本发明属于医药技术领域，具体涉及一种高纯度普拉曲沙中间体的制备方法。
背景技术：
普拉曲沙(pralatrexate)，商品名folotyn，为首个获fda批准上市的治疗外周t细胞淋巴瘤新型靶向叶酸制剂。普拉曲沙化学名称为10-炔丙基-10-去氮杂氨基蝶呤。由josephi.degraw；jwilliamt.colwell等人在《synthesisandantitumoractivityof10-propargyl-10-deazaaminopterin》j.medicalchem.36:2228-2231(1993)中首先公开。接着sirotanaketal和o’connoretal对它也进行了研究。其分子结构如下所示：
普拉曲沙的合成是以对羧基苯乙酸为起始原料，经过一系列的化学转换得到的。首先要合成中间体4-甲酸甲酯苯乙酸甲酯(plqs-1)，中间体ɑ-炔丙基-(4-甲酸甲酯)-苯乙酸甲酯(plqs-2)，中间体10-炔丙基-10-甲酯基-4-脱氧-4-氨基-10-去氮杂蝶酸甲酯(plqs-3)，中间体10-炔丙基-10-羧基-4-脱氧-4-氨基-10-去氮杂蝶酸(plqs-4)，中间体10-炔丙基-4-脱氧-4-氨基-10-去氮杂蝶酸(plqs-5)，中间体10-炔丙基-10-去氮杂氨基蝶呤二甲酯(plqs-6)，最后得到终产品普拉曲沙。
中间体10-炔丙基-10-甲酯基-4-脱氧-4-氨基-10-去氮杂蝶酸甲酯(plqs-3)因在合成过程中引入6-(溴甲基)-2，4-蝶碇二胺氢溴酸盐(plqs-b)，由于6-(溴甲基)-2，4-蝶碇二胺氢溴酸盐化学性质活泼，导致合成的(plqs-3)纯度相对较低。并且plqs-3水解过程中产生新的杂质，导致plqs-4纯度更低；现有技术得到plqs-3粗品的方法是将反应液倒入纯化水中调节ph至中性，析出固体，过滤得到plqs-3粗品，但该技术得到的plqs-3粗品较为粘稠，不宜过滤；对plqs-3粗品的精制，wo2014016740a2使用一定比例的甲醇、二氯甲烷、异丙醇混合溶剂下滴加氢溴酸，使之成盐精制，但此方法须在低温下成盐，且精制时间较长；因此，提高plqs-3、plqs-4的纯度或者制备得到新的中间体是亟需解决的问题。
技术实现要素：
本发明是在plqs-3制备的基础上，使用析晶溶剂得到plqs-3粗品，使用单一溶剂对粗品加热洗涤，趁热过滤，得到高纯度plqs-3，plqs-3使用适量的无机碱液在一定温度下水解，水解溶液加入过量的盐酸使其成为盐酸盐，其盐酸盐继续使用无水乙醇精制，得到高纯度plqs-4盐酸盐。
发明人通过深入的研究和探索，对plqs-3的析晶溶剂、洗剂溶剂作了进一步研究，同时对plqs-3的水解温度、碱用量、析晶ph值、精制溶剂及溶剂用量作了进一步研究。
具体而言，本发明是通过如下技术方案实现的：
(1)α-炔丙基-(4-甲酸甲酯)-苯乙酸甲酯(plqs-2)与nah作用脱去一个氢，与6-(溴甲基)-2，4-蝶啶二胺氢溴酸盐发生亲电取代反应，反应完毕，将反应液倒入析晶溶剂中，析晶，过滤，得到plqs-3粗品，再将粗品用洗涤溶剂进行加热回流，自然降温，析晶，过滤，干燥，得到咖啡色固体中间体10-炔丙基-10-甲酯基-4-脱氧-4-氨基-10-去氮杂蝶酸甲酯(plqs-3)；
(2)10-炔丙基-10-甲酯基-4-脱氧-4-氨基-10-去氮杂蝶酸甲酯(plqs-3)，在水为溶剂下，滴加氢氧化钠溶液水解，水解完毕，滴加盐酸，调节反应液的ph值为3.0～3.8，过滤得到固体，再将固体溶入精制溶剂，加热溶解回流，趁热过滤，滤液冷却析晶，得到高纯度中间体10-炔丙基-10-羧基-4-脱氧-4-氨基-10-去氮杂蝶酸(plqs-4)的盐酸盐。
所述的析晶溶剂选自甲基叔丁基醚、乙醚、异丙醚中的一种；优选为乙醚。
所述的反应液与析晶溶剂体积比例为1：3～10，ml/ml，优选为1：5。
所述的洗涤溶剂选自无水甲醇、无水乙醇、异丙醇、丙酮中的一种；优选无水甲醇。
所述的plqs-3粗品与洗涤溶剂用量质量体积比为：1：5～15，g/ml，优选为1：10。
所述的plqs-3的水解温度为：0℃～25℃；优选为15℃。
所述的plqs-3与氢氧化钠摩尔比为：1：3～15；优选为1：10。
所述的氢氧化钠溶液摩尔浓度为：0.1～1.5mol/l；优选为1.0mol/l。
所述的析晶ph值优选为3.5。
所述的精制溶剂选自无水甲醇、无水乙醇、异丙醇中的一种；优选为无水乙醇。
所述的plqs-4的盐酸盐与精制溶剂的质量体积比为：1：5～12，g/ml；优选为1：10。
本发明与现有技术相比取得了如下技术效果：
(1)加入析晶溶剂后，固体较快析出，与加入纯化水相比，固体黏度降低，易于抽滤，缩短了后处理时间，提高了工作效率。
(2)利用plqs-3微溶于洗涤溶剂而杂质易溶解的性质，对plqs-3粗品进行加热回流精制，所得固体纯度较高，达到98.5％以上。
(3)将plqs-4加入浓盐酸成盐精制后，所得到固体纯度约96％，继续使用无水乙醇精制重结晶，纯度可达到99％。
具体实施方式
现通过以下实施例来进一步描述本发明的有益效果，这些实施例仅用于例证的目的，不应理解为对本发明的限制，本领域技术人员对本发明所做的显而易见的改进和修饰也在本发明保护范围之内。
实施例1
惰性气体保护下，将400mldmf和32.5gnah加入到1l三口瓶中，内温降至-5～0℃时，开始滴加plqs-2的无水dmf溶液(将50gplqs-2溶解于65ml无水dmf中)，控制滴加速度使内温不高于0℃。滴完后，在0～5℃继续搅拌1h，降温，内温降至-20～-10℃时，开始缓慢滴加600mlplqs-b的无水dmf溶液，控制滴加速度使内温不高于-10℃(约2～3h滴完)。滴完后，继续保温搅拌0.5h，反应完成后，将反应液倒入5l无水乙醚中，有固体析出，继续搅拌0.5h，抽滤，滤饼加入2.0l无水甲醇加热回流2h，自然降至室温，抽滤，固体50℃真空干燥，得到68.3g咖啡色固体，纯度为：98.9％，收率为80％。
实施例2
惰性气体保护下，将400mldmf和32.5gnah加入到1l三口瓶中，内温降至-5～0℃时，开始滴加plqs-2的无水dmf溶液(将50gplqs-2溶解于65ml无水dmf中)，控制滴加速度使内温不高于0℃。滴完后，在0～5℃继续搅拌1h，降温，内温降至-20～-10℃时，开始缓慢滴加600mlplqs-b的无水dmf溶液，控制滴加速度使内温不高于-10℃(约2～3h滴完)。滴完后，继续保温搅拌0.5h，反应完成后，将反应液倒入5l甲基叔丁基醚中，有固体析出，继续搅拌0.5h，抽滤，滤饼加入2.0l无水乙醇加热回流2h，自然降至室温，抽滤，固体50℃真空干燥，得到65.2g咖啡色固体，纯度为：98.5％，收率为76.4％。
实施例3
将65gplqs-3和650ml纯化水加入3l三口瓶中，降温至10℃左右，搅拌状态下滴加1mol/l氢氧化钠水溶液1.55l，滴加完毕继续保温反应24～30h，取样hplc，反应完成后，室温下向反应液中滴加浓盐酸至ph值为3.5，有固体析出，搅拌2h，过滤，滤饼加10倍无水乙醇加热回流1h，滤除不溶物，滤液自然降温搅拌析晶，析出固体时，放冰浴中继续搅拌析晶2h，抽滤，滤饼用50ml无水乙醇洗涤，滤干后放入50℃烘箱干燥至恒重，得棕黄色固体60.65g，纯度为：98.7％，收率84.3％。
实施例4
将65gplqs-3和650ml纯化水加入3l三口瓶中，降温至10℃左右，搅拌状态下滴加1mol/l氢氧化钠水溶液1.55l，滴加完毕继续保温反应24～30h，取样hplc，反应完成后，室温下向反应液中滴加浓盐酸至ph值3.8，有固体析出，搅拌2h，过滤，滤饼加10倍无水乙醇加热回流1h，滤除不溶物，滤液自然降温搅拌析晶，析出固体时，放冰浴中继续搅拌析晶2h，抽滤，滤饼用50ml无水乙醇洗涤，滤干后放入50℃烘箱干燥至恒重，得棕黄色固体57.92g，纯度为：98.2％，收率80.5％。
实施例5
将65gplqs-3和650ml纯化水加入3l三口瓶中，保温30℃左右，搅拌状态下滴加1mol/l氢氧化钠水溶液1.55l，滴加完毕继续保温反应14～20h，取样hplc，反应完成后，室温下向反应液中滴加浓盐酸至ph值为3.5，有固体析出，搅拌2h，过滤，滤饼加5倍无水乙醇加热回流1h，滤除不溶物，滤液自然降温搅拌析晶，析出固体时，放冰浴中继续搅拌析晶2h，抽滤，滤饼用50ml无水乙醇洗涤，滤干后放入50℃烘箱干燥至恒重，得棕黄色固体57.78g，纯度为：98.1％，收率80.3％。
实施例6
将65gplqs-3和650ml纯化水加入3l三口瓶中，降温至10℃左右，搅拌状态下滴加1mol/l氢氧化钠水溶液0.78l，滴加完毕继续保温反应30～40h，取样hplc，反应完成后，室温下向反应液中滴加浓盐酸至ph值为3.5，有固体析出，搅拌2h，过滤，滤饼加10倍无水乙醇加热回流1h，滤除不溶物，滤液自然降温搅拌析晶，析出固体时，放冰浴中继续搅拌析晶2h，抽滤，滤饼用50ml无水乙醇洗涤，滤干后放入50℃烘箱干燥至恒重，得棕黄色固体59.9g，纯度为：98.5％，收率83.3％。
实施例7
将65gplqs-3和650ml纯化水加入3l三口瓶中，降温至10℃左右，搅拌状态下滴加1mol/l氢氧化钠水溶液1.55l，滴加完毕继续保温反应24～30h，取样hplc，反应完成后，室温下向反应液中滴加浓盐酸至ph值3.8，有固体析出，搅拌2h，过滤，滤饼加12倍无水乙醇加热回流1h，滤除不溶物，滤液自然降温搅拌析晶，析出固体时，放冰浴中继续搅拌析晶2h，抽滤，滤饼用50ml无水乙醇洗涤，滤干后放入50℃烘箱干燥至恒重，得棕黄色固体56.33g，纯度为：98.9％，收率78.3％。
实施例8
将65gplqs-3和650ml纯化水加入3l三口瓶中，降温至10℃左右，搅拌状态下滴加1mol/l氢氧化钠水溶液1.55l，滴加完毕继续保温反应24～30h，取样hplc，反应完成后，室温下向反应液中滴加浓盐酸至ph值为3.5，有固体析出，搅拌2h，过滤，滤饼加5倍无水乙醇加热回流1h，滤除不溶物，滤液自然降温搅拌析晶，析出固体时，放冰浴中继续搅拌析晶2h，抽滤，滤饼用50ml无水乙醇洗涤，滤干后放入50℃烘箱干燥至恒重，得棕黄色固体61.5g，纯度为：98.0％，收率85.5％。
实施例9
将65gplqs-3和650ml纯化水加入3l三口瓶中，降温至10℃左右，搅拌状态下滴加1mol/l氢氧化钠水溶液1.55l，滴加完毕继续保温反应24～30h，取样hplc，反应完成后，室温下向反应液中滴加浓盐酸至ph值为3.5，有固体析出，搅拌2h，过滤，滤饼加12倍无水乙醇加热回流1h，滤除不溶物，滤液自然降温搅拌析晶，析出固体时，放冰浴中继续搅拌析晶2h，抽滤，滤饼用50ml无水乙醇洗涤，滤干后放入50℃烘箱干燥至恒重，得棕黄色固体57.9g，纯度为：99.2％，收率80.5％。