专利名称：一种用液相色谱法分离测定依折麦布原料及其制剂的方法
技术领域：
本发明属于分析化学领域，具体涉及ー种用液相色谱法分离测定依折麦布及其有关物质的方法。
2.
背景技术：
依折麦布是治疗原发性高胆固醇血症的药物，作为饮食控制以为的辅助治疗，可単独或与HMG-CoA还原酶抑制剂联合应用于治疗原发性高胆固醇血症，可降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白。依折麦布化学名为l-(4-Fluoro-phenyl)-3-[3-(4-fluoro-phenyl)-J-hydroxy-propyl」_4_(4-hydroxy-phenyl)-azetidin-2-one,分子式为C24H21F2N03O依折麦布结构式为
OH/、fOH
ii"j ノF〇く在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，这几个中间体即药物质量控制中的有关物质，对于依折麦布的合成主要控制的有关物质有三个，分别是中间体I (3-[2-(4_Benzyloxy-phenyl) _1_ (4_f luoro-pheny_u_4-oxo-azetidin-3-yl]-propionic acid)、中 |、司体 2 (4- (4-Benzyloxy-phenyl) -I-(4_fluoro_phenyl)_3_[3_(4_fluoro_phenyl)_3_oxo_prolyl」_azetidin_2_one)、中 I日」体3 (,4- (4_Benzy_Loxy-phenyl) -I- (4-f luoro-phenyl) _3_ [3_ (4-f luoro-phenyl) -3-hydroxy-propyl] -azetidin-2-one)，结构式分别为
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中间体I中间体2中间体3对于合成依折麦布中引入的有关物质，不论是在原料药还是制剂中都是需要进行质量控制的，因此，实现依折麦布及其有关物质的分离，在依折麦布的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。
3.
发明内容
本发明的目的在于提供ー种分析依折麦布的纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现依折麦布与其有关物质的分离和測定，保证依折麦布及含依折麦布制剂的质量控制。
本发明所述的用液相色谱法分析依折麦布的纯度以及分离其有关物质的方法，是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以ー定比例的酸水溶液-有机相为流动相。上述所说的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，选自Kromasil-C18。上述所说的有机相选自以下溶剂中的ー种甲醇、こ腈、丙醇、异丙醇，优选为甲醇或こ腈。上述所说的方法，其流动相酸水溶液-有机相采用梯度洗脱。上述所说的方法中，酸水溶液中包含的酸选自磷酸、碳酸、甲酸、こ酸中的ー种，优选为磷酸。其中酸水溶液中包含的酸的浓度为0. 01 0. 5%，优选浓度为0. 1%。本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现I)取依折麦布或含依折麦布的制剂样品适量，用甲醇或流动相溶解样品，配制成含依折麦布0. I I. 5mg的样品溶液。2)设置流动相流速为0. 5 I. 5mL/min,流动相流速优选为I. OmL/min,检测波长为210 250nm，最佳检测波长为240nm，色谱柱柱箱温度为20 40°C，柱箱柱温最佳为30。。。3)取I)的样品溶液10 50 ii L，注入液相色谱仪，完成依折麦布与有关物质的分离測定。其中高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津岛津LC-IOATvp, SPD-MlOAvp色谱柱C18(Merck, 250 X 4. 6mm, 5 u m)流动相A 0. 1%磷酸水溶液；B :こ腈，按以下梯度进行洗脱
权利要求
1.一种液相色谱法分离测定依折麦布有关物质的方法，其特征在于用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以ー定比例的酸性水溶液-有机相为流动相。
2.根据权利要求I所述的分离测定方法，色谱柱选自品牌为Kromasil和Merck的色谱柱。
3.根据权利要求I所述的分离测定方法，所说的有机相选自以下溶剂中的ー种甲醇、こ腈、丙醇、异丙醇，并进一步优选为甲醇或こ臆。
4.根据权利要求I所述的分离测定方法，所说的酸性水溶液中包含的酸选自以下无机盐磷酸、碳酸、甲酸、こ酸中的ー种，并进ー步优选为磷酸。
5.根据权利要求4方法中，所说的酸性水溶液中所含酸的浓度优选为O.1%。
6.根据权利要求I所述的分离测定方法，所说的酸性水溶液的PH值为1-7。
7.根据权利要求I所述的分离测定方法，其特征在于，包括以下几个步骤 1)取依折麦布或含依折麦布的制剂样品适量，分别用甲醇或流动相溶解样品，配制成每ImL含依折麦布及其中间体O. I I. 5mg的样品溶液； 2)设置流动相流速为O.5 I. 5mL/min，检测波长为210 250nm，色谱柱柱箱温度为20 40°C。
3)取I)的样品溶液10 50μ L，注入液相色谱仪，完成依折麦布及其有关物质的分离測定。
8.根据权利要求6所述的分离测定方法，缓冲液的pH值优选为2.2。
9.根据权利要求7所述的分析分离方法，步骤2)所说的流动相流速优选为LOmL/min0
10.根据权利要求7所述的分析分离方法，步骤2)所说的检测波长为240nm。
全文摘要
本发明属分析化学领域，具体公开了一种用液相色谱法分离测定依折麦布有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的酸性水溶液-有机相为流动相，可以定量测定依折麦布及其有关物质的含量，从而有效控制依折麦布及含依折麦布制剂产品的质量。本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。
文档编号G01N30/26GK102854274SQ20121033702
公开日2013年1月2日 申请日期2012年9月13日 优先权日2012年9月13日
发明者李倩, 陈东, 郭夏, 宋雪梅 申请人:北京万全德众医药生物技术有限公司