一种γ‑谷氨酸转移酶荧光探针及其制备与应用的制作方法

技术特征：

1.一种式(Ⅰ)所示γ-谷氨酸转移酶荧光探针，

其中R₁为H、R₂和R₃同R₁，且R₁、R₂和R₃不同时为H。

2.如权利要求1所述γ-谷氨酸转移酶荧光探针，其特征在于所述荧光探针为下列之一：

3.一种权利要求1所述γ-谷氨酸转移酶荧光探针的制备方法，其特征在于所述方法为：将N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯溶于二氯甲烷中，依次加入1-羟基苯并三唑、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、三乙胺和式(Ⅱ)所示化合物，室温下反应12小时，将反应液分离纯化，获得所述式(Ⅰ)所示γ-谷氨酸转移酶荧光探针；

式(Ⅱ)中R₁为H或-NH₂，R₂和R₃同R₁，且R₁、R₂和R₃不同时为H。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于式(Ⅱ)所示化合物与N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯物质的量之比均为0.25-0.3:1，所述二氯甲烷体积用量以式(Ⅱ)所示化合物物质的量计为35-40mL/mmol；所述1-羟基苯并三唑与N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯物质的量之比为0.6:1，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐与N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯物质的量之比均为0.6:1，三乙胺与N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯物质的量之比均为1:1。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于所述反应液分离纯化方法为：反应结束后，将反应液减压浓缩至无液体流出，获得浓缩液，将浓缩液以体积比15:1的二氯甲烷和甲醇混合液为展开剂进行薄层层析分离，收集Rf值为0.5的目标产物；再将目标产物加入无水二氯甲烷a中，静置澄清后加入三氟乙酸，室温搅拌反应4h，TLC追踪，完全反应后，旋蒸除尽溶剂和三氟乙酸至无液体流出，加无水二氯甲烷b重复旋蒸几次，随后加入甲醇溶解，滴入乙醚中，析出固体，过滤，滤饼烘干，获得式(Ⅰ)所示γ-谷氨酸转移酶荧光探针；所述无水二氯甲烷a体积用量以目标产物质量计为0.16ml/mg，所述三氟乙酸体积用量以目标产物质量计为0.08ml/mg。

6.一种权利要求1所述γ-谷氨酸转移酶荧光探针在检测γ-谷氨酸转移酶中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述γ-谷氨酸转移酶为0～1000U/Lγ-谷氨酸转移酶缓冲溶液。