备用于抑制各种癌症、免疫疾病和/或炎性疾病的药物组合物中的用途。
在一些实施方案中，联合另外的治疗施用包含式i的化合物的组合物。在其它或附加的实施方案中，另外的疗法是放射治疗、化学疗法或两者的组合。在其它或附加的实施方案中，联合至少一种治疗剂施用包含式i的化合物的组合物。在一些实施方案中，通过口服、十二指肠内、胃肠外(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或通过输注)、局部或直肠施用组合物。
在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.001至约1000mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量在约0.5至约50mg/kg体重/天的范围内。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.001至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.01至约7g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.02至约5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.05至约2.5g/天。在其它或附加的实施方案中，式i的化合物的量为约0.1至约1g/天。在其它或附加的实施方案中，低于上述范围的下限的剂量水平可能绰绰有余。在其它或附加的实施方案中，可能需要高于上述范围的上限的剂量水平。
在其它或附加的实施方案中，以每日一次的单剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日多于一次的多次剂量施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日两次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日三次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以每日四次施用式i的化合物。在其它或附加的实施方案中，以多于每日四次施用式i的化合物。在一些实施方案中，患有癌症的个体是哺乳动物。在其它或附加的实施方案中，个体是人类。在其它或另外的实施方案中，施用有效量的包含式i的化合物的药学上可接受的盐的组合物。
在一些实施方案中，本发明涉及一种用于制备式i的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、酯、互变异构体或前药的方法。
式i的化合物的制备
前述方案提供了用于式i、ii和iv的化合物的一般合成路线。关键的中间体化合物3可通过环胺化合物与包含各种官能团q的二环杂环化合物1的偶联反应获得。式i的化合物中的各种五元杂环部分通过来自化合物3的偶联反应、缩合或环化反应引入。式ii的化合物可通过hew反应、水解、然后酰胺偶联反应由包含醛部分的化合物3制备。在式iv的情况下，与碘代化合物3的sonogashira反应提供目标化合物。
实验步骤
在5-mm外径的管(norell,inc.507-hp)中，在30℃下，在cdcl3和dmso-d6溶液中记录nmr谱，并在瓦里安vnmrs-400上采集400mhz下的1h谱。化学位移(δ)相对于四甲基硅烷(tms＝0.00ppm)，并且以ppm表示。在finniganthermolcqadvantagemax,agilentlc1200系列的离子阱质谱仪(柱：ymchydrosphere(c18,
实施例1：中间体化合物1的制备
中间体化合物1：3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶
步骤a：2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向吡咯烷-2-酮(10.0g,118mmol)的ch3cn(118ml)溶液中加入tea(19.6ml,141mmol)、dmap(7.18g,58.8mmol)和(t-boc)2o(32.7ml,141mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后在etoac和水之间分层。用1n的hcl水溶液、1n的naoh水溶液和盐水洗涤分离的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生淡黄色油状物形式的2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(21.0g,96％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.53(9h,s),2.00(2h,五重峰,j＝8.0hz),2.52(2h,t,j＝8.0hz),3.75(2h,t,j＝7.6hz)。
步骤b：4-(5-氟吡啶-3-基)-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下，向3-溴-5-氟吡啶(4.26g,24.2mmol)的干燥thf(25ml)溶液中加入异丙基氯化镁(2.0m的thf溶液,14.5ml,29.0mmol)。将混合物缓慢升温至0℃，在0℃下搅拌1小时，然后冷却至-78℃。在-78℃下加入2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(5.38g,29.0mmol)的干燥thf(10ml)溶液后，使反应混合物升温至室温，在室温下搅拌2小时并用饱和nh4cl水溶液淬灭。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1至1:1)，产生黄色油状物形式的4-(5-氟吡啶-3-基)-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁酯(4.73g,69％)。
步骤c：3-(3,4-二氢-2h-吡咯-5-基)-5-氟吡啶
在0℃下，向4-(5-氟吡啶-3-基)-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁酯(4.73g,16.7mmol)的dcm(17ml)溶液中加入tfa(6.45ml,84mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时，然后真空浓缩。将残留物用etoac稀释，用饱和nahco3水溶液洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色固体形式的3-(3,4-二氢-2h-吡咯-5-基)-5-氟吡啶(1.83g,66.5％)，在不对其进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.10(2h,五重峰,j＝8.0hz),2.96(2h,t,j＝8.4hz),4.10(2h,t,j＝7.6hz),7.94(1h,d,j＝9.2hz),8.53(1h,d,j＝2.4hz),8.79(1h,s)。
步骤d：3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶
在0℃下，向3-(3,4-二氢-2h-吡咯-5-基)-5-氟吡啶(1.83g,11.1mmol)的meoh(16ml)和水(4.0ml)溶液中分批加入硼氢化钠(0.843g,22.3mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后用2n的hcl水溶液淬灭。在蒸发meoh后，将残留物用1n的naoh水溶液碱化并用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色油状物形式的3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶(1.62g,87％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.60-1.69(1h,m),1.81-1.98(3h,m),2.20-2.29(1h,m),3.03-3.10(1h,m),3.15-3.20(1h,m),4.22(1h,t,j＝7.6hz),7.49(1h,d,j＝10.0hz),8.32(1h,d,j＝2.4hz),8.40(1h,s)。
实施例2：中间体化合物2的制备
中间体化合物2：2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷
步骤a：4-(2,5-二氟苯基)-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下，向2-溴-1,4-二氟苯(5.81ml,51.8mmol)的干燥thf(50ml)溶液中加入异丙基氯化镁(2.0m的thf溶液,31.1ml,62.2mmol)。将混合物缓慢升温至0℃，在该温度下搅拌1小时，然后再次冷却至-78℃。在-78℃下加入2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(11.5g,62.2mmol)的干燥thf(20ml)溶液后，伴随搅拌2小时使反应混合物升温至室温并用饱和nh4cl水溶液淬灭。混合物用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡绿色油状物形式的4-(2,5-二氟苯基)-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁基酯(15.5g,100％)，在不对其进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。
步骤b：5-(2,5-二氟苯基)-3,4-二氢-2h-吡咯
在0℃下，向4-(2,5-二氟苯基)-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁酯(15.5g,51.8mmol)的dcm(52ml)溶液中加入tfa(19.9ml,259mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时，然后真空浓缩。将残留物用etoac稀释，用饱和nahco3水溶液洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡红色油状物形式的5-(2,5-二氟苯基)-3,4-二氢-2h-吡咯(6.17g,65.8％)，在不对其进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.00-2.08(2h,m),2.97-3.02(2h,m),3.99-4.04(2h,m),7.04-7.08(2h,m),7.64-7.68(1h,m)。
步骤c：2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷
在0℃下，向5-(2,5-二氟苯基)-3,4-二氢-2h-吡咯(6.17g,34.1mmol)的meoh(60ml)和水(15ml)溶液中分批加入硼氢化钠(2.58g,68.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后用2n的hcl水溶液淬灭。在蒸发meoh后，将残留物用1n的naoh水溶液碱化并用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色油状物形式的2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(5.94g,95％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.56-1.65(1h,m),1.78-1.94(3h,m),2.21-2.30(1h,m),3.01-3.08(1h,m),3.13-3.18(1h,m),4.40(1h,t,j＝7.2hz),6.82-6.88(1h,m),6.91-6.97(1h,m),7.22-7.26(1h,m)。
实施例3：中间体化合物3的制备
中间体化合物3：5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶
步骤a：2-(丁-3-炔)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下在10分钟内向苯邻二甲酰亚胺(10.0g,68.0mmol)、丁-3-炔-1-醇(5.24g,74.8mmol)和三苯基膦(19.6g,74.8mmol)的甲苯(136ml)溶液中缓慢加入diad(15.8ml,82.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。在加入meoh(50ml)后，将混合物搅拌30分钟。通过过滤收集沉淀的固体并用meoh洗涤。将滤液真空浓缩并用meoh研磨残留的固体，通过过滤收集，产生白色固体形式的2-(丁-3-炔)异吲哚啉-1,3-二酮(10.9g,81％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ2.52(2h,dt,j＝7.2,2.4hz),2.78-2.80(1h,m),3.68(2h,t,j＝6.8hz),7.80-7.86(4h,m)。
步骤b：2-(4-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)丁-3-炔)异吲哚啉-1,3-二酮
用氩气将3-溴-5-氟-2-甲氧基吡啶(4.00g,19.4mmol)、2-(丁-3-炔)异吲哚啉-1,3-二酮(3.87g,19.4mmol)和tea(10.8ml,78mmol)的dmf(40ml)溶液脱气。在加入pd(pph3)4(1.12g,0.971mmol)和cui(0.370g,1.94mmol)后，将反应混合物在90℃下加热2小时并冷却至室温。在加入meoh后，通过过滤收集沉淀的固体。将固体用meoh洗涤并在真空下干燥，产生白色绒毛状固体形式的2-(4-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)丁-3-炔)异吲哚啉-1,3-二酮(5.80g,92％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.90(2h,t,j＝6.8hz),3.85(3h,s),3.99(2h,t,j＝6.8hz),7.34(1h,dd,j＝7.6,2.4hz),7.73-7.75(2h,m),7.87-7.89(3h,m)。
步骤c：4-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)丁-3-炔-1-胺
在室温下，向2-(4-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)丁-3-炔)异吲哚啉-1,3-二酮(6.44g,19.8mmol)的meoh(20ml)和dcm(100ml)溶液中加入肼(1.39ml,29.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时，同时观察不溶的固体。将固体滤除并用dcm洗涤。滤液用水洗涤。水层用dcm萃取。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色固体形式的4-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)丁-3-炔-1-胺(3.86g,100％)，在不对其进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.41(2h,br.s),2.61(2h,t,j＝6,4hz),2.95(2h,t,j＝6.4hz),3.97(3h,s),7.40(1h,dd,j＝8.0,2.8hz),7.92(1h,d,j＝2.8hz)。
步骤d：3-(3,4-二氢-2h-吡咯-5-基)-5-氟-2-甲氧基吡啶
将4-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)丁-3-炔-1-胺(3.86g,19.8mmol)和pdcl2(35.0mg,0.199mmol)在ch3cn(50ml)和水(17ml)中的混合物在80℃下加热5小时并冷却至室温。在真空浓缩后，将残留物在dcm和水之间分层。水层用dcm萃取。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝5:1至3:1)，产生黄色固体形式的3-(3,4-二氢-2h-吡咯-5-基)-5-氟-2-甲氧基吡啶(2.10g,54％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.01(2h,五重峰,j＝7.6hz),3.01(2h,t,j＝7.6hz),3.97(3h,s),3.99(2h,t,j＝7.6hz),7.92(1h,dd,j＝8.4,2.8hz),8.04(1h,d,j＝2.8hz)。
步骤e：5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶
在0℃下，向3-(3,4-二氢-2h-吡咯-5-基)-5-氟-2-甲氧基吡啶(500mg,2.57mmol)的meoh(10ml)和水(2.5ml)的分散体中分批加入硼氢化钠(195mg,5.15mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后用2n的hcl水溶液淬灭。在蒸发meoh后，将混合物用1n的naoh水溶液碱化并用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色油状物形式的5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶(437mg,87％)，在不对其进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.50-1.59(1h,m),1.79-1.87(2h,m),1.93(1h,br.s),2.20-2.28(1h,m),3.01-3.15(2h,m),3.93(3h,s),4.29(1h,t,j＝7.6hz),7.57(1h,dd,j＝8.8,3.2hz),7.83(1h,d,j＝3.2hz)。
实施例4：中间体化合物4的制备
中间体化合物4：(r)-3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶
步骤a：4-氯-n-甲氧基-n-甲基丁酰胺
在0℃下，用超过30分钟的时间，向4-氯丁酰氯(50.0g,355mmol)和n-meo-n-甲胺hcl(34.6g,355mmol)的dcm(709ml)溶液中缓慢加入tea(109ml,780mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌3小时，然后用水(250ml)处理。用盐水洗涤分离的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色油状物形式的4-氯-n-甲氧基-n-甲基丁酰胺(55.0g,94％)，在不对其进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.12(2h,五重峰,j＝6.4hz),2.63(2h,t,j＝7.2hz),3.19(3h,s),3.64(2h,t,j＝6.4hz),3.71(3h,s)。
步骤b：4-氯-1-(5-氟吡啶-3-基)丁烷-1-酮
在-78℃下，向3-溴-5-氟吡啶(30.0g,170mmol)的干燥thf(170ml)溶液中加入异丙基氯化镁(2.0m的thf,102ml,205mmol)。将混合物缓慢升温至0℃，在该温度下搅拌1小时，然后再次冷却至-78℃。在加入4-氯-n-甲氧基-n-甲基丁酰胺(31.1g,188mmol)的干燥thf(100ml)溶液后，伴随搅拌4小时使反应混合物升温至室温，并用饱和nh4cl水溶液淬灭。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝7:1至6:1)，产生黄色油状物形式的4-氯-1-(5-氟吡啶-3-基)丁烷-1-酮(25.1g,125mmol,73％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.27(2h,五重峰,j＝6.4hz),3.22(2h,t,j＝6.8hz),3.70(2h,t,j＝6.4hz),7.93-7.97(1h,m),8.68(1h,d,j＝3.2hz),9.03(1h,t,j＝1.6hz)。
步骤c：(s,z)-n-(4-氯-1-(5-氟吡啶-3-基)亚丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。
将4-氯-1-(5-氟吡啶-3-基)丁烷-1-酮(25.1g,125mmol)、(s)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(22.6g,187mmol)和四乙氧基钛(42.6g,187mmol)的thf(249ml)溶液在75℃下加热48小时，并冷却至室温。在加入etoac(100ml)和盐水(100ml)后，将所得混合物在室温下搅拌1小时。将沉淀的固体滤除并用etoac洗涤。滤液用水洗涤两次，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝3:1to2:1)，产生黄色油状物形式的(s,z)-n-(4-氯-1-(5-氟吡啶-3-基)亚丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30.0g,79％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.35(9h,s),2.09-2.26(2h,m),3.31-3.38(1h,m),3.44-3.51(1h,m),3.62-3.71(2h,m),7.87(1h,d,j＝9.2hz),8.59(1h,d,j＝2.8hz),8.92(1h,s)。
步骤d：3-((r)-1-((s)-叔丁基亚磺酰基)-吡咯烷-2-基)-5-氟吡啶
在-78℃下，向(s,z)-n-(4-氯-1-(5-氟吡啶-3-基)亚丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(10.0g,32.8mmol)的干燥thf(131ml)溶液中加入超氢化物(1m的thf溶液,36.1ml,36.1mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时，升温至室温并在室温下搅拌12小时。在用饱和nh4cl水溶液淬灭后，将混合物用etoac萃取两次。将合并的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1至1:2至1:3至etoac)，产生黄色油状物形式的3-((r)-1-((s)-叔丁基亚磺酰基)-吡咯烷-2-基)-5-氟吡啶(3.73g,42％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.13(9h,s),1.75-1.79(1h,m),1.79-2.04(2h,m),2.28-2.36(1h,m),2.97-3.03(1h,m),3.90-3.95(1h,m),4.71(1h,t,j＝7.2hz),7.33-7.36(1h,m),8.38-8.39(2h,m)。
步骤e：(r)-3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶
在0℃下，向3-((r)-1-((s)-叔丁基亚磺酰基)-吡咯烷-2-基)-5-氟吡啶(7.47g,27.6mmol)的meoh(55ml)溶液中加入hcl(4m的二氧六环溶液,34.5ml,138mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时。在真空浓缩后，将残留物溶于水(100ml)中并用etoac(100ml)洗涤。用1n的naoh水溶液(150ml)中和分离的水层，用dcm(100ml×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡红色油状物形式的(r)-3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶(4.35g,95％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.60-1.69(1h,m),1.83-1.97(3h,m),2.20-2.29(1h,m),3.04-3.10(1h,m),3.15-3.21(1h,m),4.23(1h,t,j＝7.6hz),7.47-7.51(1h,m),8.33(1h,d,j＝2.8hz),8.40(1h,s)。
实施例5：中间体化合物5的制备
中间体化合物5：(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷
步骤a：4-氯-1-(2,5-二氟苯基)丁烷-1-酮
在-78℃下，向2-溴-1,4-二氟苯(30.0g,155mmol)的干燥thf(155ml)溶液中加入异丙基氯化镁(2m的thf溶液,93.0ml,187mmol)。将混合物缓慢升温至0℃，在该温度下搅拌1小时，然后再次冷却至-78℃。在加入4-氯-n-甲氧基-n-甲基丁酰胺(28.3g,171mmol)的thf(100ml)溶液后，伴随搅拌4小时使反应混合物升温至室温时间，并用饱和nh4cl水溶液淬灭。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝7:1至6:1)，产生淡黄色油状物形式的4-氯-1-(2,5-二氟苯基)丁烷-1-酮(13.3g,39％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.22(2h,五重峰,j＝6.8hz),3.16-3.20(2h,m),3.67(2h,t,j＝6.4hz),7.11-7.17(1h,m),7.20-7.26(1h,m),7.55-7.59(1h,m)。
步骤b：(s,z)-n-(4-氯-1-(2,5-二氟苯基)亚丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
将4-氯-1-(2,5-二氟苯基)丁烷-1-酮(16.4g,75.0mmol)、(s)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(13.6g,113mmol)和四乙氧基钛(25.7g,113mmol)的thf(150ml)溶液在75℃下加热48小时，并冷却至室温。在加入etoac(50ml)和盐水(50ml)后，将所得混合物在室温下剧烈搅拌1小时。将沉淀的固体滤除并用etoac洗涤。滤液用水洗涤两次，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝3:1至2:1)，产生黄色油状物形式的(s,z)-n-(4-氯-1-(2,5-二氟苯基)亚丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(16.3g,67％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.15和1.21(9h,s和s),1.86-2.12(2h,m),2.78-3.30(2h,m),3.60-3.76(2h,m),7.20-7.60(3h,m)。
步骤c：(r)-1-((s)-叔丁基亚磺酰基)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷
在-78℃下，向(s,z)-n-(4-氯-1-(2,5-二氟苯基)亚丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(16.3g,50.7mmol)的干燥thf(203ml)溶液中加入超氢化物(1m的thf溶液,55.7ml,55.7mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时，升温至室温并在室温下搅拌12小时。在用饱和nh4cl水溶液淬灭后，将混合物用etoac萃取。将分离的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝6:1至5:1至4:1)，产生黄色油状物形式的(r)-1-((s)-叔丁基亚磺酰基)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(8.60g,59％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.15(9h,s),1.75-1.80(1h,m),1.82-1.98(2h,m),2.24-2.32(1h,m),2.95-3.01(1h,m),3.87-3.93(1h,m),4.96(1h,t,j＝7.2hz),6.87-6.93(1h,m),6.95-7.06(2h,m)。
步骤d：(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷
在0℃下，向(r)-1-((s)-叔丁基亚磺酰基)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(8.60g,29.9mmol)的meoh(60ml)溶液中加入hcl(4m的二氧六环溶液,37.4ml,150mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时。在真空浓缩后，将残留物溶于水(100ml)中并用etoac(100ml)洗涤。用1n的naoh水溶液(150ml)中和分离的水层，用dcm(100ml×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡红色油状物形式的(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(5.06g,92％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.56-1.65(1h,m),1.78-1.93(3h,m),2.21-2.30(1h,m),3.01-3.08(1h,m),3.13-3.18(1h,m),4.39(1h,t,j＝7.6hz),6.82-6.88(1h,m),6.91-6.97(1h,m),7.22-7.26(1h,m)。
实施例6：中间体化合物6和7的制备
中间体化合物6和7：(2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(6)和(2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(7)
步骤a：(r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯烷-2-酮
在0℃下，向(r)-4-羟基吡咯烷-2-酮(5.00g,49.5mmol)的dmf(24ml)溶液中加入tbscl(7.83g,51.9mmol)和咪唑(5.05g,74.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时并倾倒在冰水中。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生白色固体形式的(r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯烷-2-酮(9.64g,91％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ0.07(6h,s),0.89(9h,s),2.27和2.54(2h,abq,jab＝16.8hz),3.24和3.59(2h,abq,jab＝9.8hz),4.53-4.58(1h,m),6.25(1h,s)。
步骤b：(r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向(r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯烷-2-酮(9.64g,44.8mmol)的ch3cn(90ml)溶液中加入tea(7.49ml,53.7mmol)、dmap(5.47g,44.8mmol)和(t-boc)2o(12.5ml,53.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后在etoac和水之间分层。将分离的有机层用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝3:1)，产生淡褐色固体形式的(r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(13.4g,95％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ0.077(3h,s),0.082(3h,s),0.88(9h,s),1.53(9h,s),2.47和2.71(2h,abq,jab＝17.4hz),3.62和3.86(2h,abq,jab＝11.3hz),4.37-4.41(1h,m)。
步骤c：(2r)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-(2,5-二氟苯基)-4-羟基-丁基氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下，向2-溴-1,4-二氟苯(3.97ml,35.4mmol)的干燥thf(118ml)溶液中加入异丙基氯化镁(2.0m的thf溶液,21.2ml,42.5mmol)。将混合物缓慢升温至0℃，并在该温度下搅拌1小时，然后再次冷却至-78℃。在-78℃下加入(r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(13.4g,42.5mmol)的干燥thf(40ml)溶液后，伴随搅拌1小时使反应混合物升温至0℃。在0℃下加入meoh(118ml)然后nabh4(2.01g,53.1mmol)后，将所得混合物搅拌1小时，然后用饱和nh4cl水溶液淬灭。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝6:1)，产生白色固体形式的(2r)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-(2,5-二氟苯基)-4-羟基丁基氨基甲酸叔丁酯(10.2g,67％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ0.09-0.14(6h,m),0.91-0.93(9h,m),1.44(9h,s),1.73-1.93(2h,m),3.22-3.44(2h,m),3.66-3.83(1h,m),4.06-4.15(1h,m),4.81(1h,s),5.15-5.21(1h,m),6.87-6.97(2h,m),7.22-7.29(1h,m)。
步骤d：(4r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在-60℃下，向(2r)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-(2,5-二氟苯基)-4-羟基丁基氨基甲酸酯(10.0g,23.2mmol)的dcm(116ml)溶液中加入tea(9.69ml,69.5mmol)和mscl(1.99ml,25.5mmol)。将混合物在-60℃下搅拌30分钟。在-60℃下加入dbu(5.24ml,34.8mmol)后，将反应混合物缓慢升温至室温并搅拌过夜。在水的处理之后，将混合物用dcm萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝8:1)，产生无色油状物形式的(4r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯。1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ0.00-0.34(6h,m),0.86-1.08(9h,m),1.36-1.62(9h,m),2.04-2.67(2h,m),3.60-3.93(2h,m),4.50-4.55(1h,m),5.17-5.49(1h,m),6.98-7.33(3h,m)。
步骤e：(4r)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向(4r)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-2-(2,5-二氟苯基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(7.23g,17.5mmol)的thf(35.0ml)溶液中加入tbaf(1.0m的thf溶液,22.7ml,22.7mmol)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物倾倒在冰水中并用etoac萃取。将有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1)，产生白色固体形式的(4r)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(3.81g,73％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ1.20-1.46(9h,m),1.94-2.13(2h,m),2.42-2.59(1h,m),3.56-3.81(2h,m),4.49-4.50(1h,m),5.06-5.30(1h,m),6.88-7.08(3h,m)。
步骤f：(2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6a)和(2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(7a)
在-78℃下，向(4r)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.00g,3.34mmol)的dcm(11ml)溶液中加入dast(0.883ml,6.68mmol)。在-78℃下搅拌2小时后，将反应混合物缓慢升温至室温并搅拌过夜。在通过缓慢加入饱和nahco3水溶液淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝10:1)，产生无色油状物形式的(2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6a)(383mg,38％)和(2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(7a)(252mg,25％)。
(通过与参考文献(wo2012034095a1)比较提出各个异构体的立体化学)
对于(2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(6a)
1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ1.21-1.46(9h,m),1.94-2.10(1h,m),2.71-2.79(1h,m),3.62-3.75(1h,m),3.98-4.14(1h,m),5.09-5.48(2h,m),6.92-7.01(3h,m)
对于(2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(7a)
1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ1.20-1.49(9h,s),2.25-2.35(1h,m),2.48-2.60(1h,m),3.71-4.03(1h,m),5.19-5.33(2h,m),6.88-6.99(3h,m)。
步骤g：(2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(6)
在室温下，向(2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(383mg,1.27mmol)的dcm(2.5ml)溶液中加入tfa(1.96ml,25.4mmol)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物在减压下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液中和，并用etoac萃取。将有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色固体形式的(2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(100mg,39％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ1.66-1.83(1h,m),1.91(1h,s),2.58-2.69(1h,m),3.16-3.40(2h,m),4.71-4.75(1h,m),5.20-5.35(1h,m),6.84-6.90(1h,m),6.93-6.99(1h,m),7.28-7.31(1h,m)。
步骤h：(2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(7)
在室温下向(2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(252mg,0.836mmol)的dcm(1.67ml)溶液中加入tfa(1.29ml,16.7mmol)。搅拌1小时后，将反应混合物在减压下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液中和，并用etoac萃取。将有机层在na2so4上干燥，过滤并在减压下浓缩，产生黄色固体形式的(2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(117mg,70％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安400mhz)：δ1.90-2.05(2h,m),2.53-2.68(1h,m),2.98-3.11(1h,m),3.44-3.52(1h,m),4.42(1h,t,j＝7.8hz),5.28(1h,dt,j＝52.4,4.8hz),6.87-6.92(1h,m),6.93-7.00(1h,m),7.28-7.31(1h,m)。
实施例7：中间体化合物8的制备
中间体化合物8：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
步骤a：5-氧代-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将5-氨基-1h-吡唑-4-羧酸乙酯(20.0g,129mmol)、(e)-3-乙氧基丙烯酸乙酯(22.4ml,155mmol)和碳酸铯(63.0g,193mmol)在dmf(322ml)中的混合物在110℃下搅拌过夜。在冷却至0℃后，将反应混合物用2n的hcl水溶液酸化。通过过滤收集沉淀的固体并用水和etoac洗涤，产生浅黄色固体形式的5-氧代-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(24.7g,92％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.27(3h,t,j＝7.2hz),4.80(2h,q,j＝6.8hz),6.16(1h,d,j＝8.0hz),8.14(1h,s),8.58(1h,d,j＝8.0hz),11.7(1h,br.s)。
步骤b：5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将5-氧代-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(24.7g,119mmol)和pocl3(111ml,1.19mol)的混合物回流2小时。在冷却至室温后，将反应混合物真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac:dcm＝3:1:1至2:1:1)，产生白色固体形式的5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(15.6g,58％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.42(3h,t,j＝7.2hz),4.42(2h,q,j＝7.2hz),7.00(1h,d,j＝7.2hz),8.64(1h,s),8.64(1h,d,j＝7.2hz)。
步骤c：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.00g,4.43mmol)、2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(中间体2,853mg,4.65mmol)和kf(1.28g,22.1mmol)在dmso(14ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物倾倒至水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生黄色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.51g,91％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.30-1.49(3h,m),1.98-2.18(3h,m),2.43-2.58(1h,m),3.95-4.20(2h,m),4.25-4.48(2h,m),5.18-5.23(1h,m),5.82-5.94(1h,m),6.68-6.80(1h,m),6.86-6.98(1h,m),7.00-7.12(1h,m),8.08-8.22(1h,m),8.29(1h,s)。
步骤d：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
在0℃下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.51g,4.06mmol)在etoh(15ml)和水(5.0ml)中的溶液加入lioh(291mg,12.1mmol)。将反应混合物回流5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡黄色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(1.33g,95％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.12(3h,m),2.35-2.46(1h,m),3.58-3.85(1h,m),3.94-4.06(1h,m),5.31和5.53(1h,s+s),6.07和6.67(1h,s+s),6.90-7.42(3h,m),8.10-8.24(1h,m),8.58和8.71(1h,s+s),11.4(1h,br.s)。
实施例8：中间体化合物9的制备
中间体化合物9：5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
步骤a：5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.05g,4.65mmol)、23-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶(中间体1,812mg,4.89mmol)和kf(1.35g,23.3mmol)在dmso(15ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物倾倒至水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生黄色固体形式的5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.53g,93％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.22-1.48(3h,m),2.01-2.28(3h,m),2.24-2.61(1h,m),3.51-4.20(2h,m),4.21-4.40(2h,m),5.02和5.62(1h,s+s),5.90和6.31(1h,s+s),7.20-7.50(1h,m),8.10-8.45(4h,m)。
步骤b：5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
在0℃下，向5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.53g,4.31mmol)在etoh(32ml)和水(10ml)中的溶液加入lioh(309mg,12.9mmol)。将反应混合物回流5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡黄色固体形式的5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(1.23g,87％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.19-2.20(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.60-3.82(1h,m),4.00-4.08(1h,m),5.25-5.48(1h,m),6.12和6.65(1h,s+s),7.66-7.80(1h,m),8.10-8.26(1h,m),8.40-8.80(3h,m),11.6(1h,br.s)。
化合物1-10的制备
实施例9：化合物1的制备：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑
步骤a：n'-乙酰基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体8,100mg,0.290mmol)的dmf(2.0ml)溶液中加入乙酰肼(43.0mg,0.581mmol)、dipea(0.152ml,0.871mmol)、hatu(166mg,0.436mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用etoac稀释。将混合物用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生白色固体形式的n'-乙酰基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(72.0mg,62％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-1.92(2h,m),1.90-1.98(1h,m),2.10-2.16(2h,m),2.38-2.48(1h,m),3.66-3.78(1h,m),5.35-5.37(1h,m),6.26-6.27和6.69-6.71(1h,m),7.02-7.34(3h,m),8.14-8.28(1h,m),8.61-8.68(1h,m),8.82-8.93(1h,m),9.78和10.0(1h,s+s)。*未观察到来自nhnh的两个质子。
步骤b：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑。
在0℃下，向n'-乙酰基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(40.0mg,0.100mmol)的dcm(0.6ml)溶液中加入吡啶(0.0180ml,0.220mmol)。将混合物冷却至-10℃，然后向其中滴加三氟甲磺酸酐(0.0350ml,0.210mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌1小时。在用水淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:3至1:7)，产生白色固体形式的2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑(15.0mg,40％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.04-2.25(3h,m),2.43-2.56(3h,m),4.05-4.30(2h,m),5.20和5.70(1h,s+s),5.93和6.37(1h,s+s),6.74-6.83(1h,m),6.85-7.20(2h,m),7.52-7.54和7.67-7.71(1h,m+m),8.19-8.56(2h,m)。ms：383.3[mh+]。
实施例10：化合物2的制备：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噻二唑
在室温下，向n'-乙酰基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(63.0mg,0.157mmol)的甲苯(3.0ml)溶液中加入劳森试剂(70.0mg,0.173mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌2小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅dcm到dcm:meoh＝10:1)，产生白色固体形式的2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噻二唑(63.0mg,100％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.04-2.30(3h,m),2.40-2.60(1h,m),2.32-2.94(2h,m),3.60-4.40(3h,m),5.22和5.66(1h,s+s),5.91和6.39(1h,s+s),6.65-7.18(3h,m),8.20-8.37(1h,m),8.50-8.60(1h,m)。ms：399.3[mh+]。
实施例11：化合物3的制备：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-乙基-1,3,4-噁二唑
步骤a：2-丙酰肼羧酸叔丁酯
在0℃下，向肼羧酸叔丁酯(3.00g,22.7mmol)、tea(6.33ml,45.4mmol)的dcm(51ml)溶液中加入丙酰氯(3.00ml,34.0mmol)的dcm(10ml)溶液。将反应混合物在0℃下搅拌2小时并用水淬灭。将混合物用dcm萃取，用1n的hcl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1至1:1)，产生白色固体形式的2-丙酰肼羧酸叔丁酯(2.03g,47％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.19(3h,t,j＝7.6hz),1.47(9h,s),2.26(2h,q,j＝7.6hz),6.66(1h,br.s),7.67(1h,br.s)。
步骤b：丙酰肼盐酸盐
在室温下，向2-丙酰肼羧酸叔丁酯(615mg,3.27mmol)的二氧六环(11ml)溶液中加入hcl(4n的二氧六环溶液,6.53ml,26.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并真空浓缩。残留物用乙醚处理。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的丙酰肼盐酸盐(272mg,66％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.00(3h,t,j＝7.6hz),2.20(2h,q,j＝7.6hz),10.4(3h,br.s),11.0(1h,br.s)。
步骤c：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-丙酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼。
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体8,200mg,0.581mmol)的dmf(4.0ml)溶液中加入丙酰肼盐酸盐(145mg,1.16mmol)、dipea(0.406ml,2.32mmol)、hatu(331mg,0.871mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用etoac稀释。将混合物用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生白色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-丙酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(177mg,73％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.27(3h,t,j＝7.4hz),2.04-2.28(3h,m),2.32-2.48(2h,m),2.48-2.51(1h,m),3.70-4.24(2h,m),5.22(0.7h,d,j＝7.2hz),5.50-5.56(0.3h,m),5.92(0.7h,d,j＝7.2hz),6.30-6.38(0.3h,m),6.72-7.09(3h,m),8.02-8.12(0.3h,m),8.16(0.7h,d,j＝7.2hz),8.27-8.40(1h,m),9.13(0.7h,d,j＝6.8hz),9.44-9.52(0.3h,m),10.9(1h,d,j＝6.8hz)。
步骤d：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-乙基-1,3,4-噁二唑
在0℃下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-丙酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(50.0mg,0.121mmol)的dcm(1.0ml)溶液中加入吡啶(0.0220ml,0.278mmol)。将混合物冷却至-10℃，然后向其中滴加三氟甲磺酸酐(0.0430ml,0.253mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌1小时。在用水淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:2至1:3)，产生白色固体形式的2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-乙基-1,3,4-噁二唑(22.1mg,46％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.30-1.50(3h,m),2.00-2.18(3h,m),2.40-2.62(1h,m),2.80-3.04(2h,m),3.66-4.26(2h,m),5.21和5.74(1h,s+s),5.93和6.39(1h,s+s),6.72-7.6.80(1h,m),6.82-7.13(2h,m),8.10-8.40(2h,m)。ms：397.3[mh+]。
实施例12：化合物4的制备：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-乙基-1,3,4-噻二唑
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-丙酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(50.0mg,0.121mmol)的甲苯(2.5ml)溶液中加入劳森试剂(54.0mg,0.133mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌2小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅dcm到dcm:meoh＝50:1)，产生白色固体形式的2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-乙基-1,3,4-噻二唑(32.8mg,65％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.37-1.52(3h,m),2.00-2.21(3h,m),2.42-2.64(1h,m),3.31-3.22(2h,m),3.36-4.20(2h,m),5.21和5.69(1h,s+s),5.90和6.26(1h,s+s),6.65-6.70(1h,m),6.88-7.05(2h,m),8.20-8.38(1h,m),8.52-8.63(1h,m)。ms：413.3[mh+]。
实施例13：化合物5的制备：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噁二唑
步骤a：2-异丁酰肼羧酸叔丁酯
在0℃下，向肼羧酸叔丁酯(10.0g,76.0mmol)、tea(21.1ml,151mmol)的dcm(170ml)的混合物加入异丁酰氯(12.1g,113mmol)的dcm(34ml)溶液)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时并用水淬灭。将混合物用dcm萃取，用1n的hcl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1至1:1)，产生白色固体形式的2-异丁酰肼羧酸叔丁酯(14.0g,91％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.20(6h,d,j＝6.8hz),1.47(9h,s),2.41-2.47(1h,m),6.63(1h,br.s),7.57(1h,br.s)。
步骤b：异丁酰肼盐酸盐
在室温下，向2-异丁酰肼羧酸叔丁酯(14.0g,69.2mmol)的二氧六环(230ml)溶液中加入hcl(4n的二氧六环溶液,104ml,415mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并真空浓缩。残留物用乙醚处理。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的异丁酰肼盐酸盐(8.78g,92％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.06(6h,d,j＝6.8hz),2.52-2.59(1h,m),10.4(3h,br.s),11.1(1h,br.s)。
步骤c：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体8,200mg,0.581mmol)的dmf(4.0ml)溶液中加入异丁酰肼盐酸盐(161mg,1.16mmol)、dipea(0.406ml,2.32mmol)、hatu(331mg,0.871mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用etoac稀释。将混合物用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生淡黄色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(186mg,75％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.28(6h,d,j＝6.0hz),2.52-2.19(3h,m),2.50-2.61(2h,m),3.71-4.25(2h,m),5.22(0.7h,d,j＝7.6hz),5.58-5.62(0.3h,m),5.92(0.7h,d,j＝7.2hz),6.30-6.38(0.3h,m),6.72-7.09(3h,m),8.02-8.12(0.3h,m),8.19(0.7h,d,j＝7.6hz),8.28-8.37(1h,m),9.02(0.7h,d,j＝6.0hz),9.52-9.60(0.3h,m),10.9(1h,d,j＝7.2hz)。
步骤d：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噁二唑。
在0℃下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(70.0mg,0.163mmol)的dcm(1.0ml)溶液中加入吡啶(0.0300ml,0.376mmol)。将混合物冷却至-10℃，然后向其中滴加三氟甲磺酸酐(0.0580ml,0.343mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌1小时。在用水淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:2至1:3)，产生白色固体形式的2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噁二唑(39.0mg,58％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.28-1.52(6h,m),2.00-2.21(2h,m),2.40-2.60(1h,m),3.10-3.30(1h,m),3.50-4.18(3h,m),5.22和5.80(1h,s+s),5.91和6.39(1h,s+s),6.69-6.80(1h,m),6.85-7.12(2h,m),8.12-8.42(2h,m)。ms：411.3[mh+]。
实施例14：化合物6的制备：2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噻二唑
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(100mg,0.233mmol)的甲苯(4.6ml)溶液中加入劳森试剂(104mg,0.23mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌2小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:2到仅etoac)，产生白色固体形式的2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噻二唑(61.0mg,61％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.38-1.58(6h,m),2.01-2.28(3h,m),2.47-2.60(1h,m),3.42-3.75(2h,m),3.85-4.20(2h,m),5.22和5.72(1h,s+s),5.90和6.38(1h,s+s),6.62-6.80(1h,m),6.81-7.02(2h,m),8.20-8.37(1h,m),8.50-8.61(1h,m)。ms：427.3[mh+]。
实施例15：化合物7的制备：2-环丙基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
步骤a：2-(环丙烷羰基)肼羧酸叔丁酯
在0℃下，向肼羧酸叔丁酯(3.00g,22.7mmol)、tea(6.33ml,45.4mmol)在dcm(51ml)中的混合物加入环丙烷羰基氯(3.10ml,34.0mmol)的dcm(10ml)溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1小时并用水淬灭。将混合物用dcm萃取，用1n的hcl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1至1:1)，产生白色固体形式的2-(环丙烷羰基)肼羧酸叔丁酯(2.16g,47％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ0.81-0.84(2h,m),1.02-1.04(2h,m),1.45-1.52(10h,m),6.65(1h,br.s),7.95(1h,br.s)。
步骤b：环丙烷碳酰肼盐酸盐
在室温下，向2-(环丙烷羰基)肼羧酸叔丁酯(2.16g,10.8mmol)的二氧六环(36ml)溶液加入hcl(4n的二氧六环溶液,6.53ml,26.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并真空浓缩。残留物用乙醚处理。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的环丙烷碳酰肼盐酸盐(1.38g,94％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ0.77-0.88(4h,m),1.73-1.79(1h,m),10.5(3h,br.s),11.3(1h,br.s)。
步骤c：n'-(环丙烷羰基)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼。
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体8,200mg,0.581mmol)的dmf(4.0ml)溶液中加入环丙烷碳酰肼盐酸盐(159mg,1.16mmol)、dipea(0.406ml,2.32mmol)、hatu(331mg,0.871mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用etoac稀释。将混合物用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝100:1至20:1)，产生白色固体形式的n'-(环丙烷羰基)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(215mg,87％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ0.84-0.90(2h,m),1.09-0.15(2h,m),2.00-2.25(3h,m),2.48-2.61(1h,m),3.71-4.17(3h,m),5.22(0.7h,d,j＝8.4hz),5.50-5.58(0.3h,m),5.91(0.7h,d,j＝7.6hz),6.30-6.38(0.3h,m),6.71-7.09(2h,m),8.18(0.7h,d,j＝7.2hz),8.52-8.62(0.3h,m),8.25-8.37(2h,m),9.04-9.46(1h,m),10.65-10.75(1h,m)。
步骤d：2-环丙基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
在0℃下，向n'-(环丙烷羰基)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(100mg,0.235mmol)的dcm(1.5ml)溶液中加入吡啶(0.0440ml,0.539mmol)。将混合物冷却至-10℃，然后向其中滴加三氟甲磺酸酐(0.0830ml,0.492mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌1小时。在用水淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:3至1:7)，产生白色固体形式的2-环丙基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑(49.0mg,51％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.00-1.18(4h,m),2.01-2.18(4h,m),2.32-2.61(1h,m),3.61-4.20(2h,m),5.20和5.77(1h,s+s),5.92和6.39(1h,s+s),6.70-6.80(1h,m),6.82-7.12(2h,m),8.12-8.37(2h,m)。ms：409.3[mh+]。
实施例16：化合物8的制备：2-环丙基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
在室温下，向n'-(环丙烷羰基)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(80.0mg,0.188mmol)的甲苯(3.5ml)溶液中加入劳森试剂(76.0mg,0.188mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌2小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝10:1)，产生白色固体形式的2-环丙基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(23.0mg,29％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ0.88-0.95(2h,m),1.10-1.30(2h,m),2.01-2.25(3h,m),2.40-2.61(2h,m),3.61-3.67(1h,m),3.82-4.10(1h,m),5.21和5.68(1h,s+s),5.90和6.37(1h,s+s),6.62-6.80(1h,m),6.83-7.02(1h,m),7.04-7.12(1h,m),8.15-8.42(1h,m),8.50-8.61(1h,m)。ms：425.3[mh+]。
实施例17：化合物9的制备：2-叔丁基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
步骤a：2-新戊酰肼羧酸叔丁酯
在0℃下，向肼羧酸叔丁酯(5.00g,37.8mmol)、tea(10.6ml,76.0mmol)的dcm(85ml)溶液中加入新戊酰氯(6.98ml,56.7mmol)的dcm(85ml)溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1小时并用水淬灭。将混合物用dcm萃取，用1n的hcl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生白色固体形式的2-新戊酰肼羧酸叔丁酯(7.65g,93％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.25(9h,s),1.47(9h,s),6.48(1h,br.s),7.39(1h,br.s)。
步骤b：新戊酰肼盐酸盐
在室温下，向2-新戊酰肼羧酸叔丁酯(7.65g,35.4mmol)的二氧六环(118ml)溶液中加入hcl(4n的二氧六环溶液,70ml,283mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并真空浓缩。残留物用乙醚处理。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的新戊酰肼盐酸盐(5.06g,94％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.17(9h,s),10.3(3h,br.s),10.8(1h,br.s)。
步骤c：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体8,441mg,1.28mmol)的dmf(8.5ml)溶液中加入新戊酰肼盐酸盐(391mg,2.56mmol)、dipea(0.895ml,5.12mmol)、hatu(730mg,1.92mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，倾倒在水中并在室温下搅拌另外30分钟。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(454mg,80％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.19(9h,s),1.81-2.15(3h,m),2.45-2.50(1h,m),3.65-3.72(1h,m),4.00-4.08(1h,m),5.36-5.42(1h,m),6.70(1h,d,j＝8.0hz),6.95-7.11(3h,m),8.23(1h,s),8.55(1h,s),8.83(1h,d,j＝8.0hz),9.53(1h,s)。
步骤d：2-叔丁基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
在0℃下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(651mg,1.47mmol)的dcm(10ml)溶液中加入吡啶(0.274ml,3.38mmol)。将混合物冷却至-10℃，然后向其中滴加三氟甲磺酸酐(0.522ml,3.09mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌1小时。在用水淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:3至1:4)，产生白色固体形式的2-叔丁基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑(402mg,64％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.27和1.44(9h,s+s),1.82-2.18(3h,m),2.32-2.44(1h,m),3.54-3.90(1h,m),4.00-4.08(1h,m),5.32-5.38(0.3h,m),5.67(0.7h,d,j＝7.6hz),6.06-6.12(0.3h,m),6.71(0.7h,d,j＝8.0hz),6.88-7.38(3h,m),8.32-8.42(1h,m),8.58-8.65(0.3h,m),8.84(0.7h,d,j＝8.0hz)。ms：425.3[mh+]。
实施例18：化合物10的制备：2-叔丁基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(50.0mg,0.113mmol)的二甘醇二甲醚(2.2ml)溶液中加入p4s10(100mg,0.226mmol)和na2co3(48.0mg,0.452mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝10:1)，产生白色固体形式的2-叔丁基-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(30.0mg,60％)。ms：441.4[mh+]。
化合物11-15的制备
实施例19：化合物11的制备：2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噻二唑
步骤a：n'-乙酰基-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体9,200mg,0.611mmol)的dmf(4.0ml)溶液中加入乙酰肼(91.0mg,1.22mmol)、dipea(0.320ml,283mmol)和hatu(349mg,0.917mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并倾倒在水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生白色固体形式的n'-乙酰基-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(168mg,71％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.00-2.15(5h,m),2.50-2.63(1h,m),3.68-4.30(2h,m),5.06和5.30(1h,s+s),5.68和6.39(1h,s+s),7.10-7.40(1h,m),8.20-9.04(4h,m),9.84和10.8(1h,s+s)。*未观察到来自nhnh的两个质子。
步骤b：2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噻二唑
在室温下，向n'-乙酰基-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(50.0mg,0.130mmol)的二甘醇二甲醚(2.6ml)溶液中加入p4s10(116mg,0.261mmol)和na2co3(55.0mg,0.522mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌过夜，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝100:1至10:1)，产生白色固体形式的2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噻二唑(36.0mg,72％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.00-2.30(3h,m),2.50-2.80(4h,m),3.62-4.12(2h,m),5.01和5.49(1h,s+s),5.90和6.68(1h,s+s),7.20-2.26(1h,m),8.29-8.62(4h,m)。ms：382.3[mh+]。
实施例20：化合物12的制备：2-乙基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
步骤a：n'-乙酰基-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体9,200mg,0.611mmol)的dmf(4.0ml)溶液中加入丙酰肼盐酸盐(152mg,1.22mmol)、dipea(0.320ml,283mmol)和hatu(349mg,0.917mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并倾倒在水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生白色固体形式的n'-乙酰基-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(168mg,71％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.27(3h,t,j＝7.4hz),2.00-2.28(3h,m),2.32-2.45(3h,m),2.50-2.67(1h,m),3.73-4.26(2h,m),5.07和5.72(1h,s+s),5.71和5.90(1h,s+s),7.21-7.40(1h,m),8.19-9.04(4h,m),9.96和10.84(1h,s+s)。
步骤b：2-乙基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
在室温下，向5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-丙酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(50.0mg,0.126mmol)的二甘醇二甲醚(2.6ml)溶液中加入p4s10(112mg,0.252mmol)和na2co3(53.0mg,0.503mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝50:1至10:1)，产生白色固体形式的2-乙基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(36.0mg,72％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.40-1.52(3h,m),2.00-2.23(3h,m),2.52-2.65(1h,m),3.05-3.20(2h,m),3.60-3.80(2h,m),5.08和5.52(1h,s+s),5.88和6.38(1h,s+s),7.24-7.26(1h,m),8.30-8.60(4h,m)。ms：396.3[mh+]。
实施例21：化合物13的制备：2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噻二唑
步骤a：5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体9,200mg,0.611mmol)的dmf(4.0ml)溶液中加入异丁酰肼盐酸盐(161mg,1.22mmol)、dipea(0.427ml,2.44mmol)和hatu(349mg,0.917mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并倾倒在水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(208mg,83％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.26-1.39(6h,m),2.00-2.26(3h,m),2.50-2.62(2h,m),3.70-4.26(2h,m),5.06和5.32(1h,s+s),5.76(0.3h,s),6.39(0.7h,d,j＝8.0hz),7.26-7.52(1h,m),8.24-8.90(5h,m),10.06和10.85(1h,s+s)。
步骤b：2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噻二唑
在室温下，向5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(50.0mg,0.122mmol)的二甘醇二甲醚(2.6ml)溶液中加入p4s10(108mg,0.243mmol)和na2co3(52.0mg,0.486mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌过夜，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝100:1至20:1)，产生白色固体形式的2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噻二唑(37.0mg,74％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.35-1.70(7h,m),2.00-2.28(3h,m),2.52-2.67(1h,m),3.38-3.57(1h,m),3.61-3.80(1h,m),3.87-4.17(1h,m),5.08和5.51(1h,s+s),5.84和6.38(1h,s+s),7.22-7.26(1h,m),8.29-8.40(1h,m),8.42(1h,s),8.55(1h,s)。ms：410.3[mh+]。
实施例22：化合物14的制备：2-环丙基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
步骤a：n'-(环丙烷羰基)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体9,200mg,0.611mmol)的dmf(4.0ml)溶液中加入环丙烷碳酰肼盐酸盐(167mg,1.22mmol)、dipea(0.427ml,2.44mmol)和hatu(349mg,0.917mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并倾倒在水中。混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的n'-(环丙烷羰基)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(196mg,78％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ0.80-0.98(2h,m),1.15-1.28(2h,m),1.50-1.55(1h,m),1.97-2.27(3h,m),2.47-2.61(1h,m),3.60-4.30(2h,m),5.06和5.66(1h,s+s),5.88和6.39(1h,s+s),7.02-7.33(1h,m),8.24-8.36(4h,m),8.74和9.21(1h,s+s),9.94和10.71(1h,s+s)。
步骤b：2-环丙基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
在室温下，向n'-(环丙烷羰基)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(50.0mg,0.122mmol)的二甘醇二甲醚(2.6ml)溶液中加入p4s10(109mg,0.244mmol)和na2co3(52.0mg,0.488mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝100:1至20:1)，产生白色固体形式的2-环丙基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(33.0mg,66％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ0.94-1.17(2h,m),1.17-1.31(2h,m),2.04-2.28(3h,m),2.37-2.48(1h,m),2.52-2.68(1h,m),3.50-4.17(3h,m),5.07和5.58(1h,s+s),5.90和6.37(1h,s+s),7.22(1h,d,j＝7.2hz),8.30-8.40(1h,m),8.43(1h,s),8.48-5.56(1h,m)。ms：408.3[mh+]。
实施例23：化合物15的制备：2-叔丁基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
步骤a：5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体9,316mg,0.965mmol)的dmf(6.4ml)溶液中加入新戊酰肼盐酸盐(442mg,290mmol)、dipea(0.674ml,3.86mmol)和hatu(551mg,1.45mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并倾倒在水中。混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生白色固体形式的5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(362mg,88％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.20(9h,s),1.80-2.10(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.62-3.82(1h,m),4.00-4.10(1h,m),5.36(0.7h,d,j＝8.0hz),6.17(0.3h,d,j＝8.4hz),6.71(0.7h,d,j＝7.6hz),7.65(0.3h,d,j＝8.0hz),7.51(1h,d,j＝7.4hz),8.13和8.22(1h,s+s),8.28和8.43(1h,s+s),8.36和8.50(1h,s+s),8.64(0.3h,d,j＝7.2hz),8.83(0.7h,d,j＝7.6hz),8.79(1h,s),9.55和9.80(1h,s+s)。
步骤b：2-叔丁基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
在室温下，向5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(100mg,0.235mmol)的二甘醇二甲醚(4.7ml)溶液中加入p4s10(209mg,0.470mmol)和na2co3(100mg,0.940mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌4小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝20:1)，产生白色固体形式的2-叔丁基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(34.0mg,34％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.42和1.48(9h,s+s),1.90-2.07(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.69(1h,q,j＝8.8hz),4.00-4.18(1h,m),5.35(0.2h,s),5.46(0.8h,d,j＝8.4hz),6.18(0.2h,s),6.71(0.8h,d,j＝8.0hz),7.69(1h,d,j＝10.0hz),8.38-8.40(2h,m),8.48(1h,s),8.83(1h,d,j＝7.6hz)。ms：424.4[mh+]。
实施例24：化合物16的制备：2-叔丁基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
将5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(60.0mg,0.141mmol)和pocl3(0.394ml,4.23mmol)的混合物回流2小时。在冷却至室温后，将反应混合物在水和dcm之间分层。将分离的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝50:1至30:1)，产生白色固体形式的2-叔丁基-5-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑(38.0mg,66％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.27和1.44(9h,s+s),1.89-2.21(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.61-3.88(1h,m),3.93-4.11(1h,m),5.32(0.3h,s),5.55(0.7h,d,j＝8.0hz),6.18(0.3h,s),6.70(0.7h,d,j＝7.6hz),7.65(1h,d,j＝9.2hz),8.34-8.45(3h,m),8.64-8.83(1h,m)。ms：408.4[mh+]。
实施例25：中间体化合物10的制备
中间体化合物10：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
步骤a：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.30g,5.76mmol)、(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(中间体5,1.13g,6.6mmol)和kf(1.67g,28.8mmol)在dmso(19ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物在水和etoac之间分层。将分离的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生黄色固体形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(2.11g,98％)。ms：372.90[mh+]
步骤b：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
在0℃下，向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸酯(2.11g,5.68mmol)的etoh(42ml)和水(14ml)溶液中加入lioh(408mg,17.0mmol)。将反应混合物在90℃下加热5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡黄色固体形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(1.92g,98％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.92-2.04(3h,m),2.33-2.60(1h,br.s),3.64(0.5h,br.s),3.77(0.5h,br.s),4.00(1h,br.s),5.32(0.5h,s),5.53(0.5h,s),6.07(0.5h,s),6.67(0.5h,s),6.99-7.33(3h,m),8.15-8.19(1h,m),8.59和8.77(1h,s+s),11.45(1h,s)。
实施例26：中间体化合物11的制备
中间体化合物11：(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
步骤a：(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(5.70g,25.3mmol)、(r)-3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶(中间体4,4.37g,26.3mmol)和kf(7.34g,126mmol)在dmso(15ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物在水和etoac之间分层。将分离的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:3至1:4)，产生淡黄色固体形式的(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(6.42g,71％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz):δ1.17-1.30(3h,m),1.91-2.09(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.61-3.82(1h,m),3.94-4.08(1h,m),4.09-4.29(2h,m),5.24-5.34(0.3h,m),5.35-5.48(0.7h,m),6.10-6.19(0.3h,m),6.65-6.71(0.7h,m),7.60-7.74(1h,m),8.12-8.24(1h,m),8.36-8.54(2h,m),8.55-8.65(0.3h,m),8.70-8.81(0.7h,m)。
步骤b：(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
在0℃下，向(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(6.56g,18.4mmol)的etoh(70ml)和水(23ml)溶液中加入lioh(1.33g,55.4mmol)。将反应混合物在90℃下加热5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡黄色固体形式的(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(5.80g,96％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.89-2.20(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.61-3.82(1h,m),3.92-4.08(1h,m),5.24-5.48(1h,m),6.12和6.63(1h,s+s),7.56-7.78(1h,m),8.46(1h,s),8.32-8.78(3h,m),11.54(1h,s)。
实施例27：中间体化合物12的制备
中间体化合物12：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛
步骤a：吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇
在室温下，向钠金属(11.1g,481mmol)的etoh(344ml)溶液加入1h-吡唑-3-胺(20.0g,241mmol)和1,3-二甲基嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(35.4g,253mmol)。将反应混合物回流过夜并冷却至室温。通过过滤收集沉淀的固体，用冷etoh洗涤并在真空下干燥，产生白色固体形式的吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇(36.0g,>99％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ5.35(1h,d,j＝1.6hz),5.63(1h,d,j＝7.2hz),7.43(1h,d,j＝1.6hz),7.97(1h,d,j＝7.2hz)。*未观察到来自oh的质子。
步骤b：5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇(32.0g,237mmol)和pocl3(177ml,1.89mol)的混合物回流3小时。在冷却至室温后，将反应混合物真空浓缩。将残留物用dcm稀释，用饱和nahco3水溶液洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝20:1)，产生黄色固体形式的5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶(14.1g,38％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ6.73(1h,dd,j＝2.0,0.8hz),7.14(1h,d,j＝7.2hz),8.29(1h,d,j＝2.4hz),9.19(1h,dd,j＝7.2,0.8hz)。
步骤c：5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛
在室温下，向5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶(14.1g,92.0mmol)的dmf(184ml)溶液中加入pocl3(21.4ml,230mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用冰淬灭。将混合物用1n的naoh水溶液中和。通过过滤收集沉淀的黄色固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(15.1g,90％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ7.50(1h,d,j＝7.2hz),8.76(1h,s),9.40(1h,d,j＝7.2hz),10.09(1h,s)。
步骤d：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(4.70g,25.9mmol)、(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(中间体5,5.07g,27.7mmol)和kf(7.52g,129mmol)在dmso(86ml)中的混合物在180℃下加热2小时。在冷却至室温后，将反应混合物倾倒至水中。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1)，产生黄色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(8.50g,100％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.90-2.28(3h,m),2.38-2.60(1h,m),3.60-4.18(2h,m),5.14-5.28(0.6h,m),5.54-5.72(0.4h,m),5.84-6.02(0.6h,m),6.35-6.46(0.4h,m),6.68-6.78(1h,m),6.82-7.20(2h,m),8.10-8.36(2h,m),9.77和10.11(1h,s+s)。
实施例28：化合物17的制备
化合物17：(r)-2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噻二唑
步骤a：(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体11,5.65g,17.3mmol)的dmf(115ml)溶液中加入异丁酰肼盐酸盐(4.78g,34.5mmol)、dipea(12.1ml,69.0mmol)和hatu(13.1mg,34.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并在水和etoac之间分层。将分离的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝20:1)，产生白色固体形式的(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(6.14g,86％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.03-1.42(6h,m),1.80-2.10(3h,m),3.66-3.81(1h,m),4.00-4.15(1h,m),5.36(0.3h,d,j＝7.2hz),5.43(0.7h,d,j＝6.8hz),6.17(0.3h,d,j＝7.6hz),6.71(0.7h,d,j＝7.6hz),7.53(0.7h,d,j＝9.6hz),7.65(0.3h,d,j＝10.0hz),8.14和8.23(1h,s+s),8.29和8.43(1h,s+s),8.36和8.50(1h,s+s),8.64(0.3h,d,j＝7.2hz),8.83(0.7h,d,j＝8.0hz),9.08(0.7h,d,j＝2.8hz),9.92(0.3h,s),10.10(0.7h,d,j＝3.6hz),10.44(0.3h,s)。*未观察到来自nhnh的两个质子。
步骤b：(r)-2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噻二唑
在室温下，向(r)-5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-异丁酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(5.20g,12.6mmol)的thf(250ml)溶液中加入劳森试剂(10.2g,25.3mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并在水和etoac之间分层。将分离的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝50:1)，产生白色固体形式的(r)-2-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-异丙基-1,3,4-噻二唑(1.88g,36％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.34-1.38(6h,m),1.87-2.10(3h,m),3.35-3.85(1h,m),3.66-3.75(1h,m),4.03-4.12(1h,m),5.35(0.2h,d,j＝6.4hz),5.44(0.8h,d,j＝6.8hz),6.17(0.2h,s),6.71(0.8h,d,j＝7.6hz),7.70(1h,d,j＝9.2hz),8.35-8.44(2h,m),8.45-5.57(2h,m),8.64(0.2h,s),8.83(0.8h,d,j＝8.0hz)。ms：410.4[mh+]。
实施例29：化合物18的制备
化合物18：(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)-1,3,4-噁二唑
步骤a：(r)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑-2-胺
在室温下，向肼甲酰胺盐酸盐(85.0mg,0.761mmol)和乙酸钠(62.0mg,0.761mmol)的水(1.5ml)溶液中加入(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(中间体12,250mg,0.761mmol)的meoh(1.5ml)溶液。将反应混合物在室温下搅拌10分钟并真空浓缩。将所得残留物溶于二氧六环中(7.7ml)。在加入k2co3(316mg,2.28mmol)，然后加入碘(232mg,0.914mmol)后，将反应混合物在80℃下搅拌4小时，冷却至室温，然后用5％na2s2o3水溶液淬灭。将混合物用dcm/meoh(10:1,10ml×4)萃取。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝50:1至25:1)，产生黄色固体形式的(r)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑-2-胺(179mg,61％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.05(3h,m),2.35-2.55(1h,m),3.50-3.80(1h,m),3.90-4.05(1h,m),5.30和5.54(1h,s+s),6.05-6.67(1h,m),6.68-7.38(4h,m),8.00-8.18(1h,m),8.50-8.80(1h,m)。
步骤b：(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
在室温下，向溴化铜(ii)(125mg,0.560mmol)和亚硝酸叔丁酯(0.0670ml,0.560mmol)的ch3cn(1.9ml)溶液中加入(r)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑-2-胺(179mg,0.467mmol)的ch3cn(3.8ml)溶液。将反应混合物在65℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物在水和etoac之间分层。分离的水层用etoac萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1至1:1)，产生淡黄色固体形式的(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑(72.0mg,34％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.05(3h,m),2.35-2.50(1h,m),3.60-3.88(1h,m),3.96-4.08(1h,m),5.36和5.53(1h,s+s),6.12和6.69(1h,s+s),6.90-7.40(3h,m),8.33-8.40(1h,m),8.62-8.82(1h,m)。
步骤c：(r)-4-(5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑(72.0mg,0.161mmol)和叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(60.0mg,0.322mmol)的dmf(2.0ml)溶液中加入dipea(0.0840ml,0.483mmol)和dmap(20.0mg,0.161mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌7小时并倾倒入h2o中。混合物用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:3至1:9)，产生淡黄色固体形式的(r)-4-(5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(58.0mg,65％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.45(9h,s),1.80-2.10(3h,m),2.30-2.45(1h,m),2.95-3.08(1h,m),3.20-3.63(4h,m),3.40-3.51(3h,m),3.52-3.88(1h,m),3.98-4.08(1h,m),5.39和5.69(1h,s+s),6.14和6.66(1h,s+s),6.82-7.40(3h,m),8.20-8.30(1h,m),8.55-5.88(1h,m)。
步骤d：(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)-1,3,4-噁二唑
在室温下，向(r)-4-(5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(58.0mg,0.105mmol)的dcm(0.70ml)溶液中加入tfa(0.162ml,2.10mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用饱和nahco3水溶液碱化，用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝30:1至4:1)，产生淡黄色固体形式的(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)-1,3,4-噁二唑(29.0mg,61％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.82-2.08(4h,m),2.30-2.45(1h,m),2.74-2.90(4h,m),3.10-3.28(3h,m),3.36-3.45(1h,m),3.52-3.84(1h,m),3.96-4.06(1h,m),5.29和5.61(1h,s+s),6.06和6.66(1h,s+s),6.90-7.40(3h,m),8.20-8.30(1h,m),8.55-8.80(1h,m)。ms：453.2[mh+]。
实施例30：化合物19的制备
化合物19：(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(1h-吡唑-4-基)-1,3,4-噻二唑
步骤a：(r)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃下，向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体10,1.00g,2.90mmol)和氨基硫脲(265mg,2.90mmol)的混合物加入pocl3(1.08ml,11.6mmol)。在密封管中将反应混合物在80℃下搅拌3小时，同时每小时释放积聚的压力。在冷却至0℃后，将反应混合物倾倒至水中。将混合物剧烈搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体，用水洗涤并真空干燥，产生淡黄色固体形式的(r)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.16g,>99％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.85-2.20(3h,m),2.45-2.55(1h,m),3.50-3.75(4h,m),5.38(0.5h,d,j＝8.0hz),5.50(0.5h,d,j＝7.6hz),6.15(0.5h,d,j＝7.6hz),6.73(0.5h,d,j＝7.6hz),6.95-7.30(2h,m),7.33-7.39(1h,m),8.37和8.49(1h,s+s),8.72(0.5h,d,j＝6.0hz),8.92(0.5h,d,j＝7.6hz)。9.36(1h,br.s)。
步骤b：(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
在室温下，向cubr2(777mg,3.48mmol)和亚硝酸叔丁酯(4.14ml,3.48mmol)的ch3cn(9.6ml)溶液中加入(r)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.15g,2.90mmol)的ch3cn(19ml)溶液。将反应混合物在65℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物在水和etoac之间分层。分离的水层用etoac萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1至1:2)，产生淡黄色固体形式的(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(586mg,43％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.14-2.18(3h,m),2.46-2.56(1h,m),3.63-3.82(1h,m),4.03-4.07(1h,m),5.36(0.3h,d,j＝8.4h),5.46(0.7h,d.j＝8.4),6.37(0.3h,d.j＝7.2hz),6.72(0.7h,d,j＝8.0hz),6.95-7.40(3h,m),8.40和8.50(1h,s+s),8.66(0.3h,d,j＝7.2hz),8.85(0.7h,d,j＝7.6hz)。
步骤c：(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(1h-吡唑-4-基)-1,3,4-噻二唑
用n2气将(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(100mg,0.216mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1h-吡唑-1-羧酸叔丁酯(127mg,0.432mmol)、k3po4(137mg,0.648mmol)和pdcl2(dppf)-ch2cl2加合物(35.0mg,0.043mmol)在二氧六环(1.9ml)和水(0.21ml)中的混合物脱气。在密封管中将反应混合物在100℃下搅拌15小时。在真空浓缩后，残留物用etoac稀释并通过硅胶垫过滤。将滤液真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝50:1至15:1)，产生白色固体形式的(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(1h-吡唑-4-基)-1,3,4-噻二唑(14.0mg,14％)。ms：451.2[mh+]。
实施例31：化合物20的制备：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(哌啶-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
用n2气将(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(100mg,0.216mmol)、1h-吡唑-3-基硼酸(48.0mg,0.432mmol)、k3po4(137mg,0.648mmol)和pdcl2(dppf)-ch2cl2加合物(35.0mg,0.043mmol)在二氧六环(1.9ml)和水(0.21ml)中的混合物脱气。在密封管中将反应混合物在100℃下搅拌15小时。在真空浓缩后，残留物用etoac稀释并通过硅胶垫过滤。将滤液真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝50:1至15:1)，产生白色固体形式的(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(1h-吡唑-3-基)-1,3,4-噻二唑(16.0mg,16％)。ms：451.2[mh+]。
实施例32：化合物21的制备：(r)-n-(5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑-2-基)苯甲酰胺
在室温下，向(r)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(50.0mg,0.125mmol)的dmf(0.20ml)溶液中加入tea(0.0130ml)，然后加入苯甲酰氯(0.0150ml,0.125mmol)。将反应混合物在室温下搅拌8小时，然后用水处理。通过过滤收集沉淀的固体，用水洗涤并在真空下干燥。固体通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:4至1:5)，产生淡黄色固体形式的(r)-n-(5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑-2-基)苯甲酰胺(23.0mg,36％)。ms：504.3[mh+]。
实施例33：化合物22的制备
化合物22：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(哌啶-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
在室温下，向(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(89.0mg,0.192mmol)和哌嗪(41.0mg,0.480mmol)的dmf(2.4ml)溶液中加入dipea(0.0840ml,0.480mmol)。将反应混合物在70℃下搅拌16小时，冷却至室温并倾倒在水中。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4下干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝20:1至仅meoh)，产生黄色固体形式的(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌嗪-1-基)-1,3,4-噻二唑(12.0mg,13％)。ms：469.3[mh+]。
实施例34：化合物23的制备：(r)-2-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑
在室温下，向(r)-2-溴-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(100mg,0.216mmol)和1,4-二氮杂环庚烷(43.0mg,0.432mmol)的dmf(2.7ml)溶液中加入dipea(0.113ml,0.648mmol)。将反应混合物在70℃下搅拌16小时，冷却至室温并倾倒在水中。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4下干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝20:1到仅meoh)，产生黄色固体形式的(r)-2-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噻二唑(16.0mg,15％)。ms：483.3[mh+]。
实施例35：化合物24的制备
化合物24：(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌啶-4-基)-1,3,4-噁二唑
步骤a：4-(肼羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向4-乙基哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁酯(2.00g,7.77mmol)的etoh(26ml)溶液中加入水合肼(5.84g,117mmol)。将反应混合物回流过夜，冷却至室温并真空浓缩。将残留物溶于dcm中，用水洗涤3次，然后盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生白色固体形式的4-(肼羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(985mg,52％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.46(9h,s),1.58-1.70(2h,m),1.73-1.85(2h,m),2.19-2.26(1h,m),2.27(2h,br.s),3.90(2h,s),4.15(2h,br.s),6.99(1h,s)。
步骤b：(r)-4-(2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)肼羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(中间体10,200mg,0.581mmol)的dmf(3.8ml)溶液中加入4-(肼羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(212mg,0.871mmol)、dipea(0.304ml,1.74mmol)、hatu(331mg,0.871mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生白色固体形式的(r)-4-(2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)肼羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(265mg,80％)。ms：569.90[mh+]。
(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌啶-4-基)-1,3,4-噁二唑
在0℃下，向(r)-4-(2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)肼羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(90.0mg,0.158mmol)的dcm(1.0ml)溶液中加入吡啶(0.0290ml,0.363mmol)。将混合物冷却至-10℃，并向其中滴加三氟甲磺酸酐(0.0560ml,0.332mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌1小时。在用水淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝20:1至5:1)，产生黄色固体形式的(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌啶-4-基)-1,3,4-噁二唑(31.0mg,43％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.28(4h,m),2.30-2.62(4h,m),3.13-3.33(2h,m),3.35-3.74(4h,m),3.82-4.22(2h,m),5.21和5.76(1h,s+s),5.93和6.42(1h,s+s),6.65-6.80(1h,m),6.58-7.15(2h,m),8.19-8.38(2h,m)。
实施例36：化合物25的制备：(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌啶-4-基)-1,3,4-噻二唑
在室温下，向(r)-4-(2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)肼羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(90.0mg,0.158mmol)的二甘醇二甲醚(3.1ml)溶液中加入p4s10(140mg,0.316mmol)和na2co3(67.0mg,0.632mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2小时，冷却至室温并在水和etoac之间分层。将分离的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝10:1)，产生黄色固体形式的(r)-2-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-5-(哌啶-4-基)-1,3,4-噻二唑(49.0mg,66％)。ms：468.2[mh+]。
实施例37：化合物26的制备
化合物26：2-叔丁基-5-(5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
步骤a：(r)-5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(100mg,0.443mmol)、(2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(中间体6,94.0mg,0.465mmol)和kf(129mg,2.21mmol)在dmso(1.5ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物在水和etoac之间分层。将分离的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生淡黄色泡沫形式的(r)-5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(161mg,93％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.16-1.30(3h,m),2.10-2.34(1h,m),2.73-2.95(1h,m),4.00-4.30(3h,m),4.52和5.47(1h,s+s),5.49-5.67(2h,m),6.11和6.74(1h,s+s),7.12-7.40(3h,m),8.15-8.30(1h,m),8.60-8.82(1h,m)。
步骤b：5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
在0℃下，向5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(161mg,0.412mmol)的etoh(3.0ml)和水(1.0ml)溶液中加入lioh(30.0mg,1.24mmol)。将反应混合物在90℃下加热5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生白色固体形式的5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(107mg,72％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ2.93-2.37(1h,m),2.70-2.95(1h,m),3.94-4.60(2h,m),5.35-5.68(2h,m),6.11和6.71(1h,s+s),7.00-7.40(3h,m),8.17(1h,s),8.60-6.82(1h,m),11.60(1h,br.s)。
步骤c：5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(107mg,0.295mmol)的dmf(2.0ml)溶液中加入新戊酰肼盐酸盐(135mg,0.886mmol)、dipea(0.206ml,1.18mmol)和hatu(168mg,0.443mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并倾倒在水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生白色固体形式的5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(101mg,74％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.17-1.26(9h,m),2.10-2.30(1h,m),2.78-2.95(1h,m),4.10-4.38(2h,m),5.35-5.67(2h,m),6.14(0.3h,s),6.76(0.7h,d,j＝7.6hz),7.02-7.40(3h,m),8.15和8.24(1h,s+s),8.39和8.71(1h,s+s),8.86(1h,d,j＝7.2hz),9.48和9.83(1h,s+s)。
步骤d：2-叔丁基-5-(5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
在0℃下，向5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(101mg,0.219mmol)的dcm(1.5ml)溶液中加入吡啶(0.0410ml,0.505mmol)。将混合物冷却至-10℃，然后向其中滴加三氟甲磺酸酐(0.0780ml,0.461mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌1小时。在用水淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生白色固体形式的2-叔丁基-5-(5-((2r,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑(68.0mg,70％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.23-1.44(9h,m),2.10-2.38(1h,m),2.80-3.00(1h,m),4.00-4.60(2h,m),5.35-5.51(1h,m),5.52-5.71(1h,m),6.14和6.81(1h,s+s),7.02-7.40(3h,m),8.38(1h,s),8.71-8.87(1h,m)。ms：443.4[mh+]。
实施例38：化合物27的制备
化合物27：5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
步骤a：5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸酯。
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(112mg,0.496mmol)、(2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(中间体7,105mg,0.521mmol)和kf(114mg,2.48mmol)在dmso(1.6ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物倾倒至水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(171mg,88％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.04-1.38(3h,m),2.17-2.40(1h,m),2.62-2.98(1h,m),3.85-4.39(4h,m),5.45-5.53(1h,m),5.61和5.75(1h,s+s),6.17和6.71(1h,s+s),6.87-6.95(1h,m),7.05-7.40(2h,m),8.18-8.29(1h,m),8.60-8.90(1h,m)。
步骤b：5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
在0℃下，向5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(171mg,0.438mmol)的etoh(3.3ml)和水(1.1ml)溶液中加入lioh(31.0mg,1.31mmol)。将反应混合物在90℃下加热5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色固体形式的5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(150mg,95％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ2.26-2.34(1h,m),2.70-2.95(1h,m),3.92-4.18(1h,m),4.20-4.38(1h,m),5.46-6.17(3h,m),6.84-6.92(1h,m),7.09-7.19(1h,m),7.25-7.28(1h,m),8.18(1h,s),8.60-8.75(1h,m)。*未观察到来自co2h的质子。
步骤c：5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(150mg,0.414mmol)的dmf(2.7ml)溶液中加入新戊酰肼盐酸盐(190mg,1.24mmol)、dipea(0.289ml,1.65mmol)和hatu(236mg,0.621mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并倾倒在水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(102mg,53％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),2.15-2.40(1h,m),2.70-2.98(1h,m),3.88-4.18(1h,m),4.20-4.45(1h,m),5.40-5.60(2h,m),6.75(1h,d,j＝7.6hz),6.85-7.40(3h,m),8.17和8.27(1h,s+s),8.53和8.71(1h,s+s),8.91(1h,d,j＝7.6hz),9.39和9.55(1h,s+s)。
步骤d：2-叔丁基-5-(5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
在0℃下，向5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(102mg,0.222mmol)的dcm(1.5ml)溶液中加入吡啶(0.0410ml,0.509mmol)。将混合物冷却至-10℃，然后向其中滴加三氟甲磺酸酐(0.0790ml,0.465mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌1小时。在用水淬灭后，将混合物用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:3)，产生白色固体形式的2-叔丁基-5-(5-((2s,4s)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑(28.0mg,26％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.15-1.52(9h,m),2.20-2.40(1h,m),2.65-2.81(1h,m),3.88-4.38(2h,m),5.40-5.85(2h,m),6.19-6.75(1h,m),6.85-7.40(3h,m),8.34(1h,s),8.70-8.70(1h,m)。ms：443.4[mh+]。
实施例39：化合物28的制备
化合物28：2-叔丁基-5-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
步骤a：5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(200mg,0.886mmol)、5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶(中间体3,186mg,0.948mmol)和kf(257mg,4.43mmol)在dmso(3.0ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物在水和etoac之间分层。将分离的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生白色泡沫形式的5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(225mg,74％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.25-1.30(3h,m),1.88-2.08(3h,m),2.23-2.37(1h,m),3.48-3.85(1h,m),3.90-4.09(5h,m),4.15-4.30(1h,m),5.14(0.3h,m),5.48(0.7h,d,j＝7.6hz),5.98(0.3h,m),6.65(0.7h,d,j＝6.8hz),7.22-7.41(1h,m),7.93-8.11(1h,m),8.12-8.30(1h,m)。8.53(0.3h,s),8.76(0.7h,d,j＝7.2hz)。
步骤b：5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸
在0℃下，向5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)环戊基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(255mg,0.663mmol)的etoh(5.0ml)和水(1.6ml)溶液中加入lioh(48.0mg,1.99mmol)。将反应混合物在90℃下加热5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生白色固体形式的5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(170mg,72％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.82-2.08(3h,m),2.26-2.48(1h,m),3.45-3.80(2h,m),3.88-4.08(3h,m),5.15和5.46(1h,s+s),6.64和7.34(1h,s+s),7.34(1h,s),7.92-8.18(2h,m),8.42-8.85(1h,m)。*未观察到来自co2h的质子。
步骤c：5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼
在室温下，向5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(170mg,0.476mmol)的dmf(3.1ml)溶液中加入新戊酰肼盐酸盐(218mg,0.1.43mmol)、dipea(0.332ml,1.90mmol)和hatu(271mg,0.714mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并倾倒在水中。将混合物搅拌30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生白色固体形式的5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(164mg,76％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.10-1.23(9h,m),1.77-2.10(3h,m),2.20-2.48(1h,m),3.57-3.78(1h,m),3.88-3.99(3h,m),4.00-4.10(1h,m),5.19(0.3h,d,j＝7.2hz),5.31(0.7h,d,j＝8.8hz),6.01(0.3h,d,j＝8.4hz),6.69(0.7h,d,j＝7.6hz),7.3-7.42(1h,m),7.89-7.98(1h,m),8.05-8.18(1h,m),8.19-8.32(1h,m),8.60(0.3h,d,j＝8.0hz),8.83(0.7h,d,j＝7.6hz),9.29和9.54(1h,s+s)。
步骤d：2-叔丁基-5-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑
将5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-n'-新戊酰吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-碳酰肼(110mg,242mmol)和pocl3(0.675ml,7.25mmol)的混合物回流2小时。在冷却至室温后，将反应混合物在水和dcm之间分层。将分离的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1至1:4)，产生白色固体形式的2-叔丁基-5-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑(61.0mg,58％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.22和1.44(9h,s+s),1.70-2.10(3h,m),2.20-2.40(1h,m),3.52-3.85(1h,m),3.95-4.12(4h,m),5.15(0.3h,d,j＝7.6hz),5.50(0.7h,d,j＝7.6hz),6.00(0.3h,d,j＝7.2hz),6.70(0.7h,d,j＝8.0hz),7.23-7.42(1h,m),7.95-8.15(1h,m),8.30-8.42(1h,m),8.60(0.3h,d,j＝7.2hz),8.83(0.7h,d,j＝7.2hz)。ms：438.4[mh+]。
实施例40：化合物29的制备
化合物29：5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)噁唑
步骤a：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(300mg,1.65mmol)、2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(中间体2,324mg,1.77mmol)和kf(480mg,8.26mmol)在dmso(5.5ml)中的混合物在180℃下加热2小时。在冷却至室温后，将反应混合物倾倒至水中。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1)，产生黄色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(540mg,100％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.90-2.28(3h,m),2.38-2.60(1h,m),3.60-4.18(2h,m),5.14-5.28(0.6h,m),5.54-5.72(0.4h,m),5.84-6.02(0.6h,m),6.35-6.46(0.4h,m),6.68-6.78(1h,m),6.82-7.20(2h,m),8.10-8.36(2h,m),9.77和10.11(1h,s+s)。
步骤b：5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)噁唑
在室温下，向5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(300mg,0.914mmol)的meoh(9.2ml)溶液中加入1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基苯(178mg,0.914mmol)和k2co3(126mg,0.914mmol)。将反应混合物回流4小时并冷却至室温。在蒸发meoh后，将残留物在dcm和水之间分层。将有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生黄色固体形式的5-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)噁唑(46.0mg,13％)。1h-nmr(meoh-d4,瓦里安,400mhz)：δ1.95-2.25(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.50-3.88(2h,m),3.89-4.10(1h,m),5.20-5.70(1h,m),6.56-6.77(1h,m),6.80-7.20(3h,m),7.07-7.20(1h,m),7.92-8.20(1h,m),8.22-8.55(1h,m)。ms：368.2[mh+]。
实施例41：化合物30的制备
化合物30：4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)异噁唑
步骤a：5-氯-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶
在室温下，向5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶(1.00g,6.51mmol)的dmf(13ml)溶液中分批加入n-碘代琥珀酰胺(1.61g,7.16mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。在加入水后，将混合物在室温下搅拌另外30分钟。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的5-氯-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶(1.74g,96％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ7.15(1h,d,j＝7.2hz),8.34(1h,s),9.17(1h,d,j＝7.2hz)。
步骤b：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶
将5-氯-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶(621mg,2.22mmol),2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(中间体2,407mg,2.22mmol)和kf(645mg,11.1mmol)的dmso(7.4ml)溶液在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，反应混合物用水稀释。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝5:1至3:1至2:1)，产生淡黄色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶(819mg,86％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.15(3h,m),2.38-2.50(1h,m),3.50-3.80(1h,m),3.95-3.99(1h,m),5.21-5.51(1h,m),5.99和6.53(1h,s+s),6.97(1h,s),7.11-7.26(1h,m),7.95(1h,m),8.44-8.64(1h,m)。
步骤c：4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)异噁唑
用n2气将5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶(40.0mg,0.0940mmol)、k3po4(60.0mg,0.282mmol)、pdcl2(dppf)-ch2cl2加合物(7.66mg,9.39μmol)和异噁唑-4-基硼酸(21.0mg,0.188mmol)在二氧六环(0.90ml)和水(0.10ml)中的混合物脱气。在密封管中将反应混合物在100℃下加热15小时并冷却至室温。在真空浓缩后，残留物用etoac稀释并通过硅胶垫过滤。将滤液真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:3至1:4)，产生褐色油状物形式的4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)异噁唑(5.90mg,17％)。1h-nmr(meoh-d4,瓦里安,400mhz)：δ1.95-2.20(3h,m),2.40-2.60(1h,m),3.50-4.12(3h,m),5.12-5.70(1h,m),5.80-6.40(1h,m),6.74(1h,s),6.92(1h,s),7.00-7.18(1h,m),8.00(1h,s),8.10-8.50(2h,m)。ms：368.2[mh+]。
实施例42：化合物31的制备：4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3,5-二甲基异噁唑
用n2气将5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶(90.0mg,0.211mmol)、k3po4(134mg,0.634mmol)、pdcl2(dppf)-ch2cl2加合物(17.0mg,0.0210mmol)和3,5-二甲基异噁唑-4-基硼酸(60.0mg,0.422mmol)在二氧六环(1.9ml)和水(0.21ml)的混合物中脱气。在密封管中将反应混合物在约100℃下加热15小时，冷却至室温并在etoac和水之间分层。将分离的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:3至1:4)，产生黄色固体形式的4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3,5-二甲基异噁唑(13.0mg,15％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.95-2.63(10h,m),3.70(1h,s),3.91(1h,s),5.08-5.55(1h,m),5.70-6.38(1h,m),6.84(1h,m),6.91(1h,m),7.00-7.10(1h,m),7.84(1h,s),8.27(1h,m)。ms：369.2[mh+]。
实施例43：化合物32的制备
化合物32：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(5-甲基-1h-1,2,4-三唑-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤a：5-氧代-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
将5-氨基-1h-吡唑-4-甲腈(1.00g,9.25mmol)、3-乙氧基丙烯酸乙酯(2.00ml,13.8mmol)和cs2co3(4.52g,13.88mmol)在dmf(18ml)中的混合物在100℃下加热9小时。将反应混合物冷却至0℃并用2n的hcl水溶液酸化直至ph＝2-3。通过过滤收集沉淀的固体，用水随后用etoac洗涤并在真空下干燥，产生白色固体形式的5-氧代-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(1.33g,90％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ6.24(1h,d,j＝8.0hz),8.31(1h,s),8.63(1h,d,j＝7.6hz),13.24(1h,br.s)。
步骤b：5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
将5-氧代-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(1.33g,8.31mmol)和pocl3(7.74ml,83mmol)的混合物在150℃下加热3小时并冷却至室温。在真空浓缩后，残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1)，产生白色固体形式的5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(343mg,23％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ7.09(1h,d,j＝7.6hz),8.39(1h,s),8.68(1h,d,j＝7.2hz)。
步骤c：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(343mg,1.92mmol)和2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(中间体2,343mg,1.87mmol)在dmso(10ml)中的混合物在180℃下加热1小时并冷却至室温。反应混合物用水稀释并用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1至1:1)，产生乳白色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(611mg,98％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.05-2.11(3h,m),2.47-2.55(1h,m),3.67-4.10(2h,m),5.20(0.7h,s),5.65(0.3h,s),5.96(0.7h,s),6.43(0.3h,s),6.69-6.73(1h,m),6.96-7.09(2h,m),8.01-8.31(3h,m)。
步骤d：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(230mg,0.707mmol)和浓h2so4(1.13ml,21.2mmol)的混合物在0℃下搅拌5小时。在加入冰水后，混合物用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生白色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(172mg,71％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.05-1.11(2h,m),2.47-2.55(1h,m),3.67-4.10(2h,m),5.12-5.32(1h,m),5.52(0.6h,s),5.74(0.4h,s),5.90(0.4h,s),6.32(0.6h,s),6.69-6.74(1h,m),6.96-7.09(2h,m),7.80(0.5h,s),8.20(0.5h,s),8.25-8.40(1h,m)。*未观察到来自nh2nh2的两个质子。
步骤e：(z)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n-(1-(二甲基氨基)亚乙基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在密封管中将5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.291mmol)和1,1-二甲氧基-n,n-二甲基乙胺(1.06ml,7.28mmol)的混合物在120℃下加热2小时。将反应混合物冷却至室温并真空浓缩，产生粗(z)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n-(1-(二甲基氨基)亚乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(160mg,99％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。
步骤f：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(5-甲基-1h-1,2,4-三唑-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
向粗(z)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-n-(1-(二甲基氨基)亚乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(160mg,0.291mmol)的acoh(1.0ml)溶液中加入水合肼(22.0mg,0.437mmol)。将反应混合物在90℃下加热2小时，然后真空浓缩。残留物用水处理，白色固体被沉淀出。通过过滤收集固体，用水和己烷洗涤并在真空下干燥，产生白色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(5-甲基-1h-1,2,4-三唑-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(58.0mg,52％)。1h-nmr(meoh-d4,瓦里安,400mhz)：δ1.92-2.26(3h,m),2.34(3h,m),2.44-2.60(2h,m),3.67-4.22(2h,m),5.17(0.4h,s),5.68(0.6h,s),6.11(0.4h,s),6.65(0.6h,s),6.80-7.20(2h,m),7.20-7.43(1h,m),8.20-8.60(2h,m)。ms：382.3[mh+]。
实施例44：中间体化合物13的制备
中间体化合物13：3-(4-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
步骤a：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶(1.18g,7.68mmol)、(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(1.51g,8.22mmol)和kf(2.32g,39.1mmol)在dmso(26ml)中的混合物在180℃下加热2小时。将反应混合物冷却至室温并倾倒在水中。将混合物在室温下搅拌另外30分钟。通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生黄色固体形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(1.70g,74％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.88-2.06(3h,m),2.33-2.45(1h,m),3.56-3.70(1h,m),3.90-4.00(1h,m),5.38(1h,s),5.98(1h,s),6.10-6.50(1h,m),6.85-6.91(1h,m),7.10-7.15(1h,m),7.26-7.32(1h,m),7.81(1h,d,j＝1.6hz),8.60(1h,s)。
步骤b：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶
在室温下，向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(975mg,3.25mmol)的dmf(6.5ml)溶液中分批加入nis(804mg,3.57mmol)。将反应混合物搅拌2小时并倾倒在水中。将混合物搅拌另外30分钟，通过过滤收集沉淀的固体并在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶(1.19g,86％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.15(3h,m),2.38-2.50(1h,m),3.50-3.80(1h,m),3.95-3.99(1h,m),5.21-5.51(1h,m),5.99和6.53(1h,s+s),6.97(1h,s),7.11-7.26(1h,m),7.95(1h,m),8.44-8.64(1h,m)。
步骤c：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡唑并-[1,5-a]嘧啶
向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-碘代吡唑并[1,5-a]-嘧啶(1.19g,2.79mmol)的thf(10ml)和tea(10ml)溶液加入cui(53.0mg,0.279mmol)、pdcl2(pph3)2(196mg,0.279mmol)和乙炔基三甲基硅烷(0.596ml,4.19mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。通过在硅藻土垫上过滤同时用etoac洗涤后，将滤液真空浓缩。残留物用etoac稀释，用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝2:1至1:1)，产生粘稠黄色油状物形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(832mg,75％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ0.260(9h,s),2.03-2.20(3h,m),2.49(1h,br.s),3.63-4.15(2h,m),5.17和6.25(1h,br.s+br.s),5.83(1h,br.s),6.73-6.77(1h,m),6.91(1h,br.s),7.04(1h,br.s),7.93(1h,s),8.11(1h,br.s)。
步骤d：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-乙炔基吡唑并[1,5-a]嘧啶
在0℃下，向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶(832mg,2.10mmol)的thf(10ml)溶液中加入tbaf(1m的thf溶液,2.52ml,2.52mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。在用饱和nh4cl水溶液淬灭后，将混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝3:2至1:1)，产生粘稠黄色油状物形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-乙炔基吡唑并[1,5-a]嘧啶(659mg,97％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.98-2.18(3h,m),2.50(1h,br.s),3.24(1h,s),3.93(1h,br.s),4.06(1h,br.s),5.19(1h,br.s),5.87(1h,br.s),6.75(1h,br.s),6.92(1h,br.s),7.05(1h,br.s),7.96(1h,s),8.14(1h,br.s)。
实施例45：化合物33的制备
化合物33：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(哌啶-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤a：4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g,5.02mmol)的meoh(16ml)溶液中加入nabh4(285mg,7.53mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。在真空浓缩后，将残留物在etoac和水之间分层。分离的水层用etoac萃取。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生粘稠淡黄色油状物形式的4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.01g,100％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.46(9h,s),1.48-1.50(2h,m),1.84-1.87(2h,m),2.99-3.06(2h,m),3.81-3.87(3h,m)。*未观察到oh。
步骤b：4-(甲基磺酰氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.01g,5.02mmol)的dcm(16ml)溶液中加入tea(0.909ml,6.52mmol)和dmap(61.0mg,0.502mmol)，然后加入mscl(0.469ml,6.02mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。反应混合物用dcm稀释，依次用水、2n的hcl水溶液、饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生白色固体形式的4-(甲基磺酰氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.40g,100％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.46(9h,s),1.78-1.86(2h,m),1.94-1.99(2h,m),3.04(3h,s),3.27-3.34(2h,m),3.68-3.72(2h,m),4.86-4.91(1h,m)。
步骤c：4-叠氮基哌啶-1-羧酸叔丁酯
向4-(甲基磺酰氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.40g,5.02mmol)的dmf(25ml)溶液中加入叠氮化钠(979mg,15.0mmol)。伴随搅拌将反应混合物在100℃下加热12小时，同时白色固体形成。在真空浓缩后，将残留物在etoac和水之间分层。水层用etoac萃取。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝5:1)，产生无色油状物形式的4-叠氮基哌啶-1-羧酸叔丁酯(948mg,83％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.46(9h,s),1.53-1.57(2h,m),1.85-1.88(2h,m),3.05-3.12(2h,m),3.54-3.60(1h,m),3.81-3.84(1h,m)。
步骤d：(r)-4-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-乙炔基吡唑并[1,5-a]嘧啶(中间体13,144mg,0.444mmol)和4-叠氮基哌啶-1-羧酸叔丁酯(111mg,0.488mmol)的tbuoh(2.0ml)溶液中加入铜粉(23.0mg,0.355mmol)，然后加入水(1.0ml)和1m的硫酸铜的水溶液(0.089ml,0.089mmol)。将反应混合物在90℃下加热90分钟。将反应混合物冷却至室温并用etoac稀释。在加入浓nh4oh(2.0ml)，然后加入水(2.0ml)后，将混合物剧烈搅拌30分钟并用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝30:1)，产生黄色泡沫形式的(r)-4-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(177mg,72％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.49(9h,s),1.83-2.22(7h,m),2.48(1h,br.s),2.97(2h,s),3.66(1h,br.s),3.91(1h,br.s),4.35(2h,br.s),4.67(1h,br.s),5.70(1h,br.s),6.34(1h,br.s),6.75(1h,br.s),6.91(1h,br.s),7.13(1h,br.s),7.52(1h,s),8.35(1h,br.s),8.48(1h,s)。
步骤e：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(哌啶-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
在0℃下，向(r)-4-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(177mg,0.321mmol)的dcm(1.6ml)溶液中加入tfa(0.867ml,11.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝10:1至3:1至2:1)，产生黄色泡沫形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(哌啶-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(100mg,69％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.83-2.30(8h,m),2.50(1h,br.s),2.85(2h,t,j＝11.2hz),3.30-3.33(2h,m),3.69(1h,br.s),3.93(1h,br.s),4.58(1h,br.s),5.24和5.68(1h,br.s+br.s),5.87和6.30(1h,br.s+br.s),6.75(1h,br.s),6.90(1h,br.s),7.12(1h,br.s),7.57(1h,s),8.30(1h,br.s),8.48(1h,s)。ms：451.1[mh+]。
实施例46：化合物34的制备：5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(哌啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤a：3-(甲基磺酰氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g,4.97mmol)的dcm(16ml)溶液中加入tea(0.895ml,6.46mmol)，然后加入mscl(0.465ml,5.96mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物用dcm稀释，依次用水、2n的hcl水溶液、饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生无色油状物形式的3-(甲基磺酰氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.39g,100％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一部反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),1.55(1h,br.s),1.78-2.01(3h,m),3.06(3h,s),3.28-3.38(1h,m),3.42-3.48(1h,m),3.54-3.68(2h,m),4.72(1h,br.s)。
步骤b：3-叠氮基哌啶-1-羧酸叔丁酯
向3-(甲基磺酰氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.39g,4.98mmol)的dmf(24ml)溶液中加入叠氮化钠(970mg,14.9mmol)。伴随搅拌将反应混合物在100℃下加热4小时，同时白色固体形成。在真空浓缩后，将残留物在etoac和水之间分层。水层用etoac萃取。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝20:1至10:1至5:1)，产生无色油状物形式的3-叠氮基哌啶-1-羧酸叔丁酯(840mg,74％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),1.49-1.62(2h,m),1.77(1h,br.s),1.96(1h,br.s),2.90-3.30(2h,m),3.44-3.50(1h,m),3.52-3.90(2h,m)。
步骤c：3-(4-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-乙炔基吡唑并[1,5-a]嘧啶(中间体13,92.0mg,0.284mmol)和3-叠氮基哌啶-1-羧酸叔丁酯(71.0mg,0.312mmol)的tbuoh(1.4ml)溶液中加入铜粉(14.0mg,0.227mmol)，然后加入水(1.0ml)和1m的硫酸铜的水溶液(0.057ml,0.057mmol)。将反应混合物在90℃下加热90分钟。将反应混合物冷却至室温，然后用etoac稀释。在加入浓nh4oh(2.0ml)，然后加入水(2.0ml)后，将混合物剧烈搅拌30分钟并用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝30:1)，产生黄色油状物形式的3-(4-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(123mg,79％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.48(9h,s),1.63-1.76(2h,m),1.90-1.94(1h,m),2.04(1h,br.s),2.16(2h,br.s),2.29(1h,br.s),2.40-2.58(1h,m),2.80-3.50(2h,m),3.68(1h,br.s),3.92(1h,br.s),4.18(1h,br.s),4.30-4.60(2h,m),5.23和5.66(1h,br.s+br.s),5.86和6.31(1h,br.s+br.s),6.75-6.77(1h,m),6.91(1h,br.s),7.04(1h,br.s),7.56(1h,s),8.31(1h,br.s),8.47(1h,s)。
步骤d：5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(哌啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
在0℃下，向3-(4-(5-(-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(123mg,0.223mmol)的dcm(1.1ml)溶液中加入tfa(0.602ml,7.82mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝10:1至3:1)，产生黄色泡沫形式的5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(哌啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(70.0mg,69％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.92-1.95(1h,m),1.89-2.14(8h,m),2.28(1h,br.s),2.49(1h,br.s),2.77(1h,t,j＝10.8hz)2.85-3.18(2h,m),3.40(1h,br.s),3.66(1h,br.s),3.91(1h,br.s),4.50(1h,br.s),5.30和5.67(1h,br.s+br.s),5.85和6.29(1h,br.s+br.s),6.75(1h,s),6.90(1h,s),7.00-7.10(1h,m),7.57(1h,s),8.31(1h,br.s),8.47(1h,s)。ms：451.1[mh+]。
实施例47：化合物35的制备：5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤a：3-(甲基磺酰氧基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向3-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.00g,5.34mmol)的dcm(17ml)溶液中加入tea(0.962ml,6.94mmol)，然后加入mscl(0.499ml,6.41mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物用dcm稀释，依次用水、2n的hcl水溶液、饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生无色油状物形式的3-(甲基磺酰氧基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.42g,100％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),2.06-2.20(1h,m),2.21-2.36(1h,m),3.05(3h,s),3.44-3.54(1h,m),3.54-3.72(3h,m),5.27(1h,br.s)。
步骤b：3-叠氮基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
向3-(甲基磺酰氧基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.42g,5.35mmol)的dmf(26ml)溶液中加入叠氮化钠(1.04g,16.0mmol)。伴随搅拌将反应混合物在100℃下加热4小时，同时形成白色固体。在真空浓缩后，将残留物在etoac和水之间分层。水层用etoac萃取。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝10:1至5:1)，产生无色油状物形式的3-叠氮基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.07g,94％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),2.02-2.08(2h,m),3.35-3.54(4h,m),4.14-4.16(1h,m)。
步骤c：3-(4-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-乙炔基吡唑并[1,5-a]嘧啶(中间体13,92.0mg,0.284mmol)和3-叠氮基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(66.0mg,0.312mmol)的tbuoh(1.4ml)溶液中加入铜粉(14.0mg,0.227mmol)，然后加入水(1.0ml)和1m的硫酸铜的水溶液(0.057ml,0.057mmol)。将反应混合物在90℃下加热90分钟。将反应混合物冷却至室温，然后用etoac稀释。在加入浓nh4oh(2.0ml)，然后加入水(2.0ml)后，将混合物剧烈搅拌30分钟并用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝30:1)，产生黄色泡沫形式的3-(4-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(127mg,83％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.50(9h,s),1.98-2.20(3h,m),2.22-2.63(3h,m),3.50-3.83(4h,m),3.83-4.20(2h,m),5.15(1h,br.s),5.30和5.66(1h,br.s+br.s),5.84和6.31(1h,br.s+br.s),6.75(1h,br.s),6.91(1h,br.s),7.00-7.18(1h,m),7.52(1h,s),8.32(1h,br.s),8.48(1h,s)。
步骤d：5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
在0℃下，向3-(4-(5-(-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(127mg,0.237mmol)的dcm(1.2ml)溶液中加入tfa(0.638ml,8.28mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝10:1至3:1至2:1)，产生黄色泡沫形式的5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(78.0mg,76％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.00-2.20(4h,m),2.26-2.60(3h,m),3.11(1h,br.s),3.24-3.46(3h,m),3.68(1h,br.s),3.91(1h,br.s),5.02(1h,br.s),5.39和5.64(1h,br.s+br.s),5.84和6.30(1h,br.s+br.s),6.75(1h,s),6.90(1h,br.s),7.06(1h,br.s),7.56(1h,s),8.31(1h,br.s),8.46(1h,s)。
实施例48：化合物36的制备：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(四氢-2h-吡喃-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤a：四氢-2h-吡喃-4-基甲磺酸酯
在0℃下，向四氢-2h-吡喃-4-醇(500mg,4.90mmol)的dcm(16ml)溶液中加入tea(0.882ml,6.36mmol)，然后加入mscl(0.458ml,5.87mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物用dcm稀释，依次用水、2n的hcl水溶液、饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生无色油状物形式的四氢-2h-吡喃-4-基甲磺酸酯(882mg,100％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.84-1.92(2h,m),2.03-2.07(2h,m),3.04(3h,s),3.52-3.58(2h,m),3.92-3.97(2h,m),4.87-4.93(1h,m)。
步骤b：4-叠氮基四氢-2h-吡喃
向四氢-2h-吡喃-4-基甲磺酸酯(0.882g,4.89mmol)的dmf(16ml)溶液中加入叠氮化钠(954mg,14.68mmol)。将反应混合物在100℃下加热2小时。在真空浓缩后，将残留物在etoac和水之间分层。水层用etoac萃取。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝3:1)，产生无色油状物形式的4-叠氮基四氢-2h-吡喃(110mg,17％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.60-1.70(2h,m),1.88-1.92(2h,m),3.44-3.50(2h,m),3.56-3.63(1h,m),3.92-3.97(2h,m)。
步骤c：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(四氢-2h-吡喃-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶
向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-乙炔基吡唑并[1,5-a]嘧啶(96.0mg,0.296mmol)和4-叠氮基四氢-2h-吡喃(41.0mg,0.326mmol)的tbuoh(1.5ml)溶液中加入铜粉(15.0mg,0.237mmol)，然后加入水(1.0ml)和1m的硫酸铜的水溶液(0.059ml,0.059mmol)。将反应混合物在90℃下加热90分钟，冷却至室温，然后用etoac稀释。在加入浓nh4oh(2.0ml)，然后加入水(2.0ml)后，将混合物剧烈搅拌30分钟并用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝30:1)，产生黄色油状物形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-(1-(四氢-2h-吡喃-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(84.0mg,63％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.04-2.30(7h,m),2.49(1h,br.s),3.61(2h,t,j＝11.6hz),3.92(1h,br.s),4.18(2h,t,j＝11.6hz),4.73(1h,br.s),5.19和5.66(1h,br.s+br.s),5.88和6.31(1h,br.s+br.s),6.73-6.78(1h,m),6.91(1h,br.s),7.01-7.16(1h,m),7.52(1h,s),8.32(1h,br.s),8.47(1h,s)。ms：452.2[mh+]。
实施例49：化合物37的制备：(r)-2-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-1-(哌嗪-1-基)乙烷-1-酮
步骤a：4-(2-溴乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.00g,10.7mmol)在5wt％的nahco3水溶液(36ml)和dcm(36ml)中的溶液加入2-溴乙酰基溴(1.40ml,16.1mmol)。将反应混合物在0℃下然后在室温下搅拌2小时。在分离相后，有机层用水、2n的hcl水溶液、水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。通过从etoac和己烷中重结晶纯化残留的固体，产生白色固体形式的4-(2-叠氮基乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.92g,89％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),3.42-3.44(2h,m),3.46-3.54(4h,m),3.58-3.60(2h,m),3.86(2h,s)。
步骤b：4-(2-叠氮基乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将4-(2-叠氮基乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.92g,9.51mmol)和叠氮化钠(1.54g,23.7mmol)的ch3cn(47ml)悬浮液回流1小时，并冷却至室温。反应混合物用etoac稀释，用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。通过从etoac和己烷中重结晶纯化残留物，产生白色固体形式的4-(2-叠氮基乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.28g,89％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),3.33-3.38(2h,m),3.42-3.50(4h,m),3.58-3.66(2h,m),3.95(2h,s)。
步骤c：(r)-4-(2-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-乙炔基吡唑并[1,5-a]嘧啶(中间体13,100mg,0.308mmol)和4-(2-叠氮基乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(91.0mg,0.339mmol)的tbuoh(1.5ml)溶液中加入铜粉(16.0mg,0.247mmol)，然后加入水(0.70ml)和1m的硫酸铜的水溶液(0.0620ml,0.0620mmol)。将反应混合物在90℃下加热90分钟，冷却至室温，然后用etoac稀释。在加入浓nh4oh(2.0ml)，然后加入水(2.0ml)后，将所得混合物剧烈搅拌30分钟并用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝30:1)，产生黄色泡沫形式的(r)-4-(2-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(108mg,59％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),2.00-2.25(3h,m),2.42-2.58(1h,m),3.34(4h,br.s),3.59(2h,br.s),3.65(2h,br.s),3.92(1h,br.s),5.20和5.52(1h,br.s+br.s),5.28-5.32(2h,m),5.85和6.27(1h,br.s+br.s),6.78(1h,br.s),6.90(1h,br.s),7.04-7.10(1h,m),7.63(1h,s),8.25(1h,br.s),8.47(1h,s)。
步骤d：(r)-2-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-1-(哌嗪-1-基)乙烷-1-酮
在室温下，向(r)-4-(2-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(108mg,0.182mmol)的dcm(1.0ml)溶液中加入tfa(0.500ml,6.49mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用饱和nahco3水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝10:1至3:1至2:1)，产生淡黄色泡沫形式的(r)-2-(4-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮(78.0mg,87％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s),2.00-2.25(3h,m),2.50(1h,br.s),2.85(4h,br.s),3.57(2h,br.s),3.64(2h,br.s),3.90(1h,br.s),5.26和5.52(1h,br.s+br.s),5.26-5.30(2h,m),5.85和6.26(1h,br.s+br.s),6.77(1h,br.s),6.88(1h,br.s),7.00-7.12(1h,m),7.62(1h,s),8.24(1h,br.s),8.46(1h,s)。ms：494.2[mh+]。
实施例50：化合物38的制备
化合物38：(e)-n-乙基-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺
步骤a：5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(500mg,2.75mmol)、3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶(中间体1,490mg,2.95mmol)和kf(800mg,13.8mmol)在dmso(9.2ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，将反应混合物倾倒至水中。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1)，产生黄色固体形式的5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(779mg,91％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.92-2.20(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.62-3.88(1h,m),3.98-4.15(1h,m),5.30-5.45(1h,m),6.22(0.3h,m),6.72(0.7h,d,j＝6.8hz),7.60-7.75(1h,m),8.18-8.36(1h,m),8.38-8.56(2h,m),8.65(0.3h,m),8.80(0.7h,d,j＝6.0hz),9.60和9.94(1h,s+s)。
步骤b：(e)-乙基-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸酯
在0℃下，向nah(55wt％,328mg,7.51mmol)的干燥thf(8.0ml)悬浮液加入2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(841mg,3.75mmol)的干燥thf溶液。将混合物室温搅拌30分钟，在加入5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(0.779g,2.50mmol)的干燥thf溶液后，将反应混合物在室温下搅拌5小时，用饱和nh4cl水溶液淬灭，并用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生黄色固体形式的(e)-乙基-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸酯(511mg,54％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.20-1.32(4h,m),1.85-2.13(3h,m),3.60-3.90(1h,m),3.96-4.22(3h,m),5.28-5.42(1h,m),6.05-6.32(1h,m),6.54-6.70(1h,m),7.40-7.77(2h,m),8.09-8.12(1h,m),8.15-8.80(3h,m)。
步骤c：(e)-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸
在0℃下，向(e)-乙基-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸酯(511mg,1.340mmol)的etoh(5.0ml)和水(1.7ml)的溶液加入lioh(96.0mg,4.02mmol)。将反应混合物在90℃下加热5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生白色固体形式的(e)-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(373mg,79％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.92-2.13(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.60-3.92(1h,m),3.93-4.12(1h,m),5.28-5.42(1h,m),6.05-6.32(1h,m),6.54-6.70(1h,m),7.40-7.77(2h,m),8.09-8.29(1h,m),8.32-8.80(3h,m),11.73(1h,br.s)。
步骤d：(e)-n-乙基-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺
在室温下，向(e)-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(50.0mg,0.142mmol)的dmf(1.0ml)溶液中加入乙基胺(2.0m的thf溶液,0.142ml,0.283mmol)、dipea(0.0740ml,0.425mmol)和hatu(81.0mg,0.212mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生白色固体形式的(e)-n-乙基-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺(48.0mg,89％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.10(3h,t,j＝6.6hz),1.92-2.20(3h,m),2.43-2.50(1h,m),3.10-3.30(2h,m),3.60-3.92(1h,m),4.00-4.15(1h,m),5.28-5.58(1h,m),6.05-6.42(1h,m),6.54-6.80(1h,m),7.18-8.10(4h,m),8.32-8.75(3h,m)。ms：381.1[mh+]。
实施例51：化合物39的制备：(e)-n-环丙基-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺
在室温下，向(e)-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(50.0mg,0.142mmol)的dmf(1.0ml)溶液中加入环丙胺(0.0200ml,0.283mmol)、dipea(0.0740ml,0.425mmol)和hatu(81.0mg,0.212mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生白色固体形式的(e)-n-环丙基-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺(21.0mg,38％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ0.40-0.60(2h,m),0.61-0.75(2h,m),1.86-2.17(3h,m),2.43-2.50(1h,m),2.72-2.80(1h,m),3.60-3.92(1h,m),4.00-4.15(1h,m),5.25-5.52(1h,m),6.05-6.38(1h,m),6.54-6.70(1h,m),7.28-8.12(4h,m),8.32-8.75(3h,m)。ms：393.1[mh+]。
实施例52：化合物40的制备：(e)-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n,n-二甲基丙烯酰胺
在室温下，向(e)-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(50.0mg,0.142mmol)的dmf(1.0ml)溶液中加入二甲基胺盐酸盐(23.0mg,0.283mmol)、dipea(0.0740ml,0.425mmol)和hatu(81.0mg,0.212mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生白色固体形式的(e)-3-(5-(2-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n,n-二甲基丙烯酰胺(39.0mg,72％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.86-2.10(3h,m),2.38-2.50(1h,m),2.80-3.00(6h,m),3.54-3.88(1h,m),3.92-4.15(1h,m),5.25-5.50(1h,m),6.05-6.12(0.3h,m),6.48-6.70(0.7h,m),6.73-7.70(3h,m),8.00-8.70(4h,m)。ms：381.1[mh+]。
实施例53：化合物41的制备
化合物41：(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-乙基丙烯酰胺
步骤a：5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(300mg,1.65mmol)、2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(中间体2,324mg,1.77mmol)和kf(480mg,8.26mmol)在dmso(5.5ml)中的混合物在180℃下加热2小时。在冷却至室温后，将反应混合物倾倒至水中。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1)，产生黄色固体形式的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(540mg,100％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.90-2.28(3h,m),2.38-2.60(1h,m),3.60-4.18(2h,m),5.14-5.28(0.6h,m),5.54-5.72(0.4h,m),5.84-6.02(0.6h,m),6.35-6.46(0.4h,m),6.68-6.78(1h,m),6.82-7.20(2h,m),8.10-8.36(2h,m),9.77和10.11(1h,s+s)。
步骤b：(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸乙酯
在0℃下，向nah(55wt％,349mg,8.00mmol)的干燥thf(8.9ml)悬浮液加入2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(896mg,4.00mmol)的干燥thf溶液。将混合物室温搅拌30分钟。在加入5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(875mg,2.67mmol)的干燥thf溶液后，将反应混合物搅拌5小时，然后用饱和nh4cl水溶液淬灭。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生黄色固体形式的(e)-乙基-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸酯(609mg,57％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.36(3h,t,j＝7.0hz),1.95-2.20(3h,m),2.45-2.60(1h,m),3.60-4.18(2h,m),4.20-4.43(2h,m),5.14-5.28(0.6h,m),5.54-5.70(0.4h,m),5.84-5.96(0.4h,m),6.25-6.46(0.6h,m),6.65-6.78(2h,m),6.82-7.00(1h,m),7.10-4.15(1h,m),7.50-7.85(1h,m),7.80-8.05(1h,m),8.12-8.35(1h,m)。
步骤c：(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸
在0℃下，向(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸乙酯(345mg,0.866mmol)的etoh(3.3ml)和水(1.1ml)的溶液中加入lioh(62.0mg,2.60mmol)。将反应混合物在90℃下加热5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化直至ph5-6。混合物用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生白色固体形式的(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(297mg,93％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.14(3h,m),2.38-2.50(1h,m),3.35-3.88(1h,m),3.98-4.18(1h,m),5.28-5.53(1h,m),6.00-3.20(1h,m),6.50-6.70(1h,m),6.90-7.00(1h,m),7.01-7.70(3h,m),8.05-8.20(1h,m),8.50-8.78(1h,m),11.95(1h,s)。
步骤d：(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-乙基丙烯酰胺
向(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(75.0mg,0.203mmol)的dcm(2.0ml)溶液中加入2滴dmf，然后加入草酰氯(0.0355ml,0.405mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后减压浓缩，产生相应的酰氯化合物。将残留的粗酰氯化合物溶于dcm(2.0ml)中，然后向其中加入乙胺盐酸盐(18.2mg,0.405mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5小时并用1n的hcl水溶液淬灭。将混合物用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:10到仅etoac)，产生黄色固体形式的(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-乙基丙烯酰胺(13.0mg,16％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.15-1.32(6h,m),1.98-2.32(3h,m),2.42-2.60(1h,m),3.38-3.50(2h,m),3.61-4.05(2h,m),5.38-5.50(1h,m),6.23-6.60(1h,m),6.70-6.78(1h,m),6.86-7.13(2h,m),7.80-9.00(1h,m),8.10-8.36(1h,m)。ms：398.1[mh+]。
实施例54：化合物42的制备：(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)-吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-异丙基丙烯酰胺
在室温下，向(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(55.0mg,0.149mmol)的dmf(1.5ml)溶液中加入hatu(73.4mg,0.193mmol)、dipea(78.0μl,0.446mmol)和异丙基胺(9.66mg,0.163mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:10到仅etoac)，产生黄色固体形式的(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)-吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-异丙基丙烯酰胺(30.0mg,49％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.13-1.32(6h,m),2.00-2.29(3h,m),2.42-2.60(1h,m),3.60-4.00(2h,m),4.20-4.30(1h,m),5.25-5.38(1h,m),5.62-5.95(1h,m),6.20-6.60(2h,m),6.70-6.77(1h,m),6.82-6.98(1h,m),7.00-7.10(1h,m),7.45-7.55(1h,m),7.82-7.99(1h,m),8.10-8.40(1h,m)。ms：412.1[mh+]。
实施例55：化合物43的制备：(e)-n-环丙基-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺
在室温下，向(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(50.0mg,0.135mmol)的dmf(1.4ml)溶液中加入hatu(66.7mg,0.176mmol)、dipea(70.7μl,0.405mmol)和环丙基胺(10.5μl,0.149mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝10:1到仅etoac)，产生黄色固体形式的(e)-n-环丙基-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺(30.0mg,54％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ0.50-0.65(2h,m),0.78-0.92(2h,m),1.92-2.30(4h,m),2.39-2.59(1h,m),2.82-2.85(1h,m),3.58-3.80(1h,m),3.86-4.12(1h,m),5.50-5.70(2h,m),6.23-6.48(1h,m),6.69-6.78(1h,m),6.82-7.08(2h,m),7.45-7.62(1h,m),7.82-8.00(1h,m),8.12-8.40(1h,m)。ms：410.1[mh+]。
实施例56：化合物44的制备：(e)-n-叔丁基-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并-[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺
在室温下，向(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(50.0mg,0.135mmol)的dmf(0.90ml)溶液中加入叔丁基胺(20.0mg,0.270mmol)、dipea(0.0710ml,0.405mmol)和hatu(77.0mg,0.203mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生白色固体形式的(e)-n-叔丁基-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并-[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰胺(38.0mg,66％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.31(9h,s),1.80-2.10(3h,m),2.38-2.50(1h,m),3.58-3.90(1h,m),3.95-4.12(1h,m),5.25-5.40(0.4h,m),5.50-5.62(0.6h,m),5.97-6.10(0.4h,m),6.30-6.54(0.6h,m),6.52-6.68(1h,m),6.70-7.00(1h,m),7.01-7.52(4h,m),7.95-8.10(1h,m),8.43-8.72(1h,m)。ms：426.2[mh+]。
实施例57：化合物45的制备：(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n,n-二甲基丙烯酰胺
向(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(55.0mg,0.149mmol)的dmf(1.5ml)溶液中加入hatu(73.4mg,0.193mmol)、dipea(78.0μl,0.446mmol)和二甲胺盐酸盐(7.36mg,0.163mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:10到仅etoac)，产生黄色固体形式的(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n,n-二甲基丙烯酰胺(38.0mg,64％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.98-2.15(3h,m),2.35-2.60(1h,m),2.82-3.30(6h,m),3.50-3.78(1h,m),3.80-4.15(2h,m),5.64-6.01(1h,m),6.18-6.44(1h,m),6.60-6.78(1h,m),6.83-7.13(2h,m),7.55-7.86(1h,m),7.90-8.05(1h,m),8.10-8.43(1h,m)。ms：398.1[mh+]。
实施例58：化合物46的制备：(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-(2-甲氧基乙基)-丙烯酰胺
在室温下，向(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(60.0mg,0.162mmol)的dmf(1.1ml)溶液中加入2-甲氧基乙胺(37.0mg,0.486mmol)、dipea(0.0850ml,0.486mmol)和hatu(185mg,0.486mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时并用水稀释。在搅拌另外30分钟后，通过过滤收集沉淀的白色固体并在真空下干燥，产生白色固体形式的(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-(2-甲氧基乙基)-丙烯酰胺(43.4mg,63％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.10(3h,m),2.38-2.50(1h,m),3.20-3.30(3h,m),3.33-3.45(2h,m),3.46-3.88(2h,m),3.90-4.15(1h,m),5.20-5.60(1h,m),5.88-6.38(1h,m),6.40-6.80(1h,m),6.81-7.55(4h,m),7.90-8.15(2h,m),8.40-8.80(1h,m)。*未观察到来自nh的质子。ms：428.2[mh+]。
实施例59：化合物47的制备：(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(3-羟基氮杂环丁二烯-1-基)丙-2-烯-1-酮
在室温下，向(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(50.0mg,0.135mmol)的dmf(0.90ml)溶液中加入氮杂环丁二烯-3-醇盐酸盐(44.0mg,0.405mmol)、dipea(0.141ml,0.810mmol)和hatu(0.103g,0.270mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生白色固体形式的(e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(3-羟基氮杂环丁二烯-1-基)丙-2-烯-1-酮(21.0mg,36％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.86-2.10(3h,m),2.38-2.50(1h,m),3.56-3.90(2h,m),3.92-4.19(3h,m),4.20-4.58(2h,m),5.30-5.40(0.4h,m),5.50-5.62(0.6h,m),5.74(1h,d,j＝5.6hz),5.97-6.10(0.4h,m),6.28-6.40(0.6h,m),6.52-7.70(2h,m),7.05-7.52(3h,m),8.09-8.20(1h,m),8.50-8.78(1h,m)。ms：426.2[mh+]。
实施例60：化合物48的制备
化合物48：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-(2-羟基乙基)-丙烯酰胺
步骤a：(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(中间体10,4.70g,25.9mmol)、(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(中间体5,5.07g,27.7mmol)和kf(7.52g,129mmol)在dmso(86ml)中的混合物在180℃下搅拌2小时。在冷却至室温后，反应混合物用水稀释。混合物用etoac萃取两次。用盐水洗涤合并的有机层，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh＝20:1)，产生黄色油状物形式的(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(8.50g,100％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.90-2.28(3h,m),2.38-2.60(1h,m),3.60-4.18(2h,m),5.14-5.28(0.6h,m),5.54-5.72(0.4h,m),5.84-6.02(0.6h,m),6.35-6.46(0.4h,m),6.68-6.78(1h,m),6.82-7.20(2h,m),8.10-8.36(2h,m),9.77和10.11(1h,s+s)。
步骤b：(r,e)-乙基-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸酯
在0℃下，向nah(55wt％,3.30g,76mmol)的干燥thf(80ml)悬浮液加入2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(8.47g,37.8mmol)的干燥thf溶液。将混合物室温搅拌1小时。在加入(r)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(8.27g,25.2mmol)的干燥thf(40ml)溶液后，将反应混合物在室温下搅拌5小时，然后用饱和nh4cl水溶液淬灭。混合物用etoac萃取，用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1)，产生淡红色固体形式的(r,e)-乙基-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸酯(6.00g,60％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.36(3h,t,j＝7.0hz),1.95-2.20(3h,m),2.45-2.60(1h,m),3.60-4.18(2h,m),4.20-4.43(2h,m),5.14-5.28(0.6h,m),5.54-5.70(0.4h,m),5.84-5.96(0.4h,m),6.25-6.46(0.6h,m),6.65-6.78(2h,m),6.82-7.00(1h,m),7.10-4.15(1h,m),7.50-7.85(1h,m),7.80-8.05(1h,m),8.12-8.35(1h,m)。
步骤c：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸
在室温下，向(r,e)-乙基-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸酯(6.00g,15.1mmol)的etoh(56ml)和水(19ml)的溶液加入氢氧化锂水合物(1.90g,45.2mmol)。将反应混合物在90℃下加热5小时并冷却至室温。在蒸发etoh后，将残留物用2n的hcl水溶液酸化并用etoac稀释。通过过滤收集沉淀的黄色固体并用etoac洗涤，在真空下干燥，产生淡黄色固体形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(5.58g,>99％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.80-2.14(3h,m),2.38-2.50(1h,m),3.35-3.88(1h,m),3.98-4.18(1h,m),5.28-5.53(1h,m),6.00-6.20(1h,m),6.50-6.70(1h,m),6.90-7.00(1h,m),7.01-7.70(3h,m),8.05-8.20(1h,m),8.50-8.78(1h,m),11.95(1h,s)。ms：371.03[mh+]。
步骤d：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-(2-羟基乙基)-丙烯酰胺
在室温下，向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(400mg,1.080mmol)的dmf(2.1ml)溶液中加入hatu(616mg,1.62mmol)和dipea(0.472ml,2.70mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。在室温下加入2-氨基乙醇(66.0mg,1.08mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。混合物用dcm稀释，用水洗涤两次并用1n的naoh水溶液洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝20:1至10:1)，产生黄色固体形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-n-(2-羟基乙基)-丙烯酰胺(279mg,62％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.82-2.12(3h,m),2.40-2.50(1h,m),3.20-3.30(3h,m),3.33-3.52(2h,m),3.56-3.92(2h,m),3.95-4.15(1h,m),5.23-5.62(1h,m),5.92-6.43(1h,m),6.53-6.83(1h,m),6.90-7.55(4h,m),7.90-8.20(1h,m),8.50-8.80(1h,m)。ms：414.1[mh+]。
实施例61：化合物49的制备：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-吗啉代丙-2-烯-1-酮
在室温下，向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(3.00g,8.10mmol)的dmf(16ml)溶液中加入hatu(4.62g,12.1mmol)和dipea(3.54ml,20.2mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下加入吗啉(1.05ml,12.1mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在真空浓缩后，残留物用etoac稀释，依次用水洗涤两次，1n的naoh水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到etoac:meoh＝10:1)，产生粉色固体形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-吗啉代丙-2-烯-1-酮(2.13g,60％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.86-2.40(5h,m),2.38-2.50(1h,m),3.40-3.70(6h,m),3.95-4.10(1h,m),5.24-5.40(0.4h,m),5.50-5.62(0.6h,m),5.95-6.18(0.4h,m),6.58-6.70(0.6h,m),6.71-6.85(1h,m),6.86-7.50(5h,m),8.05-8.30(1h,m),8.50-8.83(1h,m)。ms：440.2[mh+]。
实施例62：化合物50的制备：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
步骤a：(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(400mg,1.08mmol)的dmf(2.2ml)溶液中加入hatu(616mg,1.62mmol)和dipea(0.472ml,2.70mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。在室温下加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(201mg,1.08mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌过夜，同时黄色固体形成。混合物用dcm稀释，用水洗涤两次并用1n的naoh水溶液洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1至dcm:etoac＝1:10)，产生黄色固体形式的(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(413mg,71％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.48(9h,s),1.95-2.09(3h,m),2.43-2.78(1h,m),3.20-4.00(10h,m),5.17和5.75(1h,s+s),5.85和6.34(1h,s+s),6.67(1h,s),6.91(1h,s),7.05(1h,s),7.32(1h,s),7.50-8.32(3h,m)。
步骤b：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在室温下，向(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(413mg,0.767mmol)的dcm(3.8ml)溶液中加入tfa(2.00ml,26.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用饱和nahco3水溶液碱化，用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝10:1至5:1)，产生淡黄色固体形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(220mg,65％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.86-2.40(3h,m),2.38-2.50(1h,m),2.64-2.80(3h,m),3.40-3.82(7h,m),3.95-4.10(1h,m),5.24-5.40(0.4h,m),5.50-5.62(0.6h,m),5.95-6.18(0.4h,m),6.58-6.70(0.6h,m),6.71-6.85(1h,m),6.86-7.00(1h,m),7.05-7.50(3h,m),8.05-8.25(1h,m),8.46-8.80(1h,m)。ms：439.2[mh+]。
实施例63：化合物51的制备：(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)哌嗪-2-酮
在室温下，向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(50.0mg,0.162mmol)的dmf(0.68ml)溶液中加入hatu(62.0mg,0.162mmol)和dipea(0.0570ml,0.324mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。在室温下加入哌嗪-2-酮(16.0mg,0.162mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌过夜，同时黄色固体形成。混合物用dcm稀释，用水洗涤两次并用1n的naoh水溶液洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1至dcm:etoac＝1:10)，产生黄色固体形式的(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)哌嗪-2-酮(52.0mg,85％)。
ms：453.1[mh+]。
实施例64：化合物52的制备：(e)-3-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(3-(2-羟基丙烷-2-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
步骤a：1,4-双(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-羧酸
在室温下，向1,4-双(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-羧酸(5.00g,15.1mmol)和na2co3(5.79g,54.7mmol)的水(49ml)溶液中加入(t-boc)2o(7.20ml,31.0mmol)的thf(31ml)溶液。将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用5n的hcl水溶液小心酸化直到ph＝1，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生白色固体形式的1,4-双(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-羧酸(5.00g,100％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.44和1.48(18h,s和s),2.83(1h,br.s),3.08-3.23(2h,m),3.84(1h,dd,j＝17.2,13.2hz),4.01(1h,br.s),4.52-4.60(1h,m),4.75(1h,s),9.56(1h,br.s)。
步骤b：哌嗪-1,2,4-三羧酸1,4-二叔丁酯2-甲酯
向1,4-双(叔丁氧基羰基)哌嗪-2-羧酸(4.88g,14.7mmol)的dmf(49ml)溶液加入k2co3(2.65g,19.2mmol)，并将混合物冷却至0℃。然后，向混合物缓慢加入碘甲烷(1.38ml,22.1mmol)。将搅拌的反应在室温下搅拌18小时，并用饱和nh4cl水溶液(100ml)淬灭。混合物用水稀释并用etoac萃取两次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝7:1至5:1至3:1)，产生淡褐色粘稠油状物形式的哌嗪-1,2,4-三羧酸1,4-二叔丁酯2-甲酯(5.09g,100％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.44(18h,s),2.80(1h,br.s),3.12-3.24(1h,m),3.21(1h,br.s),3.74(3h,s),3.80-4.10(2h,m),4.48-4.73(2h,m)。
步骤c：2-(2-羟基丙烷-2-基)哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯
在0℃下，向哌嗪-1,2,4-三羧酸1,4-二叔丁酯2-甲酯(5.09g,14.7mmol)的干燥thf(49ml)溶液中加入甲基溴化镁(3.0m的thf和甲苯溶液,31.7ml,44.3mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时。在用饱和nh4cl水溶液淬灭后，将混合物用水稀释并用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝5:1至3:1至2:1)，产生无色粘稠油状物形式的2-(2-羟基丙烷-2-基)哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯(2.47g,48％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.21(3h,s),1.31(3h,s),1.46(18h,s),3.01-3.38(4h,m),3.79-4.21(4h,m)。
步骤d：2-(哌嗪-2-基)丙烷-2-醇2hcl
在0℃下，向2-(2-羟基丙烷-2-基)哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯(2.47g,7.17mmol)的meoh(23ml)溶液中加入hcl(4m的二氧六环溶液,8.96ml,35.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5小时，同时固体被沉淀出。在真空浓缩后，将残留的固体在真空下干燥，产生淡褐色固体形式的2-(哌嗪-2-基)丙烷-2-醇2hcl(1.17g,75％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.19(3h,s),1.25(3h,s),2.97(1h,t,j＝13.6hz),3.20-3.34(3h,m),3.34-3.48(2h,m),3.53-3.56(2h,m),9.14(1h,br.s),9.60(1h,br.s),9.89(2h,br.s)。
步骤e：(e)-3-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(3-(2-羟基丙烷-2-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
在0℃下，向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(67.0mg,0.181mmol)的dmf(1.2ml)溶液中加入hatu(89.0mg,0.235mmol)和dipea(0.142ml,0.814mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时并冷却至0℃。在0℃下加入2-(哌嗪-2-基)丙烷-2-醇2hcl(47.0mg,0.217mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌2小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生淡黄色固体形式的(e)-3-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(3-(2-羟基丙烷-2-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(64.0mg,71％)。ms：468.1[mh+]
实施例65：化合物53的制备：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
将(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(50.0mg,0.114mmol)和甲醛(水溶液37％,0.011ml,0.148mmol)在meoh(1.1ml)中的混合物在室温下搅拌10分钟。在一次加入氰基硼氢化钠(10.7mg,0.171mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后用2n的naoh水溶液(1.42ml,2.85mmol)淬灭。将混合物在室温下搅拌30分钟并用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生黄色固体形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(44.0mg,85％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.65-1.85(4h,m),2.34(3h,s),2.40-2.52(5h,m),3.40-4.20(6h,m),5.20(0.5h,s),5.70-5.92(1h,m),6.38(0.5h,s),6.69(1h,s),6.82-7.16(2h,m),7.60-7.82(1h,m),7.95(1h,s),8.10-8.40(1h,m)。ms：453.1[mh+]。
实施例66：化合物54的制备：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-乙基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
将(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(100mg,0.228mmol)和乙醛(129μl,0.228mmol)在meoh(1.1ml)中的混合物在室温下搅拌10分钟。在加入三乙酰氧基硼氢化钠(73.0mg,0.342mmol)，然后加入乙酸(261μl,4.56mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后用2n的naoh(1.42ml,2.85mmol)水溶液淬灭。将混合物在室温下搅拌30分钟并用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝20:1至15:1)，产生黄色固体形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-乙基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(69.5mg,63％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.03(3h,t,j＝7.2hz),1.83-2.00(2h,m),2.02-2.10(1h,m),2.30-2.48(6h,m),3.40-3.70(4h,m)。4.03(2h,q,j＝7.2hz),5.35和5.59(1h,s+s),6.01和6.64(1h,s+s),6.76-6.79(1h,m),7.05-7.21(1h,m),7.23-7.48(2h,m),8.13-8.23(1h,m),8.54和8.74(1h,s+s)。ms：467.1[mh+]。
实施例67：化合物55的制备：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-异丙基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
将(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(50.0mg,0.114mmol)和丙酮(0.025ml,0.342mmol)在meoh(1.1ml)中的混合物在室温下搅拌10分钟。在一次加入氰基硼氢化钠(10.7mg,0.171mmol)后，将反应混合物搅拌30小时并用2n的naoh(1.4ml,2.85mmol)水溶液淬灭。将混合物在室温下搅拌30分钟并用dcm萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(dcm:meoh＝20:1至10:1)，产生黄色固体形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-异丙基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(46.3mg,84％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.08(6h,d,j＝6.8hz),1.95-2.36(4h,m),2.40-2.50(5h,m),2.70-2.78(1h,m),3.40-4.20(6h,m),5.18(0.5h,s),5.65-5.92(1h,m),6.34(0.5h,s),6.69(1h,s),6.82-7.20(2h,m),7.60-7.82(1h,m),7.95(1h,s),8.10-8.40(1h,m)。ms：481.1[mh+]。
实施例68：化合物56的制备：(r,e)-1-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙-2-烯-1-酮
步骤a：1,4-二氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向1,4-二氮杂环庚烷(1.00g,9.98mmol)的dcm(22ml)溶液中加入(t-boc)2o(1.08g,4.99mmol)的dcm(11ml)溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜并真空浓缩。将残留物溶于et2o中并用10％的柠檬酸水溶液萃取。水层用固体k2co3碱化直到ph11，然后用etoac萃取两次。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生黄色油状物形式的1,4-二氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(795mg,88％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.47(9h,s)1.59(1h,br.s),1.74-1.80(2h,m),2.84-2.93(4h,m),3.39-3.51(4h,m)。
步骤b：(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(100mg,0.270mmol)的dmf(1.8ml)溶液中加入hatu(154mg,0.405mmol)、dipea(118μl,0.675mmol)和1,4-二氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(65.0mg,0.324mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:4至1:5)，产生黄色固体形式的(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(137mg,92％)。1h-nmr(dmso-d6,瓦里安,400mhz)：δ1.12-1.43(9h,m),1.55-1.80(2h,m),1.81-2.00(3h,m),2.32-2.50(1h,m),2.19-3.30(3h,m),3.38-3.88(7h,m),4.00-4.10(1h,m),5.32和5.95(1h,s+s),6.11和3.64(1h,s+s),6.67(1h,s),6.91(1h,s),7.05(1h,s),7.32(1h,s),7.50-8.32(3h,m)。
步骤c：(r,e)-1-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙-2-烯-1-酮
在0℃下，向(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(137mg,0.283mmol)的dcm(2.5ml)溶液中加入tfa(382μlg,4.96mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时并真空浓缩。将残留物溶于水中，用饱和nahco3水溶液中和并用etoac洗涤。分离的水层用dcm萃取两次。将合并的有机层(仅dcm)在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生淡黄色固体形式的(r,e)-1-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙-2-烯-1-酮(48.1mg,42％)。ms：453.1[mh+]。
实施例69：化合物57的制备：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-羟基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮
在0℃下，向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(100mg,0.270mmol)的dmf(1.35ml)溶液中加入hatu(0.133g,0.351mmol)和dipea(0.118ml,0.675mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时并冷却至0℃。在室温下加入哌啶-4-醇(0.0330g,0.324mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌2小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用水和饱和nahco3水溶液洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh20:1至10:1)，产生黄色泡沫形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-羟基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(120mg,98％)。ms：454.1[mh+]
实施例70：化合物58的制备：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮
步骤a：4-羟基-4-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯
在-78℃下，向4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g,5.02mmol)的干燥thf(25ml)溶液中加入甲基氯化镁(2.17ml,6.52mmol)。伴随搅拌2小时将反应混合物缓慢升温至0℃，并用饱和nh4cl水溶液淬灭。混合物用etoac萃取两次，并将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，产生无色油状物形式的4-羟基-4-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.08g,>99％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ1.27(3h,s),1.46(9h,s),1.50-1.58(4h,m),3.20-3.27(2h,m),3.64-3.76(2h,m)。
步骤b：4-甲基哌啶-4-醇
在0℃下，向4-羟基-4-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.08g,5.02mmol)的dcm溶液中加入tfa(1.93ml,25.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时。在用饱和nahco3水溶液碱化后，将分离的水层真空浓缩(将化合物溶于水层中)。残留物用meoh稀释，然后通过sio2垫过滤同时用meoh洗涤。将滤液真空浓缩，产生粘稠油状物形式的4-甲基哌啶-4-醇(235mg,40％)，在不进一步纯化的情况下，将其用于下一步反应。
步骤c：(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮
在0℃下，向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(100mg,0.270mmol)的dmf(1.35ml)溶液中加入hatu(133mg,0.351mmol)和dipea(0.165ml,0.945mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时并冷却至0℃。在室温下加入粗4-甲基哌啶-4-醇(0.155g,1.35mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌4小时。在真空浓缩后，残留物用dcm稀释，用水和饱和nahco3水溶液洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(仅etoac到dcm:meoh20:1)，产生淡黄色泡沫形式的(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(126mg,100％)。ms：468.1[mh+]。
实施例71：化合物59的制备：(e)-3-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-((r)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(70.0mg,0.189mmol)的dmf(1.5ml)溶液中加入hatu(108mg,0.284mmol)、dipea(99.0μl,0.567mmol)和(r)-吡咯烷-3-醇(49.0mg,0.567mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝30:1至10:1)，产生黄色固体形式的(e)-3-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-((r)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(15.0mg,18％)。ms：440.2[mh+]。
实施例72：化合物60的制备：(e)-3-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-((s)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮
向(r,e)-3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酸(70.0mg,0.189mmol)的dmf(1.5ml)溶液中加入hatu(108mg,0.284mmol)、dipea(99.0μl,0.567mmol)和(s)-吡咯烷-3-醇(49.0mg,0.567mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用etoac稀释。混合物用饱和nh4cl水溶液和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过sio2柱色谱纯化(etoac:meoh＝30:1至10:1)，产生黄色固体形式的(e)-3-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-((s)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(15.0mg,18％)。ms：440.2[mh+]。
实施例73：化合物61的制备：3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-吗啉代丙-2-炔-1-酮
将5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-碘代吡唑并[1,5-a]嘧啶(456mg,1.070mmol)、1-吗啉代丙-2-炔-1-酮(223mg,1.60mmol)和pdcl2(pph3)2(75.0mg,0.107mmol)和碘化亚铜(i)(20.0mg,0.107mmol)的tea(5.0ml)和thf(5.0ml)溶液在70℃下搅拌12小时。在真空浓缩后，残留物通过sio2柱色谱纯化(hex:etoac＝1:1到仅etoac)，产生橙色固体形式的3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-吗啉代丙-2-炔-1-酮(45.7mg,9.7％)。1h-nmr(cdcl3,瓦里安,400mhz)：δ2.05-2.20(3h,m),2.24-2.60(1h,m),3.58-4.20(10h,m),5.18和5.73(1h,s+s),5.88和6.36(1h,s+s),6.69(1h,br.s),6.94(1h,br.s),7.13(1h,br.s),7.44-7.77(1h,m),8.15-8.50(1h,m)。ms：438.3[mh+]。
实施例74：trka,b&c激酶测定
adp-glo测定试剂盒购自promega。聚(glu，tyr)、硫酸镁、牛血清白蛋白(bsa)和二甲基亚砜(dmso)购自sigma-aldrich。tris-hcl缓冲液购自bdgentest。htrfkinease-tk试剂盒购自cisbio。trka，b&c激酶购自carnabioscience。
使用发光adp-glo测定试剂盒(promega)和htrfkinease-tk测定试剂盒(cisbio)，使用两种方法对化合物1-61进行激酶测定。发光adp-glo测定试剂盒(promega)测量由激酶反应形成的adp。adp转化成atp，然后通过ultra-glo荧光素酶将其转化为光。htrfkinease-tk测定试剂盒(cisbio)使用一种底物和通用检测系统测量酪氨酸激酶活性。
adp-glo测定试剂盒(promega)
使用一个底物和通用检测系统对化合物1-61进行蛋白激酶测定。adp转化为atp，其ich.cl浓度分别为0.4ng/ul的trka，0.5ng/ul的trkb和3ng/ul的trkc)，5μl的聚(glu,tyr)的1μg/μl的储备溶液，5μl的化合物或测定缓冲液，5μl的atp(125μm的储备溶液)。
通过在96孔板中将反应混合物在30℃下孵育1小时开始测定。孵育后，通过花费1小时在30℃下加入25个板终止测定。转变成atp，其ich.cl浓度为0.4ng/μl的trka，0.5ng/μl。然后加入50eincu激酶检测试剂，摇动96孔板，然后在环境温度下孵育另外30分钟。然后在enspire酶标仪上读取96孔反应板。通过使用sigmaplot的曲线拟合得到ic50值。
htrfkinease-tk测定试剂盒(cisbio)
在384孔低容量微孔板(greiner)中对化合物1-61进行htrfkinease-tk测定。htrfkinease-tk测定格式包括两个步骤。第一步是激酶反应步骤。根据以下测定反应配方，以10μl的最终体积在rt(室温)下进行该激酶反应步骤：10μl的激酶混合物(激酶(2μl)+atp(2μl)+底物(2μl)+化合物(4μl))。激酶终浓度分别为0.3ng/μl的trka，0.1ng/μl的trkb，0.03ng/μl的trkc。atp最终浓度分别为14.7μm(trka)，4.77μm(trkb)，25.6μm(trkc)。tk-底物最终浓度为0.3ng/μl。混合物暴露于0至100nm的剂量反应浓度(drc)化合物，共40分钟。在激酶反应步骤期间，通过加入atp开始激酶反应。激酶使底物磷酸化。
第二步是检测步骤。将10μl的检测试剂(5μl的sa-xl665的edta+5μl的tk抗体-eu的edta)加入到激酶混合物。将该步骤在室温下进行1小时。检测试剂检测磷酸化的底物。
最后，然后在flexstation3机器上读取384孔反应板。在620nm(cryptate)和665nm(xl665)下测量荧光。计算各个孔的比率(655/620)×104。通过使用graphpadprism的曲线拟合得到ic50值。下表1包括测定结果。
实施例74：细胞增殖测定
阿霉素购自sigmaaldrich(d1515)。将所有化合物在dmso中(sigmaaldrich，d2650)稀释。
细胞增殖测定
在补充有10％fbs的培养基中，使用
表1
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种式i的化合物或其盐：
r1是任选被一个或多个独立地选自卤素、羟基、线性c1-c4烷基、支链c1-c4烷基、线性c1-c4烷氧基和支链c1-c4烷氧基的取代基取代的6-元芳基环或杂芳基环；
r2选自氢、线性c1-c4烷基和支链线性c1-c4烷基；
x选自-ch2-、-ch2ch2-、-ch2o-和-ch(z)-，其中z为卤素；且
q选自-ch＝cr3c(o)nr4r5、-c≡cc(o)nr4r5和
其中r3是氢或卤素，
其中-nr4r5形成4-7元杂环或不形成环结构，所述杂环为杂芳基环或杂环烷基环，
其中当-nr4r5形成4-7元杂环时，4-7元杂环包括除-nr4r5的氮之外的任选的第二杂原子，并且任选地被一个或多个独立地选自线性c1-c6烷基、支链c1-c6烷基、羟基、羧酸、线性c1-c4烷基羧酸和支链c1-c4烷基羧酸支化的取代基取代，
其中当-nr4r5不形成环结构时，r4选自氢、线性c1-c6烷基和支链c1-c6烷基，且r5选自氢、任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的线性c1-c6烷基、任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的支链c1-c6烷基和任选被至少一个氟或至少一个羟基取代的c1-c6环烷基，
其中y1、y2、y3和y4各自独立地选自-ch、n、o、s、-cr6和-nr6，
其中r6选自氢、线性c1-c4烷基、支链c1-c4烷基、5-6元芳环、5-6元杂芳环、3-7元杂环烷基环、3-7元环烷基环、-nhco-(芳环)和-ch2co-(c3-c6元杂环)，或
r1是被一个或多个独立地选自氟、甲氧基和乙氧基的取代基取代的苯环；r2是h；x选自-ch2-、-ch2ch2-、-ch2o-和-ch(z)-，其中z为卤素；和q选自-ch＝cr3c(o)nr4r5、-c≡cc(o)nr4r5和
所述式i的化合物是(r,e)-4-(3-(5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)丙烯酰基)哌嗪-2-酮(化合物51)或(e)-3-(5-((r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-(3-(2-羟基丙烷-2-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(化合物52)。
2.如权利要求1所述的化合物，其中r1是被一个或多个独立地选自氟、甲氧基和乙氧基的取代基取代的苯环，其中r2和r3是h，其中r5选自h、甲基、乙基、异丙基、环丙基、叔丁基、甲氧基乙基和羟基乙基。
3.如权利要求1所述的化合物，其中r1是被至少一个选自氟和甲氧基的基团取代的吡啶环，其中r2和r3是h，其中r5选自h、甲基、乙基、异丙基、环丙基、叔丁基、甲氧基乙基和羟基乙基。
4.如权利要求1所述的化合物，其中当-nr4r5不形成环结构时，r4选自氢、线性c1-c6烷基和支链c1-c6烷基，且r5选自线性c1-c6氟烷基、支链c1-c6氟烷基、线性c1-c6二氟烷基、支链c1-c6二氟烷基、线性c1-c6三氟烷基、支链c1-c6三氟烷基、线性c1-c6羟基烷基、支链c1-c6羟基烷基、线性c2-c6二氟烷基和支链c2-c6二氟烷基。
5.如权利要求1所述的化合物，其中形成4-7元杂环的-nr4r5是4-7元杂环烷基环。
6.如权利要求1所述的化合物，其中当-nr4r5形成4-7元杂环时，4-7元杂环中的第二杂原子选自氮、氧和硫。
7.如权利要求1所述的化合物，其中式i化合物是式ii化合物：
8.如权利要求1所述的化合物，其中式i化合物是式iii化合物：
9.如权利要求1所述的化合物，其中式i化合物是式iv化合物：
10.如权利要求1所述的化合物，其中式i的化合物选自化合物1-10：
11.如权利要求1所述的化合物，其中式i的化合物选自化合物11-20：
12.如权利要求1所述的化合物，其中式i的化合物选自化合物21-30：
13.如权利要求1所述的化合物，其中式i的化合物选自化合物31-40：
14.如权利要求1所述的化合物，其中式i的化合物选自化合物41-50：
15.如权利要求1所述的化合物，其中式i的化合物选自化合物51-61：
16.如权利要求1所述的化合物，其中所述盐选自乙酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、酸式酒石酸盐、溴化物、碳酸盐、氯化物、依地酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、碘化物、乳酸盐、乳糖醛酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴、硫酸二甲酯、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、水杨酸盐、双水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三乙基碘、三氟乙酸盐和戊酸盐。
17.一种治疗或预防选自甲状腺乳头状癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌、乳腺癌、神经母细胞瘤、疼痛、恶病质、皮炎和哮喘的trk介导的疾病的方法，所述方法包括：
向需要这种治疗的受试者施用药学上有效量的权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐。
18.一种抑制trk酶的方法，所述方法包括：
向需要这种抑制的受试者施用药学上有效量的权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐。