1.一种人子宫内膜癌细胞系,其特征在于,所述的人子宫内膜癌细胞系保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC NO.12290。
2.如权利要求1所述的人子宫内膜癌细胞系,其特征在于,所述的人子宫内膜癌细胞为分化腺癌。
3.如权利要求1所述的人子宫内膜癌细胞系的生物学特性,其特征在于,具有稳定的细胞生物学特性,高表达HER-2基因编码蛋白,且在哺乳动物体内有能够形成肿瘤。
4.如权利要求3所述的人子宫内膜癌细胞系的生物学特性,其特征在于,所述的哺乳动物为BALB/C-nu/nu裸小鼠。
5.如权利要求1所述的人子宫内膜癌细胞系的用途,其特征在于,可以应用于细胞生物学、分子生物学、抗肿瘤药物筛选的研究。
6.如权利要求1-5所述的人子宫内膜癌细胞系的建立方法,其特征在于,所述的方法包括以下步骤:(A)获取新鲜的临床子宫内膜癌手术切除标本,采用II胶原酶消化法进行细胞分离原代培养;(B)当细胞汇合度达90%左右时,进行细胞传代培养,完成hEMC20121018的建系。
7.如权利要求6所述的人子宫内膜癌细胞系的建立方法,其特征在于,所述步骤A中的原代培养为:将新鲜离体组织浸润于RPMI-1640培养液;用PBS液冲洗组织标本,修剪组织,去除坏死组织,再用PBS液大量冲洗组织后,反复剪切组织至糊状,加入浓度为1mg/ml的胶原酶II型;置于含5%CO2,37℃的培养箱中进行消化1h,用移液器吹打消化中的组织;加入等量的含10%胎牛血清的混合培养基进行中和,静置培养数分钟;收集上层消化液进行离心,弃上清液,用混合培养液悬浮细胞团后,接种于培养瓶中,置于5%CO2,37℃的培养箱中静置培养;换液时,吸出旧培养基,用PH为7.4的PBS清洗培养瓶,加入含10%胎牛血清的培养基,置于5%CO2,37℃培养箱中静置培养。
8.如权利要求6所述的人子宫内膜癌细胞系的建立方法,其特征在于,所述步骤B中的原代培养具体方法为:吸弃进行原代培养的培养瓶中的培养液,用含双抗的PH为7.4的PBS清洗培养瓶;加入含EDTA的消化液,使细胞消化液100%覆盖细胞培养瓶底;置于5%CO2,37℃培养箱中,静置培养数分钟;加入等量培养基进行中和,吹打培养瓶,吸出细胞悬浮液,离心;弃上清液,加入细胞培养液,重悬细胞,加入细胞培养液,重悬细胞,将细胞悬液加入新的培养瓶,置于5%CO2,37℃培养箱中,静置培养,当细胞传代至第十代以后,将培养液更换为RPMI1640培养液,得到所述的子宫内膜癌细胞系hEMC20121018。
9.如权利要求6所述的人子宫内膜癌细胞系的建立方法,其特征在于,所述的细胞培养液为RPMI1640与DMEM/F12按1:1比例混合。
10.如权利要求6所述的人子宫内膜癌细胞系的建立方法,其特征在于,所述的PBS液的原料组成及用量为含100U青霉素和100ug链霉素的双抗、NaCl 8.5g、KCl 0.2g、Na2HPO42.85g、KH2PO4 0.27g,1000ml蒸馏水,PH7.4;所述的混合培养基为RPMI-1640培养液和DMEM/F12培养液按1:1比例混合,含10%胎牛血清。