复方救必应制剂指纹图谱的构建方法及检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药制剂的质量控制领域，特别是涉及复方救必应制剂指纹图谱的构 建方法及检测方法。
【背景技术】
[0002] 复方救必应制剂由中药材救必应、东风桔、香附为原料，经水提取后，按常规的制 药工艺制成，具有清热解毒、利湿止痛的功能，用于腹泻、止痛等。复方救必应制剂在中华人 民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十册收载有复方救必应胶囊，是深受欢迎的中药 制剂。
[0003] 国家标准对复方救必应胶囊的质量控制主要采用薄层色谱法，分别以救必应对照 药材、东风桔对照药材和香附对照药材进行鉴别，以判断成品中是否有救必应、东风桔、香 附；现有技术还公开了采用高效液相色谱法测定复方救必应胶囊中紫丁香苷的含量的方 法，以表征复方救必应制剂的质量。
[0004] 以上针对投料药材进行鉴别或针对个别成分含量测定的方法，难以全面表征复方 救必应制剂的物理化学特征，因此，对复方救必应制剂的质量控制方法有待进一步完善。
【发明内容】
[0005] 基于此，有必要提供一种复方救必应制剂指纹图谱的构建方法及检测方法。
[0006] -种复方救必应制剂指纹图谱的构建方法，包括如下步骤：
[0007] (1)对照品溶液的制备：
[0008] 分别精密称取紫丁香苷对照品和α -香附酮对照品，加甲醇稀释，得紫丁香苷对 照品溶液和α-香附酮对照品溶液；
[0009] ⑵供试品溶液的制备：
[0010] 精密称取复方救必应制剂，加入体积百分含量为50-70%的甲醇，回流提取或超声 提取30-45分钟，过滤，即得供试品溶液；
[0011] (3)分别精密吸取紫丁香苷对照品溶液、α -香附酮对照品溶液和供试品溶液，注 入高效液相色谱仪进行测定，得到由19个共有特征峰构成的复方救必应制剂指纹图谱。
[0012] 本发明经发明人大量的实验和研宄，得到上述复方救必应制剂指纹图谱的构建方 法：该方法以紫丁香苷、α -香附酮为参照指标，配合适当的供试品提取方法和高效液相色 谱仪的色谱条件，得出可全面表征复方救必应制剂物理化学特征的指纹图谱，该指纹图谱 中有19个特征共有峰，注重各个构成特征峰的前后顺序和相互关系，注重整体面貌特征， 既避免了因测定一、二个化学成分而判定制剂整体质量的片面性，又减少了为质量达标而 人为处理的可能性，能有效地表征复方救必应制剂的质量，有利于全面监控产品质量，及鉴 别广品的真伪。
[0013] 在其中一个实施例中，步骤（3)中，高效液相色谱仪的条件如下：
[0014] 色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；柱温：25-30 °C ;检测波长为 200-40011111;流速：0.8-1.21111^1^11_1;流动相 ：甲醇为流动相4,0.5%冰乙酸水溶液为流动 相B，采用梯度洗脱方式。
[0015] 在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0-60min，流动相A的体积百分数由 10 %变化至95%。
[0016] 在其中一个实施例中，所述柱温为25°C，检测波长为254nm，流速为1.0 mL · mirT1。
[0017] 在其中一个实施例中，步骤（2)中，所述体积百分含量为50-70%的甲醇的用量为 每克复方救必应制剂精密加入19-21毫升。
[0018] 本发明还提供一种复方救必应制剂指纹图谱的检测方法，包括如下步骤：
[0019] (1)对照品溶液的制备：
[0020] 分别精密称取紫丁香苷对照品和α -香附酮对照品，加甲醇稀释，得紫丁香苷对 照品溶液和α-香附酮对照品溶液；
[0021] (2)供试品溶液的制备：
[0022] 精密称取复方救必应制剂，加入体积百分含量为50-70%的甲醇，回流提取或超声 提取30-45分钟，过滤，即得供试品溶液；
[0023] (3)分别精密吸取紫丁香苷对照品溶液、α -香附酮对照品溶液和供试品溶液，注 入高效液相色谱仪进行测定。
[0024] 经由上述复方救必应制剂指纹图谱的检测方法对待测复方救必应制剂样品进行 检测，可获得样品具有代表性的指纹图谱，通过与前述构建方法获得的具有19个特征共有 峰的指纹图谱进行对照分析，能有效地判断复方救必应制剂的质量，有利于全面监控产品 质量，及鉴别产品的真，同时避免了因测定一、二个化学成分而判定制剂整体质量的片面 性，又减少了为质量达标而人为处理的可能性。
[0025] 在其中一个实施例中，步骤（3)中，高效液相色谱仪的条件如下：
[0026] 色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；柱温：25-30 °C ;检测波长为 200-40011111;流速：0.8-1.21111^1^11_ 1;流动相：甲醇为流动相4,0.5%冰乙酸水溶液为流动 相B，采用梯度洗脱方式。
[0027] 在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0_60min，流动相A的体积百分数由 10 %变化至95%。
[0028] 在其中一个实施例中，所述柱温为25°C，检测波长为254nm，流速为1.0 mL .mirT1。
[0029] 在其中一个实施例中，所述体积百分含量为50-70%的甲醇的用量为每克复方救 必应制剂精密加入19-21毫升。
[0030] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0031] (1)本发明经发明人大量的实验和研宄，以紫丁香苷、α-香附酮为参照指标，得 出可全面表征复方救必应制剂物理化学特征的指纹图谱的构建方法，同时确定了制备供试 品溶液和对照品溶液，及高效液相色谱仪的色谱条件的最优参数；该方法具有操作简便、结 果稳定、精密度高、重现性好等优点。
[0032] (2)采用本发明的构建方法所获得的指纹图谱中有19个特征共有峰，其能有效 地表征复方救必应制剂的质量，有利于全面监控产品质量，及鉴别产品的真伪；指纹图谱注 重各个构成特征峰的前后顺序和相互关系，注重整体面貌特征，既避免了因测定一、二个化 学成分而判定复方救必应制剂整体质量的片面性，又减少了为质量达标而人为处理的可能 性。
[0033] (3)本发明所述复方救必应制剂指纹图谱的检测方法，能更完整有效地判断复方 救必应制剂的质量，有利于全面监控产品质量，及鉴别产品的真伪。
【附图说明】
[0034] 图1为主要色谱峰选择HPLC图；
[0035] 图2为不同流动相条件下HPLC图；
[0036] 图3为流动相不同起始梯度条件下HPLC图；
[0037] 图4为不同柱温条件下HPLC图；
[0038] 图5为不同流速条件下HPLC图；
[0039] 图6为四种提取溶剂考察HPLC图；
[0040] 图7为三种提取体积考察HPLC图；
[0041] 图8为不同提取方法考察HPLC图；
[0042] 图9为三种提取时间考察HPLC图；
[0043] 图10为四个检测波长条件下HPLC图；
[0044] 图11为四种色谱柱考察HPLC图；
[0045] 图12为复方救必应胶囊、紫丁香苷对照品和α -香附酮对照品的HPLC图；
[0046] 图13为紫丁香苷对照品的HPLC图；
[0047] 图14为α -香附酮对照品的HPLC图；
[0048] 图15为复方救必应胶囊样品1-14的指纹图谱；
[0049] 图16为复方救必应胶囊样品1-14生成的对照指纹图谱；
[0050] 图17为救必应药材与复方救必应胶囊叠加图；
[0051] 图18为香附药材与复方救必应胶囊叠加图；