一类黄烷化合物在预防或治疗黑色素瘤中的应用

一类黄烷化合物在预防或治疗黑色素瘤中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，一类黄烷化合物在预防或治疗黑色素瘤方面的药物和 保健品方面的新用途。
【背景技术】
[0002] 黑色素瘤是目前恶性肿瘤中发病率增长最快的一种，在我国，黑色素瘤的发病率 也在不断增高，每年新发病例已超过10000例。目前，黑色素瘤的治疗方法主要包括手术、 化疗、免疫治疗及靶向治疗。多数早期患者通过手术能够治愈，但对于进展期患者，化疗通 常效果不佳，因此，寻找更为有效的化疗药物单独或辅助治疗具有一定意义。
[0003] 自噬是目前涉及生物学、医学、植物学和微生物学等领域的一个快速发展的研究 热点。尤其在生物医学界，许多研究人员正在积极探讨自噬在各种疾病中的作用，研究疾病 中自噬水平调控的分子机制，以期利用自噬为临床疾病治疗寻找新的有效靶点。这些疾病 包括感染性疾病、心脑血管疾病、癌症、代谢紊乱性疾病和神经退行性疾病等。
[0004] 细胞自噬是细胞在饥饿、能量缺乏等代谢应激状态下的一种分解代谢过程，细胞 内的蛋白等大分子、细胞器和胞质通过自噬作用被包裹、消化、降解成核苷、氨基酸和脂肪 酸等可被重复循环利用的物质，用作合成新的大分子和能量来源ATP，从而维持细胞基本的 生命活动。自噬参与维持蛋白代谢平衡及细胞内环境的稳定，其在清除细胞内废物、结构重 建以及细胞生长发育中起着重要作用。自噬既是细胞的一种正常生理活动，也可在细胞遭 受各种刺激（缺氧，缺营养，化学物质刺激，微生物入侵，细胞器损伤，异常蛋白堆积等）时 作为应激反应而发生。自噬不仅具有维持细胞自我调节、促进细胞生存的作用，过度活跃的 自嗤活动也可以引起细胞死亡，即"自嗤性细胞死亡（autophagic cell death)"。
[0005] 肿瘤细胞的自噬是一把双刃剑：一方面，自噬可以清除肿瘤细胞内折叠异常的蛋 白和功能异常的细胞器例如线粒体，抑制细胞应激反应，最终防止基因组损伤从而抑制癌 症发生。另一方面，在肿瘤生长的后期，肿瘤细胞可利用自噬作用使自身在营养缺乏和低氧 或缺氧的状况下得以存活。因此，在肿瘤发生发展的不同阶段，自噬可能对肿瘤细胞有不同 的影响。
[0006] 机体内的活性氧自由基（Reactive oxygen species, R0S)通过其浓度调节着机体 细胞的生死平衡。随着自由基生物学研究的发展，研究者们逐渐认识到ROS可双向调控某 些肿瘤细胞的凋亡和增殖，并发现了自由基与细胞信号转导之间的内在关联。细胞内ROS 堆积是肿瘤细胞与正常细胞的重要差异之一，鉴于肿瘤细胞这一特性，利用某些可增加细 胞氧化应激的化合物可达到对肿瘤细胞与正常细胞的差异调节：一方面ROS水平的进一步 增加可引起肿瘤细胞的凋亡或坏死；另一方面，正常细胞中ROS水平的增加仍在细胞生理 承受范围内，不会引起细胞凋亡。
[0007] 黄烷及其聚合物是广泛存在于传统药用植物中的一类化学成分，药理活性研究结 果表明，黄烷类化合物具有抗肿瘤、降糖、神经保护、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎等方面的活 性，而黄烷聚合物近年来虽有活性方面的报道，但其研究尚未成熟，且其结构复杂，单体化 合物不易提纯。文献报道，黄烷聚合物可以通过硫解的方法进行降解，得到4位被硫代的黄 烷衍生物，但由于产物比较复杂，不易分离纯化，因此目前已报道的黄烷衍生物中4位被杂 原子取代的衍生物较少。
[0008] 课题组在对红景天的化学成分研究过程中发现，红景天中的黄烷聚合物要么以 ECG为聚合单元，要么以EGCG为聚合单元，不同红景天中黄烷聚合单元不同。与其他植物如 葡萄籽中的黄烷聚合单元不同的是，3-位羟基均被没食子酰化，因此，反应产物比较单一， 后处理简单。利用此结构特点，我们对此类衍生物进行了进一步的衍生化合成，并对其药理 活性进行深入研究，结果显示，该类化合物能够激活自噬，选择性增加肿瘤细胞ROS水平， 抑制肿瘤生长。目前，国内尚未有报道此类黄烷衍生物激活自噬，选择性增加肿瘤细胞ROS 水平，也未有此类黄烷衍生物在治疗或预防黑色素瘤方面的专利申请。

【发明内容】

[0009] 本发明的目的在于提供一类新的黄烷化合物。
[0010] 本发明的另一目的在于提供一类黄烷化合物的制备方法。
[0011] 本发明的再一目的在于提供一种药物组合物，其包括至少一个上述黄烷化合物及 药用载体和/或赋形剂。
[0012] 本发明的又一目的在于提供一类黄烷化合物在制备用于预防和/或治疗黑色素 瘤的产品中的应用。
[0013] 为解决本发明的技术问题，本发明采用如下技术方案：
[0014] 本发明第一方面提供了一类黄烷化合物在其结构如下：
[0015]
[0016] 本发明第二方面提供了制备本发明黄烷化合物的方法。
[0017] 该类衍生物是通过对天然药物中的黄烷聚合物进行衍生化反应后分离纯化得到 的。具体通过以下几个步骤实现：
[0018] 1)该部位的提取参照之前中国专利，专利申请号为201010587820. 7的红景天有 效部位的提取方法，将含有黄烷聚合物的中药材粉碎，用6-12倍量的有机溶剂提取2-5 次；将提取液过滤后进行减压浓缩，除去溶剂，即得药材总提取物；
[0019] 2)将药材总提取物进行大孔吸附树脂柱分离，洗脱液减压浓缩，经冷冻干燥后即 得黄烷聚合物部位；
[0020] 3)将黄烷聚合物部位通过加入硫代试剂进行硫解反应。
[0021] 步骤1)中优选的有机溶剂选自甲醇、乙醇或丙酮。甲醇、乙醇或丙酮的优选浓度 为30-95% (和水的混合物的质量比）；
[0022] 步骤1)中为加快提交效率，提取方式优选采用50-80°C ;
[0023] 步骤1)中优选的含有黄烷聚合物的中药材选自原料药材选自大花红景天、狭叶 红景天、高山红景天、玫瑰红景天、德钦红景天、喜马红景天、帕里红景天、菱叶红景天、四裂 红景天、云南红景天、大株红景天、长鞭红景天、唐古特红景天、圣地红景天、小丛红景天、库 页红景天儿茶、虎杖、大黄、密花豆、桂皮、钩藤、金鸡纳皮。
[0024] 步骤2)中大孔吸附树脂柱所选流动相优选为纯水-95%乙醇梯度系统；每个梯度 的洗脱体积为2-4个柱体积。
[0025] 步骤2)中优选的大孔树脂选自弱极性或中性大孔树脂。
[0026] 步骤 2)中更优选的大孔树脂选自 Diaion HP-10、20、30、40、50、DM301、NKA-9、 AB-8、D101、DM130、LSA-10、LSA-20、DM-18、D312。
[0027] 步骤3)中选择硫解试剂为2, 4, 6-三甲基苄硫醇，其结构如下
[0028]
[0029] 本发明第三方面涉及以本发明化合物作为活性成份的药物组合物。该药物组合物 可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体 或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药 物组合物中的含量通常为〇. 1-95重量％。
[0030] 本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道 或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、 阴道、直肠等。
[0031] 给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂（包 括真溶液和胶体溶液）、乳剂（包括ο/w型、w/o型和复乳）、混悬剂、注射剂（包括水针剂、 粉针剂和输液）、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂（包括普通片、肠溶 片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片）、胶囊剂（包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊）、 颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气（粉）雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软 膏剂、凝胶剂、糊剂等。
[0032] 本发明化合物可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种 微粒给药系统。
[0033] 为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀 释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳 糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙 醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶 浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡 波姆、聚