一种分泌表达蛋白的稳定细胞株构建方法与流程

文档序号:11540248阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明属于生物技术领域,特别涉及一种分泌表达蛋白的稳定细胞株构建方法,包括以下步骤:以重组慢病毒载体pCDH‑S‑His为骨架,将目的蛋白基因构建到重组慢病毒载体pCDH‑S‑His上获得重组质粒pCDH‑S‑P‑His;利用PEI转染方法将上述重组质粒与辅助质粒pSPAX2和pMD2.G共转染293T细胞获得重组慢病毒;将收获的慢病毒转导293T细胞,经嘌呤霉素筛选获得多个单克隆细胞株,经Elisa方法检测各细胞上清中目标蛋白含量,确定高表达细胞株。本发明方法与传统质粒转染方法相比,实验周期短,阳性率高,细胞株稳定性好。

技术研发人员:曹齐树;李燕华;刘宗梁;张智;李光伟
受保护的技术使用者:合肥知恩生物技术有限公司
技术研发日:2017.05.11
技术公布日:2017.08.15
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