本发明属于药物领域，具体地说，涉及一种核黄素磷酸钠化合物及其药物组合物。
背景技术：
：核黄素又名维生素B2，是维持机体正常代谢所必需的一种水溶性维生素，为机体内许多酶系统的重要辅基的组成成分，它与人体内碳水化合物、脂肪、蛋白质、核酸代谢有着密切的关系，参与机体的能量代谢和物质代谢。鉴于核黄素具有广泛而重要的生理功能，世界卫生组织将其列为评价人体生长发育和营养状况的六大指标之一。核黄素磷酸钠为黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)前体药，而FMN和FAD是黄素酶家族的重要辅助因子。黄素酶催化很多生化反应，最典型的为氧化还原反应，它们是细胞呼吸的关键因子。FAD和FMN在线粒体转动链中递氢，在此过程中产生细胞能量。缺乏时可影响机体的生物氧化，使代谢发生障碍，其病变多表现为口、眼、外生殖器部位的炎症。在临床上主要用于由核黄素缺乏引起的口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎及阴囊炎等疾病的治疗。与核黄素相比，核黄素磷酸钠在水中的溶解度大大增加，容易被机体吸收利用，在临床上可被制成复合VB2制剂、滴眼剂和浓度稳定的注射液等，使用上更加方便，应用范围更加广泛。但是核黄素磷酸钠注射液稳定性差，在贮存过程中容易出现澄清度不好、溶液易变浑浊等缺陷。现有技术中通常将核黄素磷酸钠冻干粉装于安瓿或抗菌素瓶或西林瓶，有利于较稳定储存，但核黄素磷酸钠化合物的稳定性仍有待加强。申请号为CN201110110744.5的中国专利公开了一种核黄素磷酸钠晶体化合物，所述的核黄素磷酸钠晶体化合物具有1.5个结晶水，所述核黄素磷酸钠晶体化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射在2θ为6.1°、11.2°、13.4°、14.8°、19.7°、20.8°、23.9°、24.5°、26.9°、27.7°、29.1°、31.0°和31.6°显示有特征峰。申请号为CN201410514866.4的中国专利公开了一种核黄素磷酸钠化合物、核黄素磷酸钠化合物注射液及其制备方法，得到的核黄素磷酸钠化合物晶型结构与以往报道的核黄素磷酸钠相比发生了变化，稳定性有一定的提高。有鉴于此特提出本发明。技术实现要素：本发明要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供一种核黄素磷酸钠化合物及其药物组合物。本发明制备的核黄素磷酸钠化合物晶型结构的稳定性更好，组合物冻干粉针的稳定性好，易于储存运输，制备工艺简便，冻干工艺效果好，且用药治疗效果好。本发明的第一目的在于提供一种稳定性更好的核黄素磷酸钠化合物及其制备方法；本发明的第二目的在于提供一种含有所述的核黄素磷酸钠化合物的组合物，包含所述的核黄素磷酸钠化合物、甘氨酸和海藻糖，例如核黄素磷酸钠冻干粉针；本发明的第三目的在于提供一种所述核黄素磷酸钠冻干粉针的制备方法。为实现本发明的第一目的，本发明采用如下技术方案：一种核黄素磷酸钠化合物，所述核黄素磷酸钠化合物的X射线衍射图谱，在2θ角为7.5°±0.2°，7.7°±0.2°，9.8°±0.2°，12.3°±0.2°，13.1°±0.2°，15.7°±0.2°，16.8°±0.2°，17.9°±0.2°，18.5°±0.2°，20.0°±0.2°，20.8°±0.2°，22.3°±0.2°，23.2°±0.2°，24.1°±0.2°，24.9°±0.2°，27.2°±0.2°，29.5°±0.2°的位置，显示出特征衍射峰。所述的制备方法如下：将核黄素磷酸钠固体溶解在蒸馏水中，加热至55-70℃，搅拌溶解均匀后，将溶液降温至5～20℃；然后调节溶液的pH值至7.5～9.0，加入5～20℃的乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂，边加边搅拌；混合溶剂加完后，降温至0℃～5℃，静置养晶1～8小时；过滤，甲醇溶液洗涤2次，真空干燥3～6小时，得到核黄素磷酸钠晶体。其中，乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂缓慢添加，添加速度为1-3ml/min，搅拌速度为20-40转/min。所述乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂中，乙酸甲酯、无水丙酮、无水环己醇的体积比为1-3：1-5：1-2，所述乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂的用量，以ml/g计为核黄素磷酸钠固体的30-80倍。由于固体类药物存在多晶型现象，同种固体药物，既可以无定型存在，也可以以不同的晶体结构形式的多晶型存在，同一种药物不同的晶型可能在稳定性等方面存在显著的差异。与核黄素相比，核黄素磷酸钠虽然在水中的溶解度大大增加，但核黄素磷酸钠的药物制剂，尤其是注射用核黄素磷酸钠的稳定性差，冻干粉针在贮存过程中存在易氧化，易于吸湿结块，溶解后颜色加深等缺陷。本发明通过改变核黄素磷酸钠的结晶条件，经过大量的试验，制得了一种全新晶型的核黄素磷酸钠，通过各项理化性能研究，结果表明本发明提供的核黄素磷酸钠化合物稳定性好。本发明采用一定配比的乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂作为沉淀剂，配合适宜的控制条件，如温度、pH、沉淀剂添加速度、搅拌速度等，得到了一种新的稳定性更好的核黄素磷酸钠晶体。为实现本发明的第二目的，本发明采用如下技术方案：一种含有所述的核黄素磷酸钠化合物的组合物，所述的组合物包含所述的核黄素磷酸钠化合物、甘氨酸和海藻糖。进一步地，所述核黄素磷酸钠化合物与甘氨酸、海藻糖的重量比为1：3-5：4-9，其中核黄素磷酸钠的量以核黄素计。进一步地，所述的组合物为核黄素磷酸钠冻干粉针。进一步地，所述的核黄素磷酸钠冻干粉针由以下组分经过冷冻干燥制成：更进一步地，所述的核黄素磷酸钠化合物冻干粉针由以下组分经过冷冻干燥：传统的核黄素磷酸钠冻干粉针组分为核黄素磷酸钠、甘露醇、氯化钠以及pH调节剂，本发明增添了甘氨酸和海藻糖。甘氨酸是为人体非必需的一种氨基酸，在分子中同时具有酸性和碱性官能团，在水溶液中为强电解质，在强极性溶剂中溶解度较大，也可作为缓冲剂。海藻糖由两个葡萄糖分子以1,1-糖苷键构成的非还原性糖，并对多种生物活性物质具有非特异性保护作用，同时具有低吸湿性。本发明经大量试验，惊喜地发现按一定的比例添加甘氨酸和海藻糖，不仅提高了核黄素磷酸钠冻干粉针的稳定性，核黄素磷酸钠组合物的用药治疗效果也有所提高。为实现本发明的第三目的，本发明采用如下技术方案：一种核黄素磷酸钠化合物的组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：(1)取处方量的甘氨酸和甘露醇，用全量20％的注射用水溶解，加入氢氧化钠或盐酸调节pH值至5.0-6.5，得到溶液A；(2)取处方量的核黄素磷酸钠、海藻糖和氯化钠，用全量60％的注射用水溶解，加入氢氧化钠或盐酸调节pH值至5.0-6.5，得到溶液B；(3)将溶液A加入溶液B中，搅拌混合，待完全混匀后补注射用水至全量；加入活性炭搅拌，过滤脱炭，取样送检，合格后，用0.2μm的微孔滤膜精滤，灌装于处理好的注射剂瓶中，压半塞，冷冻干燥，压塞，出箱，轧盖，检验和包装。进一步地，所述的冷冻干燥过程如下：(1)将制品温度降至-40℃～-45℃，保持3-4小时；(2)然后冷凝器制冷，抽真空，使制品温度升温至-20℃；(3)继续给制品升温，使制品升温至0℃；(4)继续给制品升温，使制品升温至25℃，并保持3-14小时，停止抽真空，即得核黄素磷酸钠冻干粉针。更进一步地，步骤(2)中，升温速度≤13℃/小时，步骤(3)中，升温速度≤12℃/小时，步骤(4)中升温速度为1～18℃/小时，保温时间优选11-14小时。本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针的制备方法中，将甘氨酸和甘露醇、核黄素磷酸钠和海藻糖分别溶解，再混合，可以提高混合效果，也利于pH调节。冻干工艺中，在预冻到升华过程中，增加中间步骤，先升温至-20℃，再升温至0℃，并且控制升温的速度，有利于控制冻干粉的均匀性。同时冷冻干燥过程时间缩短，节省成本。采用上述技术方案后，本发明与现有技术相比具有以下有益效果：1、本发明制备的核黄素磷酸钠化合物晶型结构的稳定性更好。2、含有本发明核黄素磷酸钠化合物的冻干粉针性质稳定，易于储存运输，制备工艺简便，冻干工艺效果好，并且按照一定比例添加甘氨酸和海藻糖后，冻干粉针吸湿性小，稳定性更好，用药的治疗效果也有所提高。3、核黄素磷酸钠化合物和其组合物的制备方法操作简单，容易控制，冻干粉更均匀，节省成本。下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的描述。附图说明图1是本发明本发明实施例1制备的核黄素磷酸钠化合物的X-射线粉末衍射谱图；具体实施方式为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例核黄素磷酸钠化合物的制备表1核黄素磷酸钠化合物的制备控制条件实施例1核黄素磷酸钠化合物的制备将10g核黄素磷酸钠粗品溶解在500g蒸馏水中，加热至55℃，搅拌溶解均匀后，将溶液降温至15℃；然后调节溶液的pH值至8.0，加入15℃的乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂300ml，其中乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇的体积比为1：3：1，边加边搅拌，添加速度为2ml/min，搅拌速度为20转/min；混合溶剂加完后，降温至0℃，静置养晶3小时；过滤，甲醇溶液洗涤2次，真空干燥6小时，得到核黄素磷酸钠晶体。得到核黄素磷酸钠化合物9.51g，收率95.1％，HPLC纯度99.88％。使用Cu-Kα射线对得到的核黄素磷酸钠晶体在5-50°范围内进行扫描，得到的X射线粉末衍射特征峰2θ角为7.5°±0.2°，7.7°±0.2°，9.8°±0.2°，12.3°±0.2°，13.1°±0.2°，15.7°±0.2°，16.8°±0.2°，17.9°±0.2°，18.5°±0.2°，20.0°±0.2°，20.8°±0.2°，22.3°±0.2°，23.2°±0.2°，24.1°±0.2°，24.9°±0.2°，27.2°±0.2°，29.5°±0.2°。实施例2核黄素磷酸钠化合物的制备将10g核黄素磷酸钠粗品溶解在500g蒸馏水中，加热至60℃，搅拌溶解均匀后，将溶液降温至10℃；然后调节溶液的pH值至7.5，加入10℃的乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂400ml，其中乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇的体积比为2：4：1，边加边搅拌，添加速度为1ml/min，搅拌速度为30转/min；混合溶剂加完后，降温至5℃，静置养晶8小时；过滤，甲醇溶液洗涤2次，真空干燥3小时，得到核黄素磷酸钠晶体。得到核黄素磷酸钠化合物9.68g，收率96.8％，HPLC纯度99.87％。对制得的核黄素磷酸钠化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图谱与实施例1相似。实施例3核黄素磷酸钠化合物的制备将10g核黄素磷酸钠粗品溶解在500g蒸馏水中，加热至70℃，搅拌溶解均匀后，将溶液降温至20℃；然后调节溶液的pH值至9.0，加入20℃的乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂500ml，其中乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇的体积比为3：5：2，边加边搅拌，添加速度为3ml/min，搅拌速度为40转/min；混合溶剂加完后，降温至5℃，静置养晶5小时；过滤，甲醇溶液洗涤2次，真空干燥6小时，得到核黄素磷酸钠晶体。得到核黄素磷酸钠化合物9.45g，收率94.5％，HPLC纯度99.92％。对制得的核黄素磷酸钠化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图谱与实施例1相似。实施例4核黄素磷酸钠化合物的制备将10g核黄素磷酸钠粗品溶解在500g蒸馏水中，加热至60℃，搅拌溶解均匀后，将溶液降温至5℃；然后调节溶液的pH值至7.5，加入5℃的乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂800ml，其中乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇的体积比为1：4：2，边加边搅拌，添加速度为3ml/min，搅拌速度为30转/min；混合溶剂加完后，降温至0℃，静置养晶8小时；过滤，甲醇溶液洗涤2次，真空干燥5小时，得到核黄素磷酸钠晶体。得到核黄素磷酸钠化合物9.55g，收率95.5％，HPLC纯度99.94％。对制得的核黄素磷酸钠化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图谱与实施例1相似。实施例5核黄素磷酸钠化合物的制备将10g核黄素磷酸钠粗品溶解在500g蒸馏水中，加热至55℃，搅拌溶解均匀后，将溶液降温至8℃；然后调节溶液的pH值至8.0，加入8℃的乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇混合溶剂600ml，其中乙酸甲酯-无水丙酮-无水环己醇的体积比为1：2：2，边加边搅拌，添加速度为3ml/min，搅拌速度为20转/min；混合溶剂加完后，降温至5℃，静置养晶1小时；过滤，甲醇溶液洗涤2次，真空干燥6小时，得到核黄素磷酸钠晶体。得到核黄素磷酸钠化合物9.42g，收率94.2％，HPLC纯度99.85％。对制得的核黄素磷酸钠化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图谱与实施例1相似。实施例6-10核黄素磷酸钠冻干粉针的制备表2实施例6-10的处方(1000瓶，各成分单位g)注：其中核黄素磷酸钠的量以核黄素计。制备方法：(1)取处方量的甘氨酸和甘露醇，用全量20％的注射用水溶解，加入1mol/L的氢氧化钠或1mol/L的盐酸调节pH值至5.0-6.5，得到溶液A；(2)取处方量的核黄素磷酸钠、海藻糖和氯化钠，用全量60％的注射用水溶解，加入氢氧化钠或盐酸调节pH值至5.0-6.5，得到溶液B；(3)将溶液A加入溶液B中，搅拌混合，待完全混匀后补注射用水至全量；加入0.05％(W/V)针用活性炭，搅拌吸附15min，过滤脱炭，取样送检，检查pH值、含量、内毒素，合格后，用0.2μm的微孔滤膜精滤，灌装于处理好的注射剂瓶中，压半塞，冷冻干燥，压塞，出箱，轧盖，检验和包装。其中，冷冻干燥过程如下：(1)将制品温度降至-40℃～-45℃，保持3-4小时；(2)然后冷凝器制冷，抽真空，使制品温度升温至-20℃，升温速度≤13℃/小时；(3)继续给制品升温，使制品升温至0℃，升温速度≤12℃/小时；(4)继续给制品升温，使制品升温至25℃，升温速度为1～18℃/小时，并保持3-14小时，停止抽真空，即得核黄素磷酸钠冻干粉针。对比例1-对比例7核黄素磷酸钠冻干粉针中核黄素磷酸钠、甘氨酸和海藻糖的添加比例的考察表3对比例1-对比例7的处方(1000瓶，各成分单位g)注：其中核黄素磷酸钠的量以核黄素计。制备方法同实施例6-10。试验例1核黄素磷酸钠化合物稳定性试验取实施例1～5制备的核黄素磷酸钠化合物样品，在温度40±2℃，相对湿度75％±5％的条件下放置，测定在0个月、1个月、2个月、3个月、6个月的有关物质变化情况。对照样品1：按照CN201110110744.5实施例6的方法制得的核黄素磷酸钠化合物。对照样品2：按照CN201210058163.6实施例1的方法制得的核黄素磷酸钠化合物。对照样品3：按照CN201310362105.7实施例1的方法制得的核黄素磷酸钠化合物。对照样品4：按照CN201410218846.2实施例1的方法制得的核黄素磷酸钠化合物。对照样品5：按照CN201410514866.4实施例5的方法制得的核黄素磷酸钠化合物。表4核黄素磷酸钠化合物稳定性检测结果注：其中核黄素磷酸钠的量以核黄素计。由表4可知，本发明实施例1-5所制备的核黄素磷酸钠化合物，核黄素磷酸钠的含量变化很小，而现有的对照样品1-5储存12个月以后，核黄素磷酸钠的含量下降显著。说明本发明制备的核黄素磷酸钠化合物性质稳定，有更好的稳定性。试验例2核黄素磷酸钠冻干粉针的稳定性试验取实施例6-10制备的核黄素磷酸钠冻干粉针，按市售包装，在温度40℃±2℃，相对湿度75％±5％的条件下放置6个月，分别于1、2、3、6月末取样，检测。对照样品A：按照CN200910130064.2实施例1的方法制得的核黄素磷酸钠冻干粉针。对照样品B：按照CN200910258207.8实施例1的方法制得的核黄素磷酸钠冻干粉针。对照品样C：按照CN201110110744.5实施例6的方法制得的核黄素磷酸钠化合物制成的冻干粉针。对照样品D：对比例1所制备的冻干粉针。表5核黄素磷酸钠冻干粉针稳定性检测结果注：其中核黄素磷酸钠的量以核黄素计。由表5可知，本发明实施例6-实施例10所制备的核黄素磷酸钠冻干粉针，经稳定性试验考察，核黄素磷酸钠含量和有关物质的含量变化不大，其余各项指标也均在规定范围内，液体澄明，未出现可见异物，而对照样品A到对照样品C核黄素磷酸钠含量显著下降，有关物质含量显著增加，并且在6个月时出现了可见异物，不符合规定。对比例1的样品未添加甘氨酸和海藻糖，核黄素磷酸钠含量有所减少，有关物质的含量有所增加，但其余指标也均符合规定。将对比例2-对比例7对比可知，对比例3-6的含量变化较小，有关物质的含量变化也不大，而对比例2和对比例7的核黄素磷酸钠含量有所减少，有关物质的含量有所增加，说明当核黄素磷酸钠、甘氨酸和海藻糖的添加比例在1：3-5：4-9范围内时，可以增加样品稳定性。甘氨酸和海藻糖的添加过少或过多时对稳定性的影响不大。说明本发明制备的核黄素磷酸钠冻干粉针稳定性更好，而添加了一定比例的甘氨酸和海藻糖后，也增加了样品的稳定性。试验例3药效实验3.1试验药品受试制剂：本发明实施例6制得的核黄素磷酸钠冻干粉针，规格：5mg/瓶(以核黄素计)；对比例1制得的核黄素磷酸钠冻干粉针，规格：5mg/瓶(以核黄素计)；参比制剂：市售的核黄素磷酸钠冻干粉针(国药准字H20066158)；庆大霉素注射液。3.2受试者的选择80例男性口腔溃疡患者，年龄(27.59±1.1)岁，体重(67.23±6.14)kg，身高(174.5±5.78)，溃疡均发生在48小时以内，且排除严重的全身系统性疾病。80名受试者随机分为试验组1、试验组2、对照组1和对照组2共四组，每组20人。试验组1服用实施例6制备的受试制剂；试验组2服用对比例1制备的受试制剂；对照组1服用市售的核黄素磷酸钠冻干粉针，对照组2服用庆大霉素注射液。3.3方法4组患者保持口腔清洁，均先给予0.9％的100ml生理盐水漱口。试验组1用棉签取溶解的实施例6制得的核黄素磷酸钠冻干粉针，涂抹于溃疡面，3次/d；试验组2用棉签取溶解的对比例1制得的核黄素磷酸钠冻干粉针，涂抹于溃疡面，3次/d；对照组1用棉签取溶解的市售的核黄素磷酸钠冻干粉针，涂抹于溃疡面，3次/d；对照组2用棉签取庆大霉素注射液，涂抹于溃疡面，3次/d。3.4评价指标以及统计学分析显效：治疗后患者疼痛减轻或消除，口腔溃疡面愈合较好，未见复发；有效：治疗后患者疼痛减轻，口腔溃疡面稍有愈合；无效：治疗后口腔溃疡面未愈合，或出现复发。采用SPSS软件进行统计学处理，以P＜0.05为差异有统计学意义。3.5试验结果表64组患者治疗效果比较组别显效有效无效合计试验组1145120试验组2117220对照组188420对照组257820注：P＜0.05从表6可以看出，相对于对照组，试验组1和试验组2的治疗效果显著增强；而试验组1在添加了甘氨酸和海藻糖后，比未添加的试验组2的治疗效果也有所增强。说明本发明的核黄素磷酸钠冻干粉针中添加了甘氨酸和海藻糖，两者与核黄素磷酸钠协同作用，不仅增加了稳定性，也提高了用药的治疗效果。以上所述仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专利的技术人员在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述提示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明方案的范围内。当前第1页1 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