本发明属于药物化学领域，涉及一种恩替卡韦中间体的制备方法。
背景技术：
恩替卡韦，其化学名称为2-氨基-9-[(1s,3s,4s)-4-羟基-3-羟甲基-2-亚甲戊基]-1,9-氢-6-H-嘌呤-6-酮-水合物，是一种有效的，选择性抑制乙型肝炎病毒复制的脱氧鸟嘌呤核苷类似物，由Bristol-MyersSquibb公司研究开发，用于治疗乙型肝炎。体外试验表明，恩替卡韦比其他核苷类似物更有效。动物模型和人体临床研究结果显示，恩替卡韦具有极强的抑制乙型肝炎病毒复制，降低血清病毒DNA水平的作用，对耐拉米夫定的突变病毒株仍然有效，且未见明显的不良反应和线粒体毒性。大量临床试验表明，它对肝细胞内逆转录酶和乙型肝炎病毒DNA多聚酶有直接的抑制作用，有强的抗病毒能力，同时该化合物的选择性比较高，它的细胞毒性是抗乙肝病毒活性的1/8000，可有效治疗慢性乙肝而不干扰流感病毒和HIV病毒。而且由于其作用机制不同，长期使用产生的耐药性低。
全世界有3.5亿～4亿乙型肝炎病毒感染者，其中每年有近100万患者死于HBV感染引起的肝硬化和肝癌。我国约有1.2亿HBV感染者，占世界总数的1/3，居世界第一位，慢性乙型肝炎患者3000万例，而且这一数字目前正呈上升趋势。慢性的乙肝病毒感染到现在为止还没有能够完全治愈的方法，患者需要长期或者大多数情况下需要终生进行病毒抑制。临床指引建议治疗疗程最少为一年。米钱乙肝的治疗药物中核苷类药物的市场占有率超过80％。在核苷类药物中，恩替卡韦凭借其显著的疗效和良好的抗耐药性，自2007年以来，已替代拉米夫定成为一线的抗乙肝病毒药物。恩替卡韦由美国百时美施贵宝公司研制，美国FDA于2005年3月29日批准上市。于2005年11月15日获得国家食品药品监督管理总局SFDA批准在中国上市。该药物专利已经于2008年到期，但是因为其合成难度巨大，其活性成分(API)目前市场价格高昂，生产厂家不多。
恩替卡韦作为碳环核苷酸类似物，其合成方法非常复杂。现有技术中，关于恩替卡韦或者中间体的报道很多，例如CN103739603A、CN105524064A、CN1861602A、CN101805339A、CN101830856A、CN101838207A、CN101838270A、CN102225938A、CN102863444B、CN105037363B、EP2433941A1、SG171963A1、TW201118097A、US2006106216A1、WO2011102806A1、WO2011150513A1、等等。
现有技术中的关于环外烯手性五元环中间体合成方法还存在着较多的问题，主要体现在收率低、后处理难度大以及条件苛刻等，不适合大规模工业化生产。CN103739603A、CN105037363B等公开了一种恩替卡韦及其中间体的制备方法，主要采用以下路线进行。其中，CN103739603A采用Nysted试剂进行，反应条件苛刻，Nysted试剂稳定性极差，收率只有60％左右。而CN105037363B公开使用Wittg反应进行，反应条件也很苛刻，收率与上述方法相当，但是产物中大量产生三苯基膦，后处理工作量大，产品纯化困难。
CN105524064A公开了一种恩替卡韦中间体的合成方法，该方法特别是环戊烷关环步骤，设计新颖，为合成恩替卡韦以及环戊烷中间体提供了新的思路，然而在形成环戊烷时并没有选择性而得到消旋体产物，使得反应还需要额外的步骤才能得到产物，使得目标产物收率偏低。具体合成路线如下：
由于现有的制备恩替卡韦的方法还存在上述诸多问题，以及恩替卡韦作为抗病毒药物的诸多优点，本领域期待更好的恩替卡韦生产方法。
技术实现要素：
本发明目的在于克服现有的恩替卡韦中间体(式I所示的化合物)产物收率低、后处理困难等缺陷，提供一种反应收率高且后处理方便更适合工业化生产的恩替卡韦中间体的制备方法。
为了实现上述目的，本发明提供一种恩替卡韦中间体的制备方法，该中间体的如式I所示，
制备方法包括以下步骤：
1)式V所示的化合物在吡啶存在下与三甲基氯硅烷反应得到式IV所示的化合物；
2)将式IV所示的化合物与1,2-乙二硫醇反应在三氟化硼乙醚络合物存在下反应得到式III所示的化合物；
3)将式III所示的化合物与(三甲基硅基)甲基氯化镁在氯化亚铜催化下反应，反应结束氯化铵处理反应液得到式II所示的化合物；
4)式II所示的化合物在醇钠的醇溶液中搅拌反应得到如式I所示的恩替卡韦中间体；
在本发明中，采用三甲基硅基保护羟基是为了与其他羟基保护相区别，以在后续的脱除中可以取得选择性脱除的目的，该方法并没有特别的限定。优选情况下，步骤1)中，式V所示的化合物与吡啶、三甲基氯硅烷的用量的摩尔比为1：2～5：2～3，反应溶剂为乙醚、四氢呋喃或二氯甲烷等。为了保证反应的顺利进行，溶剂最好为无水处理的新蒸溶剂。所述无水处理方法可以参照本领域常规的方法进行。
在本发明中，优选地，步骤2)的反应过程包括：将式IV所示的化合物与1,2-乙二硫醇以及三氟化硼乙醚络合物加入到反应容器中，二氯甲烷中室温反应1～2小时，反应结束，饱和碳酸氢钠洗涤反应液，二氯甲烷萃取，水洗、无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到式III所示的化合物。
在步骤2)中，式IV所示的化合物与1,2-乙二硫醇、三氟化硼乙醚络合物的用量摩尔比可以为1：1.2～1.5：0.3～0.6。
在本发明中，步骤3)反应最好在无水无氧条件下进行。优选地，步骤3)的反应过程包括：在氮气保护下，将式III所示的化合物和氯化亚铜加入无水四氢呋喃中，冷却至-10～0℃，然后滴入(三甲基硅基)甲基氯化镁搅拌反应，滴毕，升温至40～50℃继续反应，反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，水洗无水硫酸钠干燥，硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到式II所示的化合物。
为了使得反应更加充分，优选地，式III所示的化合物、三甲基硅基)甲基氯化镁、氯化亚铜的用量摩尔比为1：1.1～1.3：0.05～0.15。
优选地，步骤4)的反应过程包括：将式II所示的化合物和甲醇钠加入到甲醇中，降温至0℃搅拌反应，反应结束，倾入水中，乙酸乙酯萃取，水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到式I所示的恩替卡韦中间体。低温下反应是为了防止其他羟基保护基(TBS)脱落，需要重复保护，否则中间体反应位点增多，后续反应杂乱，加大了反应的难度。
本发明的各步反应可以根据本领域常规的手段进行反应后处理，例如洗涤、过滤、结晶等。每步骤的过程中可以根据常用手段进行监控，例如LCMS、GCMS、TLC等。在没有其他特殊说明情况下，在本发明中所使用的室温是指23±2℃。
本发明提供的恩替卡韦中间体的制备方法路线可以如下：
本发明提供的恩替卡韦中间体的制备方法，尽管看起来反应步骤增长，但是反应收率却有效提高，每步反应均在90％以上，后处理简单，反应时间短。并且步骤1)和步骤2)可以产物并不需要特别的纯化直接用于后续反应，可以采用一锅煮的方法进行，步骤3)和步骤4)同样可以连续生产的方法进行。本发明的方法为制备例如恩替卡韦中间体(式I所示的化合物及其类似物)提供了新的途径，克服了现有的方法例如wittg反应收率低以及后处理难度大的缺陷，特别适合工业化扩大化生产。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，例如简单改变羟基保护基团等，这些都属于本发明的保护范围。
实施例1
式IV所示的化合物的制备
将式V所示的化合物187.3g(0.5mol)、吡啶94.9g(1.2mol)、三甲基氯硅烷120g(1.1mol)以及500ml无水THF加入到1000ml烧瓶中，室温搅拌反应4小时，监测至反应结束，加入氯化铵饱和溶液400ml，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，快速柱层析得到式E所示的化合物218g，收率97.7％。
实施例2
式III所示的化合物的制备
将式IV所示的化合物44.6g(100mmol)与1,2-乙二硫醇11.3g(120mmol)以及三氟化硼乙醚络合物7.1g(50mmol)加入到反应容器中，二氯甲烷中室温反应2小时，反应结束，饱和碳酸氢钠洗涤反应液，二氯甲烷萃取，水洗、无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到式III所示的化合物51.6g，收率98.7％。
实施例3
式III所示的化合物的制备
将式IV所示的化合物44.6g(100mmol)与1,2-乙二硫醇13.2g(140mmol)以及三氟化硼乙醚络合物4.3g(30mmol)加入到反应容器中，二氯甲烷中室温反应1小时，反应结束，饱和碳酸氢钠洗涤反应液，二氯甲烷萃取，水洗、无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到式III所示的化合物51.8g，收率99.0％。
实施例4
式III所示的化合物的制备
将式IV所示的化合物44.6g(100mmol)与1,2-乙二硫醇14.1g(150mmol)以及三氟化硼乙醚络合物5.7g(40mmol)加入到反应容器中，二氯甲烷中室温反应2小时，反应结束，饱和碳酸氢钠洗涤反应液，二氯甲烷萃取，水洗、无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到式III所示的化合物51.1g，收率97.6％。
实施例5
式II所示的化合物的制备
在氮气保护下，将式III所示的化合物52.3g(100mmol)和氯化亚铜0.5g(5mmol)加入无水四氢呋喃中，冷却至-10℃，然后滴入(三甲基硅基)甲基氯化镁17.6g(120mmol)搅拌反应，滴毕，升温至40℃继续反应，反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，水洗无水硫酸钠干燥，硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到式II所示的化合物41.1g，收率92.4％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.53(brs,1H),5.15(s,1H)4.37-4.31(m,2H),3.52(d,1H),3.25(m,1H),2.77-2.73(m,1H),2.21-1.97(m,1H),1.85(d,1H),0.96(s,9H),0.93(s,9H),0.14(s,9H),0.10(m,12H).
实施例6
式II所示的化合物的制备
在氮气保护下，将式III所示的化合物52.3g(100mmol)和氯化亚铜0.5g(5mmol)加入无水四氢呋喃中，冷却至-15℃，然后滴入(三甲基硅基)甲基氯化镁16.2g(110mmol)搅拌反应，滴毕，升温至50℃继续反应，反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，水洗无水硫酸钠干燥，硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到式II所示的化合物41.4g，收率93.1％。
实施例7
式II所示的化合物的制备
在氮气保护下，将式III所示的化合物52.3g(100mmol)和氯化亚铜1.5g(15mol)加入无水四氢呋喃中，冷却至0℃，然后滴入(三甲基硅基)甲基氯化镁19.1g(130mmol)搅拌反应，滴毕，升温至40℃继续反应，反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，水洗无水硫酸钠干燥，硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到式II所示的化合物40.5g，收率91.1％。
实施例8
式II所示的化合物的制备
在氮气保护下，将式III所示的化合物52.3g(100mmol)和氯化亚铜4.9g(50mmol)加入无水四氢呋喃中，冷却至-10℃，然后滴入(三甲基硅基)甲基氯化镁17.6g(120mmol)搅拌反应，滴毕，升温至50℃继续反应，反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，水洗无水硫酸钠干燥，硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到式II所示的化合物41g，收率92.2％。
实施例9
式II所示的化合物的制备
在氮气保护下，将式III所示的化合物52.3g(100mmol)和氯化亚铜0.2g(2mmol)加入无水四氢呋喃中，冷却至-10℃，然后滴入(三甲基硅基)甲基氯化镁17.6g(120mmol)搅拌反应，滴毕，升温至45℃继续反应，反应结束，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，水洗无水硫酸钠干燥，硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到式II所示的化合物37.5g，收率84.2％。
对比例
如实施例5中的式II所示的化合物的制备，所不同的是，不加入氯化亚铜，最后得到式II所示的化合物23.8g，收率53.4％。
实施例10
恩替卡韦中间体的制备
在250ml烧瓶中，加入式II所示的化合物44.5g(100mmol)、甲醇钠10.8g(200mmol)、100ml甲醇，然后降温至0℃中搅拌反应4小时，监测到反应结束，反应液浓缩，倒入水中，然后乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相水洗三次，并用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，快速柱层析得到式I所示的恩替卡韦中间体34.6g，收率92.8％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.45(brs,1H),5.14(s,1H),5.10(s,1H),4.38-4.31(m,2H),3.54(d,1H),3.28(m,1H),2.79-2.75(m,1H),2.2-1.95(m,1H),1.83(d,1H),0.97(s,9H),0.96(s,9H),0.12(m,12H)。