一种从草红藤中提取分离杨梅素和二氢杨梅素的方法与流程

本发明属于医药技术领域，具体提供了一种以草红藤为原料提取制备杨梅素和二氢杨梅素的新方法。

背景技术：

杨梅素和二氢杨梅素有着广泛的药理作用，具有极大的利用价值。药理活性既往研究证实杨梅素和二氢杨梅素具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、解酒保肝、抗病原微生物及调血脂等多方面的药理作用(侯小龙,王文清,施春阳,等.二氢杨梅素药理作用研究进展[j].中草药,2015,46(4):603-609.)。

草红藤为豆科宿苞豆属植物毛宿苞豆shuteriapampaninianahand.-mazz.干燥带叶茎藤，《中国中药资源志要》记载毛宿苞豆有清肝泄热，除蒸宁咳作用，用于阴虚潮热，虚痨咳嗽，乳痈。研究表明杨梅素和二氢杨梅素为其有效成分。目前国内文献报道的对草红藤中杨梅素和二氢杨梅素分离方法主要是采用水煎，聚酰胺柱分离，此方法工艺复杂、提取液不好处理、物耗大、得率低（曹延怀,黄远征,丁立生.草红藤中的黄酮成分[j].中国中药杂志,2000,25(5):290-291）。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种从草红藤中提取分离杨梅素和二氢杨梅素的方法。

采用的技术方案为：包括如下步骤：

（1）取草红藤粉末，加70-95%乙醇加热回流提取1-5次，乙醇提取液经浓缩后加蒸馏水使之分散，再用乙酸乙酯萃取1-5次，乙酸乙酯萃取层浓缩得草红藤乙酸乙酯部位浸膏；

（2）乙酸乙酯部位浸膏溶解直接上凝胶柱色谱，50-100%甲醇洗脱，共收集洗脱液15-30份，即可提取分离二氢杨梅素和杨梅素。

进一步，所述步骤（1)中，加入80-90%的乙醇回流提取2-3次，每次提取2～5小时。

进一步，所述步骤（2)中，凝胶柱色谱为sephadexlh-20柱色谱，使用洗脱剂为90-100%甲醇。

本发明从草红藤中提取分离得到杨梅素和二氢杨梅素，所得二氢杨梅素纯度达到92%，杨梅素纯度达到97%。本发明方法以价格低廉的草红藤为原料，可大幅度降低原料药成本，为杨梅素和二氢杨梅素提供了新的提取来源，也为化合物杨梅素和二氢杨梅素标准品的制备提供了新的方法。

附图说明

图1杨梅素和二氢杨梅素的结构图；

图2为本发明实施例制备的二氢杨梅素的¹h-nmr光谱图；

图3为本发明实施例制备的二氢杨梅素的¹³c-nmr光谱图；

图4为本发明实施例制备杨梅素的¹h-nmr光谱图；

图5为本发明实施例制备杨梅素的¹³c-nmr光谱图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图进一步介绍本发明，但本发明不仅限于下述实施例，可以预见本领域技术人员在结合现有技术的情况下，实施情况可能产生种种变化。

实施例1

（1）取草红藤粉末100g，加80%乙醇加热回流提取3次，乙醇提取液浓缩后加蒸馏水使之分散，用乙酸乙酯萃取2次，乙酸乙酯萃取层浓缩得草红藤乙酸乙酯部位浸膏12g。

（2）乙酸乙酯部位浸膏用甲醇溶解，上sephadexlh-20凝胶柱层析，90%甲醇洗脱，共收集洗脱液30份。

（3）馏分13为二氢杨梅素，25为杨梅素。

实施例2

（1）取草红藤盘粉末500g，加90%乙醇加热回流提取2次，乙醇提取液浓缩后加蒸馏水使之分散，用乙酸乙酯萃取2次，乙酸乙酯萃取层浓缩得草红藤乙酸乙酯部位浸膏54g。

（2）乙酸乙酯部位浸膏甲醇溶解，上sephadexlh-20凝胶柱层析，100%甲醇洗脱，共收集洗脱液30份。

（3）馏分12为二氢杨梅素，23为杨梅素。

化合物的结构鉴定

本发明通过系统溶剂法及凝胶色谱技术，从草红藤中提取分离得到杨梅素和二氢杨梅素，经理化常数测定和光谱分析，鉴定得到它们的结构，如附图1-附图5。

二氢杨梅素：白色粉末，esi-msm/z:321[m＋h]⁺。¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.9(1h,s,5-oh),6.39(2h,s,h-2',6'),5.90,5.86(each1h,br.s,h-6,8),5.76(1h,d,j=6.0hz,3-oh),4.90(1h,d,j=10.8hz,h-2),4.41(1h,dd,j=10.8,6.0hz,h-3)；¹³c-nmr(100mhz,dmso-d6)δ:83.2(c-2),71.6(c-3),197.7(c-4),163.3(c-5),95.9(c-6),166.8(c-7),95.0(c-8),162.5(c-9),100.5(c-10),127.1(c-1'),106.9(c-2',6'),145.7(c-3',5'),133.4(c-4')。

杨梅素：黄色粉末，esi-msm/z:319[m＋h]⁺。¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ:12.5(1h,s,5-oh),7.24(2h,s,h-2',6'),6.37(1h,d,j=1.9hz,h-8),6.18(1h,d,j=1.9hz,h-6)；¹³c-nmr(100mhz,dmso-d6)δ:146.8(c-2),135.9(c-3),175.8(c-4),160.7(c-5),98.2(c-6),163.9(c-7),93.2(c-8),156.1(c-9),103.0(c-10),120.8(c-1'),107.2(c-2',6'),145.7(c-3',5'),135.9(c-4')。

本发明以价格低廉的草红藤为原料，通过萃取，凝胶色谱分离即得到高纯度的杨梅素和二氢杨梅素，大幅度降低化合物的分离提取成本，为杨梅素和二氢杨梅素的制备提供了新的方法。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种从草红藤中提取分离杨梅素和二氢杨梅素的新方法。其特点是以价格低廉的草红藤为原料，通过乙醇提取乙酸乙酯萃取得到浸膏，得到的浸膏直接凝胶色谱分离得到杨梅素和二氢杨梅素。本方法操作简单，样品损耗小，提取率高，适合工业化生产。

技术研发人员：肖世基;张茂生
受保护的技术使用者：遵义医学院
技术研发日：2018.01.08
技术公布日：2018.04.13