专利名称：一种离体分析植物挥发性成分的方法
技术领域：
本发明属于化学工程领域，特别涉及一种离体分析植物挥发性成分的方法。
背景技术：
木本植物的挥发性成分是多种多样的，特别是花部器官，挥发性成分生成浓烈而且集中。木本植物一般使用于园林绿地之中，挥发性成分与人之间紧密的关系已经逐渐被人们意识到并且开始有目的地去应用。了解木本植物挥发性成分，以之指导园林绿化配植， 以期服务于城市人群的保健需求是城市环境工作者必须注意的问题。小花型木本花卉，花体积较小，在枝条上分布一般比较繁密，而且花部在外力干预下容易破碎，这些造成了获取单朵花挥发物成分的困难；木本小花型花开花一般不整齐，同一时间会有多种开花状态的花出现，作为开花群体很难研究某一开花阶段挥发物的成分及挥发物成分的发展动态；木本小花型植物所处环境一般比较复杂，活体实时测量容易受到其它气体成分的干扰，因此针对木本小花型植物的挥发物成分应有区别其它测量分析方法来进行。传统的热脱附-气质联用手段采用吸附管的方法进行样品取样，在实际过程中过分强调吸附管的吸附功能，而忽视了小分子挥发物的挥发特征，在一定程度上造成了一些挥发物成分的逃逸，使分析结果不全面，造成了研究者的试验误差。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术忽视单位鲜重开花材料对挥发物的影响、活体测量容易受环境挥发物成分的影响、一部分小分子挥发物成分容易逃逸的问题而提出的一种提高搜集准确率和工作效率的系统集成方法。为了实现以上目的，本发明的一种离体分析植物挥发性成分的方法，其包括如下步骤(1)取离体材料培养得花枝；(2)将花枝放入袋状容器中，并抽出袋状容器中的空气；(3)向袋状容器注入新鲜空气；(4)花枝在袋状容器中静置一段时间后，吸取袋中的气体进行挥发物成分分析。步骤(1)所述离体材料优选为大蕾期花枝，所述花枝优选为同一开花阶段的开花枝。步骤O)中所述袋状容器优选为微波炉袋，抽气用的仪器优选为大气采样器。步骤(3)中输入的新鲜空气经过干燥塔和吸附管处理后，由大气采样器注入。以去掉空气中的水分、环境挥发物等杂质。所述干燥塔优选活性炭干燥塔。所述吸附管的温度控制在0_4°C范围内，所述吸附管优选用冰水进行降温。步骤(4)中静置时间优选为15-60min。步骤(4)中的气体优选用吸附管吸取，吸取速度优选为250ml · min-1。
所述挥发物成分分析仪器优选为ATD-GC/MS仪器。本发明还提供了上述方法在分析植物挥发性成分中的应用，所述植物为木本小花型植物。本发明的效果本发明方法结合准确的气质联用分析方法，能够客观的反映木本小花型植物材料的挥发物类型；在存在分析内外标的基础上，可以对挥发物成分进行相对准确的定量分析， 结果可信；该方法可操作性强，各设施方便易得，减少了实验成本。
图1为梅花品种‘三轮玉蝶’花香成分分析总离子流图。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的保护范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例1梅花(Primus mume Sieb. et Zucc.)是蔷薇科李属重要的观赏花木，是中国传统名花，其花朵具有怡人的香气，深受广大人民喜爱。三轮玉蝶是真梅品系玉蝶品种群品种， 为研究三轮玉蝶花香成分，采用如下方法进行分析将处于大蕾期即将开花三轮玉蝶枝条剪切瓶插，在20°C恒温培养中培养，待梅花初开时采集花朵香气。在枝条上保留开花程度一致的初开期花朵，装入微波炉袋，密封，在一端留供气体出入通道。打开大气采样器，抽干净袋中空气，然后将大气采样器连接到装有活性炭的干燥塔，干燥塔连接一吸附管再与微波炉袋相连，通过该装置向袋中充入3L清洁空气，20°C条件下静置lh。在微波炉袋出口处连接吸附管，吸附管采用Perkin Elmer公司生产的Tenax-GR吸附管，吸附管事先需放在热脱附器上，在270°C温度条件下，通乂池吹干，在密闭、干燥、低温条件下保存。微波炉袋内空气以250ml .min-1的速率经由吸附管抽干。为了防止小分子挥发物质的逃逸，在吸附管的使用过程中要改变吸附管环境条件。将棉花或纱布压制叠压成扁平型，宽度与吸附管长度相同。将棉花或纱布置于冰水混合物中浸泡，浙干后直接缠绕于吸附管周围，用皮筋扎紧。 在吸附管下置一狭长型水槽，在实验过程中，根据时间情况向扎好的棉花或纱布上淋冰水， 尽量使吸附管处于0°C左右低温环境下。微波炉袋内的空气抽干收集于吸附管后，立即打开微波炉袋，摘取处于花枝上花朵，去除花枝、花梗等部位，准确称量花朵总重量，并且计所测量花朵数目。将吸附管用美国Perkin Elmer公司的Clarus 600 GC-MS质谱联用仪进行分析，仪器配有TurboMatrix 650全自动热脱附(ATD)及TurboMass 5. 4. 2数据处理系统。ATD工作条件载气为He ；—级热脱附温度为260°C，时间为lOmin，一级热脱附时冷阱捕集温度为_25°C ；级热脱附冷阱温度为300°C，升温速率为40°C ；阀温230°C，进入气质联用仪管道温度为250°C ；进入气质联用气体分流为4. 6%。色谱条件色谱柱为DB-5 Low Bleed/MS 柱(30mX0. 25mmX0. 25 μ m)，载气为 He ；程序升温过程为起始温度40°C，保持2min，然后以4°C · min-1的速率升至180°C，保持3min ；最后升温至220°C，速率为20°C · min-1。质谱条件电离方式为EI ；电子能量为70eV ；质谱荷质比(m/z)扫描范围为四 500amu ；GC/MS接口温度为250°C ；离子源温度为220°C。表1梅花品种‘三轮玉蝶’花香成分分析
权利要求
1.一种离体分析植物挥发性成分的方法，其包括如下步骤(1)取离体材料培养得花枝；(2)将花枝放入袋状容器中，并抽出袋状容器中的空气；(3)向袋状容器注入新鲜空气；(4)花枝在袋状容器中静置一段时间后，吸取袋中的气体进行挥发物成分分析。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述离体材料为大蕾期花枝，所述花枝为同一开花阶段开花枝条。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤O)中所述袋状容器为微波炉袋，抽气用的仪器为大气采样器。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中输入的新鲜空气经过干燥塔和吸附管处理后，由大气采样器注入。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述吸附管的温度控制在0-4°C范围内。
6.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述吸附管用冰水进行降温。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤中静置时间为15-60min。
8.如权利要求1或7所述的方法，其特征在于，步骤中的气体用吸附管吸取，吸取速度为 250ml · min-1。
9.权利要求1 8任意一项所述权利要求在分析植物挥发性成分中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述植物为木本小花型植物。
全文摘要
本发明涉及一种离体分析植物挥发性成分的方法，其包括如下步骤(1)取离体材料培养得花枝；(2)将花枝放入袋状容器中，并抽出袋状容器中的空气；(3)向袋状容器注入新鲜空气；(4)花枝在袋状容器中静置一段时间后，吸取袋中的气体进行挥发物成分分析。本发明方法结合准确的气质联用分析方法，能够客观的反映木本小花型植物材料的挥发物类型；在存在分析内外标的基础上，可以对挥发物成分进行相对准确的定量分析，结果可信；该方法可操作性强，各设施方便易得，减少了实验成本。
文档编号G01N30/02GK102565219SQ20111043993
公开日2012年7月11日 申请日期2011年12月23日 优先权日2011年12月23日
发明者孔滢, 张启翔, 郝瑞杰 申请人:北京林业大学