一种基于n,n’-二（三甲氧基硅烷基丙基）-戊二亚胺的生物传感试纸的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种基于N,N’-二（三甲氧基硅烷基丙基）-戊二亚胺的生物传感试纸的应用，该应用是以N,N’-二（三甲氧基硅烷基丙基）-戊二亚胺作为颜色探针的生物传感试纸应用于双氧水、葡萄糖或前列腺特异性抗原的检测；以N,N’-二（三甲氧基硅烷基丙基）-戊二亚胺作为颜色探针的生物传感试纸对双氧水具有特殊的变色反应，且稳定性强、灵敏度高、选择性好，检测方法快速、简单、经济，应用范围广。
【专利说明】—种基于N, N’ -二 (三甲氧基硅烷基丙基)-戊二亚胺的生物传感试纸的应用
【技术领域】
[0001]本发明公开了一种基于N，N’ - 二 (三甲氧基硅烷基丙基)_戊二亚胺的生物传感试纸的应用，属于生物传感器领域。
【背景技术】
[0002]席夫碱主要是指含有亚胺或甲亚胺特性基团(一 RC=N —)的一类有机化合物，通常希夫碱是由胺和活性羰基缩合而成。应用方面比较广泛，可以应用于医学、催化、分析化学、腐蚀等领域。在医学领域，席夫碱具有抑菌、杀菌、抗肿瘤、抗病毒的生物活性；在催化领域，席夫碱的钴和镍配合物已经作为催化剂使用；在分析领域，席夫碱作为良好的配体，可以用来鉴别，鉴定金属离子和定量分析金属离子的含量；在腐蚀领域，某些芳香族的希夫碱经常作为铜的缓蚀剂；在光致变色领域，某些含有特性基团的希夫碱也具有独特的应用。
[0003]近年来，新型生物传感器的构建及应用发展迅速，在临床早期诊断、环境监测、食品检测等领域上得到了广泛应用。而很多传感器因其应用受仪器及相关技术和专业人员的限制而无法在许多发展中国家普及，所以构建一种简单、经济且无需借助精密仪器设备而能让终端使用者操作方便快捷的传感装置成为科研热门研究领域。基于颜色变化来实现检测的生物传感试纸，因其反应迅速、方便经济、操作简单等特点而受到众多科研工作者亲睐。
[0004]现有的定量检测双氧水、葡萄糖的方法包括电化学检测法，荧光检测法等。而检测前列腺特异性抗原的方法主要是酶联免疫法。但这些检测方法都依赖一定的仪器设备，而且较少有报道同一传感器能同时实现对上述多种物质的同时检测。基于颜色变化的生物传感试纸对双氧水、葡萄糖或前列腺特异性抗原的检测还未见报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是在于提供了一种基于N，N’ - 二 (三甲氧基硅烷基丙基)_戊二亚胺的生物传感试纸的应用，以N，N’ -二 (三甲氧基硅烷基丙基)-戊二亚胺作为颜色探针的生物传感试纸对双氧水有特异的变色反应，且稳定性强、灵敏度高、选择性好，快速、简单、经济地实现了双氧水、葡萄糖或前列腺特异性抗原的检测。
[0006]本发明提供了一种基于N，N’ - 二 (三甲氧基硅烷基丙基)_戊二亚胺的生物传感试纸的应用，该应用是以N，N’ - 二(三甲氧基硅烷基丙基)-戊二亚胺作为颜色探针的生物传感试纸应用于双氧水、葡萄糖或前列腺特异性抗原的检测。
[0007]所述的生物传感试纸是通过在3-氨基丙基三甲氧基硅烷溶液中浸泡过的滤纸上滴加相对3-氨基丙基三甲氧基硅烷微量的戊二醛制得。
[0008]所述的双氧水的检测方法是在生物传感试纸上滴加待测双氧水溶液，在110?135°C下恒温6?12min后,通过ImageJ2x分析生物传感试纸颜色的灰度值,并进行比色分析。[0009]所述的葡萄糖的检测方法是用壳聚糖将葡萄糖氧化酶固定在生物传感试纸上，在固定了葡萄糖氧化酶的生物传感试纸上滴加待测葡萄糖溶液，先在37°C下反应6-12min，再在110-135°C下恒温6-12min后,通过ImageJ2x分析生物传感试纸颜色的灰度值,并进行比色分析。
[0010]所述的前列腺特异性抗原的检测方法是在生物传感试纸上用壳聚糖固定纳米金后，在纳米金表面组装前列腺特异性抗体，并用牛血清蛋白进行封闭；在封闭过的纳米金表面依次组装待测前列腺特异性抗原和二抗-纳米金棒-葡萄糖氧化酶复合物后，在所得生物传感滤纸上滴加葡萄糖溶液，先在37°c下反应6-12min,再在110-135°C下恒温8-IOmin后,通过ImageJ2x分析生物传感试纸颜色的灰度值,并进行比色分析。
[0011]所述的二抗-纳米金棒-葡萄糖氧化酶复合物由以下方法制备得到:用戊二醛将组装在纳米金棒上的半胱氨酸交联固定；再将固定了半胱氨酸的纳米金棒分散在葡萄糖氧化酶和前列腺特异性抗体混合溶液中反应后，即得。
[0012]本发明的基于N，N’- 二 (三甲氧基硅烷基丙基)_戊二亚胺的生物传感试纸的制备方法是:将滤纸用打孔器制成直径为6mm的小圆片，将其于5-10vol%的3-氨基丙基三甲氧基硅烷(APTS)乙醇溶液中浸泡2-5分钟后，取出，至于室温下自然晾干，再将小圆片滴上15-20 μ L0.125vol%的戊二醛(GA)水溶液，出现砖红色，在500W红外灯下干燥10-15分钟，得到砖红色生物传感试纸。
[0013]本发明的Ν，Ν’ - 二 (三甲氧基硅烷基丙基)-戊二亚胺的合成路线:
[0014]
【权利要求】
1.一种基于N，N’ -二 (三甲氧基硅烷基丙基)_戊二亚胺的生物传感试纸的应用，其特征在于，以N，N’ - 二 (三甲氧基硅烷基丙基)-戊二亚胺作为颜色探针的生物传感试纸应用于双氧水、葡萄糖或前列腺特异性抗原的检测。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的生物传感试纸是通过在3-氨基丙基三甲氧基硅烷溶液中浸泡过的滤纸上滴加相对3-氨基丙基三甲氧基硅烷微量的戊二醛制得。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的双氧水的检测方法是在生物传感试纸上滴加待测双氧水溶液，在Iio?135°c下恒温6?12min后,通过ImageJ2x分析生物传感试纸颜色的灰度值，并进行比色分析。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的葡萄糖的检测方法是用壳聚糖将葡萄糖氧化酶固定在生物传感试纸上，在固定了葡萄糖氧化酶的生物传感试纸上滴加待测葡萄糖溶液，先在37°C下反应6?12min,再在110?135°C下恒温6?12min后,通过ImageJ2x分析生物传感试纸颜色的灰度值,并进行比色分析。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的前列腺特异性抗原的检测方法是在生物传感试纸上用壳聚糖固定纳米金后，在纳米金表面组装前列腺特异性抗体，并用牛血清蛋白进行封闭；在封闭过的纳米金表面依次组装待测前列腺特异性抗原和二抗-纳米金棒-葡萄糖氧化酶复合物后，在所得生物传感滤纸上滴加葡萄糖溶液，先在37°C下反应6?12min,再在110?135°C下恒温8?IOmin后，通过ImageJ2x分析生物传感试纸颜色的灰度值，并进行比色分析。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的二抗-纳米金棒-葡萄糖氧化酶复合物由以下方法制备得到:用戊二醛将组装在纳米金棒上的半胱氨酸交联固定；再将固定了半胱氨酸的纳米金棒分散在葡萄糖氧化酶和前列腺特异性抗体混合溶液中反应后，即得。
【文档编号】G01N33/52GK103439482SQ201310355267
【公开日】2013年12月11日 申请日期:2013年8月15日 优先权日:2013年8月15日
【发明者】阳明辉, 周苗, 周飞艨 申请人:中南大学