本发明公开了一种能检测l-半胱氨酸(l-cysteine,l-cys)的荧光探针及其合成方法和应用，具体的说涉及一种能通过不同发射波长检测l-半胱氨酸的荧光探针，属于化学分析检测技术领域。
背景技术：
l-半胱氨酸是一种生物体内常见的氨基酸，可由体内的蛋氨酸(甲硫氨酸，人体必需氨基酸)转化而来，可与胱氨酸互相转化。
半胱氨酸的分解是在厌氧条件下通过脱硫氢酶的作用分解成丙酮酸和硫化氢和氨，或是通过转氨基作用，经由中间产物β-巯基丙酮酸分解成为丙酮酸和硫黄，在氧化条化条件下，氧化成半胱氨酸亚硫酸后，可经转氨基作用分解成为丙酮酸与亚硫酸，以及由脱羧基作用分解成为亚牛磺酸、牛磺酸等。此外，半胱氨酸是不稳定的化合物，容易氧化还原，与胱氨酸相互转换。还可与有毒的芳香族化合物缩合成硫醚氨酸(mercapturicacid)而起解毒作用。
半胱氨酸是一种天然产生的氨基酸,在食品加工中具有许多用途,它主要用于焙烤制品,作为面团改良剂的必需成分。半胱氨酸是一种还原剂,它可以促进面筋的形成,减少混合所需的时间和所需药用的能量,半胱氨酸通过改变蛋白质分子之间和蛋白质分子内部的二硫键,减弱了蛋白质的结构，这样蛋白质就伸展开来。
l-半胱氨酸是一种很重要的含巯基的α-氨基酸,在生物体内发挥着许多重要的作用,如参与蛋白质合成、解毒、新陈代谢等。在人体的许多蛋白质中都可以发现l-半胱氨酸的存在,是生物相关蛋白质最重要的组成成分之一。l-半胱氨酸还有助于维持细胞内氧化还原活性、信号传导和基因调节。若细胞中l-半胱氨酸的含量偏离正常水平会导致很多疾病,危害人体的健康。同时,l-半胱氨酸还广泛应用于食品工业、生物医药、生化研究等领域。因此,建立一种简便的、具有良好选择性的l-半胱氨酸检测方法是一项很有意义的工作。荧光化学传感器具有操作简单、灵敏度高、选择性好、响应时间短、还可以进行实时检测等优点,已被广泛应用于环境、食品和生物体内痕量样品的检测。
技术实现要素：
本发明所述的一种能检测l-半胱氨酸的荧光探针，分子式为c23h14n2o2s2，结构式如下所示：
本发明所述的一种能检测l-半胱氨酸的荧光探针，通过如下方法实现：
将化合物1和三乙胺加至反应瓶中，同时加入无水二氯甲烷作为溶剂，再在冰浴(-5～0℃)条件下加入所需剂量的丙烯酰氯。搅拌0.5h后，tlc点板监测反应至原料反应完全，按ea:pe＝1:6-15的洗脱剂比例过柱得到目标产物。1hnmr(400mhz,dmso)δ8.53(d,j＝8.0hz,1h),8.18(d,j＝12hz,4h),8.10(t,j＝8.0hz,2h),7.58(t,j＝8.0hz,2h),7.50(t,j＝8.0hz,2h),6.74–6.61(m,2h),6.35(d,j＝8.0hz,1h).13cnmr(101mhz,dmso)δ165.08,163.87,160.55,153.40,152.10,148.18,135.68,134.94,134.82,130.54,127.55,127.53,127.49,126.93,126.88,126.04,125.31,123.19,123.11,122.51,122.39,122.17.hrms理论值：415.0569，实验值:415.0560.
本发明将所述的荧光分子探针化合物在检测l-半胱氨酸的应用。
本发明的优点，探针的合成只需要一步就可以完成，且后处理过程简单。探针的选择性好，灵敏度高，显示出对l-半胱氨酸良好的选择性及对其它共存氨基酸良好的抗干扰能力。
附图说明
图1是实施例1中探针的1hnmr图谱。
图2是实施例1中探针的13cnmr图谱。
图3是实施例1中探针的hrms图谱。
图4是实施例2中探针检测l-半胱氨酸的荧光光谱。
实施例1探针分子的合成
实施例1-2将108mg(0.30mmol)化合物1和477.3mg(3mmol)三乙胺加至反应瓶中，同时加入10ml无水二氯甲烷作为溶剂，再在0～5℃下加入丙烯酰氯(0.2ml)反应0.5h后，tlc点板监测反应至原料反应完全，按ea:pe＝1:6-15的洗脱剂比例过柱得到目标产物，产率为37.7％。
实施例1-3将108mg(0.30mmol)化合物1和151.78mg(1.5mmol)三乙胺加至反应瓶中，同时加入8ml无水二氯甲烷溶液作为溶剂，再在0～5℃下加入丙烯酰氯(0.5ml)反应0.5h后，tlc点板监测反应至原料反应完全，按ea:pe＝1:6-15的洗脱剂比例过柱得到目标产物，产率为40.7％。
实施例1-4将108mg(0.30mmol)化合物1和417.3mg(3mmol)三乙胺加至反应瓶中，同时加入8ml无水二氯甲烷作为溶剂，再在0～5℃下加入丙烯酰氯(0.4ml)反应0.5h后，tlc点板监测反应至原料反应完全，按ea:pe＝1:6-15的洗脱剂比例过柱得到目标产物，产率为36.1％。
实施例1-5将108mg(0.30mmol)化合物1和155.2mg(1.53mmol)三乙胺加至反应瓶中，同时加入8ml无水二氯甲烷作为溶剂，再在0～5℃下加入丙烯酰氯(0.5ml)反应0.5h后，tlc点板监测反应至原料反应完全，按ea:pe＝1:6-15的洗脱剂比例过柱得到目标产物，产率为26.7％。
实施例2探针检测l-半胱氨酸
取实施例1制备的荧光探针化合物，溶解到dmso溶液中，配置成500umol的探针母液，将l-半胱氨酸溶解到蒸馏水中，配置成10mmol的l-半胱氨酸母液。配置乙腈：hep缓冲液(0.01mm，ph＝7.4)＝4：6的光谱溶液，每根试管3ml。从探针母液中取出6μl(1μm)加入到每根试管当中，取不同体积的l-半胱氨酸母液于前述盛有3ml光谱溶液和探针的试管中。反应35分钟后，采用350nm的激发波，用荧光光谱仪测试探针与不同浓度(0，5,10,15,20,23.3,26.7,30,33.3,40,50,60,80,100,120,140,160,180,200,250,300,350,400μm)的l-半胱氨酸的荧光光谱变化。荧光光谱变化情况如图4所示。结果显示，随着加入不同浓度的l-半胱氨酸后，在523nm处荧光发射增强。