)，W及反应体积20 %蒸馈水，揽拌，加热至85°C，反应 2比。反应结束后，萃取，洗涂，干燥。粗收率为71.5%，蒸馈，收率44.8%，HPLC检测纯度 99.0%，丰度 99.2%。
[0155] B、稳定同位素标记对氨基苯横酸钢-15N的合成
[0156] 在烧瓶中加入稳定同位素标记的苯胺-15n，再依次加入发烟硫酸，苯胺-15n与发烟 硫酸的摩尔比为1:4,再加入乙二醇，苯胺-15N与乙二醇的摩尔比为1:14。反应真空密闭， 反应溫度控制在140°C，反应4h停止反应。静置反应物，待反应物冷却，加入氨氧化钢，直 至呈碱性，冷却，待固体结晶，抽滤。收率为85. 5%，重结晶，收率81. 0%。HPLC检测纯度 99.2%，丰度 99.0%。 阳157] C、稳定同位素标记巧樣黄的合成
[0158] 在烧瓶中加入稳定同位素i5N标记的对氨基苯横酸钢，依次加入亚硝酸钢、盐酸， 对氨基苯横酸钢与亚硝酸钢、盐酸的摩尔比为1:1. 1:4,在0°C下反应40min，另外，如上述 方法再制备一份重氮液，缓慢W对氨基苯横酸钢重氮盐与乙酷下二酸二甲醋的摩尔比为 1:1. 4,加入乙酷下二酸二甲醋，升高溫度至110。反应3h，制备中间体溶液。在0°C下，将 第一份重氮液滴加入中间体溶液，反应化，W体积比10%加入氯化钢，静置化，抽滤、干燥、 称重。收率为67. 2 %，重结晶，收率为56. 2 %，HPLC检测纯度99. 1 %，丰度98. 7 %。 阳159] 实施例18 阳160] A、稳定同位素标记苯胺-15N的合成 阳161] 在烧瓶中依次加入漠苯、"N-氨水，漠苯与"N-氨水的摩尔比为1:7,分别加入S 氯化铁及氧化铁（两者摩尔比为1:3)，W及反应体积20%蒸馈水，揽拌，加热至80°C，反应 20h。反应结束后，萃取，洗涂，干燥。粗收率为68.5%，蒸馈，收率43.0%，HPLC检测纯度 99.4%，丰度 99.2%。
[0162] B、稳定同位素标记对氨基苯横酸钢-15N的合成 阳163] 在烧瓶中加入稳定同位素标记的苯胺-15N，再依次加入发烟硫酸，苯胺-15N与发烟 硫酸的摩尔比为1:3,再加入乙二醇，苯胺-15N与乙二醇的摩尔比为1:12。反应真空密闭， 反应溫度控制在120°C，反应4h停止反应。静置反应物，待反应物冷却，加入氨氧化钢，直 至呈碱性，冷却，待固体结晶，抽滤。收率为86. 5 %，重结晶，收率82. 0 %。HPLC检测纯度 99.2%，丰度 99.0%。
[0164] C、稳定同位素标记巧樣黄的合成 阳1化]在烧瓶中加入稳定同位素i5N标记的对氨基苯横酸钢，依次加入亚硝酸钢、盐酸， 对氨基苯横酸钢与亚硝酸钢、盐酸的摩尔比为1:1. 5:2,在0°C下反应40min，另外，如上述 方法再制备一份重氮液，缓慢W对氨基苯横酸钢重氮盐与乙酷下二酸二甲醋的摩尔比为 1:1. 5，加入乙酷下二酸二甲醋，升高溫度至110°C，反应化，制备中间体溶液。在0°C下，将 第一份重氮液滴加入中间体溶液，反应地，W体积比10%加入氯化钢，静置化，抽滤、干燥、 称重。收率为66. 2 %，重结晶，收率为55. 2 %，HPLC检测纯度99. 0 %，丰度98. 8 %。
【主权项】
1. 一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，该方法是W稳定同位素D 或"C标记的漠苯，经氨化、横化合成稳定同位素D或"C标记的中间体对氨基苯横酸钢，或 W漠苯为原料，与稳定同位素I5N标记的氨化试剂经氨化、横化合成稳定同位素1?标记的中 间体对氨基苯横酸钢，再经重氮化、偶合，即合成得到稳定同位素D或1?或"C标记的违禁 色素。2. 根据权利要求1所述的一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，该 方法具体包括W下步骤： (1) 氨化反应：将稳定同位素D或"C标记的漠苯与氨化试剂混合或W漠苯与稳定同位 素1?标记的氨化试剂混合，再加入氨化催化剂，并于30-150°C条件下，反应l-20h，即制得 稳定同位素D或1?或"C标记的苯胺； (2) 横化反应：将稳定同位素D或"N或"C标记的苯胺加入到有机溶剂中，再加入横化 试剂，并于30-200°C条件下，反应1-2地，即制得稳定同位素D或1?或"C标记的中间体对 氨基苯横酸钢； 做重氮化反应：将稳定同位素D或"N或"C标记的中间体对氨基苯横酸钢加入到酸 性溶剂中，再加入亚硝酸盐，并于〇-15°C条件下，反应0. 5-化，即制得含有稳定同位素D或 ISn或"C标记对氨基苯横酸钢重氮盐的重氮液； (4)偶合反应：向步骤（3)的重氮液中加入2-糞酪，并于-30-100°C条件下，反应 0. 5-她，即制得稳定同位素D或1?或"C标记的违禁色素酸性澄II。3. 根据权利要求2所述的一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，所 述的稳定同位素D或"N或"C标记的违禁色素酸性澄II的分子结构式为：其中，*表示该处碳原子为"C原子。4. 根据权利要求2所述的一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，所 述的氨化试剂为氨水、液氨、氨基钢或氨基钟中的一种或几种，所述的氨化催化剂为=氯化 铁、氯化铜、氧化铜、氧化铁、硫酸铁、硫酸铜中的一种或几种，所述的横化试剂为发烟硫酸、 硫酸或=氧化硫中的一种或几种，所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙酸、乙腊、乙酸酢、乙二 醇、邻二氯苯中的一种或几种，所述的酸性溶剂为硫酸、乙酸、硝酸、甲酸、盐酸中的一种或 几种。5. 根据权利要求2所述的一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，所 述的漠苯与氨化试剂的摩尔比为1 :1-40,所述的苯胺与横化试剂的摩尔比为1 :1-6,所述 的中间体对氨基苯横酸盐与亚硝酸盐的摩尔比为I:1-6,所述的重氮液中对氨基苯横酸钢 重氮盐与2-糞酪的摩尔比为1 :1-6。6. 根据权利要求1所述的一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，该 方法具体包括W下步骤： (A)氨化反应：将稳定同位素D或"C标记的漠苯与氨化试剂混合或W漠苯与稳定同位 素1?标记的氨化试剂混合，再加入氨化催化剂，并于30-150°C条件下，反应l-20h，即制得 稳定同位素D或1?或"C标记的苯胺； 度）横化反应：将稳定同位素D或"N或"C标记的苯胺加入到有机溶剂中，再加入横化 试剂，并于30-200°C条件下，反应1-2地，即制得稳定同位素D或1?或"C标记的中间体对 氨基苯横酸钢； 似重氮化反应：将稳定同位素D或"N或"C标记的中间体对氨基苯横酸钢加入到酸 性溶剂中，再加入亚硝酸盐，并于〇-15°C条件下，反应0. 5-化，即制得含有稳定同位素D或 ISn或"C标记对氨基苯横酸钢重氮盐的重氮液； 做偶合反应：向步骤似的重氮液中加入乙酷下二酸二甲醋，调节抑值至5,于 90-150°C条件下，反应2-地，制得中间体溶液，再另取一份步骤（C)的重氮液，并将其滴加 到中间体溶液中，于〇°C条件下，反应4-化，即制得稳定同位素D或1?或"C标记的违禁色 素巧樣黄。7. 根据权利要求6所述的一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，所 述的稳定同位素D或"C或"N标记的违禁色素巧樣黄的分子结构式为：其中，*表示该处碳原子为13C原子。8. 根据权利要求6所述的一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，所 述的氨化试剂为氨水、液氨、氨基钢或氨基钟中的一种或几种，所述的氨化催化剂为=氯化 铁、氯化铜、氧化铜、氧化铁、硫酸铁、硫酸铜中的一种或几种，所述的横化试剂为发烟硫酸、 硫酸或=氧化硫中的一种或几种，所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙酸、乙腊、乙酸酢、乙二 醇、邻二氯苯中的一种或几种，所述的酸性溶剂为硫酸、乙酸、硝酸、甲酸、盐酸中的一种或 几种。9. 根据权利要求6所述的一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，其特征在于，所 述的漠苯与氨化试剂的摩尔比为1 :1-40,所述的苯胺与横化试剂的摩尔比为1 :1-6,所述 的中间体对氨基苯横酸钢与亚硝酸盐的摩尔比为1 :1-6,所述的重氮液中对氨基苯横酸钢 重氮盐与乙酷下二酸二甲醋的摩尔比为1 :1-6。
【专利摘要】本发明涉及一种稳定同位素标记违禁色素的合成方法，该方法是以稳定同位素D或13C标记的溴苯，经氨化、磺化合成稳定同位素D或13C标记的中间体对氨基苯磺酸钠，或以溴苯为原料，与稳定同位素15N标记的氨化试剂经氨化、磺化合成稳定同位素15N标记的中间体对氨基苯磺酸钠，再经重氮化、偶合，即合成得到稳定同位素D或15N或13C标记的违禁色素。与现有技术相比，本发明工艺路线简单，易于合成，产品易分离提纯，产品化学纯度在99.0％以上，同位素丰度在98.0％atom以上，可充分满足食品安全领域痕量检测的需求，具有很好的经济性和使用价值。
【IPC分类】C09B29/01, C09B29/15, C09B29/50
【公开号】CN105199423
【申请号】CN201510527201
【发明人】杨维成, 王浩然, 罗勇, 杨超, 方超, 李美华, 盛立彦, 潘洁, 孙雯
【申请人】上海化工研究院
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年8月25日