Cippct，其制备，纳米结构，活性和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及（5aS，12S，14aS)-5，14-二酮-12-(2-色氨酰苏氨酸苄酯基-乙 基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯[1，2 :4,5]-吡嗪并[1，2: 1，6]吡啶并[3,4-b]吲哚（简称CIPPCT)。涉及它的制备方法，涉及它的纳米结构，涉及它 的抗肿瘤作用，涉及它对尿激酶的抑制作用，阐明了它在医学中的应用。本发明属于生物医 药领域。 技术背景
[0002] 生物纳米系统可以直观地观察。纳米技术在过去几十年的进步主要体现在药物输 送系统，如脂质体。发明人致力于发展的小分子纳米结构，是完全独立于药物输送系统的发 明。
[0003] 纤维蛋白溶酶原活化（PA)系统包括的尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA)不仅是是 纤溶系统中主要的调节剂之一，而且与肿瘤密切相关。在很多恶性肿瘤中uPA的过度表达 可使肿瘤恶化。下调uPA已成为癌症治疗和预防肿瘤转移的潜在策略。不过目前没有相应 的发明见诸文献。
[0004] 恶性肿瘤严重威胁人类的健康。除了自身对肿瘤患者的预后恶劣之外，恶性肿瘤 并发的转移进一步恶化患者的预后。例如，超过90%以上的恶性肿瘤患者都是死于肿瘤转 移。
[0005] 发明人曾经公开下结构的（5aS，12S，14aS)_5,14-二酮-12-(2-色氨酸基-乙 基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯[1，2 :4,5]-吡嗪并[1，2: 1，6]吡啶并[3,4-b]吲哚（简称CIPPC)可有效地抑制尿激酶的纤溶酶活性，显示止血作 用。不过一直没有得到同时具有抗肿瘤作用的化合物。
[0006]
[0007]发明人在分析数百种化合物的结构及活性变化的基础上，认识到将Thr-OBzl引 到CIPPC的色氨酸残基的羧基上，形成的化合物会同时具有抗肿瘤和抑制尿激酶两种作 用。基于这个认识，发明人提出了本发明。
【发明内容】
[0008] 本发明的第一个内容是提供下面结构的（5aS，12S，14aS)-5，14-二酮-12-(2-色 氨酰苏氨酸苄酯基-乙基-1-基）-1，2, 3, 5, 5a，6,11，12,14,14a-十氢-5H，14H-吡咯[1， 2 :4,5]_吡嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-b]叼丨哚（CIPPCT)。
[0009]
[0010]本发明的第二个内容是提供制备（5aS，12S，14aS)-5，14-二酮-12-(2-色氨酰苏 氨酸苄酯-N-乙基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5札14!1-吡咯[1，2:4，5]_吡嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-b]吲哚（CIPPCT)的方法，该方法由以下步骤构成： [0011] ⑴在盐酸存在下，L-色氨酸甲酯和1，1，3, 3-四甲氧基丙烷缩合为1- (2, 2-二甲 氧基乙基）-1，2, 3,4-四氢咔啉-3-羧酸甲酯；
[0012] (2)在二异丙基胺存在下1-(2,2-二甲氧基乙基）-1，2,3,4_四氢咔啉-3-羧酸 甲酯和Z-Pro-Cl缩合为（5aS，12S/R，14aS) -5,14-二酮-12-二甲氧基甲烷-1，2, 3, 5, 5a， 6，11，12，14，14&-十氢-5札1纽-吡咯[1，2:4,5]吡嗪并[1，2:1，6]吡啶并[3,4-13]吲哚 (2)；
[0013] (3)在三乙胺和无水硫酸钠的存在下，（5&3，123/1?，14&3)-5，14-二酮-12-二甲氧 基甲烷-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯[1，2:4,5]吡嗪并[1，2:1，6] 吡啶并[3,4-b]吲哚（2)和HC1 .Trp-OBzl缩合为（5&5，125，14&5)-5，14-二酮-12-(2-色 氨酸苄酯基4-乙基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯-[1，2:4， 5]吡嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-Β]剛哚（3a)和（5&3，121?，14&3)-5，14-二酮-12-(2-色 氨酸苄酯基4-乙基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯-[1，2: 4,5]吡嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-B]吲哚（3b);
[0014] (4)冰浴下在甲醇中（5&3，123，14&3)-5，14-二酮-12-(2-色氨酸苄酯基4-乙 基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯-[1，2:4,5]吡嗪并[1，2: 1，6]吡啶并[3,4-B]吲哚（3a)水解生成（5aS，12S，14aS)-5，14-二酮-12-(2-色氨酸乙 基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯-[1，2:4,5]吡嗪并[1，2: 1，6]吡啶并[3,4-B]叼丨哚（CIPPC);
[0015] (5)冰浴下在无水DMF中，用N，N-二环己基碳二亚胺（DCC)和无水Na2S04作脱 水剂。（5aS，12S，14aS) -5,14-二酮-12- (2-色氨酸乙基-1-基）-1，2, 3, 5, 5a，6,11，12， 14，14&-十氢-5札1纽-吡咯-[1，2:4,5]吡嗪并[1，2:1，6]吡啶并[3,4-8]吲哚（(^?〇 与Thr-OBzl用N-甲基吗啉调解pH至9,在室温下偶联生成（5aS，12S，14aS)-5，14_: 酮-12-(2-色氨酰苏氨酸苄酯基-乙基-1-基）-1，2, 3, 5, 5a，6,11，12,14,14a-十氢-5H， 14H-吡咯-[1，2 :4,5]吡嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-B]叼丨哚（CIPPCT)。
[0016] 本发明的第三个内容是测定（5aS，12S，14aS)-5,14-二酮-12-(2-色氨酰苏氨酸 苄酯-N-乙基-1-基）-1，2, 3, 5, 5a，6,11，12,14,14a-十氢-5H，14H-吡咯[1，2 :4, 5]-吡 嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-b]吲哚（CIPPCT)对肿瘤细胞增殖的抑制作用。
[0017] 本发明的第四个内容是测定（5aS，12S，14aS)-5,14-二酮-12-(2-色氨酰苏氨酸 苄酯-N-乙基-1-基）-1，2, 3, 5, 5a，6,11，12,14,14a-十氢-5H，14H-吡咯[1，2 :4, 5]-吡 嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-b]吲哚（CIPPCT)对肿瘤生长的抑制作用。
[0018] 本发明的第五个内容是测定（5aS，12S，14aS)_5,14-二酮-12-(2-色氨酰苏氨酸 苄酯-N-乙基-1-基）-1，2, 3, 5, 5a，6,11，12,14,14a-十氢-5H，14H-吡咯[1，2 :4, 5]-吡 嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-b]吲哚（CIPPCT)对尿激酶水平的下调作用。
[0019] 本发明的第六个内容是测定（5aS，12S，14aS)-5，14_二酮-12-(2-色氨酰苏氨酸 苄酯基-乙基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯-[1，2 :4,5]吡 嗪并[1，2 :1，6]吡啶并[3,4-B]吲哚（CIPPCT)的纳米结构。
【附图说明】
[0020] 图1.本申请（5&3，123，14&3)-5，14-二酮-12-(2-色氨酰苏氨酸苄酯基-乙 基-1-基）-1，2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5!1，14!1-吡咯[1，2 :4,5]-吡嗪并[1，2: 1，6]吡啶并[3,4-b]吲哚结构式。
[0021] 图 2. (5&3，123，14&3)-5，14-二酮-12-(2-色氨酰苏氨酸苄酯基-乙基-1-基）-1， 2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5札14!1-吡咯-[1，2 :4,5]吡嗪并[1，2:1，6]吡啶并[3， 4-B]吲哚（CIPPCT)的合成路线.i)盐酸；ii)二异丙基胺，Z-Pro-Cl;iii)三乙胺，无水 硫酸钠和HC1 ·Trp-OBzl;iv)冰浴，甲醇，无水DMF，N，N-二环己基碳二亚胺（DCC)，无水 Na2S0々N-甲基吗啉。
[0022] 图 3. (5&3，123，14&3)-5，14-二酮-12-(2-色氨酰苏氨酸苄酯基-乙基-1-基）-1， 2,3,5,5&，6，11，12，14，14&-十氢-5札14!1-吡咯-[1，2 :4,5]吡嗪并[1，2:1，6]吡啶并[3， 4-B]吲哚（CIPPCT)抑制肿瘤细胞增殖的活性。
[0023] 图4. (5aS，12S，14aS) -5,14-二酮