专利名称：广东海风藤挥发油gc-ms指纹图谱的构建方法及其指纹图谱的制作方法
技术领域：
本发明属于化学分析领域，特别是涉及一种广东海风藤(Kadsuraheteroclita(Roxb. ) Craib)挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法及其GC-MS指纹图谱。
背景技术：
中药色谱指纹图谱是指某些中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。 广东海风藤药材为木兰科南五味子属植物海风藤(异形五味子)Kadsuraheteroclita(Roxb. )Craib的干燥藤莖,是广东省地方常用药材。广东海风藤具有祛风湿、通经络、行气止痛之功效，从中分离得到的化学成分主要有木脂素、三萜酸类、多糖、挥发油等化合物。有研究表明其脂溶性成分具有显著的抗阿尔茨海默病作用，因此广东海风藤挥发油的研究越来越引起关注。但目前尚无广东海风藤药材挥发油的质量标准，因此建立广东海风藤药材挥发油的质量控制方法很有必要。本发明用GC-MS法构建了广东海风藤药材挥发油的指纹图谱，利用GC-MS指纹图谱可全面控制广东海风藤药材挥发油的质量。
发明内容
基于此，本发明的目的是提供广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法。具体的技术方案如下一种广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法，包括如下步骤(I)供试品溶液的制备精密称取广东海风藤药材粉末10. 0g，置于烧瓶中，力口8-10倍水量，用挥发油提取器提取6-8h，脱水后得兰绿色透明油状物，将上述兰绿色透明油状物用乙酸乙酯稀释3倍，即得供试品溶液；(2)GC-MS分析精密吸取供试品溶液I. 0 ii L，注入GC-MS色谱仪，色谱条件如下色谱柱DB-5石英毛细管柱(50mX 0. 32mmX0. 25um);载气为氦气；进样口温度270°C，联接口温度250°C ;升温程序柱温60°C，保持2min，5°C /min升温至200°C，再以15°C /min升温至250°C，保持Imin ;质谱条件电离电压1500V电子能量70eV，电离方式EI，质量扫描范围40-650amu，进样量I. OuL，分流模式20 1 ；(3)测定10批广东海风藤挥发油样品并进行分析比较，得到由其共有特征峰构成的广东海风藤挥发油样品的标准指纹图谱。在其中一个实施例中，所示指纹图谱具有的23个共有峰的保留时间tK分别为7. 5min、7. 8min> 10. 2min> 10. 5min> 11. 0min> 17. 0min> 17. 4min> 18. 4min> 19. 4min、19. 6min、20. 7min、21. lmin、21. 4min、21. 6min、21. 7min、21. 8min、22. lmin、23. lmin、23. 3min、24. 4min、24. 9min、25. 2min 和 25. 8min。
在其中一个实施例中，所述步骤(I)中精密称取广东海风藤药材粉末lO.Og，置于烧瓶中，加8倍水量，用挥发油提取器提取6h，脱水后得兰绿色透明油状物，将上述兰绿色透明油状物用乙酸乙酯稀释3倍，即得供试品溶液。本发明的另一目的是提供上述方法构建得到的广东海风藤挥发油GC-MS指纹图P曰。具体的技术方案如下如权利要求I或2所述的广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法得到的广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱。本发明具有如下优点和用途通过指纹图谱中共有峰的有无，能有效地监控广东海风藤挥发油的质量，保证其质量的稳定、均一、可控。
图I为本发明的广东海风藤挥发油指纹图谱，图中共有模式中标示了 23个共有峰的峰号，图中还包括10批广东海风藤挥发油样品GC-MS图谱。
具体实施例方式以下通过具体实施例对本发明做进一步的阐述。I仪器、样品、试药I. I仪器TRACE-DSQ气质联用色谱仪(美国Thermo fisher公司)，色谱柱DB_5石英毛细管柱(50mX0. 32mmX0. 25um);I. 2样品10批广东海风藤药材经鉴定为兰科南五味子属植物海风藤(异形五味子)(Kadsura heteroclita(Roxb. ) Craib)的干燥藤莖;I. 3试药乙酸乙酯为分析纯。2方法与结果2. I供试品溶液的制备精密称取广东海风藤药材粉末(过四号筛)各10. 0g，力口A 2000mL烧瓶中，加8-10倍水量，用挥发油提取器提取6_8h，以无水硫酸钠脱水后得挥发油，挥发油为兰绿色透明油状物，具特异香味，将提取的兰绿色透明油状物用乙酸乙酯稀释3倍，供CC-MS分析；2. 2GC-MS分析条件色谱柱DB_5石英毛细管柱(50mX0. 32mmX0. 25um);载气为氦气；进样口温度270°C，联接口温度250°C ;升温程序柱温601，保持21^11，51 /min升温至200°C，再以15°C /min升温至250°C，保持Imin ;质谱条件电离电压1500V电子能量70eV，电离方式EI，质量扫描范围40-650amu，进样量I. OuL，分流模式20 :1 ;2. 3共有峰的确定将上述得到的10批广东海风藤挥发油样品GC-MS指纹图谱进行分析比较(如图I所示)，找出其共有特征峰(共23个峰)，得到广东海风藤挥发油的标准指纹图谱，23 个共有峰分别为7. 5min、7. 8min、10. 2min、10. 5min、11. Omin、17. Omin、17. 4min、18. 4min、19. 4min、19.6min、20. 7min、21. lmin、21.4min、21. 6min、21.7min、21. 8min、22. lmin、23. lmin、23. 3min、24. 4min、24. 9min、25. 2min 和 25. 8min，它们构成了广东海风藤挥发油的指纹特征。以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进， 这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
权利要求
1.一种广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤 (1)供试品溶液的制备精密称取广东海风藤药材粉末10.0g，置于烧瓶中，加8-10倍水量，用挥发油提取器提取6-8h，脱水后得兰绿色透明油状物，将上述兰绿色透明油状物用乙酸乙酯稀释3倍，即得供试品溶液； (2)GC-MS分析精密吸取供试品溶液LOuL，注入GC-MS色谱仪，色谱条件如下色谱柱DB-5石英毛细管柱；载气为氦气；进样口温度270°C，联接口温度250°C ;升温程序柱温60°C，保持2min，5°C /min升温至200°C，再以15°C /min升温至250°C，保持Imin ;质谱条件电离电压1500V电子能量70eV，电离方式EI，质量扫描范围40_650amu，进样量I. OuL,分流模式20:1 ； (3)测定10批广东海风藤挥发油样品并进行分析比较，得到由其共有特征峰构成的广东海风藤挥发油样品的标准指纹图谱。
2.根据权利要求I所述的广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述标准指纹图谱具有的23个共有峰的保留时间tK分别为7. 5min、7. 8min、10. 2min、10.5min>11. 0min>17. 0min>17. 4min>18. 4min>19. 4min>19.6min>20.7min、21. lmin、21.4min、21.6min>21. 7min、21.8min>22. lmin、23. lmin>23.3min>24.4min、24. 9min、25. 2min 和 25. 8min。
3.根据权利要求I所述的广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤(I)中精密称取广东海风藤药材粉末10. Og,置于烧瓶中，加8倍水量，用挥发油提取器提取6h，脱水后得兰绿色透明油状物，将上述兰绿色透明油状物用乙酸乙酯稀释3倍，即得供试品溶液。
4.如权利要求I或2所述的广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法得到的广东海风藤挥发油GC-MS指纹图谱。
全文摘要
本发明公开了一种广东海风藤(Kadsura heteroclita(Roxb.)Craib)挥发油GC-MS指纹图谱的构建方法及其GC-MS指纹图谱，该指纹图谱具有23个共有峰。通过指纹图谱中共有峰的有无，能有效地监控广东海风藤挥发油的质量，保证其质量的稳定、均一、可控。
文档编号G01N30/02GK102749395SQ20121021976
公开日2012年10月24日 申请日期2012年6月28日 优先权日2012年6月28日
发明者张现涛, 徐哲, 焦豪妍, 王玉生 申请人:广东省中药研究所