本发明涉及医药技术领域，更具体而言，本发明涉及一类n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物，还涉及该类化合物的组合物、制备方法及其在制备治疗与bcl-2蛋白家族抗细胞凋亡成员高表达相关的疾病或症状的药物、抗肿瘤药和增效剂中的用途。
背景技术：
细胞凋亡是细胞受到某种信号刺激后进行的程序化死亡，是细胞的一种基本生物学现象。bcl-2蛋白家族在细胞凋亡通路中起重要的调节作用。它可以分为抗细胞凋亡成员(如bcl-2、bcl-xl、mcl-1等)和促细胞凋亡成员两类。研究表明bcl-2蛋白家族抗凋亡成员过度表达可导致正常细胞凋亡通路受阻，与许多疾病(如肿瘤、自身免疫性疾病等)的发生相关，特别是肿瘤产生及发生耐药的重要原因之一(nature2000,407,796-801；natrevcancer2004,4,592-603.)。
研究表明bcl-2蛋白家族抗细胞凋亡成员在许多肿瘤中过度表达，在不同肿瘤以及不同肿瘤亚型中的表达水平不同(oncogene2003,22,8590-607；oncogene2008,27,6398-406)。通过抑制肿瘤细胞中过度表达的抗细胞凋亡成员的抗凋亡作用，可以恢复其正常的凋亡通路，增加其对化疗放疗的敏感性，是治疗肿瘤的新策略。bcl-2蛋白家族抗细胞凋亡成员是通过其表面的疏水凹槽与促细胞凋亡成员的bcl-2蛋白家族保守区域bh3结合而发生相互作用，来调节细胞正常的生理凋亡。小分子抑制剂通过结合于抗细胞凋亡成员表面疏水凹槽，可以干扰促细胞凋亡成员bh3区域与之结合起到促进细胞凋亡的作用(natrevcancer2005,5,876-85；kelly,p.n.；celldeathdiffer2011,18,1414-24.)。近些年该类小分子抑制剂引起了研究者的广泛兴趣，通过不同途径发现了一系列小分子抑制剂，其中有四个(abt-199，abt-263，at-101，gx15-07)作为口服抗肿瘤药物进入临床研究。研究结果表明bcl-2蛋白家族抗细胞凋亡成员小分子抑制剂展现出较好的抗肿瘤作用和对其他抗肿瘤药物或放射治疗的增效协同作用，具有很好的发展前景(natrevdrugdiscov2008,7,989-100；中国新药杂志2008,17,2008-2013；药学进展2004,28,97-103；clincancerres2012,18,1-7；jthoraconcol2011,6,1757-1760；lungcancer2011,74,481-485)。
综上所述，研发bcl-2蛋白家族抗细胞凋亡成员的抑制剂，对于肿瘤等疾病的治疗具有重要意义。
技术实现要素：
本发明目的是为了提供一类新型n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物以及该类化合物的制备方法、用途和组合物。
在本发明的第一方面，提供了一类n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物，其结构通式如式(ⅰ)所示：
式中，
r1基团是-zr5(ⅱ)，其中，z是
r5是氢原子，未取代或取代芳香单环，未取代或取代氢化芳香稠环，未取代或取代芳香稠环，其中，取代基是单取代或多取代，为c1～c5直链、支链或环状烷烃基，卤素；
或r5基团是-yr6(ⅲ)，其中，y是c1～c7直链、支链或环状烷烃基，c1～c7直链、支链或环状烯烃基，r5是氢原子，未取代或取代芳香单环，其中，取代基是单取代或多取代，为卤素，未取代或卤代c1～c5直链、支链或环状烷烃基，c1～c5烷氧基团，硝基，三氟甲基，氰基，磺酸基，羧基；
或r5基团是-yr6(ⅲ)，其中，y是未取代或取代芳香单环，取代基是单取代或多取代，r6基团是vr10(ⅶ)，其中，v是
r2取代位置位于2位或3位，为氢原子，羟基，氨基，卤素，c1～c5直链、支链或环状烷烃基；
或r2基团是-xr7(ⅳ)，其中，x是o，n，s，
r3基团是氢原子，卤素，氨基，羟基，c1～c5直链、支链或环状烷烃基；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链、支链或环状烷烃基，c1～c10直链、支链或环状烯烃基，r8是氢原子，磺酸基，羧基，硝基，三氟甲基，氰基；
或r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，
r4取代位置位于2位或3位，为氢原子，硝基，三氟甲基，氰基，磺酸基，羧基，c1～c5直链或支链烷烃基，卤素，羟基，氨基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，或r2基团是-xr7(ⅳ)，其中，x是o，n，s，r7是芳香单环，
r3基团是氢原子，卤素；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是羧基，磺酸基；
或r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，或r2基团是-xr7(ⅳ)，其中，x是o，n，s，r7是芳香单环，
r3基团是氢原子，卤素；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是羧基，磺酸基；
或r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，或r2基团是-xr7(ⅳ)，其中，x是o，n，s，r7是芳香单环，
r3基团是氢原子，卤素；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是羧基，磺酸基；
或r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，或r2基团是-xr7(ⅳ)，其中，x是o，n，s，r7是芳香单环，
r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，
r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，
r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c4直链烷烃基，r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，或r2基团是-xr7(ⅳ)，其中，x是o，n，s，r7是芳香单环，
r3基团是氢原子，卤素；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是羧基，磺酸基；
或r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，或r2基团是-xr7(ⅳ)，其中，x是o，r7是芳香单环，
r3基团是氢原子，卤素；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是羧基，磺酸基；
或r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，z是
r2为氢原子，或r2基团是-xr7(ⅳ)，其中，x是o，r7是芳香单环，
r3基团是氢原子，卤素；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是羧基，磺酸基；
或r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，其中，z是
r2为氢原子，
r3基团是氢原子；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链、支链或环状烷烃基，r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，其中，z是
r2为氢原子，
r3基团是氢原子；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，o，n，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，其中，z是
r2为氢原子，
r3基团是氢原子；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c10直链烷烃基，r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一个优选例：
r1基团是-zr5(ⅱ)，其中，z是
r2为氢原子，
r3基团是氢原子；
或r3基团是-nwr8(ⅴ)，其中，w是c1～c4直链烷烃基，r8基团是-ur9(ⅵ)，u是s，r9是芳香单环，
r4为氢原子，硝基。
作为本发明的一种优选实施方式，所述的化合物为下列化合物中的任一个：
1)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(2-苯乙酰基氨基)苯甲酰胺
2)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-苯丙酰基氨基)苯甲酰胺
3)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
4)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(4-氯苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
5)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(3-氯苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
6)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(2-氯苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
7)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(4-甲氧基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
8)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(3-甲氧基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
9)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(2-甲氧基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
10)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(4-三氟甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
11)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(3-三氟甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
12)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(2-三氟甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
13)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(4-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
14)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(3-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
15)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
16)2-(2-硝基-4-(n-(2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰基)氨磺酰基)苯基氨基)乙酸
17)3-(2-硝基-4-(n-(2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰基)氨磺酰基)苯基氨基)丙酸
18)4-(2-硝基-4-(n-(2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰基)氨磺酰基)苯基氨基)丁酸
19)5-(2-硝基-4-(n-(2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰基)氨磺酰基)苯基氨基)戊酸
20)6-(2-硝基-4-(n-(2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰基)氨磺酰基)苯基氨基)己酸
21)7-(2-硝基-4-(n-(2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰基)氨磺酰基)苯基氨基)庚酸
22)8-(2-硝基-4-(n-(2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰基)氨磺酰基)苯基氨基)辛酸
23)n-(3-硝基苯磺酰基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
24)n-(4-氟-3-硝基苯磺酰基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
25)n-(4-氟-苯磺酰基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
26)n-(4-氯-苯磺酰基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
27)n-(4-溴-苯磺酰基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
28)n-(苯磺酰基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺
29)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(4-(1-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙烯基)苯甲酰基氨基)苯甲酰胺
30)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(1-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙烯基)苯甲酰胺
31)n-(3-硝基苯磺酰基)-4-(1-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙烯基)苯甲酰胺
32)n-(苯磺酰基)-4-(1-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙烯基)苯甲酰胺
33)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-羰基)苯甲酰胺
34)n-(3-硝基苯磺酰基)-4-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-羰基)苯甲酰胺
35)n-(苯磺酰基)-4-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-羰基)苯甲酰胺
36)n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基)-4-(苯甲酰基)苯甲酰胺。
在本发明的第二方面，提供了式(ⅰ)所述的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物的晶型、药学上可接受的无机酸盐或有机酸盐、水合物、溶剂合物或前药。
在本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，所述的药物组合物含有药学上可接受的赋形剂或载体，以及式(ⅰ)所述的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物或式(ⅰ)所述的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物的晶型、药学上可接受的无机酸盐或有机酸盐、水合物、溶剂合物或前药。。
在本发明的第四方面，提供了式(ⅰ)所述的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物，或式(ⅰ)所述的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物的晶型、药学上可接受的无机酸盐或有机酸盐、水合物、溶剂合物或前药在制备药物中的用途，所述的药物用于：
a)治疗与bcl-2、bcl-xl和mcl-1活性相关的疾病或症状；
b)抗肿瘤；或
c)作为抗肿瘤药或放射治疗的增效剂。
作为本发明的一种具体实施方式，所述的肿瘤为白血病、骨髓瘤、卵巢癌、乳腺癌、黑色素瘤、肺癌。
在本发明的第五方面，提供了式(ⅰ)所述的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物的制备方法包括下列步骤：
中间体(ⅷ)与2-或3-取代-4-取代苯磺胺(ⅸ)，在缩合反应条件下生成目标化合物(ⅰ)；
其中，中间体(ⅷ)结构式为：
2-或3-取代-4-取代苯磺胺(ⅸ)结构式为：
如需要，将上述步骤中所得式(ⅰ)化合物与药用碱形成式(ⅰ)化合物的药用盐，或将上述步骤中所得式(ⅰ)化合物按立体化学分离方法得到式(ⅰ)化合物的纯光学异构体。
在另一优选例中，所述的化合物(1)的合成中使用的缩合反应条件为加入1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐(edci)。
在一优选例中，所述的目标化合物(ⅰ)的合成中使用的缩合反应条件为加入1,3-二环己基碳二亚胺(dcc)。
在另一优选例中，所述的目标化合物(ⅰ)的合成中使用的缩合反应条件为加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(hatu)。
在另一优选例中，所述的目标化合物(ⅰ)的合成中使用的缩合反应条件为先在中间体(ⅷ)中加入二氯亚砜制成酰氯，再加入2-或3-取代-4-取代苯磺胺(ⅸ)。
在另一优选例中，所述的目标化合物(ⅰ)的合成中的立体化学分离方法为分馏、重结晶、引进单一手性源或色谱拆分。
本文中，“前药”是指一个试剂在体内转化为原型药。前药通常是有用的，因为在某种情况下，它们可能比原型药容易给药。前药通常是药的前体，接下来的给药和吸收被转化为活性物质，或通过一些过程变为活性更强的种类，如通过代谢途径转化。一些前药具有的化学基团使其活性较低和/或对比原型药的溶解性或一些其它性质有所改变。一旦前药的化学基团被去除和/或对其修饰，得到活性药。
所述的药学上可接受的无机酸盐可选自盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐；所述的药学上可接受的有机酸盐可选自乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐、草酸盐。
本发明涉及的药用组合物，可以是固体形式或是液体形式，所述的药物剂型可以是片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、混悬剂、或注射剂。当本发明化合物用于上述用途时，可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合，如溶剂、稀释剂等，而且可以用如下形式口服给药：片剂、丸剂、胶囊、可分散的粉末、颗粒或悬浮液(含有如约0.05-5％悬浮剂)、糖浆(含有如约10-50％糖)、和酏剂(含有约20-50％乙醇)，或以外用方式给药：软膏剂、凝胶、含药胶布等，或者以无菌可注射溶液或悬浮液形式(在等渗介质中含有约0.05-5％悬浮剂)进行非肠胃给药。例如，这些药物制剂可含有与载体混合的约0.01-99％，更佳地约为0.1％-90％(重量)的活性成分。
“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指代是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的疗效。药学上可接受的载体部分例子有糖(如葡萄糖、蔗糖、乳糖等)，淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉等)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)，明胶，滑石粉，固体润滑剂(如硬脂酸钠、硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)，多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)，乳化剂(如吐温类)、润湿剂(如十二烷基磺酸钠)，着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等。
所述的“增效剂”是指一类与某类药物配伍使用时，以特定的机制增强该类药物活性的药物，发挥协同作用。作为增效剂，可以与其他药物联合用药，所述“联合给药”指将几种所选的治疗药物给一个病人用药，以相同或不同的给药方式在相同或不同的时间给药。术语“协同”、“协同作用”或“增效”，如本文所用，指对原本存在抑制bcl-2、bcl-xl或mcl-1活性，或抗肿瘤的药物在合用另一种药物时能够增强原来药物抑制bcl-2、bcl-xl或mcl-1活性，或抗肿瘤效果的作用。
本发明优点在于：
1、本发明的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物显示了与bcl-2、bcl-xl和mcl-1蛋白较好的结合能力，特别是部分化合物mcl-1蛋白显示了更好的结合能力。因此这些化合物具有制备与bcl-2蛋白家族抗细胞凋亡成员高表达相关的疾病的治疗药物，制备抗肿瘤药物，以及制备增效剂与其它抗肿瘤药物或放射治疗合用以治疗肿瘤的潜在用途。
2、本发明的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物对人血液肿瘤(白血病、骨髓瘤)和实体瘤(卵巢癌、乳腺癌、黑色素瘤、肺癌)显示了较好的广谱抗肿瘤活性。因此，本发明的化合物可望有良好的开发前景。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
实施例1
n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基-4-(3-苯丙酰基氨基)苯甲酰胺(表1中化合物2)的制备：
合成路线为：
1、苯丙酰胺基苯甲酸乙酯的制备
苯丙酸0.305g(2mmol)，对氨基苯甲酸乙酯0.348g(2mmol)，1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐(edci)0.775g(4mmol)，4-二甲氨基吡啶0.049g(0.4mmol)，以无水dcm为溶剂，常温反应24h。反应结束后，加入1m的盐酸洗，水相用ea萃取，合并有机相，浓缩得到固体0.429g，产率72.1％。
2、苯丙酰胺基苯甲酸的制备
取之前累积得到的苯丙酰胺基苯甲酸乙酯0.8921g(3mmol)，溶于30ml四氢呋喃:甲醇＝1:1的溶液中，完全溶解后加入氢氧化钠水溶液(0.48g溶于5ml水中)，常温搅拌，反应结束后，将有机相蒸干，加入1mhcl溶液，有白色沉淀生成，过滤，ea重结晶，得到固体0.65g。收率80.46％。
3、n-(3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙氨基)苯磺酰基-4-(3-苯丙酰基氨基)苯甲酰胺(2)的制备
取苯丙酰胺基苯甲酸13.7mg(0.05mmol)，18mg(0.05mmol)3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙胺基)苯磺酰胺，1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐(edci)19.4mg(0.1mmol)，dmap6.2mg(0.05mmol)，溶于无水dcm中，常温反应24h，反应结束后加1m盐酸溶液，水相用ea萃取，合并有机相，浓缩得粗品，过flash柱，得纯品20mg，产率66.1％。
实施例2-23
重复实施例1，不同点在于：使用不同的原料，从而制得表1中化合物1和3-15和29。具体如下：使用苯乙酸、3-苯基丙烯酸、3-(4-氯苯基)丙烯酸、3-(3-氯苯基)丙烯酸、3-(2-氯苯基)丙烯酸、3-(4-甲氧基苯基)丙烯酸、3-(3-甲氧基苯基)丙烯酸、3-(2-甲氧基苯基)丙烯酸、3-(4-三氟甲基苯基)丙烯酸、3-(3-三氟甲基苯基)丙烯酸、3-(2-三氟甲基苯基)丙烯酸、3-(4-甲基苯基)丙烯酸、3-(3-甲基苯基)丙烯酸、3-(2-甲基苯基)丙烯酸和4-(1-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙烯基)苯甲酸代替实施例1中原料苯丙酸，分别制得化合物1、3-15和29。
重复实施例1中第三步，不同点在于：使用不同的原料，从而制得表1中化合物30-36。具体如下：使用4-(1-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙烯基)苯甲酸、4-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-羰基)苯甲酸和4-苯甲酰基苯甲酸代替实施例1中第三步原料苯丙酰胺基苯甲酸，分别制得化合物30、33和36；使用4-(1-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙烯基)苯甲酸代替实施例1中第三步原料苯丙酰胺基苯甲酸，且3-硝基苯磺胺和苯磺胺代替实施例1中第三步原料3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙胺基)苯磺酰胺，分别制得化合物31和32；使用4-(3,5,5,8,8-五甲基-5,6,7,8-四氢萘-2-羰基)苯甲酸代替实施例1中第三步原料苯丙酰胺基苯甲酸，且3-硝基苯磺胺和苯磺胺代替实施例1中第三步原料3-硝基-4-(2-(苯硫基)乙胺基)苯磺酰胺，分别制得化合物34和35。
实施例24
n-(4-氟-3-硝基苯磺酰基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺(表1中化合物24)的制备：
合成路线为：
1、2-氟-4-硝基苯甲酸乙酯的制备
取2-氟-4-硝基苯甲酸(5g，27.01mmol)溶于乙醇中，向溶液中加入浓盐酸20滴，升温回流16小时，反应完毕后，浓缩，得到白色固体(5.53g，收率：96％)。
2、4-硝基-2-苯氧基苯甲酸乙酯的制备
将2-氟-4-硝基苯甲酸乙酯(1g，4.69mmol)溶于二乙二醇二甲醚溶液中，向其中加入苯酚(4.41g，46.90mmol)，k2co3(1.9g，14.74mmol)100度条件下，搅拌1小时。反应完全后，将溶液倒入水中，ea萃取，合并有机相浓缩，得到粗品柱层析得到白色固体(1.14g，84.5％)。
3、4-胺基-2-苯氧基苯甲酸乙酯的制备
将4-硝基-2-苯氧基苯甲酸乙酯(2g，6.97mmol)投入150ml圆底烧瓶中，加入30ml乙醇溶解，将氯化铵(1.9g，35.52mmol)溶于10ml水，然后加入乙醇溶液中，升温至105℃，待溶液沸腾之后，缓慢加入铁粉(1.9g，34.02mmol)，回流一小时。反应液用硅藻土过滤，蒸干滤液，得到褐色固体，柱层析得到白色产物(1.47g，收率：82.1％)。
4、2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酸乙酯的制备
向圆底烧瓶中依次加入3-(2-甲基苯基)丙烯酸(1.39g，8.55mmol)、edci(4.47g，23.31mmol)，dmap(1.14g，9.32mmol)，然后加入无水二氯甲烷60ml，室温下搅拌2小时后，向溶液中加入4-胺基-2-苯氧基苯甲酸乙酯(2g，7.77mmol)，室温下搅拌15h，终止反应，反应液依次用1m的盐酸溶液(30ml*3)洗涤，有机相干燥浓缩，粗品用反相c18分离，得到产物白色固体(1.93g，收率：61.8％)。
5、2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酸的制备
将2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酸乙酯(2g，4.98mmol)加入到圆底烧瓶中，加入10ml的甲醇和四氢呋喃，将naoh(1.59g，39.84mmol)溶于6ml水中，然后加入到上述溶液中，室温下搅拌18小时。用1m的盐酸溶液将反应液ph调成弱酸性，乙酸乙酯萃取，干燥浓缩，得到淡黄色固体(1.74g，93.6％)。
6、n-(4-氟-3-硝基苯磺酰基氨基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺(24)的制备
将2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酸(1g，2.68mmol)溶于3ml无水thf中，加入氯化亚砜(1.59g，13.39mmol)，室温搅拌8小时，tlc检测反应完全，浓缩，除去剩余的氯化亚砜。加5ml的thf溶解做成的酰氯，加入4-氟-3-硝基苯磺胺(0.65g，2.95mmol)，加入三乙胺(0.54g，5.36mmol)，室温反应24小时。反应完全后，粗品通过柱层析得到淡黄色固体(0.54g，收率：35.06％)。
实施例25-29
重复实施例24，不同点在于：使用不同的原料，从而制得表1中化合物23和25-28。具体如下：使用3-硝基苯磺胺、4-氟苯磺胺、4-氯苯磺胺、4-溴苯磺胺和苯磺胺代替实施例24中原料4-氟-3-硝基苯磺胺，分别制得化合物23和25-28。
实施例30
2-(2-硝基-4-(n-(2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰基)氨磺酰基)苯基氨基)乙酸(表1中化合物16)的制备：
合成路线为：
将甘氨酸(63.8mg，0.85mmol)溶于3mldmso中，加入diea(131.8mg，1.02mmol)，加入溶于3mldmso的n-(4-氟-3-硝基苯磺酰基氨基)-2-苯氧基-4-(3-(2-甲基苯基)丙烯酰基氨基)苯甲酰胺(24)(100mg，0.17mmol)溶液，100℃条件下反应6小时，终止反应，向反应液中加入适量1m盐酸溶液，加入适量ea萃取，有机相洗涤干燥浓缩，粗品柱层析得到黄色固体(32mg，收率：30％)。
实施例24-36
重复实施例30，不同点在于：使用不同的原料，从而制得表1中化合物17-22。具体如下：使用3-氨基丙酸、4-氨基丁酸、5-氨基戊酸、6-氨基己酸、7-氨基庚酸和8-氨基辛酸代替实施例30中原料甘氨酸，分别制得化合物17-22。
本发明合成的通式(ⅰ)中目标产物的化学结构见表1。核磁氢谱和质谱系统表征了目标产物的化学结构，其具体数据见表2。
表1通式(ⅰ)中目标化合物结构
表2通式(ⅰ)中目标化合物的氢谱和质谱数据
实施例37：bcl-2、bcl-xl和mcl-1蛋白亲和力测试
实验方法：参考前期工作和相关文献(bioorgmedchemlett2012,22,39-44；chemmedchem2011,6,904-21)，以醋酸棉酚(at-101)和4-benzamido-n-(3-nitro-4-(2-(phenylthio)ethylamino)phenylsulfonyl)benzamide(对照1)作为对照药，采用荧光偏振(fp)方法考察目标化合物竞争抑制bcl-2、bcl-xl和mcl-1蛋白与促细胞凋亡蛋白bim或bid的bh3肽段(荧光素标记)结合的能力来评价其与靶蛋白的亲和力。荧光偏振信号由荧光分光光度计在激发光波长485nm和发射光波长为535nm的条件下检测。将系列浓度目标化合物与荧光素标记的bim或bid的bh3肽段与bcl-2、bcl-xl或mcl-1蛋白一起在室温下培养20分钟后，检测其荧光偏振信号，计算该化合物的ic50值。并根据测量中所使用的蛋白总浓度、荧光多肽的总浓度、蛋白-多肽复合物的解离常数以及检测化合物的ic50值，计算检测化合物的竞争性抑制常数ki。实验结果见表3、表4和表5。
表3通式(ⅰ)中部分样品与bcl-2、bcl-xl和mcl-1蛋白亲和力
表4通式(ⅰ)中部分样品与bcl-2、bcl-xl和mcl-1蛋白亲和力
说明：“/”表示未做测试；ir：抑制率
表5通式(ⅰ)中部分样品与bcl-2、bcl-xl和mcl-1蛋白亲和力
说明：“/”表示未做测试
结果表明，本发明的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物显示了与bcl-2、bcl-xl和mcl-1蛋白较好的结合能力。未列出的化合物同样与以上蛋白表现出较好的结合能力。因此这些化合物具有制备与bcl-2蛋白家族抗细胞凋亡成员高表达相关的疾病的治疗药物，制备抗肿瘤药物，以及制备增效剂与其它抗肿瘤药物或放射治疗合用以治疗肿瘤的潜在用途。
实施例38：体外抗肿瘤活性测试试验
1、实验肿瘤株：
本实验采用肿瘤细胞株系分别为：hl-60(人白血病细胞)、ccrf-cem(人急性淋巴白血病细胞)、rpmi-8226(人骨髓瘤细胞)、u266(人骨髓瘤细胞)，skov3(人卵巢癌细胞)、mcf-7(人乳腺癌细胞)、a375(人黑色素瘤细胞)和nci-h23(人肺癌细胞)(购自上海医药工业研究院)。
2、样品配制：
用dmso(merck)溶解后，加入pbs(-)配成1000μg/ml的溶液或均匀的混悬液，然后用含dmso的pbs(-)稀释。阳性对照药为雅培公司开发的at-101、abt-737和4-benzamido-n-(3-nitro-4-(2-(phenylthio)ethylamino)phenylsulfonyl)benzamide(对照1)。
3、试验方法：
根据实验检测和相关文献(bioorgmedchemlett2012,22,39-44；nature.2005,437,677-681)，采用mtt法。96孔板每孔加入浓度为4～5×104个/ml的细胞悬液100μl，置37℃，5％co2培养箱内。24h后，加入样品液，10μl/孔，设双复孔，37℃，5％co2作用72h。每孔加入5mg/ml的mtt溶液20μl，作用4h后加入溶解液，100μl/孔，置培养箱内，溶解后用mk-2全自动酶标仪测570nmod值。体外抗肿瘤活性见表6。
表6通式(ⅰ)中部分样品对人体肿瘤细胞的体外增殖抑制作用
说明：“/”表示未做测试
从表6可知，本发明的n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物对人血液肿瘤和实体瘤显示了较好的广谱抗肿瘤活性，特别是部分化合物的肿瘤细胞抑制活性强于abt-737，优于或与at-101相当，未列出的化合物同样显示了较好的广谱抗肿瘤活性。预示着本发明的化合物可望有良好的开发前景。
综上，本发明提供了一类n-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物，具有良好的抗肿瘤活性，具有较好的开发前景。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。