本申请是2014年8月7日提交到中华人民共和国国家知识产权局的发明名称为“金属酶抑制剂化合物”、申请号为“201280069217.7”的发明专利申请的分案申请。
背景技术：
活的有机体已经形成了特异性地输入金属、将其运输至细胞内储存位点并最终将其运输至使用位点的紧密调节过程。金属比如锌和铁在生物体系内最重要的功能之一是实现金属酶的活性。金属酶是将金属离子结合至酶活性位点并利用金属作为催化过程一部分的酶。所有得到表征的酶中三分之一以上是金属酶。
金属酶的功能高度依赖于酶的活性位点中金属离子的存在。人们公认，与活性位点金属离子结合并使其失活的试剂大大降低了酶的活性。大自然采用此相同的策略在不需要酶活性的时期降低某些金属酶的活性。例如，蛋白质timp(金属蛋白酶的组织抑制剂)在多种基质金属蛋白酶的活性位点中与锌离子结合，从而抑制酶活性。制药工业在治疗剂的设计中已经使用相同的策略。例如，唑类抗真菌剂氟康唑(fluconazole)和伏立康唑(voriconazole)含有1-(1,2,4-三唑)基团，其与目标酶羊毛甾醇脱甲基酶的活性位点中存在的血红素铁结合，从而使该酶失活。另一个实例包括结合锌的氧肟酸基团，其已被引入到大多数已公开的基质金属蛋白酶和组蛋白脱乙酰酶的抑制剂中。另一个实例是结合锌的羧酸基团，其已被引入到大多数已公开的血管紧张素转化酶抑制剂中。
在临床上安全且有效的金属酶抑制剂的设计中，对于特定的靶标和临床适应症使用最合适的金属结合基团是至关重要的。如果使用结合弱的金属结合基团，效力可能未达最佳。另一方面，如果使用结合非常紧密的金属结合基团，对目标酶的选择性相对于相关金属酶可能未达最佳。缺乏最佳的选择性可以是临床毒性的原因，因为对这些靶标外金属酶产生非预期的抑制。这种临床毒性的一个例子是人药物代谢酶例如cyp2c9、cyp2c19和cyp3a4受到目前可用的唑类抗真菌剂例如氟康唑和伏立康唑的非预期的抑制。据信这种靶标外的抑制主要是由目前采用的1-(1,2,4-三唑)与cyp2c9、cyp2c19和cyp3a4的活性位点中的铁不加区别地结合而造成的。这一点的另一个例子是在许多基质金属蛋白酶抑制剂的临床试验中观察到的关节痛。该毒性被认为是与因氧肟酸基团与靶标外活性位点中的锌不加区别地结合而引起的靶标外金属酶的抑制有关。
因此，对可以实现更好的效力与选择性平衡的金属结合基团的探索仍然是重要的目标，并且对实现解决当前治疗和预防疾病、病症及其症状方面未满足的需求的治疗剂和方法意义重大。
技术实现要素：
本发明涉及化合物(例如在本文所述化合物中的任意者)、调节金属酶活性的方法以及治疗疾病、病症或其症状的方法。上述方法可以包括本文的化合物。
应理解以下关于优选的可变选择所讨论的本发明的实施方式可以是单独的，或与本发明的一个或多个实施方式、或优选的可变选择进行结合，就如同各种组合明确列于本文。
式(i)的化合物、或其盐、溶剂化物、水合物或前药，其中：
r1为卤素；
r2为卤素；
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、烷氧基、卤素、卤代烷氧基、羟基、氨基、-nr6r9、-sr10、-c(o)r10、任选取代的卤代烷基、任选取代的芳基烷氧基、-c(o)nr6r7、-ch(oh)-卤代烷基、任选取代的烷基、羟基烷基、任选取代的烷氧基烷基、异氰基、环烷基氨基羰基、任选取代的芳氧基烷基、任选取代的芳基烷基硫基、卤代烷基硫基、任选取代的芳基烷基磺酰基、任选取代的芳基烷基亚磺酰基、任选取代的杂芳基烷氧基、或卤代烷基羰基；
n为0、1、2或3；
r4为任选地被0、1、2或3个独立的r8取代的芳基；
r5为h、烷基、磷酸基(phosphato)、亚磷酸基、烷氧基磷酸基、或任选地被氨基取代的-c(o)烷基；
r6独立地为h或烷基；
r7独立地为h、任选取代的烷基、任选取代的卤代烷基、或任选取代的芳基烷基；
各个r8独立地为氰基、卤代烷基、烷氧基、卤素、或卤代烷氧基；
各个r9独立地为h、烷基、-c(o)烷基、-c(o)h、-c(o)卤代烷基、或任选取代的卤代烷基；
各个r10独立地为h、任选取代的烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳基烷基；
ar2为
r11为任选取代的苯基、任选取代的烷基、任选取代的噻吩基、吡咯基、呋喃基、任选取代的吡啶基、-ch(oh)-烷基、-ch(oh)-卤代烷基、任选取代的芳基烷基、任选取代的芳氧基烷基、卤代烷基、卤代烷氧基烷基、任选取代的吲哚基、任选取代的苯并呋喃基、杂环烷基、或
r12为r4、-c(o)r4、-c(o)r7、-so2r4；
mbg为任选取代的四唑基、任选取代的三唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的嘧啶基、任选取代的噻唑基或任选取代的吡唑基。
另一方面是式(i)的化合物、或其盐、溶剂化物、水合物或前药，其中：
r1为卤素；
r2为卤素；
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、烷氧基、卤素、卤代烷氧基、羟基、氨基、-nr6r9、-sr10、-c(o)r10、任选取代的卤代烷基、任选取代的芳基烷氧基、-c(o)nr6r7、-ch(oh)-卤代烷基、任选取代的烷基、羟基烷基、任选取代的烷氧基烷基、异氰基、环烷基氨基羰基、任选取代的芳氧基烷基、任选取代的芳基烷基硫基、卤代烷基硫基、任选取代的芳基烷基磺酰基、任选取代的芳基烷基亚磺酰基、任选取代的杂芳基烷氧基、任选取代的芳基硫代烷基、或卤代烷基羰基；
n为0、1、2或3；
r4为任选地被0、1、2或3个独立的r8取代的芳基；
r5为h、烷基、磷酸基、亚磷酸基、烷氧基磷酸基、或任选地被1或2个氨基取代的-c(o)烷基；
r6独立地为h或烷基；
r7独立地为h、任选取代的烷基、任选取代的卤代烷基、或任选取代的芳基烷基；
各个r8独立地为氰基、卤代烷基、烷氧基、卤素、或卤代烷氧基；
各个r9独立地为h、烷基、-c(o)烷基、-c(o)h、-c(o)卤代烷基、任选取代的芳基烷基、或任选取代的卤代烷基；
各个r10独立地为h、任选取代的烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂环烷基、或任选取代的芳基烷基；
ar2为
r11为任选取代的苯基、任选取代的烷基、任选取代的噻吩基、吡咯基、呋喃基、任选取代的吡啶基、-ch(oh)-烷基、-ch(oh)-卤代烷基、任选取代的芳基烷基、任选取代的芳氧基烷基、卤代烷基、卤代烷氧基烷基、任选取代的吲哚基、任选取代的苯并呋喃基、杂环烷基、或
r12为r4、-c(o)r4、-c(o)r7、-so2r4；
mbg为任选取代的四唑基、任选取代的三唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的嘧啶基、任选取代的噻唑基或任选取代的吡唑基。
另一方面是本文通式的化合物，其中r1为氟。
另一方面是本文通式的化合物，其中r2为氟。
另一方面是本文通式的化合物，其中r1和r2为氟。
另一方面是本文通式的化合物，其中r4为任选地被0、1、2或3个独立的r8取代的苯基。
另一方面是本文通式的化合物，其中r4为任选地被0、1、2或3个独立的卤素取代的苯基。
另一方面是本文通式的化合物，其中r4为任选地被0、1、2或3个独立的氟取代的苯基。
另一方面是本文通式的化合物，其中r4为2,4-二氟苯基。
另一方面是本文通式的化合物，其中r5为h。
另一方面是本文通式的化合物，其中r5为氨基取代的酰基。
另一方面是本文通式的化合物，其中r5为任选地被1或2个氨基取代的-c(o)烷基。
另一方面是本文通式的化合物，其中r5为磷酸基。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为苯基、噻吩基、芳基烷基、芳氧基烷基，各个任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代；
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为苯基、噻吩基、芳基烷基、芳氧基烷基，各个任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代；
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、被卤素、氰基、卤代烷基或卤代烷氧基任选取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、被卤素、氰基或卤代烷基任选取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为苯基、噻吩基、芳基烷基、芳氧基烷基，各个任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代；
各个r3独立地为-nr6r9、卤代烷基羰基、烷氧基烷基、羟基烷基、酰基、卤代烷基硫基、-ch(oh)-卤代烷基、烷基、烷氧基、氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选地被卤素、氰基、卤代烷基或卤代烷氧基取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选地被卤素、氰基、卤代烷氧基或卤代烷基取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为苯基、噻吩基、芳基烷基、芳氧基烷基，各个任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代；
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代的苯基；
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、卤素；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代的苯基；
各个r3独立地为-nr6r9、卤代烷基羰基、烷氧基烷基、羟基烷基、酰基、卤代烷基硫基、-ch(oh)-卤代烷基、烷基、烷氧基、氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选地被卤素、氰基、卤代烷基或卤代烷氧基取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选地被卤素、氰基、卤代烷氧基或卤代烷基取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代的噻吩基；
各个r3独立地为卤代烷基氨基羰基、任选取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代的噻吩基；
各个r3独立地为卤代烷基氨基羰基或任选地被卤素、氰基或卤代烷基取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；
r5为h；
ar2为
mbg为1-四唑基；
r11为任选地被0、1、2、或3个独立的r3取代的噻吩基；
各个r3独立地为-nr6r9、卤代烷基羰基、烷氧基烷基、羟基烷基、酰基、卤代烷基硫基、-ch(oh)-卤代烷基、烷基、烷氧基、氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选地被卤素、氰基、卤代烷基或卤代烷氧基取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选地被卤素、氰基、卤代烷氧基或卤代烷基取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
r1为氟；
r2为氟；
r4为2,4-二氟苯基；且
r5为h。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r3独立地为-nr6r9、卤代烷基羰基、烷氧基烷基、羟基烷基、酰基、卤代烷基硫基、-ch(oh)-卤代烷基、烷基、烷氧基、氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选地被卤素、氰基、卤代烷基或卤代烷氧基取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选地被卤素、氰基、卤代烷氧基或卤代烷基取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为1。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r3独立地为氰基、卤代烷基、卤素、卤代烷氧基、任选取代的芳基烷氧基、卤代烷基氨基羰基、任选取代的芳基烷基氨基羰基；且
n为2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r3独立地为羟基、氨基、-nr6r9、-sr10、-c(o)r10、c(o)nr6r7、-ch(oh)-卤代烷基、任选取代的烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、异氰基、环烷基氨基羰基、芳氧基烷基、芳基烷基硫基、卤代烷基硫基、芳基烷基磺酰基、芳基烷基亚磺酰基、任选取代的杂芳基烷氧基、或卤代烷基羰基；且
n为1或2。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r3可以任选地被卤素、氰基、卤代烷基、卤代烷氧基、烷基氨基羰基、杂芳基、或芳基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个芳基烷氧基可以任选地被卤素、氰基、卤代烷基、卤代烷氧基、烷基氨基羰基、杂芳基、或芳基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个芳氧基烷基可以任选地被卤素、氰基、卤代烷基、卤代烷氧基、或芳基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个芳基烷基硫基可以任选地被卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、或氰基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个芳基烷基磺酰基可以任选地被卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、或氰基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个芳基烷基亚磺酰基可以任选地被卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、或氰基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个杂芳基烷氧基可以任选地被卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、或氰基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个芳基硫代烷基可以任选地被卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、或氰基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个噻吩基可以任选地被卤素、卤代烷基、烷基、卤代烷基羰基、卤代烷基氨基羰基、卤代芳基烷基氨基羰基、氰基芳基烷基氨基羰基、卤代烷基芳基烷基氨基羰基、杂环烷基羰基、甲磺酰基-苯基烷基氨基羰基、或氰基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r11定义内的吡啶基可以任选地被卤素、氰基、卤代烷氧基、或卤代烷基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个吲哚基可以任选地被卤素、氰基、卤代烷氧基、或卤代烷基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个苯并呋喃基可以任选地被卤素、氰基、卤代烷氧基、或卤代烷基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个mbg可以任选地被卤素、氰基、卤代烷氧基、或卤代烷基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r11可以任选地被卤素、氰基、烷基、卤代烷氧基、或卤代烷基取代。
另一方面是本文通式的化合物，其中：
各个r3独立地为4-氰基、4-三氟甲基、3-氰基、4-异丙氧基、4-氟、3-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、3-氯、4-氯、2-氟、5-氟、4-(2,2,2-三氟乙氧基)、4-(3,3,3-三氟，2,2-二氟丙氧基)、4-氰基-3-氟苯基甲氧基、4-氰基苯基甲氧基、1-羟基-2,2,2-三氟乙基、或(4-氟苯基甲基)nhc(o)-、2,4-二-氟、1-甲基、3,4-二-氟、2-氟-4-三氟甲基、3-氟、4-二氟甲基、2-氟-4-甲基、5-氯、5-三氟甲基、3,5-二-氟、2-氟-5-甲氧基、2,6-二-氟、5-甲基、4-(1,1,-二氟乙烷)、4-二氟甲氧基、4-三氟甲基硫基、3-氟-4-氯、4-乙酰基、4-羟基甲基、4-甲氧基甲基、5-溴、5-二氟甲基、5-三氟乙酰基、1-(2,2,2-三氟乙基)、2-氟-4-(甲基氨基)、4-二甲基氨基、3-氟-4-二氟甲基、1-二氟甲基、2,5-二氟、4-甲酰氨基、4-异氰基、2-氟-4-氰基、3-氟-4-氰基、2-氟-5-氰基、5-(2,2,2-三氟乙基)、4-三氟乙酰基氨基、4-(2,2,2-三氟乙基)氨基、4-氨基羰基、2-氟-4-氨基、4-乙酰基氨基、4-(氟苯基)甲基氨基、4-(2,2,2-三氟乙基)、(2,2,2-三氟乙基)氨基羰基、吡咯烷基羰基、4-(氟苯基)甲基氧基、4-(氟苯基)羰基、1-三氟乙酰基、3-(2,2,2-三氟乙基)氧基、3-(氰基苯基)甲基氧基、4-(三氟甲氧基苯基)甲基氧基、[(2-氟-4-氰基)苯基]甲基氧基、[(2-氟-5-氰基)苯基]甲基氧基、3-(三氟甲氧基)甲基氧基、2,4-(二-氟苯基)甲基氧基、3,4-(二-氟苯基)甲基氧基、4-(氯苯基)甲基氧基、(2-氟-4-氯苯基)甲基氧基、[4-(甲基氨基羰基)苯基]甲基氧基、(5-氰基-2-吡啶基)甲基氧基、(2-噻唑)甲基氧基、(3-氰基-4-氟苯基)甲基氧基、(2,3-二-氟苯基)甲基氧基、2-氟-4-氯、(3-氰基苯基)甲基氨基羰基、(4-氰基苯基)甲基氨基羰基、(4-三氟甲基苯基)甲基氨基羰基、(1-吗啉代)羰基、[4-(甲磺酰基)苯基]甲基氨基羰基、(2-氟-4-氰基苯基)甲基氧基、(3-氟-5-氰基苯基)甲基氧基、(4-氟苯基)磺酰基、1-羟基-(2,2,3,3,3-五氟)丙基、(3-氟-4-氰基苯基)甲基亚磺酰基、(3-氟-4-氰基苯基)甲基硫基、(3-氟-4-氰基苯基)甲基磺酰基、(2-氰基-5-吡啶基)甲基氧基、(3-氟-4-氰基苯基)甲基氧基、1-羟基乙基、2-氟-4-甲氧基、4-甲基氨基、4-羟基、(4-氟苯基)甲基氨基、(3-氟苯基)甲基氨基羰基、(4-氟苯基)甲基氨基羰基、(2-氟-3-氰基苯基)甲基氧基、(4-氰基苯基)甲基硫基、(3-氟-4-氯苯基)甲基氧基、(4-联苯基)甲基氧基、(4-甲基苯基)甲基氧基、(4-乙基苯基)甲基氧基、(4-二氟甲基苯基)甲基氧基、(4-三氟甲基苯基)甲基氧基、3-氰基-4-氟、(4-(1-吡咯基)苯基)甲基氧基、4-苯基、(4-(2-噁唑基)苯基)甲基氧基、4-(5-氰基噻吩基)甲基氧基。
另一方面是式(ii)的化合物、或其盐、溶剂化物、水合物或前药，其中：
r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9和r10如以上实施方式中所定义；
ar为芳基或杂芳基；
n为0、1、2或3。
在一方面，本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物为，其中该化合物抑制(或被鉴别为抑制)羊毛甾醇脱甲基酶(cyp51)。
在一方面，本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物为，其中该化合物被鉴别为具有针对目标酶(例如，白色念珠菌(c.albicans)mic<1.0μg/ml，以及烟曲霉(a.fumigatus)mic<64μg/ml)的活性范围。
本文的化合物包括其中化合物被鉴别为通过与金属形成一种或多种以下类型的化学相互作用或键而至少部分地实现对于金属酶的亲和力的那些化合物：σ键、共价键、配位-共价键、离子键、π键、δ键或反馈键(backbonding)相互作用。这些化合物也可以通过与金属较弱的相互作用实现亲和力，例如范德华相互作用、π-阳离子相互作用、π-阴离子相互作用、偶极-偶极相互作用、离子-偶极相互作用。在一方面，化合物被鉴别为经由1-四唑基部分与金属具有结合相互作用；在另一方面，化合物被鉴别为经由1-四唑基部分的n2与金属具有结合相互作用；在另一方面，化合物被鉴别为经由1-四唑基部分的n3与金属具有结合相互作用；在另一方面，化合物被鉴别为经由1-四唑基部分的n4与金属具有结合相互作用。在一方面，化合物被鉴别为经由2-四唑基部分与金属具有结合相互作用；在另一方面，化合物被鉴别为经由2-四唑基部分的n1与金属具有结合相互作用；在另一方面，化合物被鉴别为经由2-四唑基部分的n3与金属具有结合相互作用；在另一方面，化合物被鉴别为经由2-四唑基部分的n4与金属具有结合相互作用。
评价金属-配体结合相互作用的方法是本领域已知的，如以下文献中所例示，包括，例如，“principlesofbioinorganicchemistry”，lippard和berg,universitysciencebooks,(1994)；“mechanismsofinorganicreactions”，basolo和pearson,johnwiley&sonsinc；第二版(1967年9月)；“biologicalinorganicchemistry”，ivanobertini,harrygray,edstiefel,joanvalentine,universitysciencebooks(2007)；xue等人,“naturechemicalbiology”,vol.4,no.2,107-109(2008)。
在一些情形中，本发明的化合物选自以下本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物(及其药学和农业可接受的盐、溶剂化物或水合物)：
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-(苯乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(1)；
1-(5-((4-氯苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(2)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(3)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((2,4-二氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(4)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(三氟甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(5)；
5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(4-氟苄基)噻吩-2-甲酰胺(6)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(7)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)苯甲腈(8)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(9)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((1-甲基-1h-吡咯-3-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(10)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)噻吩-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(11)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(6-((3,4-二氟苯基)乙炔基)哒嗪-3-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(12)；
4-(6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)丁-3-炔-2-醇(13)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((5-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)噻吩-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(14)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((3,4-二氟苯基)乙炔基)吡嗪-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(15)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((5-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)呋喃-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(16)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-(3-(3-氟苯基)丙-1-炔-1-基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(17)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-(3-(4-氟苯氧基)丙-1-炔-1-基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(18)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((1-(4-氟苯基)哌啶-4-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(19)；
1-(5-((4-((4-氰基苄基)氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-基磷酸二氢盐(20)；
1-(5-((3-氯苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(21)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(22)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-(3,3-二氟丙-1-炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(23)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((2-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(24)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((3-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(25)；
1-(5-((4-(二氟甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(26)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((2-氟-4-甲基苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(27)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((3-氟吡啶-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(28)；
1-(5-((5-氯噻吩-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(29)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((5-(三氟甲基)噻吩-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(30)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((3,5-二氟吡啶-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(31)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((5-氟吡啶-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(32)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((6-氟吡啶-3-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(33)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(三氟甲氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(34)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((2-氟-4-甲氧基苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(35)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((2,6-二氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(36)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((3,4-二氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(37)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((5-甲基噻吩-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(38)；
1-(5-((4-(1,1-二氟乙基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(39)；
1-(5-((4-(二氟甲氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(40)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(三氟甲基硫基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(41)；
1-(5-((4-氯-3-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(42)；
2-(4-氯-2-氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(43)；
1,1-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(44)；
2-(2,5-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(45)；
2-(3,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(46)；
1-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基)乙酮(47)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(6-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(48)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(6-((4-氟苯基)乙炔基)哒嗪-3-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(49)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-(羟基甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(50)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-(甲氧基甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(51)；
4-(6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)-1,1,1-三氟丁-3-炔-2-醇(52)；
1-(5-((5-溴噻吩-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(53)；
1-(5-((5-(二氟甲基)噻吩-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(54)；
1-(5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)噻吩-2-基)-2,2,2-三氟乙酮(55)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1h-吡咯-3-基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(56)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-(3-(2,2,2-三氟乙氧基)丙-1-炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(57)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-(噻吩-2-基乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(58)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((2-氟-4-(甲基氨基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(59)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-(甲基氨基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(60)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((3,4-二氟苯基)乙炔基)噻吩-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(61)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((4-(二甲基氨基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(62)；
1-(5-((1h-吡咯-3-基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(63)；
1-(5-((4-(二氟甲基)-3-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(64)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-(3-(3-氟苯基)丙-1-炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(65)；
1-(5-((1-(二氟甲基)-1h-吡咯-3-基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(66)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((2,5-二氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(67)；
n-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基)甲酰胺(68)；
4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯甲腈(69)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-异氰基苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(70)；
3-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯甲腈(71)；
1-(5-((5-溴呋喃-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(72)；
4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-3-氟苯甲腈(73)；
4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-2-氟苯甲腈(74)；
3-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-4-氟苯甲腈(75)；
1-(5-((5-(二氟甲基)呋喃-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(76)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((5-(2,2,2-三氟乙基)噻吩-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(77)；
1-(5-((4-氨基苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(78)；
n-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(79)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(80)；
4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯酚(81)；
4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯甲酰胺(82)；
1-(5-((4-氨基-2-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(83)；
n-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基)乙酰胺(84)；
1-(5-(3-(2,4-二氟苯氧基)丙-1-炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(85)；
4-(3-(6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)丙-2-炔基氧基)苯甲腈(86)；
1-(5-((1h-吲哚-5-基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(87)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-(4-氟苄基氨基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(88)；
1-(5-(苯并呋喃-5-基乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(89)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(2,2,2-三氟乙基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(90)；
4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(2,2,2-三氟乙基)苯甲酰胺(91)；
(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基)(吡咯烷-1-基)甲酮(92)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-(4-氟苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(93)；
5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(2,2,2-三氟乙基)噻吩-2-甲酰胺(94)；
(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)哌啶-1-基)(4-氟苯基)甲酮(95)；
1-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙酮(96)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((3-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(97)；
3-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(2,2,2-三氟乙基)苯甲酰胺(98)；
1,1-二氟-2-(4-氟苯基)-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(99)；
3-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)苯甲腈(100)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(4-(三氟甲氧基)苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(101)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-3-氟苯甲腈(102)；
3-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-4-氟苯甲腈(103)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(3-(三氟甲氧基)苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(104)；
1-(5-((4-(2,4-二氟苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(105)；
1-(5-((4-(3,4-二氟苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(106)；
1-(5-((4-(4-氯苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(107)；
1-(5-((4-(4-氯-2-氟苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(108)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-n-甲基苯甲酰胺(109)；
6-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)烟腈(110)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(噻唑-2-基甲氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(111)；
5-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(112)；
1-(5-((4-(2,3-二氟苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(113)；
1-(5-(3-(4-氯苯氧基)丙-1-炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(114)；
4-(3-(6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)丙-2-炔基氧基)-3-氟苯甲腈(115)；
4-(3-(6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)丙-2-炔基氧基)-2-氟苯甲腈(116)；
1-(5-(3-(4-氯-2-氟苯氧基)丙-1-炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(117)；
1-(5-(3-(4-(二氟甲基)苯氧基)丙-1-炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(118)；
5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(3-氟苄基)噻吩-2-甲酰胺(119)；
n-(3-氰基苄基)-5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)噻吩-2-甲酰胺(120)；
n-(4-氰基苄基)-5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)噻吩-2-甲酰胺(121)；
5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(4-(三氟甲基)苄基)噻吩-2-甲酰胺(122)；
(5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)噻吩-2-基)(吗啉代)甲酮(123)；
(5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)噻吩-2-基)(吡咯烷-1-基)甲酮(124)；
5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(4-(甲基磺酰基)苄基)噻吩-2-甲酰胺(125)；
3-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(126)；
3-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-5-氟苯甲腈(127)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-(哌啶-4-基乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(128)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((1-(4-氟苯基磺酰基)哌啶-4-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(129)；
1-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基)-2,2,3,3,3-五氟丙-1-醇(130)；
4-((4-((6-(2-(2,5-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(131)；
4-((4-((6-(2-(4-氯-2-氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(132)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基硫基)甲基)-2-氟苯甲腈(133)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基亚磺酰基)甲基)-2-氟苯甲腈(134)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基磺酰基)甲基)-2-氟苯甲腈(135)；
4-((4-((6-(2-(2,5-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)苯甲腈(136)；
4-((4-((6-(2-(4-氯-2-氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)苯甲腈(137)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯基硫基)甲基)苯甲腈(138)；
5-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)氰基吡啶(139)；
1-(5-((4-(4-氰基苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-基磷酸二氢盐(140)；
5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(2h-四唑-2-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(4-氟苄基)噻吩-2-甲酰胺(141)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(2h-四唑-2-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)苯甲腈(142)；
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(2h-四唑-2-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(143)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-基醇2-氨基乙酸酯盐酸盐(144)；
(2s)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-基醇2,6-二氨基己酸酯二盐酸盐(145)；
1-(5-((4-(4-氯-3-氟苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(146)；
1-(5-((4-(联苯基-4-基甲氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(147)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-(4-甲基苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(148)；
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((4-(4-乙基苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(149)；
1-(5-((4-(4-(二氟甲基)苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(150)；
(+)-1-(5-((4-(4-(二氟甲基)苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇((+)-150)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(4-(三氟甲基)苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(151)；
4-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苄氧基)-3-氟苯甲腈(152)；
5-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苄氧基)-2-氟苯甲腈(153)；
1-(5-((4-(4-(1h-吡唑-1-基)苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(154)；
4-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苄氧基)苯甲腈(155)；
1-(5-((4-((4-氯苯氧基)甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(156)；
1-(5-((4-((联苯基-4-基氧基)甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(157)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-(4-(噁唑-2-基)苄氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(158)；
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-((4-氟苯氧基)甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(159)；
1-(5-((4-((3,4-二氟苯氧基)甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(160)；
1-(5-((4-((4-(二氟甲基)苯氧基)甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(161)；
4-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苄基硫基)苯甲腈(162)；
5-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)噻吩-2-甲腈(163)；
4-(4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苄氧基)-2-氟苯甲腈(164)；
1-(5-((4-((4-氯-3-氟苯氧基)甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(165)；
4-((3-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)苯甲腈(166)。
在另一方面，本发明提供包括本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物和药学可接受的载体的药物组合物。
在其它方面，本发明提供调节受试者中金属酶活性的方法，其包括以足以调节金属酶活性的量和条件，使受试者与本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物接触。
在另一方面，本发明提供治疗患有或易感于病症或疾病的受试者的方法，其中该受试者被鉴别为需要治疗该病症或疾病，该方法包括对需要其的所述受试者施用有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物或药物组合物，使得所述受试者得以治疗所述病症。
在另一方面，受试者是非人类动物。
本文的方法包括其中病症或疾病与一种或多种以下致病真菌相关的那些：伞状犁头霉(absidiacorymbifera)、皮炎阿耶罗菌(ajellornycesdermatitidis)、苯黑末节皮真菌(arthrodermabenhamiae)、粉节皮菌(arthrodermafulvum)、石膏样节皮菌(arthrodermagypseum)、内弯节皮菌(arthrodermaincurvaturn)、太田节皮菌(arthrodermaotae)、万博节皮菌(arthrodermavanbreuseghemii)、黄曲霉(aspergillusflavus)、烟曲霉(aspergillusfumigates)、黑曲霉(aspergillusniger)、皮炎芽生菌(blastomycesdermatitidis)、白色念珠菌(candidaalbicans)、光滑念珠菌(candidaglabrata)、季也蒙念珠菌(candidaguilliermondii)、克鲁斯念珠菌(candidakrusei)、近平滑念珠菌(candidaparapsilosis)、热带念珠菌(candidatropicalis)、菌膜假丝酵母(candidapelliculosa)、卡氏枝孢瓶霉(cladophialophoracarrionii)、粗球孢子菌(coccidioidesimmitis)、新型隐球菌(cryptococcusneoformans)、小克银汉霉菌属(cunninghamellasp.)、絮状表皮癣菌(epidermophytonfloccosum)、皮炎外瓶霉(exophialadermatitidis)、新型线黑粉菌(filobasidiellaneoformans)、佩德罗索氏着色芽生菌(fonsecaeapedrosoi)、腐皮镰刀菌(fusariumsolani)、白地霉(geotrichumcandidum)、荚膜组织胞浆菌(histoplasmacapsulaturn)、威尼克外瓶霉(hortaeawerneckii)、东方伊萨酵母(issatschenkiaorientalis)、灰马杜拉分枝菌(madurellagrisae)、糠秕马拉色菌(malasseziafurfur)、球形马拉色菌(malasseziaglobosa)、钝形马拉色菌(malasseziaobtusa)、厚皮马拉色菌(malasseziapachydermatis)、限制性马拉色菌(malasseziarestricta)、斯洛非马拉色菌(malasseziaslooffiae)、合轴马拉色菌(malasseziasympodialis)、犬小孢子菌(microsporumcanis)、黄褐色小孢子菌(microsporumfulvum)、石膏样小孢子菌(microsporumgypseum)、卷枝毛霉菌(mucorcircinelloides)、红球丛赤壳(nectriahaematococca)、宛氏拟青霉(paecilomycesvariotii)、巴西副球孢子菌(paracoccidioidesbrasiliensis)、马尔尼菲青霉菌(penicilliummarneffei)、异常毕赤酵母(pichiaanomala)、季也蒙毕赤酵母(pichiaguilliermondii)、卡氏肺孢子虫(pneumocystiscarinii)、波氏假阿利什菌(pseudallescheriaboydii)、稻根霉菌(rhizopusoryzae)、深红酵母(rhodotorularubra)、尖端赛多孢子菌(scedosporiumapiospernium)、裂褶菌(schizophyllumcommune)、申克孢子丝菌(sporothrixschenckii)、须发癣菌(trichophytonmentagrophytes)、红色毛癣菌(trichophytonrubrum)、疣状癣菌(trichophytonverrucosum)、紫色毛癣菌(trichophytonviolaceum)、阿萨希毛孢子菌(trichosporonasahii)、皮肤毛孢子菌(trichosporoncutaneum)、墨毛孢子菌(trichosporoninkin)、粘状毛孢子菌(trichosporonmucoides)。
本文的方法包括其中病症或疾病是以下的那些：曲霉病(aspergillosis)、芽生菌病(blastomycosis)、念珠菌病(candidiasis)、产色霉菌病(chromomycosis)、球孢子菌病(coccidioidomycosis)、隐球菌病(cryptococcosis)、皮肤癣菌病(dermatophytoses)、组织胞浆菌病(histoplasmosis)、角膜真菌病(keratomycosis)、瘢痕疙瘩性芽生菌病(lobomycosis)、马拉色菌(malassezia)感染、毛霉菌病(mucormycosis)、巴西芽生菌病(paracoccidioidomycosis)、马尔尼菲青霉菌(penicilliummarneffei)感染、暗色丝孢霉病(phaeohyphomycosis)、卡氏肺孢子虫肺炎(pneumocyctispneumonia)或鼻孢子虫病(rhinosporidiosis)。
本文的方法包括其中病症或疾病是以下的那些：查加斯病(锥虫属(genustrypanosoma))、非洲锥虫病(锥虫属)、利什曼病(利什曼原虫属(genusleishmania))、结核病(分枝杆菌属(genusmycobacterium))、麻风病(分枝杆菌属)、疟疾(疟原虫属(genusplasmodium))、或癣(头癣(tineacapitis)、体癣、足癣、断发癣(tonsurans)、花斑藓)。
在一方面，本发明提供治疗患有或易感于金属酶相关病症或疾病的受试者的方法，其包括对受试者施用有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物或药物组合物。
在另一方面，本发明提供治疗患有或易感于金属酶相关病症或疾病的受试者的方法，其中受试者已经被鉴别为对金属酶相关病症或疾病的治疗有需求，其包括对需要的所述受试者施用有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物或药物组合物，使得所述受试者得以治疗所述病症。
在另一方面，本发明提供治疗患有或易感于金属酶介导的病症或疾病的受试者的方法，其中受试者已经被鉴别为对金属酶介导的病症或疾病的治疗有需求，其包括对需要的所述受试者施用有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物或药物组合物，使得所述受试者中的金属酶活性得以调节(例如，下调、抑制)。
本文的方法包括其中疾病或病症由4-羟基苯基丙酮酸双加氧酶、5-脂肪氧合酶、腺苷脱氨酶、醇脱氢酶、氨肽酶n、血管紧张素转化酶、芳香酶(cyp19)、钙调磷酸酶、氨基甲酰磷酸合成酶、碳酸酐酶家族、儿茶酚o-甲基转移酶、环氧合酶家族、二氢嘧啶脱氢酶-1、dna聚合酶、法呢基二磷酸合酶、法呢基转移酶、富马酸还原酶、gaba氨基转移酶、hif-脯氨酰羟化酶、组蛋白脱乙酰基酶家族、hiv整合酶、hiv-1逆转录酶、异亮氨酸trna连接酶、羊毛甾醇脱甲基酶(cyp51)、基质金属蛋白酶家族、甲硫氨酸氨肽酶、中性肽链内切酶、一氧化氮合酶家族、磷酸二酯酶iii、磷酸二酯酶iv、磷酸二酯酶v、丙酮酸铁氧还蛋白氧化还原酶、肾肽酶、核糖核苷二磷酸还原酶、凝血噁烷合酶(cyp5a)、甲状腺过氧化物酶、酪氨酸酶、脲酶、或黄嘌呤氧化酶中的任一种所介导的那些方法。
本文的方法包括其中疾病或病症由1-脱氧-d-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(dxr)、17-α羟化酶(cyp17)、醛甾酮合酶(cyp11b2)、氨肽酶p、炭疽致死因子、精氨酸酶、β-内酰胺酶、细胞色素p4502a6、d-alad-ala连接酶、多巴胺β-羟化酶、内皮素转化酶-1、谷氨酸羧肽酶ii、谷氨酰胺酰基环化酶、乙二醛酶、血红素加氧酶、hpv/hsve1解旋酶、吲哚胺2,3-双加氧酶、白三烯a4水解酶、甲硫氨酸氨肽酶2、肽脱甲酰基酶、磷酸二酯酶vii、释放酶(relaxase)、视黄酸羟化酶(cyp26)、tnf-α转化酶(tace)、udp-(3-o-(r-3-羟基十四酰基))-n-乙酰葡糖胺脱乙酰基酶(lpxc)、血管粘附蛋白-1(vap-1)、或维生素d羟化酶(cyp24)中的任一种所介导的那些方法。
本文的方法包括其中疾病或病症是癌症、心血管疾病、炎性疾病、传染病、代谢性疾病、眼科疾病、中枢神经系统(cns)疾病、泌尿系疾病或胃肠疾病的那些方法。
本文的方法包括其中疾病或病症是前列腺癌、乳腺癌、炎症性肠病、牛皮癣、全身性真菌感染、皮肤结构真菌感染、粘膜真菌感染或甲癣的那些方法。
本文所述的方法包括其中受试者被鉴别为对特定的规定治疗有需求的那些方法。鉴别对这种治疗有需求的受试者可以是受试者或健康保健专业人员的判断，可以是主观的(例如意见)或客观的(例如，可通过测试或诊断方法测量)。
本发明的另一方面是包括本文通式(例如式i或式ii)的化合物和农业可接受的载体的组合物。
本发明的另一方面是治疗或预防植物中或植物上金属酶介导的疾病或病症的方法，其包括使本文的化合物与植物相接触。
本发明的另一方面是抑制植物中或植物上的金属酶活性的方法，其包括使本文的化合物与植物相接触。
具体实施方式
定义
为了更容易地理解本发明，为方便起见在此首先对一些术语进行定义。
本文所使用的术语“治疗”障碍包括预防、改善、减轻和/或控制该障碍和/或会引发该障碍的病症。术语“治疗”(treating、treatment)是指减缓或减轻疾病和/或其伴随症状的方法。根据本发明，“治疗”包括预防、阻断、抑制、减轻、保护、调节、逆转例如病症的不良作用的影响并减少其发生。
本文所使用的“抑制”包括预防、降低和停止进展。注意“酶抑制”(例如，金属酶抑制)与其区分开并在以下描述。
术语“调节”是指响应于暴露至本发明的化合物，酶的活性增高或降低。
术语“分离的”、“纯化的”或“生物纯的”是指大体或基本上没有在其天然状态发现时通常伴有的组分的物质。通常使用分析化学技术例如聚丙烯酰胺凝胶电泳或高效液相色谱来确定纯度和同质性。具体地，在实施方式中化合物为至少85％纯，更优选至少90％纯，更优选至少95％纯，且最优选至少99％纯。
术语“给药”或“施用”包括将化合物引入受试者以实施它们的预定功能的途径。可以使用的给药途径的例子包括注射(皮下注射、静脉注射、肠胃外注射、腹膜内注射、鞘内注射)、局部、口服、吸入、直肠和经皮。
术语“有效量”包括在必需的剂量上和时间期间上有效实现所需结果的量。化合物的有效量可以根据例如如下的因素而变化：受试者的疾病状态、年龄、和体重、及化合物在受试者中引起期望的反应的能力。可以调节剂量方案以提供最佳的治疗反应。有效量还是抑制剂化合物的治疗有益作用胜于任何毒性或有害作用(例如副作用)的量。
本文中使用的短语“全身给药”、“全身地给药”、“外周给药”和“外周地给药”是指施用化合物、药物或其它材料以使其进入患者的系统并由此进行代谢和其它类似的过程。
术语“治疗有效量”是指施用的化合物的量足以预防正在治疗的病症或障碍的一种或多种症状的发展或将其减轻至一定程度。
化合物的治疗有效量(即有效剂量)可以在约0.005μg/kg至约200mg/kg体重，优选在约0.01mg/kg至约200mg/kg体重，更优选在约0.015mg/kg至约30mg/kg体重的范围内。在其它实施方式中，治疗有效量可以在约1.0pm至约10μm的范围内。技术人员应当理解的是，某些因素可影响有效治疗受试者所需的剂量，其包括但不限于，疾病或病症的严重程度、在先的治疗、受试者的一般健康状况和/或年龄、及其它存在的疾病。而且，用治疗有效量的化合物治疗受试者可以包括单一治疗，或优选地可以包括一系列治疗。在一个实施例中，用范围在约0.005μg/kg至约200mg/kg体重的化合物治疗受试者，每天1次，持续约1至10周，优选持续2至8周，更优选持续约3至7周，且进一步更优选持续约4、5、或6周。在另一个实施例中，可以在慢性病症或疾病的情况中每天治疗受试者，持续数年。还可理解的是，用于治疗的化合物的有效剂量在具体治疗的期间内可以增加或降低。
术语“手性”是指具有与镜像伙伴不重合的特性的分子，而术语“非手性”是指与其镜像伙伴重合的分子。
术语“非对映异构体”是指具有两个或更多个不对称中心并且其分子彼此不互为镜像的立体异构体。
术语“对映异构体”是指化合物的彼此互为不重合镜像的两个立体异构体。两个对应异构体的等摩尔混合物称为“外消旋混合物”或“外消旋体”。
术语“异构体”或“立体异构体”是指化学组成相同但是原子或基团在空间排列上不同的化合物。
术语“前药”包括具有可以在体内代谢的部分的化合物。通常，前药通过酯酶或通过其它机理在体内代谢成活性药物。前药及其用途的例子在本领域内公知(参见例如berge等人(1977)“pharmaceuticalsalts”,j.pharm.sci.66:1-19)。可以在化合物最终分离和纯化期间原位制备前药，或者通过单独地使纯化的化合物以其游离酸形式或羟基与合适的酯化剂反应来制备。羟基可以经羧酸处理而转换成酯。前药部分的实例包括取代和未被取代的、支链或无支链的低级烷基酯部分(例如丙酸酯)、低级烯基酯、二-低级烷基-氨基低级烷基酯(例如二甲基氨基乙基酯)、酰基氨基低级烷基酯(例如乙酰氧基甲基酯)、酰氧基低级烷基酯(例如新戊酰氧基甲基酯)、芳基酯(苯基酯)、芳基低级烷基酯(例如苄基酯)、取代的(例如被甲基、卤素或甲氧基取代基取代的)芳基和芳基低级烷基酯、酰胺、低级烷基酰胺、二低级烷基酰胺和羟基酰胺。优选的前药部分为丙酸酯和酰基酯。也包括在体内通过其它机理转化成活性形式的前药。在一些方面，本发明的化合物是任意本文通式的前药。
术语“受试者”是指例如哺乳动物的动物，包括但不限于，灵长类动物(比如，人)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等等。在某些实施方式中，受试者是人。
术语“一个/一种(a，an)”和“该(the)”在本申请包括权利要求中使用时意指“一个或多个/一种或多种”。因此，例如，提及“一种样品”，除非上下文与此相反地明确说明(例如，多个样品)，包括多个样品，等等。
贯穿本说明书和权利要求，词语“包括”、“包含”和“含有”用于非排他性的意思，除非上下文另有需要。
当提及数值时本文所使用的术语“约”在一些实施方式中意在包括指定量的±20％的变化，在一些实施方式中意在包括指定量的±10％的变化，在一些实施方式中意在包括指定量的±5％的变化，在一些实施方式中意在包括指定量的±1％的变化，在一些实施方式中意在包括指定量的±0.5％的变化，且在一些实施方式中意在包括指定量的±0.1％的变化，因为这些变化适于实施所公开的方法或采用所公开的组合物。
本文中使用词语“抑制剂”意指表现出抑制金属酶的活性的分子。本文的“抑制”是指与没有抑制剂情况下的金属酶活性相比，金属酶的活性降低。在一些实施方式中，术语“抑制”是指金属酶活性降低至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％、或至少约95％。在其它实施方式中，抑制是指金属酶活性降低约5％至约25％、约25％至约50％、约50％至约75％、或约75％至100％。在一些实施方式中，抑制是指金属酶活性降低约95％至100％，例如活性降低95％、96％、97％、98％、99％、或100％。可使用多种本领域技术人员公知的技术来测量这样的降低。下面描述用于测量各个活性的具体检定。
此外，本发明的化合物包括具有以下任一几何结构的烯烃：“z”是指被称为“顺式”(相同侧)构型的几何结构而“e”是指被称为“反式”(相反侧)构型的几何结构。对于手性中心的命名法，术语“d”和“l”构型由iupac命名法(iupacrecommendation)而定义。对于下述术语的使用，非对映异构体、外消旋体、差向异构体和对映异构体将以其通常意义使用以描述制剂的立体化学。
本文使用的术语“烷基”是指含有1至12个碳原子的直链或支链烃基。术语“低级烷基”是指c1-c6烷基链。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、和正戊基。烷基可以任选地被一个或多个取代基取代。
术语“卤代烷基”是指被一个或多个卤素取代基取代的烷基。卤代烷基的实例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、溴甲基、氯甲基和2,2,2-三氟乙基。
术语“烯基”是指可以是直链或支链的不饱和烃链，其含有2至12个碳原子和至少一个碳-碳双键。烯基可以任选地被一个或多个取代基取代。
术语“芳基烯基”是指可以是直链或支链的不饱和烃链，其含有2～12个碳原子和至少一个碳-碳双键，其中烯基单元的一个或多个sp2杂化碳与芳基部分连接。烯基可以任选地被一个或多个取代基取代。
术语“炔基”是指可以是直链或支链的不饱和烃链，其含有2至12个碳原子和至少一个碳-碳三键。炔基可以任选地被一个或多个取代基取代。
术语“芳基炔基”是指可以是直链或支链的不饱和烃链，其含有2～12个碳原子和至少一个碳-碳三键，其中炔基单元的一个或多个sp杂化碳与芳基部分连接。炔基可以被一个或多个取代基任选取代。
烯基和炔基的sp2或sp碳可以分别任选地为烯基或炔基的连接点。
术语“烷氧基”是指-o-烷基取代基。
本文所使用的术语“卤素”、“卤代”或“卤”是指-f、-cl、-br或-i。
术语“烷基硫基”-s-烷基取代基。
术语“烷氧基烷基”是指-烷基-o-烷基取代基。
术语“卤代烷氧基”是指被一个或多个卤取代基取代的-o-烷基。卤代烷氧基的实例包括三氟甲氧基和2,2,2-三氟乙氧基。
术语“卤代烷氧基烷基”是指-烷基-o-烷基’，其中烷基’被一个或多个卤取代基取代。
术语“卤代烷基氨基羰基”是指-c(o)-氨基-烷基，其中烷基被一个或多个卤取代基取代。
术语“卤代烷基硫基”是指被一个或多个卤取代基取代的-s-烷基。卤代烷基硫基的实例包括三氟甲基硫基和2,2,2-三氟乙基硫基。
术语“卤代烷基羰基”是指被一个或多个卤取代基取代的-c(o)-烷基。卤代烷基羰基的实例包括三氟乙酰基。
术语“环烷基”是指具有至少一个饱和环或具有至少一个非芳族环的烃类3-8元单环或7-14元双环体系，其中非芳族环可具有一定的不饱和度。环烷基可以任选地被一个或多个取代基取代。在一个实施方式中，环烷基的各个环中0、1、2、3、或4个原子可被取代基取代。环烷基的代表性实例包括环丙基、环戊基、环己基、环丁基、环庚基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己二烯基等等。
术语“环烷氧基”-o-环烷基取代基。
术语“环烷氧基烷基”是指-烷基-o-环烷基取代基。
术语“环烷基烷氧基”是指-o-烷基-环烷基取代基。
术语“环烷基氨基羰基”是指-c(o)-nh-环烷基取代基。
术语“芳基”是指烃类单环、双环或三环的芳族环体系。芳基可以任选地被一个或多个取代基取代。在一个实施方式中，芳基的各个环中0、1、2、3、4、5或6个原子可被取代基取代。芳基的实例包括苯基、萘基、蒽基、芴基、茚基、薁基等等。
术语“芳氧基”是指-o-芳基取代基。
术语“芳基烷氧基”是指-o-烷基-芳基取代基。
术语“芳基烷基硫基”是指-s-烷基-芳基取代基。
术语“芳基硫代烷基”是指-烷基-s-芳基取代基。
术语“芳基烷基氨基羰基”是指-c(o)-氨基-烷基-芳基取代基。
术语“芳基烷基磺酰基”是指-s(o)2-烷基-芳基取代基。
术语“芳基烷基亚磺酰基”是指-s(o)-烷基-芳基取代基。
术语“芳氧基烷基”是指-烷基-o-芳基取代基。
术语“烷基芳基”是指-芳基-烷基取代基。
术语“芳基烷基”是指-烷基-芳基取代基。
术语“杂芳基”是指若为单环则具有1-4个环杂原子、若为双环则具有1-6个杂原子、或者若为三环则具有1-9个杂原子的芳族5-8元单环、8-12元双环、或11-14元三环体系，所述杂原子选自o、n、或s，且剩余环原子为碳(有适当的氢原子，除非另外指明)。杂芳基可以任选地被一个或多个取代基取代。在一个实施方式中，杂芳基的各个环中的0、1、2、3、或4个原子可被取代基取代。杂芳基的实例包括吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、噻唑基、异噁唑基、喹啉基、吡唑基、异噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、异喹啉基、吲唑基等等。
术语“杂芳基氧基”是指-o-杂芳基取代基。
术语“杂芳基烷氧基”是指-o-烷基-杂芳基取代基。
术语“杂芳基氧基烷基”是指-烷基-o-杂芳基取代基。
术语“含氮杂芳基”是指若为单环则具有1-4个环氮杂原子、若为双环则具有1-6个环氮杂原子、或者若为三环则具有1-9个环氮杂原子的杂芳基。
术语“杂环烷基”是指若为单环则包括1-3个杂原子、若为双环则包括1-6个杂原子、或者若为三环则包括1-9个杂原子的非芳族的3-8元单环、7-12元双环、或10-14元三环体系，所述杂原子选自o、n、s、b、p或si，其中非芳族环体系完全饱和。杂环烷基可以任选地被一个或多个取代基取代。在一个实施方式中，杂环烷基的各个环中的0、1、2、3、或4个原子可被取代基取代。代表性的杂环烷基包括哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、1,3-二氧戊基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、硫杂丙烯环基(thiirenyl)等等。
术语“烷基氨基”是指进一步被一个或两个烷基取代的氨基取代基。术语“氨基烷基”是指进一步被一个或多个氨基取代的烷基取代基。术语“羟烷基”或“羟基烷基”是指进一步被一个或多个羟基取代的烷基取代基。烷基氨基、氨基烷基、巯基烷基、羟烷基、巯基烷氧基、磺酰基烷基、磺酰基芳基、烷基羰基、以及烷基羰基烷基中的烷基或芳基部分可以任选地被一个或多个取代基取代。
可用于本文的方法中的酸和碱是本领域已知的。酸催化剂是任何酸性化学品，其性质上可以是无机的(例如，盐酸、硫酸、硝酸、三氯化铝)或有机的(例如，樟脑磺酸、对甲苯磺酸、乙酸、三氟甲磺酸镱)。酸以催化量或化学计量使用以促进化学反应。碱是任何碱性化学品，其性质上可以是无机的(例如，碳酸氢钠、氢氧化钾)或有机的(例如，三乙胺、吡啶)。碱以催化量或化学计量使用以促进化学反应。
烷化剂是任何能够使所讨论的官能团(例如，醇的氧原子、氨基的氮原子)进行烷基化的试剂。烷化剂在本领域中包括在本文引用的参考文献中是已知的，并且包括卤代烷(例如，甲基碘、苄基溴或氯)、硫酸烷基酯(例如，硫酸甲酯)、或其它领域内知晓的烷基离去基团的组合。离去基团是任何能够在反应(例如，消除反应、取代反应)过程中从分子中脱离的稳定种类，并且在本领域中包括在本文所引用的参考文献中是已知的，并且包括卤化物(例如，i-、c1-、br-、f-)、羟基、烷氧基(例如，-ome、-o-t-bu)、酰氧基阴离子(例如-oac、-oc(o)cf3)、磺酸酯(例如，甲磺酰基、甲苯磺酰基)、乙酰胺(例如-nhc(o)me)、氨基甲酸酯(例如n(me)c(o)ot-bu)、膦酸酯(例如-op(o)(oet)2)、水或醇(质子状态)等等。
在某些实施方式中，任何基团(例如，烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、环烷基、杂环烷基)上的取代基可以在该基团的任意原子上，其中可被取代的任何基团(例如，烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、环烷基、杂环烷基)可以任选地被一个或多个取代基(其可以是相同的或不同的)取代，各自取代一个氢原子。适当的取代基的实例包括，但不限于，烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳烷基、杂芳烷基、芳基、杂芳基、卤素、卤代烷基、氰基、硝基、烷氧基、芳氧基、羟基、羟基烷基、氧(即，羰基)、羧基、甲酰基、烷基羰基、烷基羰基烷基、烷氧基羰基、烷基羰基氧基、芳氧基羰基、杂芳氧基、杂芳氧基羰基、硫基、巯基、巯基烷基、芳基磺酰基、氨基、氨基烷基、二烷基氨基、烷基羰基氨基、烷基氨基羰基、烷氧基羰基氨基、烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基羰基、或芳基氨基取代的芳基；芳基烷基氨基、芳烷基氨基羰基、酰氨基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、亚氨基、甲酰氨基、脲基、氨基甲酰基、硫脲基、氰硫基、磺酰氨基、磺酰基烷基、磺酰基芳基、巯基烷氧基、n-羟基脒基、或n’-芳基、n”-羟基脒基。
可以通过有机合成领域已知的方式制备本发明的化合物。优化反应条件、必要时使竞争副产物最少化的方法，是本领域已知的。反应优化和放大可以有利地利用高速平行合成装置和计算机控制的微反应器(例如，designandoptimizationinorganicsynthesis,第二版,carlsonr,ed,2005；elsevierscienceltd.；
如本领域技术人员可以理解的，本文通式的化合物的合成方法对本领域普通技术人员而言是明显的，包括本文的路线和实例。另外，各个合成步骤可以以交替的顺序或次序进行以得到期望的化合物。此外，本文所述的溶剂、温度、反应时长等仅出于示例说明的目的，并且本领域普通技术人员应认识到，反应条件的变型可以产生本发明的期望化合物。
本文的化合物还可含有键合(例如，碳碳键)，其中键的旋转围绕该特定键合受限制，例如因存在环或双键而引起的限制。因此，所有的顺式/反式和e/z异构体都明确地包括在本发明中。本文的化合物还可以以多种互变异构形式表示，在这样的情况下，本发明明确地包括本文所述化合物的所有互变异构形式，即使可能只表示了一种互变异构形式。本文这些化合物的所有这些异构形式明确地包括在本发明中。本文所述的化合物的所有晶体形式和多晶型都明确地包括在本发明中。还实施了包括本发明化合物的提取物和部分。术语“异构体”意在包括非对映异构体、对映异构体、区域异构体(regioisomers)、结构异构体、旋转异构体、互变异构体等等。对于含有一个或多个立体中心(stereogeniccenter)的化合物，例如手性化合物，可以使用对映异构富集化合物、外消旋体、或非对映异构体混合物来实施本发明的方法。
优选的对映异构富集化合物具有50％或更多的对映异构体过量，更优选该化合物具有60％、70％、80％、90％、95％、98％、或99％或更多的对映异构体过量。在优选的实施方式中，将本发明的手性化合物的仅一种对映异构体或非对映异构体施用于细胞或受试者。
治疗方法
在一方面，本发明提供治疗患有或易感于病症或疾病的受试者的方法，其包括对受试者施用有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物或药物组合物。
在其它方面，本发明提供治疗患有或易感于病症或疾病的受试者的方法，其中受试者已经被鉴别为对金属酶介导的病症或疾病的治疗有需求，其包括对需要的所述受试者施用有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物或药物组合物，使得所述受试者得以治疗所述病症。
在一方面，本发明提供调节受试者中细胞的金属酶活性的方法，其包括以足以调节金属酶活性的量和条件使受试者与本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物接触。
在一个实施方式中，该调节是抑制。
在另一方面，本发明提供治疗患有或易感于金属酶介导的病症或疾病的受试者的方法，其包括对受试者施用有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物或药物组合物。
在其他方面，本发明提供治疗患有或易感于金属酶介导的病症或疾病的受试者的方法，其中受试者已经被鉴别为对金属酶介导的病症或疾病的治疗有需求，其包括对需要的所述受试者施用有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物或药物组合物，使得所述受试者得以治疗所述病症。
在某些实施方式中，本发明提供治疗疾病、病症或其症状的方法，其中该病症是癌症、心血管疾病、炎性疾病或传染病。在其他实施方式中，疾病、病症或其症状是代谢性疾病、眼科疾病、中枢神经系统(cns)疾病、泌尿系疾病或胃肠疾病。在某些实施方式中，疾病是前列腺癌、乳腺癌、炎症性肠病、牛皮癣、全身性真菌感染、皮肤结构真菌感染、粘膜真菌感染和甲癣。
在某些实施方式中，受试者是哺乳动物，优选为灵长类或人。
在另一实施方式中，本发明提供如上所述的方法，其中有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物如上文所述。
在另一实施方式中，本发明提供如上所述的方法，其中将本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物静脉内、肌肉内、皮下、脑室内、口服或局部给药。
在另一实施方式中，本发明提供如本文所述的方法，其中本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物表现出针对目标酶(例如，白色念珠菌mic<1.0μg/ml，以及烟曲霉mic≤64μg/ml)的活性范围的选择性。
在其它实施方式中，本发明提供如上所述的方法，其中本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物单独施用或与一种或多种其它治疗剂组合施用。在另一个实施方式中，额外治疗剂是抗癌剂、抗真菌剂、心血管药剂、抗炎药剂、化疗药剂、抗血管生成剂、细胞毒素剂、抗增殖药剂、代谢性疾病药剂、眼科疾病药剂、中枢神经系统(cns)疾病药剂、泌尿系疾病药剂、或胃肠疾病药剂。
本发明的另一目的是本文所描述的(例如，本文任意通式的)化合物在制造用于治疗金属酶介导的病症或疾病的药物中的用途。本发明的另一目的是本文所描述的(例如，本文任意通式的)化合物用于治疗金属酶介导的病症或疾病的用途。本发明的另一目的是本文所描述的(例如，本文任意通式的)化合物在制造用于治疗或预防农业或土地环境中金属酶介导的疾病或病症的农业组合物中的用途。
药物组合物
在一方面，本发明提供包括本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物和药学可接受的载体的药物组合物。
在另一实施方式中，本发明提供还包括额外的治疗剂的药物组合物。在进一步的实施方式中，额外的治疗剂是抗癌剂、抗真菌剂、心血管药剂、抗炎药剂、化疗药剂、抗血管生成剂、细胞毒素剂、抗增殖药剂、代谢性疾病药剂、眼科疾病药剂、中枢神经系统(cns)疾病药剂、泌尿系疾病药剂、或胃肠疾病药剂。
在一方面，本发明提供一种试剂盒，其包括单位剂型的有效量的本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物、以及对患有或易感于金属酶介导的疾病或病症的受试者施用化合物的说明书，上述疾病或病症包括癌症、实体瘤、心血管疾病、炎性疾病、传染病。在其它实施方式中，疾病、病症或其症状为代谢性疾病、眼科疾病、中枢神经系统(cns)疾病、泌尿系疾病、或胃肠疾病。
术语“药学上可接受的盐”或“药学上可接受的载体”意在包括，根据在本文所述化合物上发现的具体取代基，用相对无毒的酸或碱制得的活性化合物的盐。当本发明的化合物含有相对酸性的官能团时，可以通过使中性形式的该化合物与足量的期望的碱(或是纯的或是在适当的惰性溶剂中)接触而获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐的实例包括钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、有机氨基盐、或镁盐、或类似的盐。当本发明的化合物含有相对碱性的官能团时，可以通过使中性形式的该化合物与足量的期望的酸(或是纯的或是在适当的惰性溶剂中)接触而获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括源自无机酸的盐，比如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、一氢碳酸、磷酸、一氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、一氢硫酸、氢碘酸、或亚磷酸等，以及源自相对无毒的有机酸的盐，有机酸比如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等等。还包括氨基酸比如精氨酸等的盐，以及有机酸比如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等的盐(参见，例如berge等人,journalofpharmaceuticalscience66:1-19(1977))。本发明的某些具体化合物同时含有碱性官能团和酸性官能团，其允许该化合物转化成碱加成盐或酸加成盐。本领域技术人员已知的其它药学上可接受的载体适用于本发明。
通过使盐与碱或酸接触并以常规方式分离母体化合物，可以再生中性形式的化合物。母体形式的化合物与各种盐形式在某些物理性质比如在极性溶剂中的溶解性方面不同，但在其它方面这些盐与母体形式的化合物对于本发明的目的而言是相同的。
除了盐形式外，本发明还提供前药形式的化合物。本文描述的化合物的前药是容易在生理条件下发生化学变化以提供本发明化合物的那些化合物。此外，前药可通过化学或生化方法在先体外后体内的环境下被转化成本发明的化合物。例如，当将前药与合适的酶或化学试剂放置在透皮贴剂储器(reservoir)内时，前药可以缓慢地转化成本发明的化合物。
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式，包括水合形式，存在。通常，溶剂化形式等同于非溶剂化形式，并且意在包括在本发明的范围内。本发明的某些化合物可以以多种结晶或无定形形式存在。通常，所有的物理形式对于本发明预期的用途而言是等同的，并且意在包括在本发明的范围内。
本发明还提供包括有效量的本文所述的化合物以及药学上可接受的载体的药物组合物。在一个实施方式中，使用药学上可接受的制剂对受试者施用化合物，例如在对受试者施用药学上可接受的制剂后，该药学上可接受的制剂向受试者持续输送化合物至少12小时、24小时、36小时、48小时、一周、两周、三周或四周。
本发明的药物组合物中的活性成分的实际剂量水平及给药时程可以变化，以便获得针对具体患者、组合物和给药模式可有效实现期望的治疗反应，而对患者没有毒性(或不能接受的毒性)的活性成分量。
在使用中，将至少一种根据本发明的化合物以药学有效的量在药物载体中通过静脉注射、肌内注射、皮下注射、或脑室内注射，或者通过口服或局部施用给需要的受试者。根据本发明，本发明的化合物可以单独施用或与第二种不同的治疗剂联合施用。“与……联合”是指基本上同时或依次共同给药。在一个实施方式中，急性施用本发明的化合物。因此，对例如约1天至约1周的短期治疗，可以施用本发明的化合物。在另一个实施方式中，可以在较长的时期内施用本发明的化合物以改善慢性病症，例如根据待治疗的病症而持续约1周至数月。
本文中使用的“药学有效量”是指一定量的本发明化合物，其足够高从而能够显著地正向改善待治疗的病症，但又足够低从而能够避免严重的副作用(合理的收益/风险比)，其在合理的医学判断范围之内。本发明化合物的药学有效量会根据待达成的具体目标、待治疗的患者的年龄和身体状况、潜在疾病的严重度、治疗的持续时间、并行治疗的性质以及所采用的具体化合物而变化。例如，对儿童或婴儿所施用的本发明化合物的治疗有效量会根据合理的医学判断而按比例减少。因此本发明化合物的有效量将是提供期望效果的最低量。
确定的本发明的实际优点是，可以以方便的方式例如通过静脉、肌内、皮下、口服或脑室内注射途径，或通过局部施用例如以软膏或凝胶来施用化合物。根据给药途径，包括本发明化合物的活性成分可能需要包覆在材料内以保护化合物免受酶、酸和其它可能使化合物失活的自然条件的作用。为了通过除肠胃外给药之外的方式施用本发明的化合物，可以将化合物用材料包覆或者与材料一起施用以防止失活。
可以肠胃外或者腹膜内施用化合物。还可以例如在甘油、液体聚乙二醇、及其混合物、以及油中制备分散剂。
可起到药物载体作用的物质的一些实例为：糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄芪胶；麦芽；明胶；滑石；硬脂酸；硬脂酸镁；硫酸钙；植物油，例如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，例如丙二醇、甘油、山梨醇、甘露醇、和聚乙二醇；琼脂；藻酸；无热原水；等渗盐水；以及磷酸盐缓冲溶液；脱脂奶粉；以及其它在药物制剂中使用的非毒性相容物质，例如维生素c、雌激素和紫锥花属(echinacea)。润湿剂和润滑剂如月桂基硫酸钠，以及着色剂、调味剂、润滑剂、赋形剂、压片剂、稳定剂、抗氧化剂和防腐剂也可以存在。增溶剂包括例如cremaphore和β-环糊精也可用于本文的药物组合物中。
可以通过常规的混合、溶解、制粒、糖锭化、研磨、乳化、胶囊化、包埋(entrapping)或冻干方法来制备包括目前所公开主题的活性化合物(或其前药)的药物组合物。可以使用一种或多种生理学可接受的载体、稀释剂、赋形剂或促进活性化合物处理成可作药物使用的制剂的助剂，以常规方式来配制组合物。
目前所公开主题的药物组合物可以采取适用于实际上任一种给药模式的形式，包括，例如局部、眼部、口服、口腔、全身、鼻部、注射、经皮、直肠、阴道给药等，或适于通过吸入或吹入而给药的形式。
对于局部给药，可将活性化合物或前药配制为溶液、凝胶、软膏、乳膏、混悬剂等等。
全身制剂包括设计为通过注射例如皮下注射、静脉注射、肌内注射、鞘内注射或腹膜内注射来给药的制剂，以及设计为经皮、经粘膜、口服或肺部给药的制剂。
有用的可注射的制剂包括活性化合物于水性或油性媒介中的无菌混悬剂、溶液或乳剂。组合物还可含有配制剂(formulatingagent)，例如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。注射用制剂可以以单位剂量形式存在(例如，于安瓿或于多剂量容器中)，并且可以含有添加的防腐剂。
或者，可以以粉末形式提供可注射的制剂，以在使用之前与合适的媒介，包括但不限于无菌无热原水、缓冲液、右旋糖溶液等等，进行重构。为此，可以通过任何领域内已知的技术比如冻干使活性化合物干燥，并在使用之前重构。
对于经粘膜给药，在制剂中使用适合于待被渗透的屏障的渗透剂。这些渗透剂在领域内是已知的。
对于口服给药，药物组合物可以采用，例如锭剂、片剂、或胶囊剂的形式，其通过常规方法使用药学上可接受的赋形剂比如粘合剂(例如，预凝胶化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)；填料(例如，乳糖、微晶纤维素或磷酸氢钙)；润滑剂(例如，硬脂酸镁，滑石或二氧化硅)；崩解剂(例如，马铃薯淀粉或羟乙酸淀粉钠)；或润湿剂(例如，月桂基硫酸钠)来制备。可以用例如糖或肠溶衣通过领域内公知的方法来包覆片剂。
用于口服给药的液体制剂可以采用例如酏剂、溶液、糖浆或混悬剂的形式，或者其可以作为干产物存在，以在使用之前与水或其它合适的媒介构造。可以通过常规方法用药学上可接受的添加剂来制备这样的液体制剂，添加剂比如助悬剂(例如，山梨醇糖浆、纤维素衍生物或氢化食用脂)；乳化剂(例如卵磷脂或阿拉伯胶)；非水媒介(例如杏仁油、油酯、乙醇或分馏植物油)；以及防腐剂(例如，甲基或丙基对羟基苯甲酸酯或山梨酸)。制剂也可视情况而含有缓冲盐、防腐剂、调味剂、着色剂和甜味剂。
众所周知，口服给药的制剂可以适当地配制成对活性化合物或前药提供控释。
对于口腔给药，组合物可以采用以常规方式配制的片剂或锭剂的形式。
对于直肠和阴道途径给药，活性化合物可以配制为含有常规栓剂基质例如可可油或其它甘油酯的溶液(用于保留灌肠)、栓剂、或软膏。
对于鼻部给药或者通过吸入或吹入的给药，使用合适的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氟碳化合物、二氧化碳或其他合适的气体，活性化合物或前药可以方便地以气溶胶喷雾的形式从加压容器或喷雾器中递送。在加压气溶胶的情况下，可以通过设置阀以输送计量的量来确定剂量单元。用于吸入器或吹入器的胶囊和药筒(例如由明胶组成的胶囊和药筒)可以配制成含有化合物与适当的粉末基质例如乳糖或淀粉的粉末混合物。
适于使用市售鼻腔喷雾装置进行鼻腔给药的水性混悬制剂的具体实例包括以下成分：活性化合物或前药(0.5-20mg/ml)；苯扎氯铵(0.1-0.2mg/ml)；聚山梨醇酯80(
对于眼部给药，活性化合物或前药可配制为适用于对眼睛施用的溶液、乳剂、混悬剂等。适用于对眼睛施用化合物的多种媒介在领域内是已知的。具体的非限制性的实例在美国专利第6,261,547号；美国专利第6,197,934号；美国专利第6,056,950号；美国专利第5,800,807号；美国专利第5,776,445号；美国专利第5,698,219号；美国专利第5,521,222号；美国专利第5,403,841号；美国专利第5,077,033号；美国专利第4,882,150号；以及美国专利第4,738,851中描述，其各自以其整体引入本文以作参考。
对于延时输送，活性化合物或前药可以配制为储库型(depot)制剂，用于通过植入或肌内注射给药。活性成分可以与适当的聚合或疏水材料(例如，作为可接受的油中的乳液)或离子交换树脂一起配制，或者配制为微溶的衍生物，例如作为微溶的盐。或者，可以使用经皮输送体系，其被制造为缓慢释放用于经皮吸收的活性化合物的吸盘或贴剂。为此，可以使用渗透促进剂来促进活性化合物的经皮渗透。合适的经皮贴剂在例如美国专利第5,407,713号；美国专利第5,352,456号；美国专利第5,332,213号；美国专利第5,336,168号；美国专利第5,290,561号；美国专利第5,254,346号；美国专利第5,164,189号；美国专利第5,163,899号；美国专利第5,088,977号；美国专利第5,087,240号；美国专利第5,008,110号；以及美国专利第4,921,475号中描述，其各自以其整体引入本文以作参考。
或者，可以采用其它的药物输送体系。脂质体和乳剂是已知可用于输送活性化合物或前药的输送媒介的实例。也可采用某些有机溶剂比如二甲亚砜(dmso)。
如果需要，药物组合物可以存在于包装或分配装置中，其可含有一个或多个包含活性化合物的单位剂型。包装可以，例如，包括金属或塑料箔，比如泡罩包装。包装或分配装置可以伴有给药说明书。
目前所公开主题的活性化合物或前药、或其组合物通常会以可有效实现预期结果的量进行使用，例如以可有效治疗或预防正在治疗的具体疾病的量进行使用。可以治疗地施用化合物以实现治疗益处，或者预防地施用化合物以实现预防益处。治疗益处是指消除或改善正在治疗的潜在病症和/或消除或改善与潜在病症相关的一种或多种症状，使得患者报告有感觉上或病症上的改善，尽管该患者可能仍然遭受潜在病症的折磨。例如，对患有过敏症的患者施用化合物，不仅在潜在的过敏反应被消除或改善时，而且在患者暴露至过敏原之后报告与过敏症相关的症状的严重度或持续时间降低时，都提供了治疗上的有益效果。作为另一实例，哮喘背景下的治疗益处包括哮喘发作后呼吸改善或哮喘发作的频率或严重度降低。治疗益处还包括使疾病的进展停止或变慢，无论是否实现了改善。
对于预防给药，可以对有形成一种之前所描述疾病的风险的患者施用化合物。如由适当的医学专家或小组所确定的，有形成疾病风险的患者可以是具有使该患者被分配到风险患者指定群体中的特征的患者。有风险的患者还可以是一般或通常处于以下情况中的患者，即，对于可通过施用本发明的金属酶抑制剂来治疗的潜在疾病，其发展可能发生。换言之，有风险的患者是一般或通常暴露于疾病或疾患引发条件或者可能剧烈地暴露有限时间的人。或者，在诊断为具有潜在病症的患者中，可以应用预防给药来避免症状发作。
化合物的给药量取决于多种因素，包括，例如治疗的具体适应症、给药模式、预期益处是预防性还是治疗性、正在治疗的适应症的严重度以及患者的年龄和体重、具体的活性化合物的生物利用度等等。有效剂量的确定在本领域技术人员的能力范围之内。
有效剂量可以由体外检定初步估计。例如，用于动物中的初始剂量可以配制成实现活性化合物的循环血液或血清浓度达到或高于在体外检定中测得的具体化合物的ic50，体外检定是例如体外真菌mic或mfc和实施例部分中所述的其他体外检定。考虑具体化合物生物利用度而计算达到该循环血液或血清浓度的剂量在本领域技术人员的能力范围之内。作为指导，参见fingl&woodbury,“generalprinciples,”in:goodmanandgilman’sthepharmaceuticalbasisoftherapeutics,chapter1,pp.1-46,最新版,pagamononpress，以及其中引用的参考文献，将其引入本文作为参考。
还可根据体内数据例如动物模型来估计初始剂量。用于测试化合物治疗或预防上述各种疾病的效力的动物模型在本领域内是公知的。
剂量通常在约0.0001或0.001或0.01mg/kg/天至约100mg/kg/天的范围内，但可以更高或更低，这取决于除其它因素之外的化合物活性、其生物利用度、给药模式、以及以上讨论的各种因素。可单独调整剂量和间隔，以提供足以保持治疗或预防作用的化合物血浆水平。在局部给药或选择性摄取的情形中，比如局部给药，活性化合物的有效局部浓度无法与血浆浓度关联。技术人员能够优化有效局部剂量而无需过度实验。
取决于除其它因素之外的正在治疗的适应症和处方医师的判断，可以每天一次、每天几次或数次、或甚至每天多次地施用化合物。
优选地，化合物会提供治疗或预防益处而不引起实质毒性。可使用标准药物规程来确定化合物的毒性。毒性与治疗(或预防)作用的剂量比为治疗指数。优选表现出高治疗指数的化合物。
本文任何变量的定义中对化学基团列表的叙述，包括了作为任何单一基团或所列基团组合的变量的定义。本文变量的实施方式的叙述，包括了作为任何单一实施方式或与任何其他实施方式或其一部分组合的实施方式。本文中对实施方式的叙述，包括了作为任何单一实施方式或与任何其他实施方式或其一部分的组合的实施方式。
农业应用
在调节植物上微生物中的金属酶活性的方法中，可以使用本文的化合物和组合物，该方法包括使本文的化合物与植物(例如种子、幼苗、草、杂草、谷物)接触。通过对目标植物、田地或其它农业区域施用化合物或组合物(例如，接触、涂施、喷洒、雾化、撒粉等等)，可以使用本文的化合物和组合物来处理植物、田地或其它农业区域(例如，作为除草剂、杀虫剂、生长调节剂等等)。施用可以在出土前或出土后进行。施用可以是治疗或预防性方案。
一方面是治疗或预防在植物中或植物上的真菌疾病或病症的方法，包括使本文任意通式的化合物与植物接触。另一方面是治疗或预防在植物中或植物上的真菌生长的方法，包括使本文任意通式的化合物与植物接触。另一方面是抑制在植物中或植物上的微生物的方法，包括使本文任意通式的化合物与植物接触。
例如，可以通过喷射、雾化、喷撒、散布或倾倒的方式，以可直接喷射的水溶液、粉末、混悬液，以及高浓水性、油性或其他的混悬液或分散液、乳液、油分散液、糊状物、尘粉、用于散布的材料或颗粒的形式使用包括本文化合物的组合物。
水性的使用形式可以通过加入水由乳液浓缩物、混悬液、糊状物、可润湿粉末或可分散于水中的颗粒而制备。为了制备乳液、糊状物或油分散液，可以通过润湿剂、增粘剂、分散剂或乳化剂使物质本身或者溶解于油或溶剂中的物质在水中均化。但是，也可以制备由活性物质、润湿剂、增粘剂、分散剂或乳化剂以及如果适当则存在的溶剂或油组成的浓缩物，这些浓缩物适于用水稀释。
可以通过将活性成分(例如本文的化合物)与固体载体结合来制备颗粒，例如涂覆颗粒、浸渍颗粒和均质颗粒。固体载体是矿物土，比如硅石、硅胶、硅酸盐、滑石、高岭土、石灰石、石灰、白垩、红玄武土、黄土、粘土、白云石、硅藻土、硫酸钙、硫酸镁、氧化镁、碾磨的合成材料；肥料，比如硫酸铵、磷酸铵、硝酸铵、尿素；以及植物来源的产物，例如谷类粉、树皮粉、木粉和坚果壳粉、纤维素粉；或其它固体载体。
本文的化合物可以配制为适用于对植物、田地或其它农业区域施用的普通的片剂、胶囊剂、固体、液体、乳剂、浆料、油、细颗粒或粉末。在优选的实施方式中，制剂于载体或稀释剂中包括在1与95％之间(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、25％、75％、80％、90％、95％)的本文化合物。本文描述的组合物以有效控制(例如，调节、抑制)金属酶介导的农业疾病或病症的量包括本文描述的通式化合物、以及额外的农业试剂(如果存在的话)。
在一种方法中，以胶囊化制剂(液体或粉末)提供本文的化合物。适用于胶囊材料的具体材料包括，但不限于，多孔微粒或基质，比如硅石、珍珠岩、滑石、粘土、叶蜡石、硅藻土、明胶和凝胶、聚合物(例如，聚脲、聚氨酯、聚酰胺、聚酯等)、聚合颗粒、或纤维素。这些包括，例如中空纤维；经由壁释放出本文指明的化合物的中空管或中空管道；从管道的开口释放出化合物的毛细管；从聚合物基质释放出化合物的不同形状比如条状、块状、片状、盘状的聚合块；将化合物保持在不可渗透的容器内并且经由测量的可渗透膜来释放出化合物的膜体系；以及前述的结合。这些分配组合物的实例为聚合物层压制品、聚氯乙烯丸剂、以及微毛细管。
胶囊化工序通常分为化学或机械的工序。化学工序胶囊化的实例包括，但不限于，复合凝聚、聚合物-聚合物不相容、液体媒介中的界面聚合、原位聚合、液中干燥、液体媒介中热离子凝胶化、液体媒介中去溶剂化、淀粉类化学工序、捕集于环糊精中、以及形成脂质体。机械工序胶囊化的实例包括，但不限于，喷雾干燥、喷雾冷冻、流化床、静电沉积、离心挤压、旋转盘或旋转悬浮分离、环形射流胶囊化(annular-jetencapsulation)、液气或固气界面处的聚合、溶剂蒸发、加压挤压或喷洒到溶剂萃取浴中。
微胶囊也适用于本文活性化合物的长期释放。微胶囊是含有由涂层或壳围绕的内核材料或活性成分的小颗粒。微胶囊的大小通常在1至1000微米之间变化，其中小于1微米的胶囊被分类为纳米胶囊而大于1000微米的胶囊则被分类为大胶囊。内核有效载荷通常在0.1至98重量百分比之间变化。微胶囊可具有多种结构(连续的内核/壳结构、多核结构、或单块结构)并且具有不规则形状或几何形状。
在另一方式中，以油类输送体系提供本文的化合物。油释放物质包括植物油和/或矿物油。在一个实施方式中，基质还含有表面活性剂，其使组合物容易分散于水中；这些表面活性剂包括润湿剂、乳化剂、分散剂等等。
本发明的化合物还可以提供为乳液。可以找到油包水(w/o)或水包油(o/w)的乳液制剂。微滴大小可以从纳米级(胶体分散系)变化到数百微米。通常在制剂中引入多种表面活性剂和增稠剂，以改变微滴的大小，使乳液稳定，并改良释放。
或者，本发明的化合物也可配制成固体片剂，并且包括(优选基本上由以下组成)油、蛋白质/碳水化合物材料(优选植物类)、甜味剂以及用于预防或治疗金属酶介导的农业疾病或病症的活性成分。在一个实施方式中，本发明提供固体片剂并且包括(并且优选基本上由以下组成)油、蛋白质/碳水化合物材料(优选植物类)、甜味剂以及用于预防或治疗金属酶介导的农业疾病或病症的活性成分(例如，本文的化合物或其组合或衍生物)。片剂通常含有约4～40重量％(例如，5％、10％、20％、30％、40％)的油(例如，植物油比如玉米油、葵花油、花生油、橄榄油、葡萄籽油、桐油、萝卜油、大豆油、棉籽油、核桃油、棕榈油、蓖麻油、地栗油(earthalmondoil)、榛子油、鳄梨油、芝麻油、巴豆油、可可油、亚麻籽油、菜籽油和芥花油及其氢化衍生物；石油来源的油(例如，石蜡和凡士林)，以及其它不与水混溶的烃(例如，石蜡))。片剂还含有约5～40重量％(例如，5％、10％、20％、30％、40％)的植物类蛋白质/碳水化合物材料。该材料含有碳水化合物部分(例如，来源于谷类，比如小麦、黑麦、大麦、燕麦、玉米、稻、小米、高粱、鸟食(birdseed)、荞麦、苜蓿(alfalfa)、mielga、玉米粉、大豆粉、谷物粉、小麦次粉(wheatmiddling)、麦麸、玉米面筋粉、海藻粉、干酵母、豆类、大米)和蛋白质部分。
任选地，为了帮助活性成分输送或为片剂提供合适的结构，可以使用多种赋形剂和粘合剂。优选的赋形剂和粘合剂包括无水乳糖、微晶纤维素、玉米淀粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、及其混合物。
本发明提供用于治疗或预防农业或植物疾病或病症的试剂盒。在一个实施方式中，试剂盒包括以适用于输送至场地植物(siteplant)的形式含有有效量的本文化合物的组合物。在一些实施方式中，该试剂盒包括容纳本文任意通式(例如式i或式ii)的化合物的容器；这样的容器可以是盒子、安瓿、瓶、小瓶、管子、袋子、小袋、泡罩包装或者其它本领域已知的适当的容器形式。这样的容器可以由塑料、玻璃、层压纸、金属箔或其它适用于保持化合物的材料制成。
如果需要，本发明的化合物与将其施用至植物、田地、或其它农业区域的说明书一起提供。说明书通常包括用于治疗或预防金属酶介导的农业疾病或病症的组合物的使用信息。在其它实施方式中，说明书包括至少一项以下内容：化合物的描述；用于治疗或预防金属酶介导的农业疾病或病症的剂量方案和用法；注意事项；警告；调查研究的描述；和/或参考文献。说明书可以直接打印在容器(当存在时)上，或者作为应用于容器上的标签，或者作为提供在容器中或与容器一起提供的单独的页、小册、卡片或文件夹。
实施例
现将使用具体的实施例对本发明进行说明，该实施例不应理解成具有限定性。
一般实验流程
本文路线中的结构中的变量的定义与本文所述通式中相应位置的变量的定义是相称的。
唑的合成
炔目标物(i)的合成可以使用以下所示(路线1)的实例合成来完成。较宽范围的芳烃和杂环(r11＝芳基或杂芳基)可以由芳基溴起始原料(例如1)起始制备。出于该实施例的目的，r4为卤代苯基。目标物(i)的实例合成开始于2,5-二溴-吡啶与铜活化的α-溴-乙酸乙酯的缩合，随后是初始的乙酯产物与锂化溴二氟苯的缩合，以提供酮b(路线1)。将酮用重氮甲烷环氧化以得到c。1-四唑产物d(和2-四唑异构体)通过在碳酸钾的存在下用四唑打开环氧化物c而得到。所得的溴吡啶d用苯基-乙炔处理，以提供偶联产物(例如1)。
路线1
在实施方式中，本发明提供本文所述通式的中间化合物以及将这些化合物转化为本文通式化合物的方法(例如，在路线1中，a至b；b至d；c至1；或d至1)，该方法包括使本文的化合物与一种或多种试剂在一种或多种化学转化(包括本文提供的那些)中进行反应，从而提供本文任意通式的化合物或其中间化合物。
本文所述的合成方法还可以在任何路线中所述的任何步骤之前或之后包括其它步骤，以添加或去除合适的保护基，以便最终允许合成本文所述通式的化合物。本文所述方法考虑了将一种通式的化合物转化为另一通式的化合物(例如，在路线1中，a至b；b至d；c至1；或d至1)。转化过程是指一种或多种化学转化，其可以原位进行、或在分离中间化合物的情况下进行。转化可以包括使用本领域已知的技术和方案(包括本文所引用的参考文献中的那些)，使起始化合物或中间体与其它试剂进行反应。中间体可以经或不经纯化(例如过滤、蒸馏、升华、结晶、研磨、固相萃取和层析)而使用。
实施例1
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-(苯乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(1)
向铜粉(2.68g，42.2mmol)在dmso(35ml)中的混悬液中加入溴二氟乙酸乙酯(2.70ml，21.10mmol)，并将混合物在rt搅拌1h。然后将2,5-二溴吡啶(2.50g，10.55mmol)加入并继续在rt搅拌15h。将反应用nh4cl水溶液淬灭并用dcm(3x25ml)萃取。将合并的有机层用水洗涤，用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，并减压浓缩得到粗产物混合物，其使用etoac/己烷经过柱纯化得到乙酯中间体(2.40g，8.57mmol，81％)，其为淡黄色油。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.71(s,1h),8.00(d,j＝9.0hz,1h),7.64(d,j＝9.0hz,1h),4.42-4.35(m,2h),1.39-1.31(m,3h)。
在70℃向2,4-二氟-溴苯(1.65g，8.57mmol)在二乙醚(10ml)中的搅拌溶液中加入n-buli(3.70ml，8.57mmol)，随后在15分钟之后添加酯(2.40g，8.57mmol)于二乙醚(5ml)中的溶液。将反应混合物在-70℃搅拌1h并温热至室温，在室温下另外实施2h搅拌。将反应用nh4cl水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。将合并的有机层用水洗涤，用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，并减压浓缩。将粗化合物通过柱层析纯化得到酮b(1.30g，3.73mmol，43％)，其为黄色液体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.62(s,1h),8.08-8.04(m,2h),7.74-7.70(m,1h),7.05-6.95(m,1h),6.88-6.78(m,1h)。ms(esi):347,349[(m++1)+2]。
在0℃向酮b(1.30g，3.73mmol)在二乙醚(300ml)中的搅拌溶液中加入新鲜制备的重氮甲烷，随后温热至rt。将反应混合物搅拌2h。将挥发物减压移除得到粗产物混合物，其经柱色谱使用etoac/己烷作为洗脱液，得到环氧乙烷c(800mg，2.20mmol，59％)，其为浅黄色液体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.72(s,1h),7.89(d,j＝9.0hz,1h),7.39-7.35(m,2h),6.86-6.83(m,1h),6.77-6.74(m,1h),3.44(s,1h),2.98(s,1h).ms(esi):362,364[(m++1)+2]。
在rt向环氧化物c(5g，13.8mmol)在dmf(15ml)中的搅拌溶液中加入k2co3(1.9g，13.87mmol)，随后加入1h-四唑(1.55g，20.72mmol)。将所得的反应混合物加热至70℃并搅拌16h。反应进程通过tlc监测。将反应用冰冷水(50ml)淬灭并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层用水(30ml)、盐水(30ml)洗涤，并经无水na2so4干燥得到粗产物，其通过使用40％etoac/己烷洗脱的硅胶柱色谱纯化得到1-四唑产物d(2.7g，6.24mmol，45.3％)，其为白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):8.73(s,1h),8.62(s,1h),7.95(dd,j＝2.0hz,8.0hz,1h),7.46(d,j＝8.5hz,1h),7.31-7.28(m,1h),6.86(s,1h),6.77-6.73(m,1h),6.70-6.66(m,1h),5.60(d,j＝14.5hz,1h),5.11(d,j＝14.5hz,1h)。
质量:m/z433.3[m++2]
在rt向化合物d(100mg，0.23mmol)在dmf(2ml)中的搅拌溶液中添加苯乙炔(35mg，0.34mmol)，随后添加tpp(6mg，0.023mmol)、pd(pph3)2cl2(16mg，0.023mmol)、cui(4mg，0.023mmol)和et3n(5ml)，并用氩净化30min且在rt继续搅拌16h。将反应混合物冷却至rt，通过硅藻土垫过滤，并将滤液减压浓缩。将由此获得的残余物用水(50ml)稀释并用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。将合并的有机层用水(15ml)、盐水(15ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。将粗产物通过使用etoac/己烷梯度洗脱的硅胶柱色谱纯化得到1(30mg，0.06mmol，28％)，其为灰白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.65(s,1h),7.88(dd,j＝2.0hz,8.5hz,1h),7.55-7.53(m,3h),7.41-7.37(m,3h),7.31-7.26(m,2h),6.76-6.75(m,1h),6.66-6.64(m,1h),5.61(d,j＝14.0hz,1h),5.12(d,j＝14.0hz,1h).hplc:96.4％。ms(esi):m/z453[m++1]。
实施例2
1-(5-((4-氯苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(2)
在rt在氩氛下向化合物d(100mg，0.231mmol)在thf(5ml)中的搅拌溶液中添加4-氯苯基乙炔(47mg，0.345mmol)，随后添加pd(pph3)2cl2(16mg，0.023mmol)、cui(4.4mg，0.023mmol)和二异丙基乙胺(0.08ml，0.462mmol)。将所得的反应混合物在回流温度在氩氛下搅拌16h。反应进程通过tlc和lc-ms监测。将反应混合物冷却至rt，通过硅藻土垫过滤并将滤液减压浓缩。将所得的残余物用水(15ml)稀释并用乙酸乙酯(4x30ml)萃取。将合并的有机层用水(10ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。将粗产物通过制备hplc纯化(流动相：ch3cn:0.1％tfa/h2o，梯度；流速：15.0ml/min)得到2(14mg，0.028mmol，12.5％)，其为淡黄色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.64(s,1h),7.88(d,j＝8.5hz,1h),7.55(d,j＝8.5hz,2h),7.47(d,j＝9.0hz,1h),7.37(d,j＝8.5hz,2h),7.33-7.28(m,1h),6.78-6.74(m,1h),6.68-6.65(m,1h),5.60(d,j＝14.5hz,1h),5.13(d,j＝14.5hz,1h)。hplc:99.5％.ms(esi):m/z488[m++1]。
实施例3
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(3)
在rt向化合物d(250mg，0.578mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加4-氟苯基乙炔(104mg，0.868mmol)，随后添加tpp(15mg，0.0578mmol)、cui(11mg，0.0578mmol)和et3n(16ml)并用氩净化20min。在rt向所得的反应混合物中加入pd(pph3)2cl2(40mg，0.0578mmol)，再次用氩净化20min并搅拌。在16h之后，通过lc-ms仅观察到0.87％的转化；然后将反应混合物缓慢加热至60℃并搅拌6h。在6h之后，将反应混合物冷却至rt，通过硅藻土垫过滤并将滤液减压浓缩。将所得的残余物用水(50ml)稀释并用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。将合并的有机层用水(2×15ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。将粗产物通过使用35％etoac/己烷洗脱的硅胶柱色谱纯化得到3(25mg，0.053mmol，9.2％)，其为灰白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.63(s,1h),7.88(d,j＝8.0hz,1h),7.55-7.51(m,2h),7.33-7.27(m,2h),7.09(t,j＝8.0hz,2h),6.78-6.74(m,1h),6.68-6.65(m,1h),5.61(d,j＝14.5hz,1h),5.13(d,j＝14.5hz,1h).hplc:92.97％。ms(esi):m/z472.4[m++1]。
实施例4
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((2,4-二氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(4)
在rt向化合物d(100mg，0.231mmol)在dmf(3ml)中的搅拌溶液中添加2,4-二氟苯基乙炔(47.9mg，0.347mmol)，随后添加tpp(6mg，0.023mmol)、cui(4.39mg，0.023mmol)并用氩净化20min。在rt向所得的反应混合物中加入pd(pph3)2cl2(16.24mg，0.023mmol)，再次用氩净化15min并搅拌16h。将反应混合物冷却至rt，通过硅藻土垫过滤并将滤液减压浓缩。将所得的残余物用水(20ml)稀释并用乙酸乙酯(4x20ml)萃取。将合并的有机层用水(2×10ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。将粗产物通过制备hplc纯化(流动相：(a)ch3cn(b)0.1％tfa/h2o，等度洗脱：a:b＝70:30；流速：15.0ml/min)得到4(18mg，0.036mmol，15.9％)，其为灰白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.66(s,1h),7.91(dd,j＝1.5hz,8.0hz,1h),7.56(d,j＝8.0hz,1h),7.53-7.49(m,1h),7.32-7.27(m,1h),6.94-6.88(m,2h),6.78-6.74(m,1h),6.69-6.65(m,1h),5.61(d,j＝14.0hz,1h),5.13(d,j＝14.0hz,1h).hplc:99.7％。ms(esi):m/z490[m++1]。
实施例5
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(三氟甲基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(5)
在rt向化合物d(300mg，0.69mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加4-(三氟甲基)苯基乙炔(177mg，1.0mmol)，随后添加tpp(18mg，0.069mmol)、cui(13mg，0.069mmol)、pd(pph3)2cl2(48mg，0.069mmol)和et3n(10ml)并用氩净化30min。在rt将所得的反应混合物搅拌16h。将反应混合物冷却至rt，通过硅藻土垫过滤并将滤液减压浓缩。将所得的残余物用水(50ml)稀释并用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。将合并的有机层用水(2×20ml)、盐水(20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。将粗产物通过制备hplc纯化(流动相：ch3cn:0.1％tfa/h2o，梯度；流速：15.0ml/min)得到5(18mg，0.034mmol，5％)，其为淡黄色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.66(s,1h),7.92(d,j＝8.5hz,1h),7.65(s,3h),7.53(d,j＝8.5hz,1h),7.34-7.29(m,1h),6.78-6.74(m,1h),6.69-6.66(m,1h),5.61(d,j＝14.5hz,1h),5.15(d,j＝14.5hz,1h)。hplc:99.3％.ms(esi):m/z522.3[m++1]。
路线2
制备三丁基锡中间体g
在rt在惰性气氛下向化合物c(20.0g，55.24mmol)在thf(300ml)中的搅拌溶液中添加tms-乙炔(10.3ml，82.87mmol)，随后添加cui(525mg，2.76mmol)、pd(pph3)2cl2(1.93g，2.76mmol)和et3n(20ml)并搅拌16h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用etoac(3x100ml)洗涤。将滤液用水(150ml)、盐水(150ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：7％etoac/己烷)得到化合物e(18.0g，47.5mmol，85％)，其为淡黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.69(s,1h),7.78(d,j＝10.0hz,1h),7.76(d,j＝10.0hz,1h),7.37-7.31(m,1h),6.85-6.80(m,1h),6.76-6.71(m,1h),3.45(d,j＝5.0hz,1h),2.96(d,j＝5.0hz,1h),0.26(s,9h)。
在0℃在惰性气氛下向e(18.0g，47.5mmol)在thf(200ml)中的搅拌溶液中添加tbaf(52.2ml，52.25mmol；thf中的1m溶液)并搅拌1h；反应进程通过tlc监测。然后将挥发物减压蒸发；将所得的残余物用etoac(500ml)稀释，用水(250ml)、盐水(250ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：8-10％etoac/己烷)得到化合物f(9.0g，29.31mmol，61.7％)，其为淡黄色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.73(d,j＝1.5hz,1h),7.82(dd,j＝8.0,1.5hz,1h),7.44(d,j＝8.0hz,1h),7.38-7.34(m,1h),6.85-6.81(m,1h),6.76-6.72(m,1h),3.44(d,j＝5.0hz,1h),3.31(s,1h),2.97(d,j＝5.0hz,1h)。
在-78℃在惰性气氛下向化合物f(9.0g，29.31mmol)在et2o(200ml)中的搅拌溶液中添加n-buli(22.0ml，35.18mmol；1.6m于己烷中)。在-78℃搅拌30min之后，添加n-bu3sncl(11.9ml，43.97mmol)。使反应混合物温热至rt并搅拌16h。反应进程通过tlc监测。将反应混合物用饱和nh4cl溶液淬灭，用etoac(2x200ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(150ml)、盐水(150ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品-g(20.0g)。将粗品用于下一反应而不经进一步纯化。
路线3
实施例6
5-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)-n-(4-氟苄基)噻吩-2-甲酰胺(6)
在惰性气氛下在rt向酸-h(1.50g，7.24mmol)在dmf(20ml)中的搅拌溶液中添加4-氟苄胺(1.35g，10.84mmol)，随后添加hobt(1.08g，7.95mmol)和dipea(3ml，18.07mmol)并搅拌5min。然后，将edci(1.52g，7.96mmol)添加至反应混合物并继续搅拌16h；反应进程通过tlc监测。然后将反应混合物用etoac(100ml)稀释并用0.1nhcl(100ml)洗涤。将分离的有机层用饱和nahco3溶液(100ml)、盐水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：20％etoac/己烷)得到酰胺-i(1.5g，4.77mmol，66％)，其为无色油。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.31-7.28(m,2h),7.23(d,j＝4.0hz,1h),7.05-6.99(m,3h),6.21(bs,1h),4.55(d,j＝5.6hz,2h)。
向化合物g(4.0g，粗品)在1,4-二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中添加化合物i(600mg，1.91mmol)，随后用氩净化20min。然后在rt将pd(pph3)4(434mg，0.37mmol)添加至混合物并用氩净化另外20min。将反应混合物逐渐加热至80℃并搅拌3h；反应进程通过tlc监测。使反应混合物冷却至rt并将挥发物减压蒸发得到化合物j(1.0g，粗品)。将粗化合物用于下一反应而不经进一步纯化。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.76(s,1h),7.85(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),7.47(d,j＝8.0,hz,1h),7.40-7.31(m,4h),7.27(d,j＝4.0hz,1h),7.06-7.02(m,2h),6.86-6.81(m,1h),6.77-6.71(m,1h),6.25(t,j＝5.6hz,1h),4.59(d,j＝5.6hz,2h),3.47(d,j＝5.0hz,1h),2.98(d,j＝5.0hz,1h)。lc-ms(esi):m/z540.0[m]+在4.28rt(86％纯)。
在rt在惰性气氛下向环氧化物j(1.0g，粗品)在干dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加1h-四唑(194mg，2.77mmol)，随后添加k2co3(255mg，1.85mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至65℃并搅拌16h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物用冰冷水(100ml)稀释并用etoac(2x100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(使用45-50％etoac/己烷洗脱)得到6(500mg，0.82mmol)，其为淡黄色固体。1h-nmr(400mhz,cdcl3):δ8.74(s,1h),8.64(s,1h),7.89(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),7.56(d,j＝8.4hz,1h),7.38(d,j＝4.0hz,1h),7.35-7.27(m,4h),7.14(bs,oh),7.05(t,j＝8.4hz,2h),6.79-6.73(m,1h),6.69-6.64(m,1h),6.22(t,j＝5.6hz,1h),5.59(d,j＝14.0hz,1h),5.14(d,j＝14.0hz,1h),4.60(d,j＝5.6hz,2h)。
用于分离6-对映异构体的手性制备hplc法：
将外消旋体-6(303mg，0.49mmol)通过制备高效液相色谱(chiralpakia，250x20mm，5μ；使用(a)正己烷、(b)etoh(a:b，75:25)作为流动相；流速：15ml/min)分离得到6-(+)(100mg)，其为灰白色固体。
6-(+)的分析数据:
手性hplc纯度：98.5％eert＝20.22min(chiralpakia，250x4.6mm，5μ；流动相(a)正己烷、(b)etoh(a:b::75:25)；流速：1.00ml/min)。
旋光度[α]d20:+19.76°(c＝0.1％于meoh中)。
1h-nmr(400mhz,cdcl3):δ8.74(s,1h),8.64(s,1h),7.89(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),7.56(d,j＝8.4hz,1h),7.38(d,j＝4.0hz,1h),7.35-7.27(m,4h),7.14(bs,oh),7.05(t,j＝8.4hz,2h),6.79-6.73(m,1h),6.69-6.64(m,1h),6.22(t,j＝5.6hz,1h),5.59(d,j＝14.0hz,1h),5.14(d,j＝14.0hz,1h),4.60(d,j＝5.6hz,2h)。质量:m/z611[m+h]+。hplc:98.5％。
路线4
实施例7
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(7)
在rt在惰性气氛下向4-溴苯酚(k)(1.0g，5.78mmol)在dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(1.6g，11.56mmol)，随后添加4-氰基-3-氟苄基溴(1.36g，6.36mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至70℃并搅拌3h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物冷却至rt，用冰冷水(100ml)稀释并用etoac(2x100ml)萃取。将合并的有机层用水(2x50ml)、盐水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗化合物通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：15％etoac/己烷)得到l(1.2g，3.93mmol，68％)，其为棕色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.66-7.62(m,1h),7.41(d,j＝6.8hz,2h),7.32-7.29(m,2h),6.82(d,j＝6.8hz,2h),5.09(s,2h)。lc-ms:m/z304.7[m-h]-在4.80rt(75.9％纯)。
向化合物g(3.0g，粗品)在1,4-二噁烷(15ml)中的搅拌溶液中添加l(1.2g，3.93mmol)并用惰性气体净化15min。向所得的反应混合物中添加pd(pph3)4(291mg，0.25mmol)并净化另外10min。然后将反应混合物逐渐加热至90℃并搅拌3h；反应进程通过tlc监测。然后将反应混合物冷却至rt；将挥发物减压蒸发得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：18％etoac/己烷)得到m(0.7g，粗品)，其为黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.77(s,1h),7.85(d,j＝8.0hz,1h),7.68(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.53(d,j＝6.8hz,2h),7.46(d,j＝8.0hz,1h),7.41-7.33(m,3h),6.97(d,j＝6.8hz,2h),6.88-6.83(m,1h),6.77-6.71(m,1h),5.17(s,2h),3.48(d,j＝5.2hz,1h),3.00(d,j＝5.2hz,1h)。lcms:m/z533.9[m+h]+在5.29rt(89.0％纯)。
在rt在惰性气氛下向m(0.7g，粗品)在dmf(7ml)中的搅拌溶液中添加1h-四唑(138mg，1.97mmol)，随后添加k2co3(181mg，1.31mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至65℃并搅拌7h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物冷却至rt；用冰冷水(50ml)稀释并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机层用水(2x50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗化合物通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：40％etoac/己烷)得到7(350mg，0.58mmol)，其为黄色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.62(s,1h),7.86(d,j＝8.0hz,1h),7.67(t,j＝8.0hz,1h),7.53(d,j＝8.0hz,1h),7.50(d,j＝9.0hz,2h),7.34-7.32(m,4h),6.95(d,j＝9.0hz,2h),6.77-6.75(m,1h),6.67-6.65(m,1h),5.59(d,j＝14.0hz,1h),5.15(s,2h),5.12(d,j＝14.0hz,1h)。
用于分离7的对映异构体的手性制备hplc法：
将7的对映异构体(35mg)通过正相制备高效液相色谱(chiralpakic，250x20mm，5μ；使用(a)0.1％tea/正己烷、(b)乙醇(a:b::70:30)作为流动相；流速：15ml/min)分离得到7-(+)(15mg)，其为灰白色固体。
7-(+)的分析数据：
手性hplc：100％eert＝27.72min(chiralpakic，250x4.6mm，5μ；流动相(a)0.1％tea/正己烷、(b)乙醇(a:b::70:30)；流速：1.00ml/min)
旋光度[α]d20：+29.80°(c＝0.1％于meoh中)。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.62(s,1h),7.86(d,j＝8.0hz,1h),7.67(t,j＝8.0hz,1h),7.53(d,j＝8.0hz,1h),7.50(d,j＝9.0hz,2h),7.34-7.32(m,4h),6.95(d,j＝9.0hz,2h),6.77-6.75(m,1h),6.67-6.65(m,1h),5.59(d,j＝14.0hz,1h),5.15(s,2h),5.12(d,j＝14.0hz,1h)。ms(esi):603[m+h]+。hplc:99.0％。
路线5
实施例8
4-((4-((6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)乙炔基)苯氧基)甲基)苯甲腈(8)
在惰性气氛下在rt向4-溴苯酚(k)(2.9g，14.45mmol)在dmf(20ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(4.0g，28.90mmol)，随后添加4-氰基苄基溴(3.4g，17.34mmol)。将混合物逐渐加热至80℃并搅拌1h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物冷却至rt，用冰冷水(100ml)淬灭，用etoac(2x100ml)萃取。将合并的有机层用水(100ml)、盐水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5％etoac/己烷)得到化合物n(2.9g，10.06mmol，71％)，其为无色液体。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.68(d,j＝8.4hz,2h),7.52(d,j＝8.4hz,2h),7.39(d,j＝9.2hz,2h),6.83(d,j＝9.2hz,2h),5.09(s,2h)。
向化合物g(3.5g，粗品)在1,4-二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中添加化合物n(2.7g，9.39mmol)并用氩净化20min。在rt将pd(pph3)4(678mg，0.58mmol)添加至混合物并用氩净化另外20min。将反应混合物逐渐加热至80℃并搅拌3h；反应进程通过tlc监测。使反应混合物冷却至rt并将挥发物减压蒸发得到化合物o(800mg，粗品)。将粗品用于下一反应而不经进一步纯化。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.74(s,1h),7.81(d,j＝8.0hz,1h),7.69(d,j＝8.0hz,2h),7.55(d,j＝8.0hz,2h),7.51(d,j＝9.0hz,2h),7.44(d,j＝8.0hz,1h),7.39-7.35(m,1h),6.96(d,j＝9.0hz,2h),6.85-6.82(m,1h),6.76-6.72(m,1h),5.16(s,2h),3.47(d,j＝5.0hz,1h),2.98(d,j＝5.0hz,1h)。质量(esi):m/z515[m+h]+。
在rt在惰性气氛下向环氧化物o(800mg，粗品)在干dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加1h-四唑(163mg，2.33mmol)，随后添加k2co3(215mg，1.55mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至65℃并搅拌16h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物用冰冷水(50ml)稀释并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(使用40-45％etoac/己烷洗涤)得到8(360mg，0.61mmol，39.5％)，其为黄色固体。1h-nmr(400mhz,cdcl3):δ8.76(s,1h),8.62(s,1h),7.84(d,j＝8.0hz,1h),7.70(d,j＝8.0hz,2h),7.69-7.51(m,3h),7.47(d,j＝7.5hz,2h),7.33-7.27(m,2h),6.96(d,j＝7.5hz,2h),6.78-6.73(m,1h),6.69-6.64(m,1h),5.60(d,j＝14.0hz,1h),5.16(s,2h),5.12(d,j＝14.0hz,1h)。
用于分离8对映异构体的手性制备hplc法(制备8(+))：
将8的对映异构体(300mg，0.51mmol)通过制备高效液相色谱(
8-(+)的分析数据：
1h-nmr(400mhz,cdcl3):δ8.76(s,1h),8.62(s,1h),7.84(d,j＝8.0hz,1h),7.70(d,j＝8.0hz,2h),7.69-7.51(m,3h),7.47(d,j＝7.5hz,2h),7.33-7.27(m,2h),6.96(d,j＝7.5hz,2h),6.78-6.73(m,1h),6.69-6.64(m,1h),5.60(d,j＝14.0hz,1h),5.16(s,2h),5.12(d,j＝14.0hz,1h)。
手性hplc纯度：99.74％eert＝18.11min(
旋光度[α]d20：+27.00°(c＝0.1％于meoh中)。质量:m/z585[m+h]+。hplc:98.7％。
路线6
实施例9
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((4-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(9)
在0℃在惰性气氛下向4-溴苯甲醛(p)(2.0g，10.81mmol)在dme(20ml)中的搅拌溶液中添加cf3tms(1.4ml，16.2mmol)和csf(1.64g，10.81mmol)。将所得的反应混合物在rt搅拌16h；反应进程通过tlc监测。然后将反应混合物用1nhcl水溶液(8ml)淬灭并且在rt继续搅拌另外1h。将挥发物减压蒸发；将残余物用水(100ml)稀释并用dcm(2x100ml)萃取。将合并的有机层用水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗化合物通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5-6％etoac/己烷)得到q(0.65g，2.54mmol，23.5％)，其为黄色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.54(d,j＝9.0hz,2h),7.36(d,j＝9.0hz,2h),5.01-4.98(m,1h),2.87(bs,oh)。
在rt在惰性气氛下向q(0.45g，1.76mmol)在et3n(5ml)中的搅拌溶液中添加tms-乙炔(0.33ml，2.65mmol)、pd(pph3)2cl2(41mg，0.035mmol)和cui(11mg，0.053mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至75℃，搅拌16h；反应进程通过tlc监测。然后将反应混合物冷却至rt，用水(50ml)稀释并用et2o(2x50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5％etoac/己烷)得到r(0.4g，1.47mmol，83％)，其为棕色浆状物。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.56(d,j＝8.8hz,2h),7.37(d,j＝8.8hz,2h),5.04-5.01(m,1h),2.68(bs,oh),0.26(s,9h)。
在0℃向化合物r(0.4g，1.47mmol)在thf(3ml)中的搅拌溶液中逐滴添加tbaf(1.5ml，1.47mmol，1m于thf中)并搅拌1h；反应进程通过tlc监测。将挥发物减压蒸发得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5％etoac/己烷)得到s(0.25g，1.25mmol，85％)，其为棕色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.53(d,j＝8.0hz,2h),7.36(d,j＝8.0hz,2h),5.04-5.02(m,1h),3.11(s,1h),2.62(bs,oh)。
在-78℃在惰性气氛下向s(0.1g，0.5mmol)在et2o(6ml)中的搅拌溶液中添加n-buli(0.7ml，1.1mmol；1.6m于己烷中)。在搅拌45min之后，逐滴添加n-bu3sncl(0.27ml，1.0mmol)并在-78℃搅拌另外10min。使所得的反应混合物温热至rt并继续搅拌另外2h；反应进程通过tlc监测。然后将反应用nh4cl水溶液(20ml)淬灭并用etoac(2x25ml)萃取。将合并的有机层用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到t(0.3g，粗品)，其为黄色浆状物。这用于下一步骤而不经进一步纯化。
在rt向化合物c(10.0g，27.62mmol)在dmf(20ml)中的搅拌溶液中添加1h-四唑(2.85g，41.43mmol)，随后添加k2co3(3.81g，27.62mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至65℃并搅拌16h；反应进程通过tlc监测。将反应用冰冷水(250ml)稀释并用etoac(2x250ml)萃取。将合并的有机层用水(200ml)、盐水(200ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：40％etoac/己烷)得到u(5.20g，12.03mmol，43.5％)，其为淡黄色固体。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.73(s,1h),8.62(s,1h),7.95(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),7.46(d,j＝8.0hz,1h),7.31-7.27(m,1h),6.86(s,oh),6.77-6.73(m,1h),6.70-6.66(m,1h),5.60(d,j＝14.5hz,1h),5.11(d,j＝14.5hz,1h)。
用于分离u的对映异构体的手性制备hplc法(制备u(-))：
将u的对映异构体(5.20g，12.03mmol)通过正相制备高效液相色谱(chiralpakia,250x20mm,5μ；使用(a)正己烷、(b)etoh(a:b::90:10)作为流动相；流速：15ml/min)分离得到u-(-)(2.5g)，其为灰白色固体。
u-(-)的分析数据：
手性hplc：99.46％eert＝20.05min(chiralpakia,250x4.6mm,5μ；流动相(a)正己烷、(b)乙醇(a:b:90:10)；流速：1.00ml/min)。
旋光度[α]d25：-16.48°(c＝0.1％于meoh中)。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.73(s,1h),8.62(s,1h),7.95(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),7.46(d,j＝8.0hz,1h),7.31-7.27(m,1h),6.86(s,oh),6.77-6.73(m,1h),6.70-6.66(m,1h),5.60(d,j＝14.5hz,1h),5.11(d,j＝14.5hz,1h).质量:m/z430[m-2]-。hplc:99.7％。
在rt向t(0.43g，粗品)在1,4-二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中添加u-(-)(0.18g，0.42mmol)并用氩净化5min。在rt向所得的反应混合物中添加pd(pph3)4(24mg，0.03mmol)并用氩净化另外10min。将所得的反应混合物逐渐加热至90℃并搅拌2h；反应进程通过tlc监测。然后将反应混合物冷却至rt；将挥发物减压蒸发得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：40％etoac/己烷)得到(90mg，粗品)，其为棕色固体。
用于分离u的对映异构体的手性制备hplc法(制备9(-))：
将9的对映异构体(35mg)通过正相制备高效液相色谱(chiralpakia,250x20mm,5μ；使用(a)0.1％dea/正己烷、(b)etoh:meoh(80:20)(a:b:80:20)作为流动相；流速：15ml/min)分离得到9(-)(15mg)，其为灰白色固体。
9-(-)的分析数据：
手性hplc：100％eert＝19.56min(chiralpakia,250x4.6mm,5μ；流动相(a)0.1％dea/正己烷、(b)etoh:meoh(80:20)(a:b::80:20)；流速：1.00ml/min)
旋光度[α]d20：+2.16°(c＝0.1％于meoh中)。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.66(s,1h),7.90(d,j＝8.4hz,1h),7.60-7.51(m,5h),7.34-7.28(m,1h),6.79-6.73(m,1h),6.67-6.65(m,1h),5.61(d,j＝14.4hz,1h),5.13(d,j＝14.4hz,1h),5.09-5.06(m,1h),2.98(bs,oh).质量:m/z552.1[m+h]+。hplc:99.5％。
路线7
实施例10
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((1-甲基-1h-吡咯-3-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(10)
在-78℃向1h-吡咯(v)(3.0g，44.7mmol)在thf(100ml)中的搅拌溶液中添加n-buli(30.7ml，49.1mmol；于己烷中的1.6m溶液)并在氩氛下在相同的温度保持30min。在-78℃向反应混合物中添加三异丙基氯硅烷(9.56ml，44.7mmol)并使所得的反应混合物温热至rt然后额外搅拌30min。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物用饱和nh4cl水溶液淬灭然后用etoac(2×100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到w(6.5g，29.14mmol，65％)，其为无色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ6.79(s,2h),6.31(s,2h),1.52-1.42(m,3h),1.09(d,j＝7.5hz,18h)。
在-25℃在45min内向化合物w(3.0g，13.45mmol)和hg(oac)2(4.7g，14.84mmol)在dcm(200ml)中的搅拌溶液中逐滴添加碘(3.41g，13.45mmol)在dcm(300ml)中的溶液，然后在氩氛下在相同的温度保持5h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物减压浓缩得到粗x。将粗材料与己烷(15ml)研磨，并将所得的材料(2.1g)直接用于下一反应而不经进一步纯化。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ6.64(s,1h),6.36(s,1h),6.31(s,1h),1.53-1.25(m,3h),1.09(d,j＝7.5hz,18h)。
在rt在惰性气氛下向环氧锡化合物g(1.0g，粗品)在1,4-二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中添加化合物x(936mg，粗品)，随后添加pd(pph3)4(193mg，0.167mmol)。将所得的溶液用氩气净化15min。将反应混合物缓慢加热至90℃然后保持3h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物冷却至rt并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5％etoac/己烷)得到y(90mg)，其为无色半固体。该化合物含有一定量的锡杂质，其直接用于下一步骤而不经任何进一步的纯化。lc-ms(esi):m/z529[m+h]+在rt6.06min，纯度为67.2％。
在0℃在惰性气氛下向化合物y(600mg，混合物)在thf(20ml)的搅拌溶液中添加tbaf(1.1ml，1.13mmol)。使反应混合物温热至rt并保持30min。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物用水(20ml)稀释并用etoac(2×30ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(40ml)、盐水(40ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(15-20％etoac/己烷梯度)得到化合物z(200mg，0.53mmol)，其为淡黄色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.72(s,1h),8.38(s,nh),7.78(dd,j＝8.5,1.5hz,1h),7.40(d,j＝8.5hz,1h),7.38-7.33(m,1h),7.13(s,1h),6.84-6.71(m,3h),6.43(s,1h),3.46(d,j＝5.0hz,1h),2.97(d,j＝5.0hz,1h)。ms(ei):m/z373[m+h]+。
在rt在惰性气氛下向化合物z(100mg，0.26mmol)在acn(10ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(111mg，0.80mmol)。在搅拌30min之后，将碘甲烷(0.1ml，1.3mmol)在rt缓慢添加至反应混合物并将所得的反应混合物加热至80℃然后搅拌6h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物冷却至rt并减压浓缩。将所得的残余物溶于etoac(25ml)，用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(10-15％etoac/己烷梯度)得到化合物aa(50mg，0.12mmol，48％)，其为棕色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.70(s,1h),7.76(d,j＝8.0hz,1h),7.39(d,j＝8.0hz,1h),7.36-7.33(m,1h),6.93(s,1h),6.84-6.81(m,1h),6.75-6.71(m,1h),6.56(s,1h),6.33(s,1h),3.67(s,3h),3.46(d,j＝5.0hz,1h),2.97(d,j＝5.0hz,1h)。
在rt在惰性气氛下向化合物aa(100mg，0.25mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(35mg，0.25mmol)，随后添加1h-四唑(27mg，0.38mmol)。然后将反应混合物加热至65℃，之后搅拌16h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物冷却至rt并减压浓缩。将所得的残余物溶于etoac(30ml)，用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：30-35％etoac/己烷梯度)得到10(23mg，0.05mmol，20％)，其为无色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.57(s,1h),7.79(dd,j＝8.5,1.5hz,1h),7.49(s,oh),7.48(d,j＝8.5hz,1h),7.30-7.27(m,1h),6.92(s,1h),6.76-6.72(m,1h),6.66-6.63(m,1h),6.56(s,1h),6.31(s,1h),5.63(d,j＝14.0hz,1h),5.08(d,j＝14.0hz,1h),3.67(s,3h).ms(ei):m/z457[m+h]+。hplc:97.17％。
路线8
实施例11
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)噻吩-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(11)
在rt向铜粉(2.07g，33.0mmol)在dmso(5ml)中的搅拌混悬液中添加溴二氟乙酸乙酯(2.0ml，16.52mmol)然后在惰性气氛下保持搅拌1h。向其中添加化合物ab(2.0g，8.26mmol)并在rt搅拌10h。在反应完成之后(通过tlc监测)，将反应用饱和nh4cl水溶液(30ml)淬灭并用dcm(3x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(0-2％etoac/己烷梯度)得到化合物ac(0.56g，1.96mmol，23.7％)，其为棕色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.17(d,j＝4.0hz,1h),7.02(d,j＝4.0hz,1h),4.39(q,j＝7.0hz,2h),1.38(t,j＝7.0hz,3h)。
在-78℃向1-溴-2,4-二氟苯ac(0.25ml,1.96mmol)在et2o(10ml)中的搅拌溶液中添加n-buli(1.3ml，1.96mmol；1.6m于己烷中)并在惰性气氛下搅拌30min。在-78℃将酯ac(560mg，1.96mmol)在et2o(2ml)中的溶液添加至反应混合物并继续搅拌另外2h。在反应完成之后(通过tlc监测)，将反应混合物用饱和nh4cl溶液(15ml)淬灭并用etoac(3x20ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(30ml)、盐水(30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(15-20％etoac/己烷梯度)得到酮ad(400mg，1.13mmol，57.6％)，其为棕色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.86-7.81(m,1h),7.10(d,j＝4.0hz,1h),7.04(d,j＝4.0hz,1h),7.01-6.98(m,1h),6.91-6.84(m,1h)。ms(ei):m/z354[m+h]+。
在-5℃向酮ad(430mg，1.218mmol)在et2o(10ml)中的搅拌溶液中添加新鲜制备的重氮甲烷[通过将nmu(627mg，6.09mmol)在0℃溶于10％koh水溶液(40ml)与et2o(40ml)的1:1混合物中，然后分离并使用koh丸粒干燥有机层而制备]并搅拌2h。使所得的反应混合物温热至rt并继续搅拌另外3h。反应进程通过tlc监测。将反应混合物减压浓缩并将所得的粗材料通过硅胶柱色谱纯化(20-25％etoac/己烷梯度)得到环氧化物ae(320mg，0.87mmol，71.5％)，其为棕色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.36-7.29(m,1h),6.98(d,j＝4.0hz,1h),6.94(d,j＝4.0hz,1h),6.87-6.76(m,2h),3.36(d,j＝5.0hz,1h),2.98(d,j＝5.0hz,1h)。ms(ei):m/z368[m]+。
在rt在惰性气氛下向环氧化物ae(320mg，0.87mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加1h-四唑(92mg，1.3mmol)，随后添加k2co3(120mg，0.87mmol)。将反应混合物逐渐加热至65℃并保持8h。反应进程通过tlc监测。在起始原料完全消耗之后，将反应混合物用冰冷水(20ml)稀释然后用etoac(3x30ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(30ml)、盐水(30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(40-45％etoac/己烷梯度)得到af(120mg，0.27mmol，31.5％)，其为棕色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.61(s,1h),7.39-7.35(m,1h),6.93(d,j＝4.0hz,1h),6.83(d,j＝4.0hz,1h),6.79-6.75(m,2h),5.60(d,j＝14.0hz,1h),5.00(d,j＝15.0hz,1h),4.39(s,oh)。ms(ei):m/z435[m-h]-。hplc:91.2％。
在rt在惰性气氛下将1-乙炔基-4-氟苯(22mg，0.18mmol)、cui(2mg，0.01mmol)、pph3(3mg，0.01mmol)相继添加至af(50mg，0.114mmol)在et3n-dmf(2:1；6ml)中的搅拌溶液中。将所得的混合物通过用氩净化15min来脱气。向其中添加pd(pph3)2cl2(8mg，0.01mmol)并再次用氩净化15min。然后将所得的混合物加热至90℃并在相同的温度保持16h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物冷却至rt，用水(10ml)稀释并用etoac(3x25ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(30ml)、盐水(30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗产物通过硅胶柱色谱纯化(40-45％etoac/己烷梯度)得到11(35mg)，hplc纯度为79％。
注意：上述反应分两批进行(50mgx2)然后纯化。将所得的作为混合物的产物(70mg)通过制备hplc进一步纯化得到11(35mg，0.073mmol，32％)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.64(s,1h),7.50-7.47(m,2h),7.36-7.29(m,1h),7.09-7.03(m,3h),6.97(d,j＝5.0hz,1h),6.80-6.74(m,2h),5.63(d,j＝15.0hz,1h),5.03(d,j＝15.0hz,1h),4.41(s,oh)。ms(ei):m/z475[m-h]-。hplc:98.43％。
路线9
实施例12
2-(2,4-二氟苯基)-1-(6-((3,4-二氟苯基)乙炔基)哒嗪-3-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(12)
在rt向化合物ag(6.0g，31.08mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中添加三甲基硅烷基乙炔(6ml，42.4mmol)、et3n(6.0ml，43.2mmol)，随后添加cui(344mg，1.81mmol)并用氩净化10min。在rt向该混合物中添加pd(pph3)2cl2(1.3g，1.85mmol)并在惰性气氛下继续搅拌16h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用etoac(3x75ml)洗涤硅藻土饼。将滤液用水(75ml)、盐水(75ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：己烷)得到化合物ah(5.8g，27.61mmol，88.8％)，其为深棕色液体。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.28-7.20(m,1h),7.20-7.17(m,1h),7.10-7.05(m,1h),0.22(s,9h)
在0℃在惰性气氛下向化合物ah(5.8g，27.61mmol)在thf(50ml)中的搅拌溶液中添加tbaf(27ml，27.61mmol；thf中的1m溶液)并在相同的温度搅拌1h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc)，将挥发物减压浓缩；将所得的残余物用et2o(100ml)稀释，用水(100ml)、盐水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品ai(3.4g)，其为棕色液体。将粗产物用于下一步骤而不经进一步纯化。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.31-7.21(m,2h),7.13-7.08(m,1h),3.06(s,1h)
在rt在惰性气氛下向化合物aj(3.0g，12.61mmol)在thf(30ml)中的搅拌溶液中添加化合物ai(2.78g，粗品)，随后添加cui(0.12g，0.63mmol)、pd(pph3)2cl2(0.44g，0.63mmol)和et3n(3ml)并搅拌16h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc)，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用etoac(3x75ml)洗涤硅藻土饼。将滤液用水(75ml)、盐水(75ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗化合物通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5％etoac/己烷)得到化合物ak(1.3g，4.40mmol，35％)，其为棕色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.67(d,j＝8.5hz,1h),7.48(d,j＝8.5hz,1h),7.46-7.42(m,1h),7.39-7.37(m,1h),7.22-7.17(m,1h)。
在rt向铜-青铜(3.23g，17.62mmol)在dmso(20ml)中的搅拌混悬液中添加溴二氟乙酸乙酯(1.13ml，8.81mmol)并在惰性气氛下搅拌1h。将化合物ak(1.3g，4.40mmol)在dmso(5ml)中的溶液添加至反应混合物并将搅拌在rt继续另外16h。在起始原料消耗之后(通过tlc监测)，将反应用nh4cl水溶液(20ml)稀释，通过硅藻土垫过滤并用dcm(3x55ml)洗涤硅藻土饼。将所收集的滤液用水(30ml)、盐水(30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过柱色谱纯化(洗脱液：20％etoac/己烷)得到酯al(550mg，1.62mmol，37％)，其为棕色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.88(d,j＝8.5hz,1h),7.78(d,j＝8.5hz,1h),7.42-7.39(m,2h),7.24-7.20(m,1h),4.43(q,j＝7.0hz,2h),1.36(t,j＝7.0hz,3h)。
在-78℃向1-溴-2,4-二氟苯(0.19ml，1.62mmol)在et2o(20ml)中的搅拌溶液中逐滴添加n-buli(1.6ml，2.43mmol；己烷中1.6m)并搅拌30min。在-78℃将化合物al(550mg，1.62mmol)在et2o(10ml)中的溶液添加至反应混合物并继续搅拌另外5min。在起始原料消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物用饱和nh4cl水溶液(20ml)淬灭并用etoac(3x25ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗化合物通过柱色谱纯化(洗脱液：10％etoac/己烷)得到酮am(420mg，1.03mmol，64％)，其为灰白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.18-8.14(m,1h),7.90(d,j＝9.0hz,1h),7.80(d,j＝9.0hz,1h),7.46-7.39(m,2h),7.24-7.18(m,1h),7.05-7.02(m,1h),6.83-6.79(m,1h)。
在0℃向化合物am(420mg，1.03mmol)在et2o(10ml)中的搅拌溶液中添加新鲜制备的重氮甲烷[通过将nmu(527mg，5.17mmol)在0℃溶于10％koh水溶液(100ml)和et2o(100ml)中，然后分离并使用koh丸粒干燥有机层而制备]并在0℃继续搅拌30min。使所得的反应混合物温热至rt并搅拌16h。反应进程通过tlc监测。将反应混合物减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：20％etoac/己烷)得到化合物an(350mg)，其为灰白色固体。1h-nmr显示出所有的特征峰以及其它较少杂质。将该材料直接用于下一反应而不经进一步纯化。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.09(d,j＝8.0hz,1h),7.67(d,j＝8.0hz,1h),7.45-7.40(m,3h),7.24-7.19(m,1h),6.88-6.85(m,1h),6.79-6.76(m,1h),3.51(d,j＝5.0hz,1h),3.04(d,j＝5.0hz,1h)。
在rt在惰性气氛下向化合物an(300mg，混合物)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加1h-四唑(75mg，1.07mmol)，随后添加k2co3(99mg，0.71mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至65℃并搅拌16h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物冷却至rt；用冰冷水(50ml)稀释并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机层用水(2x50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗化合物通过制备hplc纯化得到12(25mg，0.05mmol)，其为棕色固体。1hnmr(500mhz,cd3od):δ8.98(s,1h),7.95(d,j＝8.5hz,1h),7.78(d,j＝8.5hz,1h),7.64-7.60(m,1h),7.51-7.49(m,1h),7.40-7.35(m,1h),7.17-7.12(m,1h),6.98-6.95(m,1h),6.76-6.73(m,1h),5.82(d,j＝14.5hz,1h),5.25(d,j＝14.5hz,1h)。ms(esi):491[m+h]+。hplc:97.19％
路线10
实施例13
4-(6-(2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1h-四唑-1-基)丙基)吡啶-3-基)丁-3-炔-2-醇(13)
在-78℃向炔f(800mg，2.6mmol)在et2o(50ml)中的搅拌溶液中添加n-buli(1.63ml，2.6mmol；己烷中的1.6m溶液)并在相同的温度保持30min。在-78℃向所得的反应混合物中添加新鲜蒸馏的乙醛(0.14ml，3.1mmol)。在-78℃搅拌2h之后，使反应混合物温热至rt并搅拌另外2h。反应进程通过tlc监测。在起始原料完全消耗之后，将反应混合物用饱和nh4cl溶液(10ml)淬灭然后用etoac(2×50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(10-15％etoac/己烷梯度)得到化合物ao(600mg，1.7mmol，65％)，其为无色半固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.68(s,1h),7.75(dd,j＝8.5,1.5hz,1h),7.42(d,j＝8.5hz,1h),7.37-7.33(m,1h),6.84-6.81(m,1h),6.75-6.71(m,1h),4.81-4.76(m,1h),3.45(d,j＝5.0hz,1h),2.97(d,j＝5.0hz,1h),2.04(s,oh),1.58(d,j＝7.0hz,3h)。ms(ei):m/z353[m+2]+。
在rt在惰性气氛下向化合物ao(500mg，1.4mmol)在dmf(25ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(196mg，1.4mmol)，随后添加1h-四唑(150mg，2.1mmol)。然后将反应混合物加热至65℃并搅拌16h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物冷却至rt并减压浓缩。将所得的残余物溶于etoac(40ml)，用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(30-35％etoac/己烷梯度)得到13(250mg，0.59mmol，41％)，其为白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.74(s,1h),8.54(s,1h),7.80(d,j＝8.0hz,1h),7.51(d,j＝8.0hz,1h),7.30-7.27(m,1h),7.22(s,oh),6.77-6.73(m,1h),6.67-6.64(m,1h),5.58(d,j＝14.5hz,1h),5.12(d,j＝14.5hz,1h),4.79-4.76(m,1h),1.93(s,oh),1.56(d,j＝7.0hz,3h)。ms(ei):m/z421[m]+。hplc:98.02％。
路线11
实施例14
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((5-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)噻吩-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(14)
在0℃向5-溴噻吩-2-甲醛ap(5.0g，26.1mmol)在dme(30ml)中的搅拌溶液中添加csf(3.9g，26.1mmol)并在惰性气氛下搅拌10min。将cf3tms(6.2ml，39mmol)在0℃添加至反应混合物并在rt继续搅拌另外18h。反应进程通过tlc监测。将反应混合物用1nhcl溶液(20ml)淬灭并用etoac(3x100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml)、盐水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：4-5％etoac/己烷)得到化合物aq(5.0g，19.15mmol，73.3％)，其为棕色油。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ6.99(d,j＝4.0hz,1h),6.93(d,j＝4.0hz,1h),5.21-5.16(m,1h),3.16(d,j＝4.5hz,oh)。
在rt向化合物g(1.5g，粗品)在1,4-二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中添加化合物aq(985mg，3.77mmol)并用氩净化20min。向所得的反应混合物中添加pd(pph3)4(288mg，0.25mmol)并且在rt进一步脱气15min。将所得的反应混合物逐渐加热至90℃并搅拌5h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物冷却至rt，通过硅藻土垫过滤并将硅藻土饼用etoac(3x30ml)洗涤；将滤液减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：12％etoac/己烷)得到化合物ar(800mg)，其为无色液体。该化合物含有一定量的锡杂质，其直接用于下一步骤而不经任何进一步的纯化。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.74(s,1h),7.83(d,j＝7.5hz,1h),7.46(d,j＝7.5hz,1h),7.39-7.34(m,1h),7.27(d,j＝3.5hz,1h),7.12(d,j＝3.5hz,1h),6.85-6.82(m,1h),6.76-6.73(m,1h),5.28(d,j＝6.0hz,1h),3.47(d,j＝5.0hz,1h),2.98(d,j＝5.0hz,1h),2.91(s,oh)。
在rt在惰性气氛下向化合物ar(800mg，粗品)在dmf(8ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(224mg，1.63mmol)，随后添加1h-四唑(172mg，2.45mmol)。然后将反应混合物加热至65℃，之后搅拌16h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物冷却至rt并减压浓缩。将所得的残余物溶于etoac(50ml)，用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：35％etoac/己烷)得到14(280mg，0.50mmol)，其为淡黄色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.76(s,1h),8.63(s,1h),7.87(d,j＝8.5hz,1h),7.55(d,j＝8.5hz,1h),7.32-7.27(m,2h),7.21(s,oh),7.13(d,j＝4.0hz,1h),6.78-6.74(m,1h),6.68-6.65(m,1h),5.61(d,j＝14.0hz,1h),5.30-5.28(m,1h),5.13(d,j＝14.0hz,1h),3.08(s,oh)。ms(ei):m/z558[m+h]+。hplc:97.43％。
路线12
实施例15
2-(2,4-二氟苯基)-1-(5-((3,4-二氟苯基)乙炔基)吡嗪-2-基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(15)
在rt向铜粉(1.48g，23.30mmol)在dmso(20ml)中的搅拌混悬液中添加溴二氟乙酸乙酯(1.6ml，11.65mmol)并在rt在惰性气氛下搅拌1h。将2-溴-5-氯吡嗪as(1.5g，7.77mmol)在dmso(5ml)中的溶液添加至反应混合物并在rt继续搅拌另外16h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc)，将反应用饱和nh4cl水溶液(100ml)稀释，通过硅藻土垫过滤并用dcm(3x75ml)洗涤硅藻土饼。将所收集的滤液用水(100ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5％etoac/己烷)得到酯at(1.0g，4.23mmol，54.5％)，其为淡黄色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.78(s,1h),8.62(s,1h),4.38(q,j＝7.0hz,2h),1.34(t,j＝7.0hz,3h)。
在-78℃向1-溴-2,4-二氟苯(0.816g，4.23mmol)在et2o(20ml)中的搅拌溶液中逐滴添加n-buli(2.64ml，4.23mmol；己烷中1.6m)并搅拌30min。将化合物at(1.0g，4.23mmol)在et2o(10ml)中的溶液在-78℃添加至反应混合物并继续搅拌另外2h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc)，将反应混合物用饱和nh4cl水溶液(50ml)淬灭并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)和盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5％etoac/己烷)得到酮au(1.0g，3.28mmol，77.6％)，其为淡黄色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.86(s,1h),8.56(s,1h),8.06-8.02(m,1h),7.05-7.01(m,1h),6.88-6.84(m,1h)。
在0℃向化合物au(1.0g，3.28mmol)在et2o(10ml)中的搅拌溶液中添加新鲜制备的重氮甲烷[通过将nmu(1.7g，16.49mmol)在0℃溶于10％koh水溶液(30ml)和et2o(30ml)，然后分离并使用koh丸粒干燥有机层而制备]并在相同的温度继续搅拌30min。使所得的反应混合物温热至rt并搅拌16h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：5％etoac/己烷)得到环氧化物av(0.8g，2.51mmol，76.5％)，其为棕色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.62(s,1h),8.51(s,1h),7.42-7.37(m,1h),6.90-6.86(m,1h),6.79-6.75(m,1h),3.43(d,j＝5.0hz,1h),3.00(d,j＝5.0hz,1h)。
在rt向化合物ai(400mg，1.25mmol)、化合物av(277mg，2.0mmol)、et3n(0.4ml，3.12mmol)在dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加cui(12mg，0.08mmol)然后用氩净化10min。向其中添加pd(pph3)2cl2(44mg，0.08mmol)并将所得的混合物逐渐加热至80℃并搅拌4h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)；将反应混合物冷却至rt；通过硅藻土垫过滤并用etoac(4x50ml)洗涤硅藻土饼。将滤液用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：10％etoac/己烷)得到化合物aw(180mg，0.42mmol，34％)，其为棕色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.74(s,1h),8.70(s,1h),7.47-7.39(m,3h),7.23-7.18(m,1h)6.89-6.86(m,1h),6.79-6.74(m,1h),3.46(d,j＝5.0hz,1h),3.01(d,j＝5.0hz,1h)。ms(ei):m/z421[m+h]+。
在rt在惰性气氛下向化合物aw(180mg，0.42mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(59mg，0.42mmol)，随后添加1h-四唑(45mg，0.64mmol)。将反应混合物逐渐加热至65℃然后保持16h。反应进程通过tlc监测。在起始原料完全消耗之后，将反应混合物冷却至rt，用冰冷水(50ml)稀释并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：35％etoac/己烷)得到15(25mg，0.05mmol，12％)，其为棕色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.71(s,1h),8.62(s,1h),7.46-7.38(m,2h),7.38-7.18(m,2h),6.81-6.77(m,1h),6.74-6.71(m,1h),5.64(d,j＝15.0hz,1h),5.56(s,oh),5.17(d,j＝15.0hz,1h)。ms(ei):491[m+h]+。hplc:92.9％。
路线13
实施例16
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)-1-(5-((5-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)呋喃-2-基)乙炔基)吡啶-2-基)丙-2-醇(16)
在0℃向5-溴呋喃-2-甲醛ax(250mg，1.43mmol)在dme(10ml)中的搅拌溶液中添加csf(108mg，0.71mmol)并在惰性气氛下搅拌10min。将cf3tms(0.27ml，1.71mmol)在0℃添加至反应混合物并在0℃-rt继续搅拌18h。反应进程通过tlc监测。将反应混合物用1nhcl(10ml)淬灭并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品ay(200mg)，其直接用于下一反应而不经纯化。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ6.51(d,j＝3.0hz,1h),6.35(d,j＝3.0hz,1h),5.03-4.99(m,1h),2.78(bs,oh)。
在rt向化合物g(500mg，粗品)在1,4-二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中添加化合物ay(309mg，粗品)并用氩净化15min。向其中添加pd(pph3)4(97mg，0.08mmol)并进一步脱气15min。将所得的反应混合物逐渐加热至80℃并搅拌3h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物冷却至rt，通过硅藻土垫过滤并用etoac(2x50ml)洗涤硅藻土饼并将滤液减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：10-12％etoac/己烷)得到环氧化物az(200mg，混合物)，其为无色油。1h-nmr显示出所有特征峰以及小锡杂质峰。将产物直接用于下一反应而不经进一步纯化。1h-nmr(500mhz,cdcl3):δ8.77(s,1h),7.81(d,j＝8.5hz,1h),7.42(d,j＝8.5hz,1h),7.37-7.32(m,1h),6.79-6.75(m,3h),6.60(d,j＝3.5hz,1h),4.90-5.10(m,1h),3.46(d,j＝5.0hz,1h),2.98(d,j＝5.0hz,1h),2.75(d,j＝7.0hz,oh)。
在rt在惰性气氛下向环氧化物az(200mg，粗品)在dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加1h-四唑(44.5mg，0.63mmol)，随后添加k2co3(58.6mg，0.42mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至65℃并搅拌16h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物用冰冷水(50ml)稀释并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：40％etoac/己烷)得到16(20mg，0.037mmol)，其为灰白色固体。1h-nmr(500mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.64(s,1h),7.89(d,j＝8.5hz,1h),7.56(d,j＝8.5hz,1h),7.32-7.29(m,1h),7.10(s,oh),6.78-6.65(m,3h),6.60(d,j＝3.5hz,1h),5.59(d,j＝14.5hz,1h),5.13(d,j＝14.5hz,1h),5.10-5.07(m,1h),2.78(d,j＝7.0hz,oh)。
质量:m/z542[m+h]+。hplc:95.59％。
路线14
实施例17
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-(3-(3-氟苯基)丙-1-炔-1-基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(17)
在0℃在惰性气氛下向三甲基硅烷基乙炔(1.49ml，10.47mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中添加n-buli(6ml，9.67mmol，己烷中1.6m)。在搅拌1h之后，在0℃添加3-氟苯甲醛ba(1.0g，8.06mmol)并继续搅拌另外2h。反应进程通过tlc监测。将反应用饱和nh4cl水溶液淬灭并用dcm(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(5-10％etoac/己烷梯度)得到化合物bb(1.1g，4.95mmol，61.5％)，其为黄色浆状物。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.37-7.28(m,3h),7.04-6.99(m,1h),5.44(d,j＝6.4hz,1h),2.23(d,j＝6.4hz,1h),0.21(s,9h)。
在0℃在惰性气氛下向化合物bb(1.1g，4.95mmol)在meoh(12ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(1.02g，7.43mmol)。在搅拌1h之后，反应进程通过tlc监测。将反应用水(10ml)淬灭并用et2o(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品bc(600mg)。将粗材料用于下一步骤而不经进一步纯化。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.38-7.26(m,3h),7.05-7.02(m,1h),5.47(dd,j＝4.5,2.0hz,1h),2.69(d,j＝2.0hz,1h),2.33(d,j＝4.5hz,1h)。
向化合物u(250mg，0.578mmol)在dmf(5ml)中的搅拌溶液中添加化合物bc(140mg，1.5eq)并用氩气净化20min。在rt向其中添加cui(11mg，0.05mmol)、pd(pph3)4(34mg，0.03mmol)，随后添加et3n(0.1ml，0.69mmol)，然后再次用氩气净化15min。将所得的混合物逐渐加热至90℃并保持5h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc监测)，将反应混合物冷却至rt，用水(20ml)稀释并用etoac(3x40ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗产物通过硅胶柱色谱纯化(40-45％etoac/己烷梯度)得到化合物bd(180mg，0.35mmol，62％)，其为淡黄色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.74(s,1h),8.58(s,1h),7.85(d,j＝8.0hz,1h),7.67-7.64(m,1h),7.54-7.28(m,4h)7.16(s,oh),7.08-7.04(m,1h),6.78-6.72(m,1h),6.68-6.63(m,1h),5.71(d,j＝5.2hz,1h),5.59(d,j＝14.5hz,1h),5.12(d,j＝14.5hz,1h),2.74(d,j＝5.2hz,1h)。ms(ei):m/z502[m+h]+。
在0℃在惰性气氛下向化合物bd(110mg，0.22mmol)在acn(10ml)中的搅拌溶液中添加et3sih(0.052ml，0.33mmol)，随后添加bf3.et2o(0.04ml，0.33mmol)并在相同的温度保持5h。反应进程通过tlc监测。将反应用冰冷水(10ml)淬灭并用etoac(2x30ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(40ml)、盐水(40ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗产物通过硅胶柱色谱纯化(使用40-45％etoac/己烷25-30％etoac/己烷梯度洗脱)得到17(8.0mg)，其为灰白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.76(s,1h),8.48(s,1h),7.73(d,j＝7.2hz,1h),7.48(d,j＝7.2hz,1h),7.38-7.24(m,2h),7.14-7.09(m,1h),7.02-6.92(m,2h),6.78-6.72(m,1h),6.67-6.62(m,1h),6.41(s,oh),5.60(d,j＝14.5hz,1h),5.09(d,j＝14.5hz,1h),3.53(s,2h)。hplc:79.36％。lc-ms(esi):m/z488在rt4.01min，纯度为88％。
路线15
实施例18
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-(3-(4-氟苯氧基)丙-1-炔-1-基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(18)
在0℃在惰性气氛下向4-氟苯酚(1.0g，8.9mmol)在dmf(25ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(1.84g，13.3mmol)，随后逐滴添加炔丙基溴(1.1ml，9.8mmol；甲苯中80wt.％)。使所得的反应混合物温热至rt然后搅拌8h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物用冰冷水(40ml)淬灭并用etoac(2×40ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(40ml)、盐水(40ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(0-5％etoac/己烷梯度)得到化合物be(0.6g，4.0mmol，45％)，其为无色浆状物。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.00-6.91(m,4h),4.65(d,j＝2.5hz,2h),2.51(t,j＝2.5hz,1h)。ms(ei):m/z151[m+h]+。
将化合物u(50mg，0.11mmol)、化合物be(28mg，0.18mmol)、pd(dppf)cl2.ch2cl2复合物(8.1mg，0.011mmol)、三苯基瞵(3.0mg，0.011mmol)和cui(2.2mg，0.011mmol)在et3n-dmf(2:1；6ml)中的搅拌混合物通过用氩净化15min而脱气。将所得的反应混合物缓慢加热至90℃并继续搅拌8h。在起始原料完全消耗之后(通过tlc)，将反应混合物冷却至rt，通过硅藻土垫过滤并用etoac(3x20ml)洗涤硅藻土饼。将滤液用水(40ml)稀释并用etoac(2×30ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(30ml)、盐水(30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(25-30％etoac/己烷梯度)得到18(25mg，0.049mmol，45％)，其为棕色半固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.73(s,1h),8.54(s,1h),7.80(d,j＝8.0hz,1h),7.51(d,j＝8.0hz,1h),7.30-7.28(m,1h),7.14(s,oh),7.03-6.99(m,2h),6.96-6.93(m,2h),6.76-6.73(m,1h),6.67-6.64(m,1h),5.58(d,j＝14.0hz,1h),5.11(d,j＝14.0hz,1h),4.89(s,2h)。ms(ei):m/z502[m+h]+。hplc:97.55％。
路线16
实施例19
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((1-(4-氟苯基)哌啶-4-基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-醇(19)
向哌啶-4-基甲醇(750mg，6.51mmol)在dcm(20ml)中的混悬液中添加4-氟苯基硼酸bf(794mg，6.51mmol)、cu(oac)2(1.18g，6.51mmol)、吡啶(2.6ml，32.55mmol)、粉末状
将草酰氯(0.42ml，4.78mmol)在dcm(50ml)中的搅拌溶液冷却至-78℃，并在氮氛下逐滴添加dmso(0.74ml，9.47mmol)。在搅拌15min之后，在-78℃缓慢添加化合物bg(500mg，粗品)在dcm(10ml)中的溶液，然后在相同的温度保持15min。向其中添加et3n(1.25ml，9.47mmol)并在-78℃继续搅拌另外30min。使所得的混合物温热至rt；反应进程通过tlc监测。将反应混合物用水(50ml)稀释并用dcm(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用饱和na2co3水溶液(50ml)、水(50ml)、盐水(30ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品bh(500mg)。将粗材料用于下一步骤而不经进一步纯化。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.71(s,1h),6.98-6.91(m,4h),3.50-3.45(m,2h),2.84-2.78(m,2h),2.39-2.36(m,1h),2.07-2.04(m,2h),1.87-1.77(m,2h)。
在rt在惰性气氛下向化合物bh(500mg，粗品)在meoh(15ml)中的搅拌溶液中添加k2co3(833mg，6.03mmol)，随后添加bestmann试剂(695mg，3.62mmol)。将反应混合物在rt搅拌30min。在反应完成之后(通过tlc)，将挥发物减压移除得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：10％etoac/己烷)得到化合物bi(320mg，1.58mmol)，其为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ6.94-6.87(m,4h),3.38-3.33(m,2h),2.92-2.86(m,2h),2.57-2.53(m,1h),2.10(s,1h),2.00-1.96(m,2h),1.85-1.79(m,2h)。ms(ei):m/z204[m+h]+
在0℃向化合物bj(300mg，粗品)在dcm(20ml)中的搅拌溶液中添加et3n(0.28ml，1.20mmol)，随后添加tf2o(0.24ml,1.46mmol)并搅拌20min；反应进程通过tlc监测。将反应混合物用冰冷水(20ml)淬灭并用dcm(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品bk(360mg，粗品)。将粗材料用于下一步骤而不经进一步纯化。
在惰性气氛下向化合物bk(150mg，粗品)、化合物bi(84.3mg，0.417mmol)、et3n(0.15ml，0.62mmol)在dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加cui(3.3mg，0.017mmol)和pd(pph3)2cl2(24.4mg，0.034mmol)。将反应混合物在微波下逐渐加热20min至120℃。在起始原料完全消耗之后(通过tlc)，使反应混合物冷却至rt；通过硅藻土垫过滤并用etoac(4x25ml)洗涤硅藻土饼。将滤液用水(40ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：10％etoac/己烷)得到化合物bl(200mg，粗品)，其为淡黄色固体。
在rt在惰性气氛下向化合物bl(200mg，粗品)在dmf(10ml)中的搅拌溶液中添加1h-四唑(43.4mg，0.619mmol)，随后添加k2co3(57mg，0.413mmol)。将所得的反应混合物逐渐加热至65℃并搅拌16h。反应进程通过tlc监测。将反应混合物用冰冷水(50ml)稀释并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(40ml)、盐水(40ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将粗材料通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：40％etoac/己烷)得到19(60mg，0.108mmol)，其为浅黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.75(s,1h),8.52(s,1h),7.77(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),7.49(d,j＝8.4hz,1h),7.49(s,oh),7.32-7.27(m,1h),6.99-6.85(m,4h),6.81-6.72(m,1h),6.70-6.60(m,1h),5.59(d,j＝14.4hz,1h),5.10(d,j＝14.4hz,1h),3.42-3.36(m,2h),2.97-2.91(m,2h),2.81-2.76(m,1h),2.06-2.04(m,2h),1.93-1.87(m,2h)。ms(esi):m/z555[m+h]+。hplc:97.52％。
路线17
实施例20
1-(5-((4-((4-氰基苄基)氧基)苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-基磷酸二氢盐(20)
在rt向8(+)(400mg，0.686mmol)和1h-四唑(236mg，3.43mmol)在dcm(25ml)中的搅拌混悬液中添加二烯丙基-n,n-二异丙基亚磷酰胺(0.72ml，2.74mmol)在dcm(5ml)中的溶液并搅拌2h。在-5℃缓慢添加mcpba(472mg，2.74mmol)在dcm(5ml)中的溶液并搅拌1h。在起始原料完全消耗之后，将反应混合物用dcm(50ml)稀释，用5％na2s2o5水溶液(2x40ml)、10％nahco3水溶液(2x40ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗品。将残余物通过基于质量的制备hplc纯化得到化合物bm(250mg，0.336mmol，49％)，其为无色半固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ9.10(s,1h),8.75(s,1h),7.76(d,j＝8.0hz,1h),7.70(d,j＝8.0hz,2h),7.56-7.50(m,4h),7.46-7.42(m,1h),7.17(d,j＝8.0hz,1h),6.96(d,j＝8.0hz,2h),6.83-6.80(m,1h),6.66-6.62(m,1h),6.19(d,j＝16.0hz,1h),6.02-5.97(m,1h),5.91(d,j＝16.0hz,1h),5.85-5.79(m,1h),5.44(d,j＝17.0hz,1h),5.33-5.22(m,3h),5.16(s,2h),4.74(d,j＝4.0hz,2h),4.49-4.39(m,2h)。hplc:98.46％。
在0℃向化合物bm(220mg，0.295mmol)在thf(10ml)中的搅拌溶液中添加tpp(58mg，0.221mmol)，随后添加pd(pph3)4(27mg，0.023mmol)、et3n(0.08ml，0.59mmol)和1m乙酸溶液(1.47ml，1.47mmol)。将所得的混合物在rt搅拌16h；反应进程通过tlc监测。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用dcm(3x30ml)和etoh(3x10ml)硅藻土饼洗涤。将滤液减压浓缩得到粗品。将粗材料通过基于质量的制备hplc纯化得到20(70mg，0.105mmol，35.60％)，其为白色固体。1hnmr(400mhz,cd3od):δ9.33(s,1h),8.70(s,1h),7.92(d,j＝8.0hz,1h),7.75(d,j＝8.4hz,2h),7.64(d,j＝8.4hz,2h),7.51(d,j＝8.0hz,2h),7.45-7.39(m,1h),7.34-7.27(m,1h),7.05(d,j＝8.0hz,2h),6.95-6.89(m,1h),6.83-6.78(m,1h),6.21(d,j＝15.2hz,1h),5.94(d,j＝15.2hz,1h),5.21(s,2h).31pnmr(500mhz,cd3od):δ-6.98(s)。ms(esi):m/z665[m]+。hplc:97.83％。
路线18
实施例144
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-基醇2-氨基乙酸酯盐酸盐(144)
在0℃向3(+)(25mg，0.053mmol)在干thf(3ml)中的搅拌溶液中添加nah(5mg，0.21mmol)并在0℃在惰性气氛下搅拌2h。在0℃将n-boc-gly-osu(28.8mg，0.10mmol)在干thf(2ml)中的溶液添加至反应混合物并在相同的温度继续搅拌另外10h。反应进程通过tlc监测。将反应用冰冷水(10ml)淬灭然后用etoac(2x15ml)萃取。将合并的有机层用水(10ml)、盐水(10ml)洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩得到粗产物。
注意：反应以2x25mg批次进行，并且将所得的粗产物合并且通过制备tlc纯化得到bn(12mg，0.019mmol，18％)，其为淡黄色半固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ9.27(s,1h),8.82(s,1h),7.75(d,j＝8.5hz,1h),7.57-7.54(m,2h),7.40-7.39(m,1h),7.11-7.08(m,2h),6.99(d,j＝8.0hz,1h),6.93-6.91(m,1h),6.67-6.63(m,1h),6.05(d,j＝15.0hz,1h),5.68(d,j＝15.0hz,1h),5.09(bs,1h),4.19-4.14(m,1h),3.97-3.93(m,1h),1.45(s,9h)。ms(esi):m/z629[m+h]+。
在rt向化合物bn(18mg，0.028mmol)在1,4-二噁烷(1ml)中的搅拌溶液中逐滴添加1,4-二噁烷(0.5ml)中的4mhcl溶液并保持2h。反应进程通过tlc监测。将挥发物减压蒸发。将所得的粗品与二乙醚(3x3ml)研磨得到144(10mg，0.017mmol，62％)，其为淡黄色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ9.66(s,1h),8.82(s,1h),8.59(bs,3h),8.03(d,j＝7.6hz,1h),7.69-7.67(m,2h),7.44-7.42(m,1h),7.34-7.30(m,4h),7.12-7.10(m,1h),6.15(d,j＝15.6hz,1h),5.56(d,j＝15.6hz,1h),4.13(d,j＝17.6hz,1h),3.90(d,j＝17.6hz,1h)。ms(esi):m/z529[(m-hcl)+h]+。hplc:97.9％。
路线19
实施例145
(2s)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-(5-((4-氟苯基)乙炔基)吡啶-2-基)-3-(1h-四唑-1-基)丙-2-基醇2,6-二氨基己酸酯二盐酸盐(145)
1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ9.69(s,1h),8.86(s,1h),8.73(bs,3h),8.07(d,j＝8.0hz,1h),7.97(bs,3h),7.71-7.69(m,3h),7.33-7.21(m,4h),7.18-7.12(m,1h),6.15(d,j＝15.6hz,1h),5.63(d,j＝15.6hz,1h),4.25-4.20(m,1h),2.76-2.72(m,2h),1.90-1.83(m,2h),1.61-1.22(m,4h)。ms(esi):m/z600[(m-2hcl)+h]+。hplc:96.5％。
实施例21-166基本上根据以上合成步骤制备。下表包含实施例1-166的化合物信息和分析数据。
方法说明
方法m:
柱，类型，尺寸：
sunfirec-18(150x4.6mm,5μm)
流动相a：acn
流动相b：50mmnh4hco2
流速：1.0ml/min
方法n:
柱，类型，尺寸：
chiralpakia(250x10mm,5μm)
流动相a：15％etoh
流动相b：30％ipa
流动相c：55％己烷
流速：1.0ml/min
实施例167:金属酶活性
a.最小抑制浓度(mic)
使用标准化方法(clsim27-a2)，对化合物测定其抑制常见真菌菌株白色念珠菌的生长的能力。
在dmso中以1,600μg/ml的浓度制备测试化合物和标准品的储液(白色念珠菌)。在96孔板中，在rpmi+mops中制备化合物的11份连续的半数稀释物。检定浓度范围为1～0.001μg/ml(白色念珠菌)。制备白色念珠菌的细胞悬浮液，并以每毫升约3.7×103菌落形成单位(cfu/ml)的浓度加入每个孔中。所有测试均重复两次。将接种的板在35±1℃下孵育约48h。孵育完成后，视觉评价各个板的孔中真菌生长的存在。
对于氟康唑和测试化合物，mic是生长显著降低(降低约50％)的浓度。对于伏立康唑，mic是使白色念珠菌生长降低50％(根据clsi，m27-a2)的浓度。出于qc目的，在vor检定中包括克柔念珠菌(c.krusei)分离株atcc6258(4.0×103cfu/ml)。该分离株不表现出针对伏立康唑的蔓延性生长(trailinggrowth)，因此mic是生长被完全抑制时的浓度。
根据clsi指南在64～0.062μg/ml(clsim38-a2)的浓度范围内在50％和100％生长抑制下测定烟曲霉mic。
结果：抗真菌活性
*白色念珠菌mic50(半数抑制浓度)值以ug/ml表示；烟曲霉mic50值以ug/ml表示。
本发明的化合物在标准的4天小鼠模型中抑制烟曲霉的生长。例如，在4天的每天以20mg/kg口服化合物(-)-9相比于对照使小鼠肾脏真菌负担减少了84％。
本发明的化合物抑制壳针孢属(septoria)和柄锈菌属(puccinia)的生长，从而保护植物免受真菌感染(体外和植物中)。例如，化合物2、3和21在标准小麦壳针孢(septoriatritici)mic检定(atcc26517，clsi操作方案)中表现出mic＝0.25-1.0ug/ml的范围。本发明的化合物例如化合物2当以50ppm针对壳针孢属和柄锈菌属病原体在植物内施用时提供防止真菌生长的保护。
参考文献的引用
本申请通篇引用的所有参考资料(包括参考文献、已授权专利、公开的专利申请和共同待决的专利申请)的内容明确地以其整体引入本文以供参考。
等同方式
本领域的技术人员仅使用常规的实验可认识或者能够确定本文所述的本发明的具体实施方式的许多等同方式。这些等同方式意在包括在权利要求中。