基于荧光染料在支化聚醚骨架上的多聚的明亮荧色物的制作方法

文档序号:11933718阅读:来源:国知局

技术特征:

1.根据通式I的荧光染料:

其中

C为包含20-200个原子的核部分;

S为相同或不同的包含1-10个碳原子的醚残基;

n为2-500范围的整数;

m为0-500范围的整数;

x为2-50范围的整数;

y为1-50范围的整数;

R为相同或不同的残基,其包含能够与生物分子形成共价键的反应性基团;

F为相同或不同的共价连接到(S)n的荧光团。

2.根据权利要求1的荧光染料,其中所述荧光团F选自吨染料、若丹明染料、香豆素染料、花青染料、芘染料、嗪染料、吡啶基唑染料和吡咯亚甲基染料。

3.根据权利要求1或2的荧光染料,其中所述荧光团F再一次被赋予水溶性的取代基取代,所述赋予水溶性的取代基选自磺酸酯、膦酸酯、磷酸酯、磺酰胺、聚醚和碳酸酯。

4.根据权利要求1-3中任一项的荧光染料,其中所述核部分C为多羟基化合物、多氨基化合物或多巯基化合物。

5.根据权利要求1-4中任一项的荧光染料,其中所述核部分C选自季戊四醇、二季戊四醇,三季戊四醇和六聚甘油。

6.根据权利要求1-5中任一项的荧光染料,其中S代表残基-CH2CH2O-,且n、m独立地为10-200范围的整数。

7.根据权利要求1-6中任一项的荧光染料,其中R包括选自N-羟基琥珀酰亚胺酯、四氟苯基酯、五氟苯基酯、磺基二氯苯基酯、亚胺酯、异硫氰酸酯、异氰酸酯、磺酰卤、酰卤、酰基叠氮化物、单氯三嗪、二氯三嗪、醛、乙二醛、马来酰亚胺、碘代乙酰胺、肼、叠氮硝基苯基、亚磷酰胺、炔、烷基叠氮化物、二烯或烯丙基的反应性基团。

8.根据权利要求1-7中任一项的荧光染料,其特征在于通式(II)的结构:

其中Z=F或R,且p=n或m

条件是通式(II)包含至少两个F和至少一个基团R。

9.根据权利要求1-7中任一项的荧光染料,其特征在于通式(III)的结构:

其中Z=F或R,且p=n或m

条件是通式(II)包含至少两个F和至少一个基团R。

10.包含经由基团R缀合到至少一个生物分子的一个或多个根据权利要求1-9中任一项的荧光染料的荧光生物分子缀合物,所述至少一个生物分子选自各自为天然或重组体来源的免疫球蛋白、抗体、抗体片段、Fab、Fab'、F(ab')2、sdAb、scFv、di-scFv。

11.包含经由基团R缀合到至少一个生物分子的一个或多个根据权利要求1-9中任一项的荧光染料的荧光生物分子缀合物,所述至少一个生物分子选自肽/MHC-复合物、用于细胞黏附的受体或共刺激分子、受体配体、抗原、半抗原结合剂、抗生物素蛋白、链霉抗生物素蛋白、中性抗生物素蛋白、适体、引物和连接酶底物。

12.根据权利要求10或11的荧光生物分子缀合物,其中至少一个生物分子与2-20个根据权利要求1-9中任一项的荧光染料缀合,所述荧光染料各自包含1-10个荧光团F。

13.通过流式细胞法和/或通过荧光显微镜法分析用根据权利要求10-12中任一项的荧光生物分子缀合物标记的细胞或组织的方法。

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