H为5. 0,在 2L/min的通气条件下连续发酵24小时。发酵反应结束后，在90°C，加热失活15min后，离 心分离，将上清液定容到7, 000g。取样分析其GABA生成浓度为5, 769. Omg/L，谷氨酸的残 留量仅为22. lmg/L。
[0024] 将以上的发酵反应液7, OOOg通过真空减圧浓缩后，获得GABA含量10. 5%的浓缩 液350g。该浓缩液可作为生产含有GABA的各种饮料、食品等保健食品的功能辅料。
[0025] 实施例2 :除了不添加酵母菌体和葡萄糖之外，发酵反应液的配方组成及发酵反 应条件都与实施例1 一样，使用成熟的新鲜锦粟南瓜作为发酵原料，利用10升发酵罐进行 了生物发酵生产GABA的实验，最终获得发酵上清液7, 000g。取样分析其GABA生成浓度为 4, 061. 2mg/L〇
[0026] 实施例3 :使用成熟的新鲜日本南瓜（花瓜）作为发酵原料，按南瓜：纯净水=1:1 的比例磨碎打浆后备用。往灭菌后的10升发酵罐中注入含有味精1.5%、新鲜日本南瓜 汁40 %、及面包酵母0. 5 %浓度的发酵反应液8, 000g，并设定发酵温度为37°C，反应pH为 5. 0,在2L/min的通气条件下连续发酵24小时。发酵反应结束后，在90°C，加热失活15min 后，离心分离，将上清液定容到8, 000g，取样分析其GABA生成浓度为4, 689. 0mg/L。
[0027] 实施例4 :使用新鲜猕猴桃作为发酵原料，按猕猴桃：纯净水=1:1的比例磨碎打 浆后备用。往灭菌后的10升发酵罐中注入含有葡萄糖3%、味精1. 5%、新鲜猕猴桃汁40%、 及面包酵母〇. 5 %浓度的发酵反应液8, 000g，并设定发酵温度为37°C，反应pH为5. 0,在 2L/min的通气条件下连续发酵24小时。发酵反应结束后，在90°C，加热失活15min后，离 心分离，将上清液定容到8, 000g，取样分析其GABA生成浓度为5, 264. 5mg/L。
[0028] 实施例5 :使用市售香蕉作为发酵原料，按香蕉：纯净水=1:1的比例磨碎打浆后 备用。往灭菌后的10升发酵罐中注入含有味精1.5%、香蕉汁40%的发酵反应液8, 000g， 并设定发酵温度为37°C，反应pH为5. 0,在2L/min的通气条件下连续发酵24小时。发酵反 应结束后，在90°C，加热失活15min后，离心分离，将上清液定容到8, 000g，取样分析其GABA 生成浓度为3, 523. 7mg/L。
[0029] 以上实施例的味精添加量可在1. 0?3. 0%范围内变动，对GABA生成浓度的影响 不大，但味精的过剩添加会使发酵液中残留较高浓度的味精，需要进一歩分离去除。
[0030] 试验例1 :不同种类的新鲜果蔬汁发酵生成GABA能力的测定 为了测定不同种类的新鲜果蔬汁发酵生成GABA能力的差异，以及验证添加酵母菌是 否有促进果蔬汁生成GABA能力的効果，本发明分别选用了日常比较常见的19种果蔬汁进 行了发酵生成GABA能力的实验，并比较其最终发酵液中的GABA生成浓度的差异。实验分 为三组，各组的实验条件如下： (1)第一组：新鲜果蔬汁发酵 新鲜果蔬洗净，并按原料：纯净水=1:1的比例打浆后的果蔬汁作为发酵原料使 用（下同）。分别在19个灭菌后的500ml三角烧杯中注入含有不同种类新鲜果蔬汁 的发酵反应液各200g(含葡萄糖3%，味精1.5%，果蔬汁40%，余量水），置于37°C的 摇床中在150rpm的摇动速度下连续发酵2天。之后，95°C加热15min失活，离心分离 (6, OOOrpmX IOmin)，将上清液定容到发酵前的200g，分别取样分析其GABA的生成浓度（使 用日本电子株式会社制造的全自动氨基酸分析仪几 C-500/V分析GABA的含量，以下同）。
[0031] (2)第二组：新鲜果蔬汁添加酵母发酵 发酵反应液除了分别添加〇. 5%重量浓度的面包酵母外，其他的发酵条件与第一组相 同。
[0032] (3)第三组：新鲜果蔬汁加热失活后添加酵母发酵 除了将含有新鲜果蔬汁的原料在95°C加热15min失活，放冷后分别添加0. 5%面包酵 母以外，其他的发酵条件与第一组相同。
[0033] 表1.不同种类新鲜果蔬汁发酵生成GABA能力的测定（mg/L)
【主权项】
1. 一种通过新鲜果蔬汁发酵制备Y -氨基丁酸的方法，其特征在于，所述方法包括如 下步骤： (1) 将新鲜果蔬洗净，按新鲜果蔬：纯净水=1:1?5的比例混合打浆得果蔬汁； (2) 选择以下之一的配方发酵制备氨基丁酸： 配方一、按照重量百分比计，各组分组成为：果蔬汁10?50%，味精0. 1?3. 0%，干燥 酵母菌体0. 1?3. 0 %，余量为水； 配方二、按照重量百分比计，各组分组成为：果蔬汁10?50%，味精0. 1?3. 0%，干燥 酵母菌体0. 1?3.0%，葡萄糖0.5?5.0%，余量为水； 配方三、按照重量百分比计，各组分组成为：果蔬汁10?50 %，味精0. 1?3. 0 %，余量 为水； 发酵过程控制温度为10?50°C，pH3?7,发酵时间6?48小时。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述配方一的果蔬汁的果蔬原料为南瓜、 猕猴桃、香蕉、哈密瓜或辣椒。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述配方二的果蔬汁的果蔬原料为南瓜、 猕猴桃、香蕉、哈密瓜或辣椒。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述配方三的果蔬汁的果蔬原料为南瓜、 香蕉、橙、哈密瓜、茄子、菠菜或辣椒。
5. 根据权利要求1-4任意一项所述的方法，其特征在于：发酵过程中连续通入空气。
6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于：空气的通入量为0. 1?0. 5V/V。
7. 根据权利要求1-4任意一项所述的方法，其特征在于：发酵过程控制温度为20? 37。。，pH 5-6。
8. 根据权利要求1-4任意一项所述的方法，其特征在于：发酵时间20?24小时。
【专利摘要】本发明公开了一种通过新鲜果蔬汁发酵制备γ-氨基丁酸的方法，本发明的方法主要为采用新鮮果蔬汁与味精、酵母、葡萄糖等成分进行合理组合，通过发酵生产γ-氨基丁酸。本发明所使用的原料全部为普通的食品素材，产品安全性高；在发酵过程中，酵母菌体基本上不増殖，无需添加額外的碳源、氮源、及各种生长促进剂，发酵液成分単純，分离精製容易；生产周期短，操作简单易行，生产成本低，适合大規模工业化生产，γ-氨基丁酸产量高。
【IPC分类】C12P13-00
【公开号】CN104611386
【申请号】CN201410844519
【发明人】郭晓风, 王春茹, 舒成亮, 单胜艳
【申请人】杭州娃哈哈科技有限公司
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2014年12月30日