玉米母本单倍体主效诱导基因及应用的制作方法

文档序号:12056450阅读:来源:国知局

技术特征:

1.ZmPLA突变基因,其核苷酸序列为将野生ZmPLA基因核苷酸序列上进行插入或/和缺失或/和替换突变,得到序列;

所述野生ZmPLA基因核苷酸序列为序列1。

2.根据权利要求1所述的ZmPLA突变基因,其特征在于:

所述ZmPLA突变基因的核苷酸序列为如下1)-4)中任一种:

1)为野生ZmPLA基因核苷酸序列第280位和281位之间插入T碱基,其他碱基不变,得到的序列;

2)为野生ZmPLA基因核苷酸序列第271位-281位碱基缺失,其他碱基不变,得到的序列;

3)为野生ZmPLA基因核苷酸序列第281位碱基G缺失,其他碱基不变,得到的序列;

4)为野生ZmPLA基因核苷酸序列第1569位后插入CGAG,且第409位的C突变为T、第421位的C突变为G,第441位的T突变为C,第887位的T突变为G,第1210位的G突变为C,第1306位的T突变为C,第1435位的G突变为A,第1471位的C突变为A,第1541位的A突变为C,第1588位的T突变为C,第1591位的C突变为A,得到的序列所示的DNA分子。第1687位碱基A突变为C,第1691位碱基G突变为A,第1706位碱基T突变为C,第1708位碱基G突变为C,第45-46碱基位缺失两个碱基TA,第65-67为碱基由TCG替换为CAA,第67-68碱基位之间插入两个碱基TC,第80-81位碱基由TT替换为CG,499-503位碱基GTAC缺失,524位碱基C突变为G,530位碱基G突变为T,553-560位碱基GCATGCAT缺失,第806-809位碱基GTAC缺失,第1741位碱基G突变为A,第1781位碱基C突变为T,第1787位碱基A突变为T,其他碱基不变,得到的序列。

3.权利要求1或2所述的突变基因或所述野生ZmPLA基因核苷酸序列在诱导产生植物单倍体或在双单倍体系育种中的应用。

4.沉默或抑制目的植物基因组中ZmPLA基因的表达或敲除ZmPLA基因在生产植物单倍体中的应用;

或,沉默或抑制目的植物基因组中ZmPLA基因的表达或敲除ZmPLA基因的物质在生产植物母本单倍体中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:

所述沉默或抑制目的植物基因组中ZmPLA基因的表达或敲除ZmPLA基因为使目的植物基因组中ZmPLA基因表达量降低或发生缺失或插入突变。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:

所述使目的植物基因组中ZmPLA基因发生缺失或插入突变为所述使目的植物基因组中ZmPLA基因第一外显子和/或第二外显子和/或第三外显子和/或第四外显子发生缺失或插入突变;

或所述使目的植物基因组中ZmPLA基因发生缺失或插入突变的方式为CRISPER/Cas9和/或TELLEN技术和/或T-DNA插入和/或EMS诱变。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:

所述使目的植物基因组中ZmPLA基因第一外显子发生缺失或插入突变的方式为CRISPER/Cas9;

或所述沉默或抑制目的植物基因组中ZmPLA基因的表达或敲除ZmPLA基因的物质为使目的植物基因组中ZmPLA基因第一外显子发生缺失或插入突变的物质;

所述使目的植物基因组中ZmPLA基因第一外显子发生缺失或插入突变的物质为CRISPER/Cas9系统;

所述CRISPER/Cas9系统的靶序列为序列3所示的第1外显子中第264-276位碱基;

所述CRISPER/Cas9系统的sgRNA序列为序列4。

8.沉默或抑制目的植物基因组中ZmPLA基因的表达或敲除ZmPLA基因在双单倍体系选育或基于DH系的杂交种选育中的应用;

或沉默或抑制目的植物基因组中ZmPLA基因的表达或敲除ZmPLA基因的物质在双单倍体系选育或基于DH系的杂交种选育中的应用。

9.沉默或抑制目的植物基因组中ZmPLA基因的表达或敲除ZmPLA基因的物质,包括CRISPER/Cas9系统,所述CRISPER/Cas9系统的靶序列为序列3所示的第1外显子中第264-286位碱基;所述CRISPER/Cas9系统的sgRNA序列为序列4。

10.根据权利要求3-8任一所述的应用或权利要求9所述的物质,其特征在于:所述植物为玉米或其他植物。

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