噻唑内盐类化合物的制备方法和用途与流程

本发明是申请号为201480038496.x的母案的分案申请，该母案的申请日为2014年7月9日，发明名称为“噻唑内盐类化合物、其制备方法及用途”。本发明属于医药化工领域，涉及噻唑内盐类化合物的制备方法和用途。
背景技术：
：晚期糖基化终产物(advancedglycationendproducts，ages)是随着人体衰老、糖尿病发展，体内蛋白质、脂蛋白或者核酸等大分子在生理环境中，经非酶催化、自发的与葡萄糖或其它还原性单糖反应生成的稳定的共价加成产物。ages交联结构的形成是一缓慢过程，首先大分子末端还原性氨基和葡萄糖分子中的醛基进行加成形成可逆的早期糖基化产物(schiffbases，希夫碱)；经过数天时间，不稳定的希夫碱逐渐发生重排反应形成更加稳定的amadori型早期糖基化产物。aamadori产物再经过一系列机理还不充分为人所知的脱氢、氧化和重排反应形成ages。由于ages具有交联性，它可以与蛋白质、脂肪和核酸等大分子物质以糖基化作用形成的二羰基键为桥梁连接成具有更大分子量的物质——ages交联结构。ages通过形成交联结构使体内胶原蛋白老化，加速动脉硬化，改变基质成分，引起血小板聚集，造成血管弹性减小、血管顺应性降低并产生异常脂蛋白代谢从而影响心血管系统的功能。因此，ages与糖尿病和机体老化的许多并发症密切相关，如肾功能减退、神经系统疾病、中风、阿尔茨海默症、皮肤老化、视网膜病变、白内障、心血管疾病和动脉硬化等。目前，已经有一些抑制ages累积的治疗方法。中国发明专利cn101684106b中披露了一类噻唑鎓盐化合物，如下面的式a所示的3-羧甲基-4-甲基-溴化噻唑鎓盐：其中：m是na或kx是br、cl或i；式a类化合物在体内能够显著减少长期糖尿病大鼠主动脉、左心室心肌、肾脏ages荧光含量，同时提高心肌胶原、尾胶原溶解性，且能够提高糖尿病大鼠主动脉顺应性，降低总外周阻力，增加心输出量，显著改善左心室功能。因此该化合物可以裂解已经形成的ages交联，重构血管结构，逆转糖尿病诱发的心血管系统硬化及功能紊乱，是一类新型的ages裂解剂。但是，在后续的研究中发现，式a类化合物的理化性质不稳定，在规模化生产中产品质量不好控制，样品在室温中保存不稳定，易吸潮变色，不适合作为一种药物的存在形式进一步发展。例如：①经多次试验，各批次式a类化合物的元素分析结果差异很大，且都与理论值相差较远(超过了千分之三的误差限)。②质量不稳定，放置(温度40℃，湿度75％，常压)3个月后易吸潮，结块，变色，见附图1a和图1b。不拘于理论的限制，本发明人在仔细分析x-射线衍射和元素分析的结果后发现，这个同时具有季铵盐结构和羧酸盐结构的化合物很难独立稳定的以分子形式存在，可能因为分子中的na和br极易以nabr形式结合，从而导致了式a类化合物具有明显的成药性缺陷。式a类化合物在体外和体内呈现很好的药理活性和良好的药代动力学性质，但是其以溴鎓盐的形式存在理化性质不稳定，不适合作为药用。因此，亟需开发新的稳定有效的噻唑内盐类化合物。技术实现要素：本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了式ⅰ所示的噻唑内盐类化合物。本发明人惊奇地发现，式ⅰ化合物结构稳定，理化性质优良，具有很好的药理作用；大规模化生产可以得到质量稳定、可控可靠的样品，适合作为药物发展。由此提供了下述发明：本发明的一个方面涉及式ⅰ所示的化合物或其可药用盐，其中：n为0、1、2或3。根据本发明任一项所述的式i化合物或其可药用盐，其中，所述式i化合物选自：3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐(n＝0)，和3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物(n＝1)。3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐可以是直接合成产物。3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物可以是3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐的单晶培养产物。所述的式i化合物的单晶(n＝1、2或3)的制备方法，包括下述步骤：将3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐(n＝0)加入甲醇溶解，然后滴加乙酸乙酯，静置，得到单晶；具体地，每毫克3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐使用0.05ml甲醇，0.3ml乙酸乙酯。在本发明的一个实施方案中，单晶的制备方法可以为：取3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐白色结晶2mg，加0.1ml甲醇，待颗粒溶解后滴加0.6ml乙酸乙酯，静置，待晶粒缓慢生长为单晶。在本发明的一个实施方案中，其为化合物3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐(n＝0)的一种晶型，其x射线粉末衍射谱图在12.6，13.3，14.9，18.5，19.1，27.0，27.7，28.8，29.8，32.1，40.8，42,8，45.2，47.9，52.6，54.8，55.6，59.0(2θ/℃)处显示出特征衍射峰(详见附图4)。在本发明的一个实施方案中，其为化合物3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物(n＝1)的一种晶型，其x射线粉末衍射谱图在11.8，15.2，16.7，18.9，19.3，19.8，21.0，23.8，24.5，25.2，26.4，26.9，28.6，29.3，31.3，31.9，32.1，34.1，34.7，35.0，35.6，38.9，40.1，40.6，43.1，45.9，46.7，48.1，49.0(2θ/℃)处显示出特征衍射峰(详见附图5)。本发明的另一方面涉及本发明任一项所述的式i化合物的制备方法，包括下述步骤：将化合物a与1,2-环氧丙烷反应得到化合物b，其中化合物a结构式中的x为氯、溴或碘。根据本发明任一项所述的制备方法，其中化合物a通过下述步骤制得：将4-甲基噻唑与氯乙酸、溴乙酸或碘乙酸反应，得化合物a，化合物b即为3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐(n＝0)。根据本发明任一项所述的制备方法，其中化合物a和/或化合物b通过重结晶进行分离纯合；具体地，重结晶所用溶剂独立地选自丙酮、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚和正己烷中的任意一种溶剂或者多种溶剂的混合物。在本发明的一个实施方案中，制备方法为：15.6g4-甲基噻唑溶于50ml无水丙酮中，加入21g溴乙酸，搅拌3小时，过滤，得固体，乙醇重结晶得到白色固体，干燥，共得到26g，产率72％。10g3-羧甲基-4-甲基-噻唑溴化鎓盐白色固体溶于50ml蒸馏水中，随后加入7.31g1,2-环氧丙烷，室温搅拌12小时，反应毕，用30ml二氯甲烷萃取反应液，萃取三次，弃去二氯甲烷层；将水层减压蒸干,得浅黄色油状物。向油状物中加入适量丙酮，析出淡黄色颗粒；用乙醇-乙醚体系重结晶(其中最优选重结晶比例为:1g黄色颗粒加热溶于4.5ml乙醇，然后加2ml乙醚)，得白色晶体5.15g，产率78％。在本发明的一个实施方案中，制备方法如下：本发明人经过大量的创造性的合成设计和实践探索，得到化合物3和物4(附图2)，经过对这两个化合物的化学性质和体内药代动力学性质的考察，最终确定两性离子类化合物4(3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐，c6h7no2s)才是这一结构类型的最稳定形式。本发明的再一方面涉及一种组合物，其包含一种或者多种本发明任一项所述的式i化合物或其可药用盐，以及任选的一种或多种药学上或者化妆品中可接受的辅料；可选地，其还包含一种或几种降血压药物；具体地，所述降血压药物为硝苯地平。可选地，所述组合物为口腔清洁制剂。在本发明的一个实施方案中，所述组合物为药物组合物。所述药物组合物可以根据不同给药途径而制备成各种形式。本发明的药物组合物包括有效剂量的本发明式ⅰ、其水合物或其可药用盐以及一种或多种适宜的可药用载体。这里的药用载体包括但不限于：离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白如人血白蛋白，缓冲物质如磷酸盐，甘油，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶态氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸酯，蜂蜡，羊毛脂。本发明的化合物是一类强效交联蛋白裂解剂，具有很好的裂解糖基化老化蛋白的能力，因此可以用于但不局限于(i)增加皮肤弹性或者减少皮肤皱纹，(ii)治疗糖尿病，(iii)治疗或缓解糖尿病的后遗症，(iv)治疗或缓解肾脏损伤，(v)治疗或缓解血管损伤，(vi)治疗或缓解高血压，(vii)治疗或缓解视网膜病变，(viii)治疗或缓解晶状体蛋白损伤，(ix)治疗或缓解白内障，(x)治疗或缓解周围神经病，(xi)治疗或缓解骨关节炎，(xii)与降压药联用治疗糖尿病伴随的高血压。本发明的化合物能够很好的改善心血管系统的硬化。本发明的化合物能够很好增强老年及糖尿病心血管药物治疗敏感性。本发明的化合物具有治疗慢性心衰的作用。发生在口腔中的非酶促反应可以导致牙齿着色。目前所使用的抗蛀蚀剂可以加速这种碳基化反应进一步导致了牙齿的着色。最近有一类具有抗蛀蚀功能的阳离子杀菌剂用于常规口腔清洗。这些阳离子抗菌剂有阿莱西丁，十六烷基吡啶氯酸盐等等。而这些制剂可以加速糖基化反应中关键的一步maillard反应，进而加速牙齿的着色(nordbo,j.dent.res.,58:1429(1979))。并且有报道在体外观察到了洗必泰和洁而灭能够催化糖基化反应(褐化反应)。由于maillard反应，洗必泰加入糖和氨基酸的混合物中加速了色素的形成。基于上述原理，本发明所涉及的化合物及其药物组合物可以用于口腔。特别是用作口腔清洗液和牙膏中的添加剂。在有关本发明化合物的上述用途中，可以采用无毒且药学上可接受的载体的适当形式应用于洁口液和牙膏中。本发明化合物的药物组合物可以以下面的任意方式施用：口服，喷雾吸入，直肠用药，鼻腔用药，颊部用药，局部用药，非肠道用药，如皮下，静脉，肌内，腹膜内，鞘内，心室内，胸骨内和颅内注射或输入，或借助一种外植储器用药。其中优选口服、腹膜内或静脉内给药方式。当口服用药时，本发明化合物可制成任意口服可接受的制剂形式，包括但不限于片剂、胶囊、水溶液或水悬浮液。其中，片剂使用的载体一般包括乳糖和玉米淀粉，另外也可加入润滑剂如硬脂酸镁。胶囊制剂使用的稀释剂一般包括乳糖和干燥玉米淀粉。水悬浮液制剂则通常是将活性成分与适宜的乳化剂和悬浮剂混合使用。如果需要，以上口服制剂形式中还可加入一些甜味剂、芳香剂或着色剂。当局部用药时，特别是治疗局部外敷容易达到的患面或器官，如眼睛、皮肤或下肠道神经性疾病时，可根据不同的患面或器官将本发明化合物制成不同的局部用药制剂形式，具体说明如下:当眼部局部施用时，本发明化合物可配制成一种微粉化悬浮液或溶液的制剂形式，所使用载体为等渗的一定ph的无菌盐水，其中可加入也可不加防腐剂如氯化苄基烷醇盐。对于眼用，也可将化合物制成膏剂形式如凡士林膏。当皮肤局部施用时，本发明化合物可制成适当的软膏、洗剂或霜剂制剂形式，其中将活性成分悬浮或溶解于一种或多种载体中。软膏制剂可使用的载体包括但不限于:矿物油，液体凡士林，白凡士林，丙二醇，聚氧化乙烯，聚氧化丙烯，乳化蜡和水；洗剂或霜剂可使用的载体包括但不限于：矿物油，脱水山梨糖醇单硬脂酸酯，吐温60，十六烷酯蜡，十六碳烯芳醇，2-辛基十二烷醇，苄醇和水。本发明化合物还可以无菌注射制剂形式用药，包括无菌注射水或油悬浮液或无菌注射溶液。其中，可使用的载体和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，灭菌的非挥发油也可用作溶剂或悬浮介质，如单甘油酯或二甘油酯。本发明的再一方面涉及本发明任一项所述的式i化合物或其可药用盐在制备用于治疗和/或缓解和/或预防和/或辅助治疗蛋白质老化相关疾病或症状的产品例如药物中用途；具体地，所述蛋白质老化相关疾病或症状选自如下的任意一种或者几种：i皮肤弹性减小或者皮肤皱纹增加，ii糖尿病，iii糖尿病后遗症，iv肾脏损伤，v血管损伤，vi高血压，vii视网膜病变，viii晶状体蛋白损伤，ix白内障，x周围神经病，xi骨关节炎，xii糖尿病伴随的高血压。本发明的再一方面涉及本发明任一项所述的式i化合物或其可药用盐在制备用于动物体内牙齿着色的逆转剂、用于防止或逆转牙齿着色的口腔用制剂、蛋白保鲜剂或动物蛋白保鲜剂、交联蛋白裂解剂、裂解晚期糖基化终产物的药物、降低血浆中bnp含量和/或mcp-1含量的药物、改善心血管系统硬化的药物、增强糖尿病和心血管治疗敏感性的药物、治疗和/或预防和/或辅助治疗慢性心衰的药物中的用途。本发明的再一方面涉及选自如下(1)－(7)项中任意一项的方法，其特征在于，所述方法包括使用或给予有效量的本发明任一项所述的式i化合物或其可药用盐或者本发明的组合物的步骤：(1)一种在体内或体外裂解晚期糖基化终产物(ages)的方法；(2)一种改善心血管系统硬化的方法；(3)一种增强糖尿病和心血管药物治疗敏感性的方法；(4)一种治疗和/或预防和/或辅助治疗慢性心衰的方法；(5)一种防止或者逆转动物体内牙齿着色的方法；(6)一种植物蛋白或动物蛋白保鲜的方法；(7)一种治疗和/或缓解和/或预防和/或辅助治疗蛋白质老化相关疾病或症状的方法；具体地，所述蛋白质老化相关疾病或症状选自如下的任意一种或者几种：i皮肤弹性减小或者皮肤皱纹增加，ii糖尿病，iii糖尿病后遗症，iv肾脏损伤，v血管损伤，vi高血压，vii视网膜病变，viii晶状体蛋白损伤，ix白内障，x周围神经病，xi骨关节炎，xii糖尿病伴随的高血压。在本发明的一个实施方案中，所述方法是非治疗目的的。需要指出的是，本发明化合物的使用剂量和使用方法取决于诸多因素,包括患者的年龄、体重、性别、自然健康状况、营养状况、化合物的活性强度、服用时间、代谢速率、病症的严重程度以及诊治医师的主观判断。优选的使用剂量介于0.01－100mg/kg体重/天，其中最优剂量在20mg/kg－30mg/kg体重/天。本发明中，术语“有效量”是指是指可在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的剂量。术语“受试者”可以指患者或者其它接受本发明组合物以治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的动物，特别是哺乳动物，例如人、狗、猴、牛、马等。术语“疾病和/或病症”是指所述受试者的一种身体状态，该身体状态与本发明所述疾病和/或病症有关。发明的有益效果本发明的式ⅰ化合物、其水合物或其可药用盐具有跟cn101684106b中披露的优选化合物3-羧甲基-4-甲基-溴化噻唑鎓钠盐(见式a)相当的ages裂解活性和更稳定的药物代谢动力学的性质；并且产品质量更易控制，更适合用于制药业和/或化妆品行业。附图说明图1：式a类化合物(m＝na，k＝br)放置三个月前后外观对比。图1a，新制得的式a化合物；图1b，式a化合物放置(温度40℃，湿度75％，常压)3个月后。图2：3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物(n＝1)的x-单晶衍射结构图。图3：3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物(n＝1)的分子晶胞堆积图。图4：3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐(n＝0)x-射线粉末衍射图。图5：3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物(n＝1)x-射线粉末衍射图。图6：10:00-20:00时间段内不同组的收缩压动态曲线(平均数±标准差,n＝12)。图7：10:00-20:00时间段内不同组的收缩压变异系数(平均数±标准差,n＝12.*p<0.05,#p<0.01vs.正常组；**p<0.01vs.model)。图8：10:00-20:00时间段内不同组的舒张压动态曲线。图9：10:00-20:00时间段内不同组的脉压差动态曲线。图10：10:00-20:00时间段内不同组的心率动态曲线。图11：10:00-20:00时间段内不同组的收缩压动态曲线(m平均数±标准差,n＝12.##p<0.01vs.model组；**p<0.01vs.硝苯地平组)。图12：10:00-20:00时间段内不同组的收缩压压降幅度动态曲线(平均数±标准差,n＝12.##p<0.01vs.model组；*p<0.05,**p<0.01vs.硝苯地平组)。图13：11:00-15:00时间段内不同组的收缩压变异系数动态曲线(平均数±标准差,n＝12.**p<0.01vs.model组)。图14：10:00-20:00时间段内不同组的舒张压动态曲线(平均数±标准差,n＝12.##p<0.01vs.model组；*p<0.05,**p<0.01vs.硝苯地平组.)。图15：10:00-20:00时间段内不同组的脉压差动态曲线(平均数±标准差,n＝12.**p<0.01vs.硝苯地平组)。图16：10:00-20:00时间段内不同组的心率动态曲线。图17：10:00-20:00时间段内不同组的射血时间动态曲线(m平均数±标准差,n＝12.*p<0.05vs.硝苯地平组)。图18：10:00-20:00时间段内不同组的肌耗氧指数动态曲线(平均数±标准差,n＝12.*p<0.05vs.硝苯地平组)。图19：不同治疗组的血浆6-酮-前列腺素含量(平均数±标准差,n＝9-11.*p<0.05vs.正常组；**p<0.01vs.model组；##p<0.05vs.硝苯地平组)。图20：不同治疗组的血浆txb2含量(平均数±标准差,n＝9-11.*p<0.01vs.正常组；**p<0.01vs.model组)。图21：不同治疗组的txb2/6-keto-pgi1a值(平均数±标准差,n＝9-11.*p<0.01vs.正常组；**p<0.01vs.model组；$$p<0.05vs.硝苯地平组)。图22：不同治疗组的血浆mcp-1含量(平均数±标准差,n＝9-11.*p<0.05vs.正常组；##p<0.01vs.model组)。图23：不同治疗组的血浆bnp含量(平均数±标准差,n＝9-11.*p<0.05vs.正常组；△△p<0.05,**p<0.01vs.model组；##p<0.01vs.硝苯地平组)。具体实施方式下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。化合物熔点由sry-1型熔点仪测定，温度未经校正。1h-nmr及13c-nmr光谱由brukerarx400型核磁仪测定；质谱由api-150exlc/ms高分辨质谱仪测定；x-射线单晶衍射由rigakusaturn944ccd衍射仪测定；x-射线粉末衍射由brukerd8advance衍射仪测定。实施例1：3-羧甲基-4-甲基-噻唑溴化鎓盐(化合物a)的制备15.6g4-甲基噻唑溶于50ml无水丙酮中，加入21g溴乙酸，搅拌3小时，过滤，得固体，乙醇重结晶得到白色固体，干燥，共得到26g，产率72％，mp＝240.6－241.6℃。ms[m]+＝158.2m/e；1h-nmr(400mhz,dmso-d6)，2.48(d,3h)；5.55(s,2h)；8.09(d,1h)；10.25(d,1h)；14.05(brs,1h)。实施例2：3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐(n＝0)的制备10g3-羧甲基-4-甲基-噻唑溴化鎓盐白色固体溶于50ml蒸馏水中，随后加入7.31g1,2-环氧丙烷，室温搅拌12小时，反应毕，用30ml二氯甲烷萃取反应液，萃取三次，弃去二氯甲烷层；将水层减压蒸干,得浅黄色油状物。向油状物中加入适量丙酮，析出淡黄色颗粒；用乙醇-乙醚体系重结晶(其中最优选重结晶比例为:1g黄色颗粒加热溶于4.5ml乙醇，然后加2ml乙醚)，得白色晶体5.15g，产率78％，mp＝169℃。ms:158[m+h]+，315[2m+h]+，472[3m+h]+；1h-nmr(400mhz,dmso-d6)，2.41(d,3h),4.76(s,2h),7.90(d,1h),9.97(d,1h)；13c-nmr(methanol-d4),δ12.98,56.71,121.47,148.36,169.71；元素分析anal.calcdforc6h7no2s(157.2):c,45.85；h,4.49；n,8.91％found:c,45.74；h,4.51；n,8.87％。进行x-单晶衍射测定晶体结构。化合物3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐(n＝0)的一种晶型，其x射线粉末衍射谱图在12.6，13.3，14.9，18.5，19.1，27.0，27.7，28.8，29.8，32.1，40.8，42,8，45.2，47.9，52.6，54.8，55.6，59.0(2θ/℃)处显示出特征衍射峰(详见附图4)。实施例3：3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物(n＝1)的制备取实施例2制得的3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐(n＝0)2g，于20℃溶于100ml甲醇和1ml水的混合溶剂中，待完全溶解后缓慢加入300ml乙酸乙酯溶液，混合均匀后于5℃静置12小时，析出的晶体即为3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物(n＝1)。x-单晶衍射测定晶体结构实验：取3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐白色结晶2mg，加0.1ml无水甲醇，待颗粒溶解后滴加0.6ml乙酸乙酯，静置，待晶粒慢慢长大生长为单晶(3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物，n＝1)。进行x-单晶衍射测定晶体结构。化合物3-甲基羰氧基-4-甲基-噻唑内盐一水合物(n＝1)的一种晶型，其x射线粉末衍射谱图在11.8，15.2，16.7，18.9，19.3，19.8，21.0，23.8，24.5，25.2，26.4，26.9，28.6，29.3，31.3，31.9，32.1，34.1，34.7，35.0，35.6，38.9，40.1，40.6，43.1，45.9，46.7，48.1，49.0(2θ/℃)处显示出特征衍射峰(详见附图5)。结晶学数据：c6h7no2s·h2o，mr＝175.20，斜方晶系，空间群p-1，晶体学参数：alpha＝90deg.，beta＝90deg.,gamma＝90deg.。单晶结构图见附图2。分子晶胞堆积图见附图3。实施例4：稳定性试验按照中国药典2010年版附录要求取样品(按照实施例2制备)三批，模拟上市包装(药品包装采用固体药用高密度聚乙烯袋，)在rt40℃，rh75％(nacl饱和溶液)条件放置进行加速试验，1、2、3、6个月后，分别取样考察式i和式a化合物，并与0天数据比较，结果见表1、表2。取按照实施例3制备的化合物一批，模拟上市包装(药品包装采用固体药用高密度聚乙烯袋，)在rt40℃，rh75％(nacl饱和溶液)条件放置1、2、3个月后，取样与0天数据比较，结果见表3。按照中国药典2010年版附录要求取式a化合物三批，模拟上市包装(药品包装采用固体药用高密度聚乙烯袋)在rt40℃，rh75％(nacl饱和溶液)条件放置1、2、3个月后，取样与0天数据比较，结果见表1、表4。表1：实施例2制备的式i化合物(n＝0)与式a化合物(m＝na,k＝br)的质量稳定性比较表2：实施例2制备的式i化合物加速试验含量考察结果表3：实施例3化合物加速试验含量考察结果表4：式a化合物(m＝na，k＝br)加速试验含量考察结果由上面的数据可见，本发明所涉及的实施例2化合物和实施例3化合物的稳定性均显著优于已有的式a化合物，具有更好的成药潜力。实施例5：体外裂解红细胞表面交联igg(免疫球蛋白g)的实验由于红细胞表面交联igg是较为典型的ages交联结构，所以测定化合物对红细胞表面交联igg的裂解程度是公认较优的评价化合物对ages交联结构裂解能力的方法(bruceh.r.wolffenbuttel,breakersofadvancedglycationendproductsrestorelargearterypropertiesinexperimentaldiabetes,natl.acad.sci.u.s.a.1998,95,4630.)。血细胞处理方法：16周糖尿病大鼠麻醉后颈总动脉取血，加肝素抗凝，4℃，1000g离心3分钟，取下层rbc(红细胞)；0.1mol/lpbs(ph7.4)洗三次，每次4℃1000g离心3分钟；取下层rbc用于实验。体外给药方法：以0.1mol/l等渗pbs(磷酸缓冲液)(ph7.4)为阴性对照，各受试化合物以其为溶剂配制成不同浓度药液。每900μl药液或溶剂对照中加入100μlrbc，37℃轻微振摇16-18小时；1000g，4℃离心3分钟，弃上清，0.1mol/lpbs(ph7.4)洗板4次除去残留化合物；1000g，4℃离心3分钟，取下层rbc1∶100稀释用于elisa测定。rbc表面交联igg含量免疫吸附法测定流程：multiscreen-ha0.45μm96孔板(millipore)，以superblock封闭(300μl/孔)，37℃1小时；然后在5mmhg负压的条件下抽干，pbst满孔洗板3次，0.1mpbs(ph7.4)洗板2次，每次振板1分钟；加入待测rbc(50μl/孔)，另设pbs本底对照孔(od0)；负压抽干；0.1mol/lpbs(ph7.4)150μl洗四次，每次振板1分钟。负压抽干后加入1∶500稀释的羊抗小鼠igg-hrp(50μl/孔)，室温静置2小时，抽干；0.1mol/lpbs(ph7.4)150μl/孔洗3次，每次振板1分钟；抽干；加邻苯二胺(opd)底物显色液(100μl/孔)，室温避光放置30分钟，2mol/lh2so4(100μl/孔)终止反应；快速吸出反应液(150μl/孔)转入普通96孔酶标板，于490nm下测定od值。受试化合物裂解率的计算：校正od＝待测rbc样品的od平均值-无rbc的pbs本底孔的od平均值，药物裂解率以od490nm值降低的百分率表示：(pbs孔od490nm－受试化合物od490nm)/pbs孔od490nm×100％。实验结果见表5：表5：实施例2化合物对红细胞表面交联igg的裂解率表5结果显示，实施例2化合物在不同浓度下对红细胞表面交联igg均有较高的裂解率。实施例6：实施例2化合物对糖尿病伴高血压大鼠24小时尿量/饮水量的影响1.实验方法：(1)分组及给药方式参照大鼠体重，血压均匀分组：未给药的糖尿病伴高血压模型组(model组)，硝苯地平组，实施例2化合物+硝苯地平组。同时设定同周龄的单纯糖尿病组和正常对照组。实施例2化合物(36mg/kg)用蒸馏水溶解，现用现配，灌胃给药，每日一次，持续5周。于给药3周后，将植入子埋置于大鼠腹主动脉，恢复1周，监测血压3天，待血压基本稳定，每天上午10:00灌胃给予硝苯地平(0.75mg/kg)1次，连续7天。(2)硝苯地平溶液的配制硝苯地平粉末置于5mlep管内，加入适量cmc-na，放入4颗钢珠，涡旋5-10分钟，待硝苯地平完全混悬之后，定容，再混悬。(3)大鼠饮水量及尿量测定给药第3周，将各组大鼠单独置于代谢笼饲养，记录给药第19、20、21天的24小时饮水量和尿量。(4)实施例2化合物联用硝苯地平血压监测手术方法同(1)、(2)、(3)所述，大鼠术后恢复1周，将鼠笼置于dsi接收器上，设定需监测参数和通道，用磁开关打开植入子，调试结束后，开始记录生物信号，连续3天后，于每天上午10:00给予硝苯地平和实施例2化合物，动态监测记录10:00-20:00时间段内大鼠心血管参数，连续7天(在此期间，盐水浓度严格控制在1％)。(5)大鼠血管活性物质含量测定方法txb2、6-keto-pgf1a测定方法：取全血，加40μl消炎痛edta-na抗凝，4℃，3500rmp/min，15分钟，分离血浆，-70℃保存。由北京华英生物科技有限公司采用放射免疫法测定。bnp、mcp-1测定方法：取全血，加40μledta-na抗凝，1000g/min，10分钟，分离血浆，-70℃保存。由华英生物科技有限公司采用放射免疫法测定。(6)统计方法实验数据以mean±sd(平均数±标准差)表示，应用spss2.0软件分析处理数据，采用单因素方差分析进行统计学处理，以p<0.01为有显著性差异。给予实施例2化合物第3周，24小时大鼠v尿/v饮。2.实验结果结果如表6所示：表6：不同组饮水量和尿量的测量结果(mean±sd,n＝12)model实施例2化合物v饮(ml)369.3±122.7375.0±123.6v尿(ml)302.9±101.8318.3±106.0v尿/体重(ml/g)0.82±0.310.88±0.31v饮/体重(ml/g)1.00±0.781.03±0.34v尿/v饮0.79±0.060.86±0.05**p<0.01vs.model。实施例6的实验结果表明，实施例2化合物能明显增加大鼠的饮水量和尿量。实施例7：实施例2化合物对糖尿病伴高血压大鼠血压的影响给予实施例2化合物4周后，model组大鼠10:00-20:00时间段内的平均收缩压与正常对照组(nc组)相比显著升高。实施例2化合物组在10:00-20:00时间段内的平均收缩压相比model组显著下降(169.8±15.8mmhgvs.181±14.9mmhg，p<0.05)(详见附图6)。给予实施例2化合物4周后，糖尿病组大鼠在10:00-20:00时间段内的收缩压变异系数(cv)与nc组比较明显增加(p<0.05)，model组大鼠的收缩压cv进一步显著增加(p<0.01)；与model组相比，实施例2化合物组大鼠的收缩压cv显著降低(p<0.01)(详见附图7)。给予实施例2化合物4周后，model组大鼠10:00-20:00时间段内的平均收缩压与nc组相比显著升高。相比model组，实施例2化合物组在10:10-20:00时间段内的平均舒张压均显著降低(123.1±13.4mmhgvs.132.3±12.7mmhg)(详见附图8)。给予实施例2化合物4周后，model组大鼠在10:00-20:00时间段内的脉压差均值与nc组相比，显著上升(p<0.01)。实施例2化合物组与model组相比均无明显变化(46.5±5.7mmhgvs.49.7±3.5mmhg)(详见附图9)。给予实施例2化合物4周后，model组大鼠10:00-20:00时间段内心率均值与nc组相比显著下降(p<0.01)。实施例2化合物组大鼠与model组相比均无明显变化(255±17vs.257±13beats/min)(详见附图10)。实施例7的结果表明实施例2化合物具有稳定血压的作用，符合糖尿病伴高血压的治疗原则，可作为抗高血压联合用药中增强血压稳定性的辅助用药。实施例8：实施例2化合物联合硝苯地平对糖尿病伴高血压大鼠血压的影响10:00给予硝苯地平后，各给药组收缩压迅速下降，1.5小时达到降压最大值；硝苯地平组的收缩压在给药2小时后开始回升，10小时后收缩压基本接近model组；实施例2化合物+硝苯地平组的收缩压在达到最低值后可保持平稳5小时，而后缓慢恢复。实施例2化合物+硝苯地平组相比硝苯地平组的平均收缩压在给药后1小时(135.8±12.5mmhgvs.155.2±14.9，p<0.01)显著下降；5小时(135.0±11.4mmhgvs.166.0±15.0mmhg，p<0.01)，10小时(152.2±10.4mmhgvs.179.0±14.1mmhg，p<0.01)，均显著下降(详见附图11)。给药后1.5小时，实施例2化合物+硝苯地平组的降压幅度δsbp显著高于硝苯地平组(37.1±13.5mmhgvs.25.3±9.3mmhg，p<0.05)。给药后5小时，实施例2化合物+硝苯地平组的δsbp显著高于硝苯地平组(30.9±12.5mmhgvs.15.9±9.3mmhg，p<0.01),给药后10小时，实施例2化合物+硝苯地平组的δsbp显著高于硝苯地平组(19.4±6.4mmhgvs.1.19±3.5mmhg，p<0.01)(详见附图12)。给药后1小时至5小时，与model组相比，硝苯地平组收缩压变异系数(cv)无明显变化(0.047±0.017vs.0.051±0.012)，实施例2化合物+硝苯地平组的cv显著降低(0.019±0.006vs.0.051±0.012，p<0.01)(详见附图13)。10:00给药后，各给药组舒张压迅速下降，1.5小时后基本接近最大降压幅度，然后慢慢回升。给药后1.5小时，实施例2化合物+硝苯地平组的平均舒张压相比硝苯地平组显著下降(95.8±14.5mmhgvs.111.2±15.3，p<0.05)。给药后5小时，实施例2化合物+硝苯地平组的平均收缩压相比硝苯地平组显著下降(96.6±12.3mmhgvs.115.9±15.7mmhg，p<0.01)。给药后10小时，硝苯地平组舒张压基本接近model组，实施例2化合物+硝苯地平组的平均收缩压相比硝苯地平组显著下降(106.1±16.4mmhgvs.130.1±14.8mmhg，p<0.01)(详见附图14)。10:00给药后，实施例2化合物+硝苯地平组的脉压差(ph)迅速下降，11:00达到降压最大值；硝苯地平组的ph轻微下降，1小时后开始回升，10小时后基本接近model组；实施例2化合物+硝苯地平e组ph在1小时达到最低值后缓慢回升。给药后1小时，实施例2化合物+硝苯地平组的平均脉压差相比硝苯地平组显著下降(40.2±4.5vs.46.9±2.9mmhg，p<0.01)。给药后5小时，实施例2化合物+硝苯地平组的平均脉压差相比硝苯地平组显著下降(40.6±4.9vs.48.1±5.1mmhg，p<0.01)。给药后10小时，实施例2化合物+硝苯地平组的平均脉压差相比硝苯地平组无明显变化(45.6±5.8vs.48.7±5.2mmhg)(详见附图15)。10:00给药后，各给药组心率(hr)迅速上升，20分钟后达到最大值，然后缓慢下降，给药后8小时，各给药组心率基本恢复到给药前。给药后，实施例2化合物+硝苯地平组的心率相比硝苯地平组无显著性差异(详见附图16)。10:00给药后，各给药组射血时间(et)迅速下降，20分钟达到最低值，而后缓慢上升，5小时时，硝苯地平组et基本恢复到给药前，10小时时，硝苯地平组et值与mc组基本相当。给药20分钟时，实施例2化合物+硝苯地平组的et与硝苯地平组相比显著下降(67.3±5.3msvs.71.8±4.2ms)，而后et缓慢上升，在8-10小时时有一个快速上升的阶段，在10小时et值与mc组基本相当；在给药5小时时，实施例2化合物+硝苯地平组的et相比硝苯地平组显著降低(74.2±5.2msvs.81.1±5.0ms,p<0.05)，该效应维持4小时(详见附图17)。肌耗氧指数(myocardialoxygenconsumptionindex，moci)反映心肌总耗氧量。给药后1小时，与model组相比，硝苯地平组moci有所下降，但无显著性差异(3772.7±444.7vs.4255.0±416.1，p＝0.36),实施例2化合物+硝苯地平组moci显著下降(3128.4±238.7vs.4255.0±416.1，p<0.05)。给药后5小时，相比model组，硝苯地平组moci有所下降，但无显著性差异,实施例2化合物+硝苯地平组moci显著下降(p<0.05)。给药后10小时，硝苯地平组moci恢复到给药前，实施例2化合物+硝苯地平组moci低于model组和硝苯地平组，但无显著性差异(详见附图18)。实施例8的结果表明，实施例2化合物可明显增强硝苯地平对心脏的作用；实施例2化合物与硝苯地平联用，能显著降低糖尿病伴高血压大鼠的血压。实施例9：实施例2化合物联合硝苯地平对糖尿病伴高血压大鼠血管活性分子含量的影响①实施例2化合物联合硝苯地平对糖尿病伴高血压大鼠血浆6-酮-前列腺素含量的影响血浆6-酮-前列腺素是前列环素(pg12)的代谢物，反映了血浆中pg12的含量。糖尿病组、model组大鼠血浆中6-酮-前列腺素含量与正常组相比显著下降(78.15±5.6,77.62±8.67vs.85.41±4.36pg/ml，p<0.05)。实施例2化合物+硝苯地平组大鼠与model组相比显著升高(87.21±6.90vs.77.62±8.67pg/ml，p<0.01)，与硝苯地平组相比也显著升高(p<0.05)(详见附图19)。②ages裂解剂联合硝苯地平对糖尿病伴高血压大鼠血浆txb2含量的影响txb2是txa2的代谢产物，反应血浆中txa2的含量。与正常组相比，糖尿病组、model组大鼠的txb2含量显著上升(93.14±10.99、104.19±11.68vs.64.88±7.24，p<0.01)。实施例2化合物+硝苯地平组、硝苯地平组txb2含量相比model组有显著下降(73.64±12.27、80.88±15.31vs.104.19±11.68pg/ml，p<0.01)；实施例2化合物+硝苯地平组txb2含量相比硝苯地平组，无显著性差异(详见附图20)。③实施例2化合物联合硝苯地平对糖尿病伴高血压大鼠血浆txb2/6-keto-pgi1a值的影响txb2/6-keto-pgi1a比值反映血浆中txa2/pgi2的水平。与正常组相比，糖尿病组、model组大鼠的txb2/6-keto-pgi1a显著上升(1.15±0.15、1.18±0.16vs.0.80±0.10，p<0.01)；实施例2化合物+硝苯地平组的txb2/6-keto-pgi1a相比model组显著下降(0.93±0.13vs.1.18±0.16，p<0.01)；硝苯地平组相比model组略有下降(1.06±0.14vs.1.18±0.16)，无显著性差异；实施例2化合物+硝苯地平组的txb2/6-keto-pgi1a相比硝苯地平组显著下降(0.93±0.13vs.1.06±0.14，p<0.05)(详见附图21)。④实施例2化合物联合硝苯地平对糖尿病伴高血压大鼠血浆mcp-1含量的影响与正常组相比，糖尿病组、model组大鼠血浆mcp-1含量均显著上升(75.9±9.7、77.4±9.5vs.66.9±7.3pg/ml，p<0.05)；实施例2化合物+硝苯地平组的血浆mcp-1含量相比model组显著降低(64.0±14.2vs.77.4±9.5pg/ml，p<0.01)；硝苯地平组血浆中mcp-1含量相比model组略有降低(70.7±8.8vs.77.4±9.5pg/ml)，但无显著性差异；实施例2化合物+硝苯地平组血浆中mcp-1含量相比硝苯地平组显著降低(p<0.05)(详见附图22)。⑤实施例2化合物联合硝苯地平对糖尿病伴高血压大鼠血浆bnp含量的影响与正常组相比，model组大鼠血浆bnp含量均显著上升(16.7±2.0vs.14.3±2.1pg/ml，p<0.05)；实施例2化合物+硝苯地平组的血浆bnp含量相比model组显著降低(12.2±3.5vs.16.7±2.0pg/ml，p<0.01)；硝苯地平组血浆中bnp含量相比model组显著降低(14.6±2.4vs.16.7±2.0pg/ml，p<0.05)；实施例2化合物+硝苯地平组血浆中mcp-1含量相比硝苯地平组显著降低(p<0.05，p<0.01)(详见附图23)。实施例9的结果表明实施例2化合物导致txa2/pgi2比值降低，造成舒张血管，减少血栓的产生，延缓血管粥样硬化的进程，起到血管保护作用。ages裂解剂还可降低糖尿病伴高血压大鼠血浆中的bnp含量，同时也可显著降低糖尿病伴高血压大鼠血浆中mcp-1的含量。尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。当前第1页12