本发明属于微生物技术领域，涉及一种微生物复合菌剂及其制备方法与应用。
背景技术：
现有的农业种植土壤已经大部分被过量使用化肥农药所污染，严重危害了蔬菜、粮食的种植食品安全。中国拥有50000多条流域面积在100平方公里以上的河流，绝大多数已经遭受到程度不同的水污染侵害，包括长江在内的七大水系无一幸免，而河水是主要的饮用水源，污染物通过饮水可直接毒害人体，也可通过食物链和灌溉农田间接危及人身健康。此外，养殖业有机肥、污泥、人畜粪便的处理压力也非常大。针对以上问题，人们采取了多种措施，有些用微生物方法进行处理，但是效果有待提高。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种微生物复合菌剂及其制备方法与应用。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明首先提供一种微生物复合菌剂，包括：芽孢杆菌、沙雷氏菌、硫化细菌及酵母菌。
可选地，所述微生物复合菌剂中，芽孢杆菌、沙雷氏菌、硫化细菌及酵母菌的质量比例为(1-10)：(1-10)：(1-10)：(1-20)。
可选地，所述微生物复合菌剂为液体菌剂。
可选地，所述液体菌剂的pH值范围是3-5。
可选地，所述液体菌剂中，细菌计数不少于1×105cuf/g。
可选地，所述微生物复合菌剂为粉剂。
可选地，所述粉剂中包含乳糖。
本发明还提供所述微生物复合菌剂的一种制备方法，包括如下步骤：将芽孢杆菌、酵母菌、沙雷氏菌、硫化细菌加入同一液体培养基进行混合培养，得到所述微生物复合菌剂的液体菌剂。
可选地，所述液体培养基包括水、蛋白胨、糖蜜及尿素，混合培养温度范围是30-40℃。
可选地，进一步将所述液体菌剂冷冻干燥，得到所述微生物复合菌剂的粉剂。
可选地，被冷冻干燥的液体菌剂中添加有乳糖。
本发明还提供所述微生物复合菌剂的另一种制备方法，包括如下步骤：将芽孢杆菌、酵母菌、沙雷氏菌、硫化细菌分别培养，得到各菌的液体发酵液，并取各菌的液体发酵液按比例混合，得到所述微生物复合菌剂的液体菌剂。
可选地，进一步将所述液体菌剂冷冻干燥，得到所述微生物复合菌剂的粉剂。
本发明还提供所述微生物复合菌剂用于污水处理剂、农业种植土壤改良剂、养殖业有机肥处理剂、污泥处理剂、人畜粪便处理剂或动物饲料改良剂的用途。
如上所述，本发明的微生物复合菌剂及其制备方法与应用，具有以下有益效果：制备与使用方法简单易操作，可广泛应用于污水的处理，农业种植土壤污染治理与修复改良，恢复被污染土壤的生长力，对盐碱地改良、养殖业有机肥的发酵除臭，和多种有机物有降解作用，对厕所和化粪池的降解与除臭效果显著，对畜牧业，家禽的饲料进行少量添加后，可预防动物的肠道疾病，增加动物的免疫力，效果显著。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
实施例1微生物复合菌剂的制备
制备步骤；
1、将芽胞杆菌、酵母菌、沙雷氏菌、硫化细菌的粉剂放置入灭过菌的发酵罐净化水中。
2、将蛋白胨，糖蜜，尿素等培养基和营养剂投放入发酵罐，并进行搅拌。本实施例中，各种材料的质量配比为：灭菌水885份、蛋白胨50份、糖蜜50份、尿素5份、芽胞杆菌2份、酵母菌4份、杀雷氏菌2份、硫化细菌2份。搅拌时间为2-3分钟。
3、将发酵罐自动加温至35-38℃，25小时后，PH值达4，按照国家标准GB、T4789、2-2008检测细菌计数。
本实施例中，沙门氏菌和志贺氏菌不得检出，细菌计数约为1×106cuf/g。
培养得到的微生物复合菌剂不具有毒性及环境污染。
实施例2微生物复合菌剂的制备
制备步骤：
1、各菌的发酵培养
培养基：LB
培养条件：在35-37℃下摇瓶培养至菌浓度约为108～1011个/ml。
分别将芽孢杆菌、沙雷氏菌、硫化细菌、酵母菌的斜面种接种入LB液体培养基，各菌分别培养。
2、复合菌剂的配置：取各菌的液体发酵液按下表重量比例混合制得复合菌剂：
表1
复合菌剂配制完成后4℃保存。
实施例3微生物复合菌剂的制备
为了提高微生物复合菌剂的保存期限，将实施例1或实施例2制得的液体菌剂冷冻干燥，得到所述微生物复合菌剂的粉剂，使得微生物复合菌剂保质期得到延长，例如保质期可以达到2年时间。
本实施例中，在冷冻干燥前，在液体菌剂中添加乳糖作为保护剂，可以提高各菌的存活率。
实施例4农业种植土壤污染修复治理处理
处理对象：种植贫瘠钙化土壤修复治理
处理步骤：
1)包括下列步骤：
a.将蔬菜大棚内一亩修复治理的贫瘠而钙化的污染土壤上平均施入动、植物有机肥一吨。
b.投入本发明的微生物复合菌剂粉剂5公斤(成本约10元人民币)。
c.用大棚小型拖拉机旋转爬犁将有机复合肥和微生物菌剂、被修复治理的土壤，均匀打碎混合。
d.再经滴灌软管将水施入土壤，时间约5分钟；
e.将大棚密闭五天。
二、5天后土壤抽样检测方法
1、菌落总数测定方法：依据为“中华人民共和国国家标准GB/T 4789.2-2008”发布的检测标准。
2、在大棚内不同地点采样土壤样品。
3、微生物总数量测试：各预处理样品液用无菌生理盐水梯度稀释菌液至10-6倍，分别取10-5、10-6倍稀释液0.1mL滴入无菌营养琼脂平板上，用无菌涂布棒涂布均匀，菌落计数法测定土壤中的细菌数量。
三、试验材料
1、营养琼脂培养基(NA)
牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，琼脂粉20g/L，pH7.0～7.2，0.1Mpa，灭菌30min。
2、稀释液
NaCl 8.5g/L，pH7.0～7.2，0.1MPa，灭菌30min。
三、测试结果
样品名称：栽培土壤
样品：分8份不同地点采集样品
样品包装：塑料袋简易装(湿样)
检验目的：微生物总数量
样品来源：大棚土壤
检测所依据：“中华人民共和国国家标准GB/T 4789.2-2008”发布的检测标准。
菌落总数检测结果：B1-8对照组为5.2×107cfu/ml；B1-8施菌组为2.05×108cfu/ml
检测结论：施菌样品(B1-8施菌)菌落总数都高出未施菌样品10倍以上，菌落形态类型也大大丰于未施菌土样，反映出施加微生物样品含有更多平衡土壤pH酸碱值，改善土壤结构，营造优势有益菌群，保持土壤活力。有益微生物菌调节植物根系生态环境，形成优势菌落，防止土传病虫害。解除化肥、农药及有害因子对土壤和植物的影响和破坏，修复已贫瘠化和钙化的土壤，使土壤重现种植活力，降解和转化土壤中的有毒有害物质，提高农作物的产量与质量，保障食用植物的安全性，此数据说明本发明的复合菌剂改良对修复农业种植土壤污染的能力十分优良。
实施例5对动物粪便的除臭和降解处理
1、实验材料：
鸡粪和猪粪的混合材料共10Kg
氨氮的测定(气相分子吸收光谱法)HJT 195-2005
本发明的复合菌剂粉剂200g
2、实验
2.1、第一天上午将10Kg猪和鸡的混合粪投入一带有搅拌的反应容器中，投入复合菌剂200g，通入空气，流量控制在每小时1.2升，搅拌下加热保温，温度控制在35～39℃。将整体的反应容器称量为22.5Kg。
第二天上午9：00分，关上电源，称量为16.5Kg，减量6Kg，直接用手掌向鼻子方向招闻，已经嗅觉不出动物粪便的臭味，氨氮的去除率达到99.32％，说明本发明的复合菌剂降解动物粪便和除臭的能力十分优良。
实施例6动物饲料的改良
在鸡饲料中添加本发明的微生物复合菌剂，食用20天后，与食用未添加本发明的微生物复合菌剂的鸡群相比，鸡发病率显著降低。说明本发明的微生物复合菌作为饲料改良剂，有助于预防动物的肠道疾病，增加动物的免疫力
实施例7污水处理
将本发明的微生物复合菌剂投入污水中，并通过曝气泵往污水中曝气，持续曝气24小时以上，检测结果显示，污水中的氨氮浓度明显下降。本实施例中，既可以直接将微生物复合菌剂的粉剂投入污水中，也可以首先将微生物复合菌剂的粉剂与液体培养基混合，扩培得到液体复合菌剂，再将液体复合菌剂投入污水中。例如20g左右的粉剂可以扩培得到半吨液体复合菌剂，可以有效降低使用成本
综上所述，本发明的微生物复合菌剂的制备方法简单易操作，使用方法简单，可广泛应用于污水的处理，农业种植土壤污染治理与修复改良，恢复被污染土壤的生长力，对盐碱地改良、养殖业有机肥的发酵除臭，和多种有机物有降解作用，对厕所和化粪池的降解与除臭效果显著，对畜牧业，家禽的饲料进行少量添加后，可预防动物的肠道疾病，增加动物的免疫力，效果显著。所以，本发明有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。