本发明属于生物细胞分离的技术领域，特别是涉及一种活细胞分离系统及其分离方法。
背景技术：
在生物制药过程中，细胞中的药物成分是以高浓度在相对比例较小、最经济的生物反应器中进行培育的。此时，所使用的灌流系统必须具有细胞截留功能，以便尽可能地截留来自生物反应器内的有用介质。理想的细胞截留系统应该既具有良好的灌流能力，又具有很高的细胞截留能力，细胞截留时还应尽可能地不影响细胞的活性，能够在最短的停留时间内把截留的细胞回输到培养反应器中。
现有的活细胞分离系统通常存在控制系统稳定性不高、细胞培养原液被污染等弊端，且细胞分离的效率低下，降低了细胞药用产物的产出。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种活细胞分离系统及其分离方法，系统稳定性易用控制，降低细胞培养原液被污染的风险，提高细胞的分离效率。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是提供一种活细胞分离系统，包括反应器、中空纤维切向流过滤器、增压器、第一容器、第二容器、第一流体泵和第二流体泵，所述反应器通过增压器与中空纤维切向流过滤器一端的进水口连通，所述中空纤维切向流过滤器另一端的进水口与第一容器连通，所述第一容器与第二容器之间为贯通式结构，第一容器与第二容器之间安装有流体压力推动式隔离膜，所述第一流体泵和第二流体泵通过管道连接到第二容器。
作为本发明一种优选的实施方式，所述中空纤维切向流过滤器的内部通过细胞截留纤维膜形成细胞培养原液流通通道，所述细胞截留纤维膜外侧的腔体设有若干废液排出口。
作为本发明另一种优选的实施方式，所述中空纤维切向流过滤器沿竖直方向设置，所述第一容器位于第二容器的正上方，所述隔离膜沿水平方向设置于第一容器与第二容器之间。
作为本发明另一种优选的实施方式，所述第一流体泵和第二流体泵通过共同的管道与第二容器连通。
本发明解决其技术问题所采用的另一技术方案是提供一种利用上述活细胞分离系统进行活细胞分离的方法，包括以下步骤：
(1)通过第一流体泵对第二容器进行抽液，隔离膜向第二容器压缩，第一容器形成负压，反应器中的细胞培养原液通过中空纤维切向流过滤器进入到第一容器中；
(2)结束抽液，通过第二流体泵对第二容器进行加压，隔离膜向第一容器压缩，第一容器内部的细胞培养原液通过中空纤维切向流过滤器、并在增压器的作用下回流至反应器中；
(3)重复步骤(1)和(2)，使细胞培养原液反复通过中空纤维切向流过滤器进行细胞截留分离。
作为本发明一种优选的实施方式，所述第一流体泵对第二容器进行抽液的时间控制为8～12s，所述第二流体泵对第二容器进行加压的时间控制为2～4s。
作为对上述实施方式的进一步改进，所述第一流体泵对第二容器进行抽液的时间控制为10s，所述第二流体泵对第二容器进行加压的时间控制为3s。
有益效果
在本发明中，通过流体泵来提供系统的动力源，能更加精确控制系统的压力、时间和流量等参数，从而实现系统的稳定性，且易于控制；采用液体对系统进行控制，减少容器内部的隔离膜损伤，降低了细胞培养原液被污染的风险；通过抽液工况与加压工况之间转换存在的时间差，提供一个瞬时过滤内外的瞬时差压，再配合增压器的加压效果，提高了细胞截留分离的效果，从而有利于提高生产效率。
附图说明
图1本发明的系统设备连接结构图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
如图1所示的一种活细胞分离系统，包括反应器、中空纤维切向流过滤器、增压器、第一容器、第二容器、第一流体泵和第二流体泵。
中空纤维切向流过滤器沿竖直方向设置，反应器通过增压器与中空纤维切向流过滤器上端的进水口连通，中空纤维切向流过滤器下端的进水口与第一容器连通。中空纤维切向流过滤器的内部通过细胞截留纤维膜形成细胞培养原液流通通道，细胞培养原液在经过该流通通道的同时进行细胞截流分离，细胞截留纤维膜外侧的腔体设有若干废液排出口，将过滤的废液排出中空纤维切向流过滤器外。
第一容器位于第二容器的正上方，第一容器与第二容器之间为贯通式结构，第一容器与第二容器之间水平安装有流体压力推动式隔离膜。第一流体泵和第二流体泵通过管道连接到第二容器，第一流体泵和第二流体泵通过共同的管道与第二容器连通，减少管道的布设。
下面提供一种利用上述活细胞分离系统进行活细胞分离的方法，包括以下步骤：
(1)抽液工况：启动第一流体泵，通过第一流体泵对第二容器进行抽液，抽液时间控制为8～12s，以设置为10s为宜。隔离膜在第二容器负压的作用下向第二容器压缩，从而使得第一容器形成负压，反应器中的细胞培养原液通过中空纤维切向流过滤器进入到第一容器中，此时增压器打开成常压状态。
(2)加压工况：结束抽液，停止第一流体泵，启动第二流体泵，通过第二流体泵对第二容器进行加压，加压时间控制为2～4s，以设置为3s为宜。隔离膜在第二容器正压的作用下向第一容器压缩，第一容器内部的细胞培养原液通过中空纤维切向流过滤器、并在增压器的作用下回流至反应器中，此时增压器工作，使得中空纤维切向流过滤器到增压器端形成一定的压力。
(3)通过第一流体泵与第二流体泵相互切换工作重复步骤(1)和步骤(2)，使细胞培养原液反复通过中空纤维切向流过滤器，并在管道增压器的增压作用下，实现细胞截流功能从而达到分离的效果。
该系统通过流体泵来提供系统的动力源，能更加精确控制系统的压力、时间和流量等参数，从而实现系统的稳定性，且易于控制。采用液体对系统进行控制，减少容器内部的隔离膜损伤，降低了细胞培养原液被污染的风险。通过抽液工况与加压工况之间转换存在的时间差，提供一个瞬时过滤内外的瞬时差压，再配合增压器的加压效果，提高了细胞截留分离的效果，从而有利于提高生产效率。