专利名称：一种药物组合物制剂的含量测定方法和鉴别方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物制剂的检测方法，特别涉及一种药物组合物制剂的含 量测定方法和/或鉴别方法。
背景技术：
冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)一直是危害人类健康甚至生命的严重疾 病，冠心病的发生，致使相当数量的患者不同程度的丧失劳动能力，既给患者造成生活上的 困难，肉体上的痛苦，又给国家、社会带来一系列问题和严重损失。祖国医学认为，冠心病的 发生虽为标实，实为本虚，制法上活血祛瘀可治其标，但更应益气固本以补其虚，本发明即 是根据这一理论而创立的具有固正扶本，益气活血，行脉止痛的有效中成药。它的研制成功 克服了部分药品单纯活血化瘀而耗气上瘾的不良倾向，又避免了部分药品采用名贵紧缺动 植物，价格昂贵，不宜推广的不足。中药的处方成分比较多，是多成分得鉴别，前处理难度比较大，干扰多。本发明检 测方法先进，消除了干扰，精密度及重现性好，能够全面的对该药品进行质量控制，保证产 品质量的稳定性均一性。
发明内容
本发明的一个目的在于公开一种药物组合物的含量测定方法及其检测方法。本发明目的是通过如下技术方案实现本发明药物组合物制剂的检测方法包括如下鉴别和含量测定中的一种或几种含量测定方法照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水= 25-40 60-80为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000; 取黄芪甲苷对照品，精密称定，加甲醇制成每体积份含0. 0002-0. 0003重量份的溶液，即得 对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量的5/9-5/6，加甲醇40-60体积份，超声 处理30-90分钟，滤过，药渣及滤器用甲醇洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水20-40体 积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4-6次，每次用正丁醇5-40体积份，合并正丁 醇提取液，用氨水洗涤2-4次，每次用氨水10-40体积份，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加 甲醇溶解，转移至5体积份量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得供试品 溶液；分别精密吸取0. 005-0. 015体积份、0. 01-0. 03体积份与供试品溶液0. 01 0. 02体 积份，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算；本发明药物组合物制剂每日用 制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360 μ g或不得少于540 μ g或不得少于 600 μ g或不得少于900 μ g ；鉴别方法A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇20-30体积份，加热 回流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0. 5-2体积份使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0. 04-0. 06重量份，加甲醇20-30体积份，加热回流40-80分钟，放冷，滤 过，滤液蒸干，残渣加甲醇0. 5-2体积份使溶解，制成对照药材溶液；取盐酸小檗碱对照品， 加甲醇制成每体积份含0. 0002-0. 0008重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B 的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各0. 001-0. 003体积份，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水=11-13 5-7 2-4 2-4 0. 5-1. 5为 展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品 色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/6-5/9，加乙醇40_60体积份，加热回 流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水8-12体积份和氨水3-5体积份，混勻，加乙 醚提取2-4次，每次10-20体积份，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇1-3体积份，溶解，作为供 试品溶液；另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每体积份含0. 0005-0. 0015重量份的溶液， 作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0. 005-0. 015 体积份，分别点于同一用0. 5-2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮= 8-10 1-3为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显色至斑点显色清晰，取出，挥尽板上 吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光斑点；C.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/12-7/18，加60-80%乙醇20-30体积 份，加热回流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水8-12体积份使溶解，用稀盐 酸调PH值至1-3，用乙酸乙酯振摇提取1-3次，每次8-12体积份，合并乙酸乙酯液，蒸干，残 渣加乙醇0. 5-2体积份使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每体积 份含0.0005-0. 0015重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验， 吸取上述两种溶液各0. 002-0. 008体积份，分别点于同一硅胶G薄层.板上，以甲苯-三氯 甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸1-3 2-4 3-5 0.2-0.8 1-3为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以2-4%三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点；D、取葛根素对照品，甲醇制成每体积份含0. 0005-0. 0015重量份的溶液，作为 对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇20-30体积份， 加热回流40-80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0. 5-2体积份使溶解，作为供试 品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液0. 002-0. 008体积份及对 照品溶液0. 002-0. 004体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水 =60-70 30-40 8-12的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置 365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧 光斑点。本发明药物组合物制剂的检测方法优选包括如下含量测定方法和鉴别方法中的 一种或几种含量测定方法照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水=32 68 为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000 ；取黄芪甲苷对 照品，精密称定，加甲醇制成每体积份含0. 00025重量份的溶液，即得对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量的5/9-5/6，加甲醇50体积份，超声处理60分钟，滤过，药渣 及滤器用甲醇洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30体积份微热使溶解，用水饱和的正 丁醇振摇提取5次，每次用正丁醇依次为30体积份、30体积份、20体积份、20体积份和10体 积份，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，每次用氨水30体积份、20体积份和20体积份， 弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5体积份量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇 勻，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液0. 01体积份、0. 02体积份 与供试品溶液0. 01 0. 02体积份，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算；本 发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360yg或 不得少于540 μ g或不得少于600 μ g或不得少于900 μ g ；鉴别方法A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇25体积份，加热回 流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取黄连 对照药材0. 05重量份，加甲醇25体积份，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加 甲醇1体积份使溶解，制成对照药材溶液；取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每体积份含 0. 0005重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述三 种溶液各0. 002体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙 醇-氨水=12 6 3 3 1为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干， 置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相 同的黄色荧光斑点；B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/6-5/9，加乙醇50体积份，加热回流60 分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10体积份和氨水4体积份，混勻，加乙醚提取3次，每 次15体积份，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2体积份，溶解，作为供试品溶液；另取延胡索 乙素对照品，加乙醇制成每体积份含0. 001重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0. 01体积份，分别点于同一用1 %氢氧化钠溶液 制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮=9 2为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显色 至斑点显色清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/12-7/18，加70%乙醇25体积份，加 热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水10体积份使溶解，用稀盐酸调pH值 至2，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10体积份，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1体 积份使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每体积份含0. 001重量 份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各 0. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯_三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸 2 3 4 0.5 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D、取葛根素对照品，甲醇制成每体积份含0. 001重量份的溶液，作为对照品溶液； 取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇25体积份，加热回流60分钟， 放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄 层色谱法试验，吸取供试品溶液0. 005体积份及对照品溶液0. 003体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水=65 35 10的下层溶液为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 本发明所指药物组合物制剂的原料药组成及配比如下(按重量份)
黄芪 100-150重量份 党参 丹参 60-100重量份 葛根 山楂60-100重量份
延胡索(或炙延胡索)40-70重量份
80-120重量份 60-100重量份
当归 40-70重量份 人参 20-30重量份
甘草(或炙甘草) 20-30重量份。
本发明药物组合物制剂的原料药组成优选配比为(按重量份)
黄芪140重量份党参90重量份
丹参90重量份葛根 70重量份
山楂70重量份当归 45重量份
延胡索(或炙延胡索)45重量份人参 22重量份
甘草(或炙甘草) 28重量份。
本发明药物组合物制剂的原料药组成优选配比为(按重量份) 黄芪110重量份党参 110重量份
丹参70重量份葛根 90重量份
山楂90重量份当归 65重量份
延胡索(或炙延胡索)65重量份人参 28重量份
甘草(或炙甘草) 22重量份。
本发明药物组合物制剂的原料药组成优选配比为(按重量份)
黄芪 丹参 山楂 人参
延胡索(或炙延胡索)
120重量份 80重量份 80重量份 25重量份 60重量份t
党参 葛根 当归
100重量份
80重量份 60重量份
甘草(或炙甘草)25重量份
上述本发明药物组合物制剂的原料药还可以加入下述原料药(按重量份) 淫羊藿
60-100重量份
地黄
40-70重量份黄连40-70重量份灵芝40-70重量份。上述本发明药物组合物制剂的原料药还可以加入下述原料药(按重量份)优选配 比为(按重量份)淫羊藿80重量份地黄60重量份黄连60重量份灵芝60重量份。以上九味或十三味药按照常规方法可以制成临床可接受的剂型，如片剂、颗粒剂、 胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释制剂、注射剂。本药物组合物制剂的制备方法可以是以上九味，人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩 余黄芪加水煎煮1-3次，每次1-3小时，(优选2次，第一次2小时，第二次1. 5小时)，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1. 12(90-95°C，优选90°C )，放冷，加一倍量乙醇使 沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.26-1. 32 (90-95°C，优选90°C )的清膏，与 上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释制剂、注射剂。本发明十三味原料药药物组合物的制备方法以上十三味药，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与 剩余黄芪加水煎煮1-3次，每次1-3小时，(优选2次，第一次2小时，第二次1. 5小时)，合 并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.06-1. 12(90 95°C，优选90°C )，放冷，加一倍量乙 醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1. 26-1. 32(90 95°C，优选90°C )的清 膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释制剂、注射剂。本发明上述十三味原料药制备方法中，其中所述的回收乙醇并浓缩至90°C时相对 密度可以替换为1.20 1.22。本发明所述的重量份与体积份的比例为克/毫升。本发明药物组合物含量测定方 法可以应用于组合物的各种剂型，如片剂、胶囊、口服液、滴丸、喷雾剂、颗粒剂等临床可接 受的剂型，由于不同剂型的制剂每日用制剂量中所含的相当生药量是相同的，因此各个剂 型在进行含量测定时，所选用样品量可统一折算为每日用制剂量，本含量测定方法所述的 每日用制剂量是指每日使用的总片数、总粒数或总丸数等。
图1黄芪甲苷对照品溶液液相色谱图；图2本发明药物组合物制剂供试品溶液液相色谱图；图3缺黄芪阴性对照溶液液相色谱图；图4黄芪甲苷标准曲线图本发明所要解决的技术问题在于改进原有的质量标准，提高产品质量的可控性。 本发明所研究的药物组合物是由黄芪、党参、丹参、葛根等药材组成，黄芪作为本方的君药， 其主要成分黄芪甲苷也是本品的有效成分，为了控制本发明药物组合物制剂的质量，保证 其疗效，我们采用高效液相-蒸发光散射检测法测定了黄芪甲苷在该制剂中的含量，并对 其测定方法进行了研究。通过本发明的含量测定方法和鉴别方法，提高了产品稳定性，有利 于工业化生产的质量控制。下面实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例1 仪器采用Agilent 1100高效液相色谱仪；Allerch ELSD-2000蒸发光散射检测 器；METTLER TOLEDO AT201电子天平；1810-B型石英双重纯水蒸馏器。材料采用根据实施例1制成的本发明药物组合物片剂；黄芪甲苷(中国药品生物 制品检定所，批号=110781-200512)；乙腈(色谱纯)；其他试剂为分析纯。取本品小片20片 或大片10片，糖衣片除去包衣，精密称定，研细，取约3g，加甲醇50ml，超声处理1小时(功 率500W，频率40kHz)，滤过，药渣及滤器用甲醇适量洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水 30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次(30ml，30ml，20ml，20ml，10ml)，合并正 丁醇提取液，用氨水洗涤3次(30ml，20ml，20ml)，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶 解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按处方组成，取除黄芪外的其他药材，按制备工艺要求制成不含黄芪的阴性对照样品，按供试品溶 液的制备方法制备阴性对照溶液。取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 0. 25mg的溶液，即得对照品溶液。本法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(32 68)为流动相；蒸发光 散射检测器。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000。按上述色谱条件对供试品溶液、 黄芪甲苷对照品溶液、阴性对照溶液进行色谱分析，色谱图见图1、2、3，表明阴性对照液对 测定基本无干扰，供试品液中黄芪甲苷峰与杂质峰分离良好，不干扰测定。实验例2线形关系考察精密吸取黄芪甲苷对照品溶液(1.032mg/ml) 1. 0,2. 0,4. 0,6. 0,8. 0，10. 0μ 1，注
入液相色谱仪，以进样量的常用对数值作为横坐标，峰面积的常用对数值为纵坐标进行回 归计算。表1黄芪甲苷线性关系
权利要求
一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中含有如下鉴别和含量测定中的一种或几种含量测定方法照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈 水＝25 40∶60 80为流动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000；取黄芪甲苷对照品，精密称定，加甲醇制成每体积份含0.0002 0.0003重量份的溶液，即得对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量的5/9 5/6，加甲醇40 60体积份，超声处理30 90分钟，滤过，药渣及滤器用甲醇洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水20 40体积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4 6次，每次用正丁醇5 40体积份，合并正丁醇提取液，用氨水洗涤2 4次，每次用氨水10 40体积份，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5体积份量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取0.005 0.015体积份、0.01 0.03体积份与供试品溶液0.01～0.02体积份，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算；本发明药物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360μg或不得少于540μg或不得少于600μg或不得少于900μg；鉴别方法A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18 7/12，加甲醇20 30体积份，加热回流40 80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5 2体积份使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.04 0.06重量份，加甲醇20 30体积份，加热回流40 80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5 2体积份使溶解，制成对照药材溶液；取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每体积份含0.0002 0.0008重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各0.001 0.003体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯 乙酸乙酯 甲醇 异丙醇 氨水＝11 13∶5 7∶2 4∶2 4∶0.5 1.5为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/6 5/9，加乙醇40 60体积份，加热回流40 80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水8 12体积份和氨水3 5体积份，混匀，加乙醚提取2 4次，每次10 20体积份，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇1 3体积份，溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每体积份含0.0005 0.0015重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.005 0.015体积份，分别点于同一用0.5 2％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯 丙酮＝8 10∶1 3为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显色至斑点显色清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/12 7/18，加60 80％乙醇20 30体积份，加热回流40 80分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水8 12体积份使溶解，用稀盐酸调pH值至1 3，用乙酸乙酯振摇提取1 3次，每次8 12体积份，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇0.5 2体积份使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每体积份含0.0005 0.0015重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.002 0.008体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯 三氯甲烷 乙酸乙酯 甲醇 甲酸1 3∶2 4∶3 5∶0.2 0.8∶1 3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2 4％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D、取葛根素对照品，甲醇制成每体积份含0.0005 0.0015重量份的溶液，作为对照品溶液；取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18 7/12，加甲醇20 30体积份，加热回流40 80分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5 2体积份使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液0.002 0.008体积份及对照品溶液0.002 0.004体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷 甲醇 水＝60 70∶30 40∶8 12的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；该方法中所指药物组合物制剂的原料药组成及配比为黄芪100 150重量份 党参80 120重量份丹参60 100重量份葛根60 100重量份山楂60 100重量份当归40 70重量份炙延胡索或延胡索40 70重量份 人参20 30重量份炙甘草或甘草20 30重量份。
2.如权利要求1所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中含有如 下鉴别和含量测定中的一种或几种 含量测定方法照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水=32 68为流 动相；蒸发光散射检测器，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于2000 ；取黄芪甲苷对照品， 精密称定，加甲醇制成每体积份含0. 00025重量份的溶液，即得对照品溶液；取本发明药物 组合物制剂日用制剂量的5/9-5/6，加甲醇50体积份，超声处理60分钟，滤过，药渣及滤器 用甲醇洗涤，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30体积份微热使溶解，用水饱和的正丁醇振 摇提取5次，每次用正丁醇依次为30体积份、30体积份、20体积份、20体积份和10体积份， 合并正丁醇提取液，用氨水洗涤3次，每次用氨水30体积份、20体积份和20体积份，弃去碱 液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5体积份量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤 过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液0. 01体积份、0. 02体积份与供试 品溶液0. 01 0. 02体积份，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算；本发明药 物组合物制剂每日用制剂量中含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于360 μ g或不得少 于540 μ g或不得少于600 μ g或不得少于900 μ g ； 鉴别方法A.取本发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇25体积份，加热回流60 分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照 药材0. 05重量份，加甲醇25体积份，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1体积份使溶解，制成对照药材溶液；取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每体积份含0. 0005 重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各0. 002体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水 =12 6 3 3 1为展开剂，置以氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm 紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色 荧光斑点； B.取本发明药物组合物制剂日用制剂量5/6-5/9，加乙醇50体积份，加热回流60分 钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10体积份和氨水4体积份，混勻，加乙醚提取3次，每次 15体积份，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙醇2体积份，溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙 素对照品，加乙醇制成每体积份含0. 001重量份的溶液，作为对照品溶液；照药典附录VI B 的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.01体积份，分别点于同一用氢氧化钠溶液 制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮=9 2为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中显色 至斑点显色清晰，取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C.取本发明药物组合物制剂日用制剂量7/12-7/18，加70%乙醇25体积份，加热回流 60分钟，放冷，滤过，滤液蒸至近干，残渣加水10体积份使溶解，用稀盐酸调pH值至2，用乙 酸乙酯振摇提取2次，每次10体积份，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇1体积份使溶解， 作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每体积份含0. 001重量份的溶液，作为 对照品溶液；照药典附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0. 005体积份，分别 点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸2 3 4 0.5 2 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.取葛根素对照品，甲醇制成每体积份含0.001重量份的溶液，作为对照品溶液；取本 发明药物组合物制剂日用制剂量的7/18-7/12，加甲醇25体积份，加热回流60分钟，放冷， 滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；照药典附录VI B的薄层色 谱法试验，吸取供试品溶液0. 005体积份及对照品溶液0. 003体积份，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水=65 35 10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以三氯化铝试液，置365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点。
3.如权利要求1-2任一所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中 所指药物组合物制剂的原料药组成为黄芪140重量份党参 90重量份丹参90重量份葛根 70重量份山楂70重量份当归 45重量份炙延胡索或延胡索45重量份人参 22重量份炙甘草或甘草 28重量份。
4.如权利要求1-2任一所述的药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指 药物组合物制剂的原料药组成为黄芪 110重量份党参 110重量份丹参70重量份葛根 90重量份山楂90重量份当归 65重量份炙延胡索或延胡索65重量份人参 28重量份 炙甘草或甘草 22重量份。
5.如权利要求1-2任一所述的药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指 药物组合物制剂的原料药组成为黄芪120重量份党参100重量份丹参80重量份葛根80重量份山楂80重量份当归60重量份人参25重量份炙甘草或甘草25重量份炙延胡索或延胡索 60重量份。
6.如权利要求1-2任一所述的药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指 药物组合物制剂的原料药中还加入下述原料药淫羊藿 60-100重量份地黄 40-70重量份黄连 40-70重量份灵芝 40-70重量份。
7.如权利要求6所述的药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指药物组 合物制剂的原料药中还加入的原料药为淫羊藿 80重量份地黄 60重量份黄连 60重量份灵芝 60重量份。
8.如权利要求1-2任一所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中 所指药物组合物制剂由如下方法制成人参、炙延胡索或延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余 黄芪加水煎煮2-3次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90-95 °C时相对密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90-95°C时相对密度 1. 26-1. 32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释 制剂、注射剂。
9.如权利要求3所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指药 物组合物制剂由如下方法制成人参、炙延胡索或延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余 黄芪加水煎煮2-3次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90-95 °C时相对密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90-95°C时相对密度 1. 26-1. 32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释 制剂、注射剂。
10.如权利要求4所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指 药物组合物制剂由如下方法制成人参、炙延胡索或延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余 黄芪加水煎煮2-3次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90-95 °C时相对密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90-95°C时相对密度 1. 26-1. 32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释 制剂、注射剂。
11.如权利要求5所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指药物组合物制剂由如下方法制成人参、炙延胡索或延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余 黄芪加水煎煮2-3次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90-95 °C时相对密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90-95°C时相对密度 1. 26-1. 32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释 制剂、注射剂。
12.如权利要求8所述的药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指药物 组合物制剂由如下方法制成的人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎 煮2次，第一次2小时，第二次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90°C时相对密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90°C时相对密度 1. 26-1. 32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释 制剂、注射剂。
13.如权利要求9-11任一所述的药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所 指药物组合物制剂由如下方法制成的人参、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余党参等五味与剩余黄芪加水煎 煮2次，第一次2小时，第二次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90°C时相对密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90°C时相对密度 1. 26-1. 32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释 制剂、注射剂。
14.如权利要求6所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指 药物组合物制剂由如下方法制成人参、黄连、炙延胡索或延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与剩余 黄芪加水煎煮2-3次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90-95 °C时相对密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90-95°C时相对密度 1. 26-1. 32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释 制剂、注射剂。
15.如权利要求7所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所指 药物组合物制剂由如下方法制成人参、黄连、炙延胡索或延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与剩余 黄芪加水煎煮2-3次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90-95°C时相对密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90-95°C时相对密度 1.26-1.32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、控释 制剂、注射剂。
16.如权利要求14或15所所述的药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中所 指药物组合物制剂由如下方法制成的以上十三味药，人参、黄连、延胡索、山楂与一半量的黄芪粉碎成细粉，其余八味与剩余 黄芪加水煎煮2次，第一次2小时，第二次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90°C时相 对密度1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90°C时相对密度1. 26-1. 32的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、 控释制剂、注射剂。
17.如权利要求14或15所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中 药物组合物制剂的制备中所述的回收乙醇并浓缩至90°C时相对密度替换为1. 20 1. 22。
18.如权利要求16所述的一种药物组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法中药物 组合物制剂的制备中所述的回收乙醇并浓缩至90°C时相对密度替换为1. 20 1. 22。
全文摘要
本发明公开了一种药物组合物制剂的检测方法，该方法中含有如下鉴别和含量测定中的一种或几种本发明是以一定配比关系的黄芪、党参、丹参等八味药或十三味原料药，按照常规制法制成临床可接受的剂型，如片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、滴丸、糖浆剂、控释制剂、注射剂。各制剂以每日用制剂量的成品量为单位量，黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，黄芪甲苷不得少于600μg或不得少于900μg。通过本发明的含量测定方法和鉴别方法，提高了产品稳定性，有利于提高产品质量的可控性。
文档编号G01N30/36GK101953915SQ200910088239
公开日2011年1月26日 申请日期2009年7月13日 优先权日2009年7月13日
发明者姜作玲, 王守农, 田红伟 申请人:青岛国风药业股份有限公司