1.甘薯IbCBF3基因非生物胁迫特异性表达的启动子,其特征在于:所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的甘薯IbCBF3基因非生物胁迫特异性表达的启动子;其特征在于:扩增所述甘薯IbCBF3启动子任意片段的引物对如SEQ ID NO.2~11所示。
3.根据权利要求2所述的甘薯IbCBF3基因非生物胁迫特异性表达的启动子;其特征在于:扩增所述甘薯IbCBF3启动子全长的引物对如SEQ ID NO.12~13所示。
4.根据权利要求3所述的甘薯IbCBF3基因非生物胁迫特异性表达的启动子;其特征在于:构建甘薯IbCBF3上游基因IbICE1,其特征在于序列表中SEQ ID NO.14所示的cDNA片段。
5.根据权利要求4所述的甘薯IbCBF3基因非生物胁迫特异性表达的启动子;其特征在于:扩增所述甘薯IbIDE1启动子全长的引物对如SEQ ID NO.15~16所示。
6.根据权利要求5所述的甘薯IbCBF3基因非生物胁迫特异性表达的启动子;其特征在于:构建甘薯IbCBF3基因非生物胁迫特异性表达的启动子的方法,
(1)对甘薯IbCBF3基因启动子的克隆,以甘薯cDNA为模板,对该序列PCR扩增,获得甘薯IbCBF3基因启动子序列全长;
(2)构建甘薯IbCBF3上游基因IbICE1,连接到T-blunt载体上,并将其转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,获得重组载体IbCBF3 pro-GUS和CaMV35S-IbICE1;
(3)重组载体质粒分别转化至农杆菌菌株GV3101中,在YEP培养基中提取单菌落基因组进行PCR验证。
7.含有权利要求1-6任一所述启动子及其上游基因重组载体、重组菌、转基因细胞系或表达盒。
8.根据权利要求7所述的启动子及其上游基因含有上述SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.14所示的DNA片段。
9.权利要求1所述的甘薯IbCBF3基因非生物胁迫特异性表达的启动子在植物的遗传育种中的应用。
10.根据权利要求9所述的启动子,其特征在于:为核苷酸序列中的2118位碱基的核酸序列,该核酸序列编码一个受低温诱导的、能调控冷诱导基因的转录因子;所述启动子区域包含4个ABRE、1个ERE和1个CGTCA-motif等顺式作用元件,能特异地对脱落酸(ABA)、乙烯和茉莉酸甲酯(MeJA)等激素应答。该启动子还包含5个MYCRE顺式作用元件CANNTG,能与上游调控因子ICE(INDUCER OF CBF EXPRESSION)基因结合。