一种提取及保存核酸的试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型涉及生物检测领域，具体地，本实用新型提供了一种能够用于提取和 保存核酸的试剂盒。
【背景技术】
[0002] 基因是所有生物体内的信息贮存物质，这些信息包括生物体的基本特征、生物体 的组成成分和组成方式等。由于生物体的生命活动是组成生物体的各种物质相互作用的结 果，因此，基因信息也包含了生物体生命活动形式和方式的信息。基因检测就是通过实验显 示出基因的信息，通过基因检测可进行引起疾病的微生物种类分析、身份鉴定、临床病理诊 断、生理病理特征分析。
[0003] 基因检测的质量和水平主要由样品处理、信息量及分析技术来决定，检测的样品 可以是血液、唾液、口腔黏膜、体液、头发根部、组织等，对这些生物样本进行样本处理分离 核酸是分子生物学、医学检验中的必经步骤。
[0004] 采集的血液或其他生物样本通常会送到实验室中进行核酸提取，由于这些生物样 本是潜在的病毒及细菌感染源，转运或处理这些生物样品给操作人员生命健康带来威胁； 同时，样本通常需要在低温存储及运输，不正确的生物样本采集、转运及处理过程常常导致 核酸物质降解、从而导致假阴性结果。
[0005] 磁珠核酸纯化方法将DNA结合到氧化硅等磁性载体上，而杂质被选择性洗脱掉正 在实验室中得到了广泛应用。然而，现有的磁珠核酸分离技术仍存在一些不足：如复杂的样 品处理过程：需进行蛋白酶消化过程、需要温度控制等，；这些问题对快速核酸样本处理带 来不利影响，特别是阻碍了其在大量核酸样本安全采集及检测中的应用。
[0006] 因此，需要一种能结合、保存及转运生物样本中核酸，同时安全便捷地进行后续基 因检测的方法和试剂。 【实用新型内容】
[0007] 本实用新型的目的是提供一种能结合、保存及转运生物样本中核酸，同时安全便 捷地进行后续基因检测的核酸提取试剂盒。
[0008] 本实用新型的第一方面，提供了一种用于提取及保存核酸的试剂盒，所述的试剂 盒包括：
[0009] 一个或多个储存容器，所述的储存容器中包括：
[0010] 核酸结合相，所述的核酸结合相用于吸附和/或结合待纯化的核酸；
[0011] 裂解-结合液，所述的裂解-结合液用于裂解细胞膜，释放待纯化核酸，并促使待 纯化的核酸结合于所述的核酸结合相；
[0012] 且所述的核酸结合相具有：（1)磁性内核；（2)位于所述内核上的氧化硅层；（3) 位于所述氧化硅层表面的羧基修饰层。
[0013] 在另一优选例中，所述的细胞裂解结合液含有以下组分：（i)chaotropic盐，浓度 为3-6M ;(ii)盐溶液（包括一价盐、二价盐），浓度为0. 1-1. 5M 表面活性剂，浓度为 2-5% (v/v) ;(iv)螯合剂，浓度为 0-100mM;和（v)醇，浓度为 20-60% (v/v)。
[0014] 在另一优选例中，所述核酸结合相的磁性内核选自下组：聚合物材料内核、多糖类 材料内核、无机载体材料内核，或其组合。
[0015] 在另一优选例中，所述的裂解结合液中含高浓度盐溶液，且所述的盐为单价盐、二 价盐、铵盐，或其组合，其浓度为〇. 1-1. 5M。
[0016] 在另一优选例中，所述的储存容器选自下组：试管、离心管、印pendorf管、培养 瓶。
[0017] 在另一优选例中，所述的储存容器为一次性容器。
[0018] 在另一优选例中，所述的储存容器为带刻度塑料容器。
[0019] 在另一优选例中，所述的储存容器为预先装有定量液体的塑料容器。
[0020] 在另一优选例中，所述的储存容器还具有一密封盖，且所述的密封盖可以被注射 器或毛细管扎入。
[0021] 在另一优选例中，所述的密封盖为塑料密封盖或橡胶密封盖。
[0022] 在另一优选例中，所述的密封盖用于防止氧气和/或水进入储存容器。
[0023] 在另一优选例中，所述的储存容器具有一内管部分和一采样管部分，且所述的内 管部分位于采样管部分内。
[0024] 在另一优选例中，所述的内管含磁性内核和裂解结合液，且所述的内管下部可以 被塑料物体、注射器或毛细管扎入或穿刺。
[0025] 在另一优选例中，所述的内管为塑料内管或橡胶内管。
[0026] 在另一优选例中，所述的内管具有一可穿刺下部，所述的可穿刺下部可通过穿刺 破坏其结构完整性。
[0027] 在另一优选例中，所述的采样管还具有一穿刺部分，且所述的穿刺部分用于扎入 或穿刺所述的内管，从而破坏所述内管的完整性。
[0028] 在另一优选例中，所述的储存容器的容量为1. 5_15ml。
[0029] 在另一优选例中，所述的核酸结合相为磁性微球。
[0030] 在另一优选例中，所述的磁性微球的粒径为50纳米-2微米，较佳地为300-1000 纳米。
[0031] 在另一优选例中，单个所述储存容器中的所述核酸结合相为0. l-5mg。
[0032] 在另一优选例中，所述的试剂盒还包括样本采集装置。
[0033] 在另一优选例中，所述的样本采集装置是微量样本采集装置。
[0034] 在另一优选例中，所述的微量指样本的采集量为10ul_5ml液体样本。
[0035] 在另一优选例中，所述的微量指样本的采集量< 2ml，较佳地为< 1ml，更佳地为 < 0. 5ml。
[0036] 在另一优选例中，所述的样本采集装置与所述储存容器相连。
[0037] 在另一优选例中，所述的样本采集装置与所述的密封盖相连。
[0038] 在另一优选例中，所述的样本采集装置为采血装置。
[0039] 在另一优选例中，所述的试剂盒还包括抗凝血剂。
[0040] 在另一优选例中，所述的采血装置为指尖采血装置，较佳地，所述的指尖采血装置 选自下组：指尖采血针、拭子、吸水纸、涂片、毛细管、滴管。
[0041] 在另一优选例中，所述的样本采集装置为采集口腔黏膜细胞的刮棒或唾液收集 器。
[0042] 在另一优选例中，所述的试剂盒还包括洗涤液：所述的洗涤液用于从核酸结合相 上洗去非特异吸附组分；和/或
[0043] 所述的试剂盒还包括DNA洗脱液，所述的DNA洗脱液用于使核酸与所述核酸结合 相发生解离。
[0044] 在另一优选例中，所述的非特异吸附组分选自下组：蛋白、多糖、脂类，或其组合。
[0045] 在另一优选例中，所述的洗涤液位于第二储存容器内。
[0046] 在另一优选例中，所述的DNA洗脱液选自下组：水、弱碱性溶液、生物缓冲液，或其 组合。
[0047] 在另一优选例中，所述弱碱性溶液的pH值为7. 5-9。
[0048] 在另一优选例中，所述的DNA洗脱液位于第三储存容器内。
[0049] 应理解，在本实用新型范围内中，本实用新型的上述各技术特征和在下文（如实 施例）中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。 限于篇幅，在此不再一一累述。
【附图说明】
[0050] 图1是本实用新型的一个优选例中容器的示意图；
[0051] 图2是本实用新型的一个优选例中试剂盒的示意图；
[0052] 图3是本实用新型的一个优选例中试剂盒的示意图；
[0053] 图中，1为储存容器、2为裂解结合液、3为核酸结合相、4为密封盖、5为内管、6为 采样管。
【具体实施方式】
[0054] 本发明人经过长期而深入的研宄，研制了一种能够用于样本采集、DNA提取以及保 存的试剂盒。所述的试剂盒不仅可以用于提取生物样本中的DNA，还能够稳定保存提取完毕 的DNA样品，因此适合用于大规模生物样本采集及保存，例如普通实验室或野外样本采集 等。
[0055] 磁性微球
[0056] 如本文所用，术语"磁性微球"、"磁珠"、"磁性颗粒"可互换使用，均指用于本实用 新型核酸分离的一种优选核酸结合相。
[0057] 在本实用新型中，磁性微球的尺寸没有特别限制，一般其粒径为50纳米-2微米， 较佳地为300-1000纳米。
[0058] 在本实用新型中，磁性微球的材料没有特别限制，可以含有或由各种磁性材料构 成。
[0059] 在本实用新型中，