伊血安颗粒HPLC指纹图谱的建立方法与流程

文档序号:11413379阅读:来源:国知局
伊血安颗粒HPLC指纹图谱的建立方法与流程

技术特征:
1.一种伊血安颗粒HPLC指纹图谱的建立方法,其特征在于包括以下步骤:(1)对照品溶液的准备:原儿茶酸标准品,加入甲醇定容,制得参照物溶液;(2)供试品溶液的准备:取伊血安颗粒,加水溶解,加稀盐酸调节pH,搅匀,静置,滤过,加水饱和正丁醇萃取3~6次,分取出正丁醇提取液,合并正丁醇提取液,静置,分取获得正丁醇液,回收正丁醇,残渣加甲醇溶解,离心,取上清液,得供试品溶液;(3)高效液相色谱仪的色谱条件:色谱柱:PhenomenexGeminiC18柱,4.6mm×250mm,5μm;保护柱:PhenomenexC18,4×3.0mm;流动相:甲醇-0.1%冰乙酸;梯度洗脱程序:时间梯度0min→11min→16min→29min→30min→35min→45min→55min→70min→95min;对应的梯度洗脱液按以下体积比由流动相A甲醇和流动相B0.1%冰乙酸组成,流动相A的体积百分数梯度5%→16%→17%→30%→34%→34%→35%→45%→45%→70%,流动相B的体积百分数梯度95%→84%→83%→70%→66%→66%→65%→55%→55%→30%;紫外检测波长:256nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:25℃;(4)测定:吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪,按照步骤(3)的色谱条件测定,得到指纹图谱;所述指纹图谱共有色谱峰21个,其平均保留时间分别为:1号峰3.234min、2号峰5.962min、3号峰11.023min、4号峰15.353min、5号峰16.521min、6号峰24.498min、7号峰27.158min、8号峰30.877min、9号峰32.29min、10号峰34.752min、...
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