中溶剂为Ν，Ν' -二甲基甲酰胺，回流温度100°C，反应时间24小时；步骤 (3)中硅胶柱层析所用的洗脱剂为体积比为10:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶液。
[0013] 所述的
的合成方法包括如下步骤： (1) 将间氨基苯酚、碳酸钠和正溴丁烷溶于溶剂，加热回流反应； (2) 冷却至室温，静置分层，有机相经干燥后，除去溶剂得粗产物； (3) 经硅胶柱层析纯化，得到
[0014] 步骤（1)中溶剂为体积比为1:1的异丙醇和水的混合溶剂，回流反应时间24小时； 步骤（3)中硅胶柱层析所用的洗脱剂为体积比为10:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶液。
[0015] 所述的近红外方酸染料作为荧光和比色双响应的铜离子探针。
[0016] 与铜离子形成的配合物用作荧光和比色双响应的焦磷酸根探针。
[0017] 与铜离子形成的配合物用作荧光和比色双响应的α -氨基酸探针。
[0018] 本发明通过向苯胺侧链的氮接入正丁基，可以调节染料的溶解性能和聚集行为， 从而影响染料的光物理性质。通过氧醚链的引入，可以改善它们在水中的溶解性，同时氧醚 结构与苯胺上的氮原子结合可用于铜离子的捕获，成为与铜离子有特异响应的比色荧光双 响应探针。进而利用焦磷酸根（PPi)和α-氨基酸与铜离子形成稳定的复合物，夺取染料 与铜离子形成的配合物的中心金属，恢复染料的光谱性质，将该配合物用作检测焦磷酸根 及α-氨基酸的比色荧光双响应探针。
[0019] 本发明涉及的近红外方酸染料具有如下特征：染料的最大吸收位于645-656 nm， 具有很高的摩尔吸光系数和荧光量子产率。在非质子溶剂中，随着极性的增强，染料最大吸 收波长发生红移，在极性较大的DMSO溶剂中，其最大吸收波长比在极性较小的氯仿溶剂中 红移了 11 nm。随着溶剂极性的变化，染料吸收强度变化很小，证明溶剂极性对染料的摩尔 吸光系数的影响较小。
[0020] 不同比例的乙腈/水溶液中，染料的吸收强度会随含水量增加而逐渐降低。当体 系中含水量增加至60%时，染料吸收光谱仅有微小变化。当含水量增加至70 %时，646 nm 处的单体吸收峰明显降低，575 nm左右处出现了聚集态的吸收峰，在725 nm左右处也出现 小的肩峰。随着乙腈/水混合溶剂中含水量的继续增加，单体的吸收峰强度降低，聚集态吸 收峰强度增强。这表明了，相比其它方酸染料，所述的方酸染料的水溶性和抗聚集能力得到 了显著提高。
[0021] 本发明的显著优点在于：该类方酸染料荧光探针稳定性好，光学性能优异，通过氧 醚链的引入，可以改善它们在水中的溶解性，而且氧醚链与苯胺上氮原子构成的离子穴可 用于铜离子的捕获，可用于离子响应的荧光探针，并进一步应用于焦磷酸根（PPi)和α-氨 基酸的检测。
【附图说明】
[0022] 图1是浓度为2. 5 μΜ的方酸染料在不同有机溶剂中的吸收光谱图； 图2是浓度为2. 5 μΜ的方酸染料在不同比例的乙腈/水的吸收光谱变化图； 图3是浓度为2. 5 μ M的方酸染料在乙腈中对金属离子的吸收光谱响应； 图4是浓度为2. 5 μ M的方酸染料在乙腈中对金属离子的荧光光谱响应； 图5是浓度为2. 5 μΜ的方酸染料在乙腈/水（90:10，v/v)溶液中对铜离子的吸收 光谱滴定图； 图6是浓度为2.5 μΜ的方酸染料在乙腈/水（90:10，v/v)溶液中对铜离子的荧光 光谱滴定图，插图：检测体系在670 nm处的荧光强度随铜离子浓度变化的趋势图（Aex = 620 nm, PMT = 600 V, slit = 5 nm/5 nm)； 图7是浓度为2.5 μΜ的方酸染料与铜离子（25 μΜ)的络合物在乙腈/水（90:10，v/ v)溶液中对焦磷酸根（PPi)的吸收光谱滴定图，插图：A为方酸染料的照片，B为方酸染 料与铜离子配合物的照片，C为加入焦磷酸根（PPi)后的照片； 图8是浓度为2.5 μΜ的方酸染料与铜离子（25 μΜ)的络合物在乙腈/水（90:10，v/ v)溶液中对焦磷酸根（PPi)的荧光光谱滴定图（λ ex = 620 nm，PMT = 600 V，slit = 5 nm/5 nm)； 图9是浓度为2.5 μΜ的方酸染料与铜离子（25 μΜ)的络合物在乙腈/水（90:10，v/ v)溶液在670 nm处的荧光强度随焦磷酸根（PPi)浓度变化的趋势图，插图：焦磷酸根（PPi) 浓度为6. 25-13. 75 μΜ的荧光强度变化趋势图（λ ex = 620 nm, PMT = 600 V，slit = 5 nm/5 nm)； 图10是浓度为2.5 μΜ的方酸染料与铜离子（25 μΜ)的络合物在乙腈溶液中对不同 氨基酸（25 μ Μ)的焚光光谱图（λ ex = 620 nm, PMT = 600 V，slit = 5 nm/5 nm); 图11是浓度为2.5 μΜ的方酸染料与铜离子（25 μΜ)的络合物在乙腈溶液中对组氨 酸（His)的荧光光谱滴定图，插图：检测体系在670 nm处的荧光强度随组氨酸（His)浓度 变化的趋势图（^ex = 620 nm, PMT = 600 V，slit = 5 nm/5 nm)〇
【具体实施方式】
[0023] 实施例1 苯胺衍生物
的制备： 于50 mL的单口烧瓶中，加入间氨基苯酷（3.3 g，30 mmol)，碳酸钠（4.4 g，42 mmol)， 正溴丁烧（12 g，88 mmol)和30 mL异丙醇/水（v/v, 1:1)。加料完成后，升温回流反应过 夜。TLC监控，反应完全后，冷却至室温，溶液分为两层，取有机相。有机相经干燥后，除去溶 剂得棕色油状物。粗产物经硅胶柱层析纯化，用石油醚：乙酸乙酯（10:1，v/v)洗脱，除去 溶剂后得到淡紫色液体 4.7 g。产率 71 %。FTIR (KBr): Vmax 3401，2957，2932，2872， 1620，1579，1505，1464，1368，1241，1193，1144，1025，941，819，751，687 CnT1;1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.90 (t, ^7. 3 Hz, 6H), 1.24-1.33 (m, 4H), 1.47-1.55 (m, 4H), 3.17 (t, ^7.6 Hz, 4H), 5.34 (s, 1H), 6.09 (d, ^7.9 Hz, 1H), 6.14 (s, 1H), 6.21 (d,岁7.5 Hz, 1H), 6.99 (t,岁8.1 Hz, 1H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 13.8, 19.2, 31.0, 68.4, 108.7, 115.5, 121.7, 129.8, 149.2, 159.7.
实施例2 苯胺衍生牧 的制备 于50 mL的单口烧瓶中，加入苯胺衍生物
（0. 44 g，2. 0 mmol)，碳酸 钾（0. 43 g，3. I mmol)，2-氯乙醇（I. 6 g，20 mmol)，催化量碘化钾和 10 mL N, Ν'-二甲基 甲酰胺。加料完成后，升温至l〇〇°C回流反应过夜。停止反应，冷却至室温，倒入盛有冰水 的烧杯中。用二氯甲烷萃取，有机相用水洗涤三次，用饱和食盐水洗涤一次，经无水硫酸镁 干燥，除去溶剂得棕色油状物。粗产物经硅胶柱层析纯化，用石油醚：乙酸乙酯（10:1，v/ V)洗脱，除去溶剂后得到黄色油状液体86 mg，产率16%。FTIR (KBr): Vmax 3391，2956， 2931， 2872， 1612， 1572， 1500， 1456， 1368， 1292， 1243， 1198， 1175， 1144， 1080， 1051，947，898，827，746，687 CnT1; 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 0.95 (t，岁7.6 Hz, 6H), 1.30-1.39 (m, 4H), 1.52-1.60 (m, 4H), 2.14 (s, 1H), 3.23 (t, ^7.6 Hz, 4H), 3.93 (s, 2H), 4.06 (t, J=A. 4 Hz, 2H), 6. 18-6. 20 (m, 2H), 6. 28 (d, 岁8.8 Hz, 1H), 7.09 (t,岁8.0 Hz, 1H); 13CNMR (100 MHz, CDCl3): δ 14.0，20.4， 29.5, 50.8, 61.6, 69.0, 98.9, 100.5, 105.5, 129.9, 149.7, 160.0.
实施例3 所述的近红外方酸染半」 的制备： 于50 mL的圆底烧瓶中，加入苯胺衍生物
：27 mg，0. 10 mmol)，方 酸
（5. 7 mg，0. 050 mmol)和20 mL正庚醇。加料完毕，接上分水器，减压至 76 mmHg左右，加热至回流（135°C左右）反应10小时，溶液变为墨绿色；停止加热，冷却至 室温，减压除去溶剂正庚醇，得到绿色固体。残留物先经石油醚洗涤多次，后经硅胶柱层 析分离，用二氯甲烷：乙酸乙酯（5:1，v/v)洗脱，得到绿色固体7.3 mg，产率24%。熔 点：236-238°C;FTIR (KBr): Vniax 3435，2929，1593，1405，1384，1356，1228，1172， 1111，919，857，810，767 cnT1; 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 0.98 (t，岁7.4 Hz, 12H), 1.35-1.44 (m, 8H), 1.60-1.68 (m, 8H), 3.40 (t, ^7.6 Hz, 8H), 4.04 (d, J=A. 0 Hz, 4H), 4. 10 (d, J=?,. 6 Hz, 4H), 5. 99 (s, 2H), 6. 35 (d, ^8. 8 Hz, 2H), 8. 75 (s, 2H); 13CNMR (100 MHz, CDCl3): δ 13.9，20.3，29.7，51.3，60.3，69.5， 93.6，106.6，111.5，134.0，155.5，162.3，182.5，187.9; ESI-MS: 609. 4 ([M+H]+)· 所述的染料的最