专利名称：化合物微阵列芯片的点样制备方法
技术领域：
本发明涉及一种化合物微阵列芯片的制备方法，尤其涉及化合物微阵列芯片的点样制备方法。
背景技术：
化合物微阵列点样模板制备方法是一种新的快捷通过点样法制备生物芯片的新手段。生物芯片主要指在固体芯片中组装的生物活性物质(包括核酸、蛋白质、细胞及微小组织等)构成的微阵列，以实现对化合物(包括药物)、蛋白质、核酸、细胞以及其它生物组分的准确、快速、大信息量的筛选或检测。多孔检测板(如96孔板)是现行普遍使用的一种用于医药、生化检测和筛选的常规器具。分别把不同蛋白质、核酸探针、细胞株、或生物组织放置或固定于不同的孔洞之中，通过加入不同的化学物，或化合物组合，或生化试剂，或被检测的生物样品，观察不同化学/生物物质的反应，进行快速并行的生化分析、临床检验、或药物筛选。其上的96个反应池彼此隔离，根据用户需要可任意选用反应池的个数。这是现行普遍使用的一种用于生化研究和开发的方法。但这种方法仍需要逐个地把不同化合物、生物分子等分配到各个孔洞之中，制备过程仍较复杂，尤其是试剂成本高，也不便于同时快速连续操作，更不便于同时对试样中多组分的连续快速检测。点样法制备生物芯片是先将分析的生物分子固定在基片材料连接。其主要缺点为探针密度不高。但是作为一种生物平行性分析的新途径和手段具有灵活、简单、投资不高等特点，因而是一种特别适合各种生物样品早期进行科研的手段和方法。但目前点洋仪的费用高达几十万人民币，不利于推广；虽然人工点样则具有费用低廉的优秀，但也存在样品阵点排列不整齐，样品阵点不规则和样品阵点上结合的化合物分子数量不均匀和一致的缺点。
技术内容本发明提出一种制备成本低、操作简单易行、阵点排列整齐并适用于标准化批量生产的化合物微阵列芯片的点样制备方法，采用本发明化合物微阵列芯片点样板制得的化合物阵列芯片阵点上化合物分子密度均匀。
本发明采用如下技术方案，即先取设有孔的块体，然后沿块体上的孔的径向对块体进行机械切割，得到多孔膜片，再将多孔膜片贴合在由硅烷化试剂修饰的玻璃载片表面上，最后，根据待制备的化合物微阵列芯片上的化合物种类及其分布，逐一选取化合物并用点样法将其滴入多孔膜片的孔中并与经修饰的玻璃载片表面上的活性基团发生化学反应而使其固定在载体表面，构成化化合物微阵列芯片。
与现有技术相比，本发明具有如下优点1)由于对块体进行机械切割，可以同时得到许多相同的多孔膜片，继而得到许多相同的贴合在玻璃载片表面的多孔膜片，根据待制备的化合物微阵列芯片上的化合物种类及其分布的需要，可以制备许多相同或者不同的化合物芯片。因而，可以标准化和大批量化生产，制备成本低；2)本发明既具有手工点样制备法所具有的设备简单、成本低廉的优点，又能使得到的化合物分子阵点排列整齐，便于扫描分析；3)用点样法将化合物其滴入多孔膜片的孔中，化合物溶液能有效保留在其滴入的膜片孔中，不会向孔周围迁移，保证化合物溶液充分与玻璃载片表面接触并发生化学反应。因此得到的阵点上化合物分子密度均匀，使化合物阵列芯片分析的准确性高；4)点样仪点样制备化合物阵列芯片相比，不需要昂贵的点样设备，同时化合物阵列芯片的制作能力得到大大提高。
具体实施例一种化合物微阵列芯片的点样制备方法，先取设有孔的块体，然后沿块体上的孔的径向对块体进行机械切割，得到多孔膜片，再将多孔膜片贴合在由硅烷化试剂修饰的玻璃载片上，最后，根据待制备的化合物微阵列芯片上的化合物种类及其分布，逐一选取化合物并用点样法将其滴入多孔膜片的孔中，并与经修饰的玻璃载片表面上的活性基团(如氨基、醛基等)发生化学反应使其固定在体表面，使这些固定化合物形成化合物微阵列芯片。这种化合物分子可以是多聚物化合物分子，例如寡核苷酸、多肽、多糖、肽核酸、蛋白质等生物大分子及其细胞等物质，上述有孔块体可以采取以下两种方法来制备(1)取块体材料，在块体材料上钻孔后得到有孔块体，该块体材料可以是有机高分子材料，如橡胶、塑料、石蜡、凝胶、尼龙、生物大分子或聚电聚合物等，也可以是有机高分子复合材料；(2)将直管平行排列，再在直管之间充填块体材料，使其形成有孔块体，在本实施例中，块体上的孔按阵列分布，在完成了将化合物滴入多孔膜片的孔中并得到固定的操作后，取下贴合在载片上的多孔膜片。载片表面即由这些化合物构成化合物阵列芯片。
实施例一寡核苷酸阵列膜芯片的制备若干密集平行排列的、内径0.35毫米外径0.40毫米的中空纤维管通过胶粘剂粘和成一个整体，中空纤维间通过胶粘剂相互隔离；沿中空纤维管垂直的方向通过机械切片得到包含一系列中空纤维管的膜片；将膜片贴和于一经过醛基修饰的基片上；用点样法将末端修饰氨基的寡核苷酸溶液滴入多孔膜片的不同孔中，寡核苷酸上的氨基与玻璃载片表面上的醛基基团化学反应而使寡核苷酸得到固定，取下贴合在载片上的多孔膜片。载片表面即由这些寡核苷酸构成寡核苷酸阵列芯片。
实施例二蛋白质膜芯片的制备在块体石蜡材料上钻出若干密集平行的直线孔道，直线孔道间由石蜡材料隔离；沿直线孔道垂直的方向通过机械切片得到一系列包含直线孔道的膜片；将膜片贴和于一经过修饰、表面带有醛基基团的玻璃基片上；用点样法将蛋白质分子溶液滴入多孔膜片的不同孔中，蛋白质分子上的氨基与玻璃载片表面上的醛基基团化学反应而使蛋白质分子得到固定，取下贴合在载片上的多孔膜片。载片表面即由这些蛋白质分子构成蛋白质阵列芯片。
权利要求
1.一种化合物微阵列芯片的点样制备方法，其特征在于先取设有孔的块体，然后沿块体上的孔的径向对块体进行机械切割，得到多孔膜片，再将多孔膜片贴合在由硅烷化试剂修饰的玻璃载片表面上，最后，根据待制备的化合物微阵列芯片上的化合物种类及其分布，逐一选取化合物并用点样法将其滴入多孔膜片的孔中并与经修饰的玻璃载片表面上的活性基团发生化学反应而使其固定在载体表面，构成化化合物微阵列芯片。
2.根据权利要求1所述的化合物微阵列芯片的点样制备方法，其特征在于取块体材料，在块体材料上钻孔后得到有孔块体。
3.根据权利要求1所述的化合物微阵列芯片的点样制备方法，其特征在于将直管平行排列，再在直管之间充填块体材料，使其形成有孔块体。
4.根据权利要求2或3所述的化合物微阵列芯片的点样制备方法，其特征在于块体上的孔按阵列分布。
5.根据权利要求1所述的化合物微阵列芯片的点样制备方法，其特征在于取下贴合在载片上的多孔膜片。
全文摘要
本发明公开了一种化合物微阵列芯片的点样制备方法。先取设有孔的块体，然后沿块体上的孔的径向对块体进行机械切割，得到多孔膜片，再将多孔膜片贴合在由硅烷化试剂修饰的玻璃载片表面上，最后，根据待制备的化合物微阵列芯片上的化合物种类及其分布，逐一选取化合物并用点样法将其滴入多孔膜片的孔中并与经修饰的玻璃载片表面上的活性基团发生化学反应而使这些化合物在载体表面得到固定，这些固定化合物便构成化合物微阵列芯片。本发明具有制备成本低、操作简单易行、阵点排列整齐并适用于标准化批量生产的优点，采用本发明制得的化合物阵列芯片阵点上化合物分子密度均匀。
文档编号G01N33/53GK1563416SQ20041001468
公开日2005年1月12日 申请日期2004年4月19日 优先权日2004年4月19日
发明者肖鹏峰, 陆祖宏, 张胜友 申请人:东南大学