一种弧菌DNA电化学传感器及其制备方法和应用与流程

本发明属于生物电化学传感器技术领域，具体涉及一种弧菌dna电化学传感器及其制备方法，以及用于高灵敏检测致病性副溶血性弧菌的特异性dna。

背景技术：

海洋弧菌是一类活动力极强的棒状或弧状革兰氏阴性菌，广泛分布于半咸水、沿岸、河口、海洋水体、沉积物和海洋生物体内，分布在全球河口环境中的一种革兰氏阴性菌，当食用生的、未煮熟的或处理不当的海鲜时，会引起人类急性胃肠炎。其中以副溶血性弧菌的危害最大，研究发现副溶血性弧菌株中都发现了tlh基因，因此它被认为是检测总副溶血性弧菌的一个有用的指标。近年来，dna电化学生物传感器以其成本低、灵敏度高、响应速度快、选择性好以及仪器小型化等优点引起了人们的广泛关注。迄今为止，各种类型的dna电化学生物传感器以其广泛的纳米材料如类水滑石(ldh)、碳纳米管(cnts)和石墨烯(gr)等，被用于提高dna生物传感器的灵敏度和稳定性，但用于检测弧菌的dna传感器在灵敏度和检测限方面仍然有很大提升空间。

石墨烯(gr)是一种sp²杂化碳原子组成的具有一个碳原子厚度的二维材料，于2004年由geim首次成功制备，因其具备优良的机械性能和电性能，近年来引起了各个领域研究的广泛关注。化学还原是一种低成本的方法，因此被广泛应用于gr的大规模工业生产。然而在生产过程中，gr片层间会因强的π-π相互作用而发生不可逆的堆叠，这不仅损害了gr的分散性能，同时也增大了片层间的接触电阻，从而严重限制了gr的电化学性能以及其在各个领域内的应用。类水滑(简写为ldh)是一类二维纳米阴离子粘土，组成通式可表示为[m1-x²⁺mx³⁺(oh)2]^x+(a^n-)x/n·mh2o，具有水滑石层状结构且片层携带正电荷，层间存在可交换的阴离子。类水滑石纳米片(ldhns)是指其以单层或几层类水滑石纳米片形式存在，不仅具有原始ldh的各种性能，同时还呈现出开放的内表面、分子厚度的正电层、大的比表面积和丰富的活性位点等特点，因此极大扩展了ldh的应用领域。因此研究者将带正电荷的ldhns与gr进行复合来阻止两种组分的聚集，提高复合物的导电性能。虽然复合的方案可以解决gr片堆叠和ldhns聚集的问题，但复合后的杂化物容易沉降，整体分散性较差，而且作为电极修饰材料其导电性也需进一步提高。氨基功能化离子液体不仅是一种高导电性、具有特殊溶解性能的绿色溶剂，而且具有功能性的氨基，因此可能通过与go表面大量的环氧环发生开环反应，修饰到基于go/gr复合材料表面。由于特殊的溶解性、大量的电荷以及高的导电性，离子液体的引入可以大大提高go/gr基材料的分散性、稳定性和导电性。

本发明先使用氨基功能化离子液体对go进行剥离，再在甲酰胺介质中合成ldhns，从而制备离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片(il-gr-ldhns)复合物，以此il-gr-ldhns复合膜修饰的玻碳电极为基础，建立了一种高灵敏的弧菌dna杂交检测方法。il-gr-ldhns复合膜不仅能够有效地固定dna，而且具有大的比表面积，丰富的活性位点，良好的生物相容性、导电性和分散性，有效地促进了电子转移。与其它报道的方法相比，该方法对目标dna的检出限较低，线性范围宽，选择性好，可实现对弧菌特征dna的高灵敏无标记检测。

技术实现要素：

针对现有dna传感检测技术的不足以及本领域研究和应用的需求，本发明的目的之一是提供一种弧菌dna电化学传感器，所述dna传感器以玻碳电极为基底电极，离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合膜作为电极修饰材料，探针ssdna通过生物连接剂1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和n-羟基琥珀酰亚胺共价键合的方式固定在修饰电极表面；所述离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合膜是先将氧化石墨烯在含有氨基离子液体的n,n-二甲基甲酰胺溶液中进行剥离，制备离子液体功能化石墨烯；然后在上述分散液中制备类水滑石纳米片，制得离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合物；所述玻碳电极记为gce；所述n,n-二甲基甲酰胺记为dmf；所述氧化石墨烯记为go，石墨烯记为gr；所述类水滑石纳米片记为ldhns；所述离子液体为1-甲基-3-氨丁基咪唑四氟硼酸盐，记为il，其结构式如下：

本发明的目的之二是提供一种弧菌dna电化学传感器的制备方法，其特征在于包括以下具体步骤：

(1)il-gr-ldhns复合物的制备

将一定量的go加入到100ml含有200mgil的甲酰胺中，超声分散2h，得到go浓度为0.5～1.5mg/ml的il-go分散液；按一定摩尔比向其中加入mgcl2·6h2o和alcl3·9h2o，使总金属离子浓度为0.03mol/l，搅拌1h使金属盐完全溶解，在搅拌条件下，用浓度为0.5mol/l的氢氧化钠的甲酰胺溶液缓慢滴定至反应液的ph约为9.0～10.0，室温搅拌反应12h，之后在30～70℃条件下老化12h，反应液在8000rpm转速下离心10min，分别用乙醇和去离子水洗涤3次，室温自然干燥后即得离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合物，记为il-gr-ldhns；

(2)il-gr-ldhns修饰玻碳电极的制备

将玻碳电极用0.05μm的a12o3抛光粉抛光后，用双蒸水冲洗干净，并在超声水浴中超声5min，用高纯氮气吹干；将步骤(1)中得到的il-gr-ldhns复合物超声分散于去离子水中，配制成浓度为3mg/ml的分散液，取0.5～50μl该分散液滴涂在处理好的玻碳电极表面，自然晾干后得到il-gr-ldhns修饰的玻碳电极，记为il-gr-ldhns/gce；

(3)dna传感器的制备

将il-gr-ldhns/gce浸入0.4mol/l1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和0.1mol/ln-羟基琥珀酰亚胺的混合溶液中30min，使修饰电极表面羧基化；取1～100μl浓度为1×10^-6mol/l的探针ssdna溶液滴涂于修饰电极表面，在25～70℃下孵育2h，依次用ph为7.4的pbs和双蒸水对电极进行冲洗，除去未固定的探针ssdna，室温自然干燥后得dna传感器。

其中步骤(1)中mgcl2·6h2o和alcl3·9h2o的摩尔比为2：1；老化过程中il在碱性介质中与go分子上的环氧环发生开环反应，实现了il对go的共价修饰和部分还原；在甲酰胺介质中制备的ldhns具有超薄特性，厚度约为0.7～2nm；步骤(2)中所述抛光后的玻碳电极，采用三电极系统检测，在[fe(cn)6]^3-/4-溶液中，设置电压为-0.4～0.8v，对玻碳电极进行循环伏安扫描，若氧化还原峰电位差在0～100mv内，则说明电极表面已处理好，否则重新处理，直至符合要求为止。

本发明目的之三是提供一种弧菌dna电化学传感器用于弧菌的检测应用。具体包括以下具体步骤：

(1)dna传感器与目标ssdna的杂交

将不同浓度互补dna滴入固定有探针的电极表面，在35℃下孵育50min进行杂交，杂交后依次用pbs(ph为7.4)和双蒸水对电极进行冲洗，去除未杂交的目标dna，即完成dna分子在电极表面的杂交。

(2)传感器的电化学信号检测

采用循环伏安(cv)和差分脉冲伏安法(dpv)进行检测，以不同的修饰玻碳电极作为工作电极，铂丝电极为对电极，ag/agcl电极为参比电极，[fe(cn)6]^3-/4-为指示剂，检测底液为0～10mmoll^-1[fe(cn)6]^3-/4-和0～1moll^-1kcl的pbs(ph为7～9)缓冲液，应用电化学工作站测试不同修饰电极的循环伏安曲线、差分脉冲伏安曲线，扫描电位为-1～1v，扫描速度为1～200mv/s。观察峰型变化，记录还原峰电流值。

与现有技术相比，主要优点在于：所述弧菌dna电化学传感器充分发挥了il、gr和ldhns的协同效应，提高了复合膜的比表面积、导电性和分散性，增加了活性位点，大大增强了修饰界面对探针ssdna的固定能力，从而整体提高了dna电化学传感器检测弧菌特征dna的性能，对高灵敏无标记检测致病性副溶血性弧菌具有重要的理论意义和潜在的应用价值。该传感器的灵敏度高选择性好，尤其具有较低的检测限和较宽的线性范围；制备方法简单，检测速度快。

附图说明：

图1为对比例4步骤(1)所得go-ldhns(a)和实施例1步骤(1)所得il-gr-ldhns(b)的扫描电镜图。

图2为对比例1、对比例2、对比例3、对比例4和实施例1分别对应的gce、ldhns/gce、go/gce、go-ldhns/gce和il-gr-ldhns/gce在5mmoll^-1[fe(cn)6]^3-/4-和0.1moll^-1kcl的pbs(ph＝7.4)缓冲液中的cv结果。

图3为对比例1、对比例2、对比例3、对比例4和实施例1分别对应的gce、ldhns/gce、go/gce、go-ldhns/gce和il-gr-ldhns/gce在5mmoll^-1[fe(cn)6]^3-/4-和0.1moll^-1kcl的pbs(ph＝7.4)缓冲液中的电化学阻抗结果。

图4为实施例1对应的il-gr-ldhns/gce(a)、固定探针ssdna后(b)以及与目标dna杂交后(c)在[fe(cn)6]^3-/4-和kcl的pbs中的cv结果。

图5为实施例1对应的固定有探针ssdna的il-gr-ldhns/gce(a)、与非互补dna杂交(b)、与三碱基错配dna杂交(c)、与单碱基错配dna杂交(d)和完全互补dna杂交后(e)的dpv结果。

图6为不同浓度目标ssdna与实施例1对应dna传感器杂交后的dpv响应结果(a-k):0，1.0×10^-16，1.0×10^-15，1.0×10^-14，1.0×10^-13，1.0×10^-12，1.0×10^-11，1.0×10^-10，1.0×10^-9，1.0×10^-8，1.0×10^-7moll^-1，插图为ipa与-lgc之间的线性关系图。

具体实施方式：

为进一步理解本发明，下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明，但并不以任何方式限制本发明。

实施例1：

(1)il-gr-ldhns复合物的制备

将一定量的go加入到100ml含有200mgil的甲酰胺中，超声分散2h，得到go浓度为1.0mg/ml的il-go分散液；按2：1的摩尔比向其中加入mgcl2·6h2o和alcl3·9h2o，使总金属离子浓度为0.03mol/l，搅拌1h使金属盐完全溶解，在搅拌条件下，用浓度为0.5mol/l的氢氧化钠的甲酰胺溶液缓慢滴定至反应液的ph约为9.0～10.0，室温搅拌反应12h，之后在60℃条件下老化12h，反应液在8000rpm转速下离心10min，分别用乙醇和去离子水洗涤3次，室温自然干燥后即得离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合物，记为il-gr-ldhns；

(2)il-gr-ldhns修饰玻碳电极的制备

将玻碳电极用0.05μm的a12o3抛光粉抛光后，用双蒸水冲洗干净，并在超声水浴中超声5min，用高纯氮气吹干；将步骤(1)中得到的il-gr-ldhns复合物超声分散于去离子水中，配制成浓度为3mg/ml的分散液，取12μl该分散液滴涂在处理好的玻碳电极表面，自然晾干后得到il-gr-ldhns修饰的玻碳电极，记为il-gr-ldhns/gce；

(3)dna传感器的制备

将il-gr-ldhns/gce浸入0.4mol/l1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和0.1mol/ln-羟基琥珀酰亚胺的混合溶液中30min，使修饰电极表面羧基化；取20μl浓度为1×10^-6mol/l的探针ssdna溶液滴涂于修饰电极表面，在25℃下孵育2h，依次用ph为7.4的pbs和双蒸水对电极进行冲洗，除去未固定的探针ssdna，室温自然干燥后得dna传感器。

实施例2：

(1)il-gr-ldhns复合物的制备

将一定量的go加入到100ml含有200mgil的甲酰胺中，超声分散2h，得到go浓度为0.5mg/ml的il-go分散液；按2：1的摩尔比向其中加入mgcl2·6h2o和alcl3·9h2o，使总金属离子浓度为0.03mol/l，搅拌1h使金属盐完全溶解，在搅拌条件下，用浓度为0.5mol/l的氢氧化钠的甲酰胺溶液缓慢滴定至反应液的ph约为9.0～10.0，室温搅拌反应12h，之后在70℃条件下老化12h，反应液在8000rpm转速下离心10min，分别用乙醇和去离子水洗涤3次，室温自然干燥后即得离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合物，记为il-gr-ldhns；

(2)il-gr-ldhns修饰玻碳电极的制备

将玻碳电极用0.05μm的a12o3抛光粉抛光后，用双蒸水冲洗干净，并在超声水浴中超声5min，用高纯氮气吹干；将步骤(1)中得到的il-gr-ldhns复合物超声分散于去离子水中，配制成浓度为3mg/ml的分散液，取18μl该分散液滴涂在处理好的玻碳电极表面，自然晾干后得到il-gr-ldhns修饰的玻碳电极，记为il-gr-ldhns/gce；

(3)dna传感器的制备

将il-gr-ldhns/gce浸入0.4mol/l1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和0.1mol/ln-羟基琥珀酰亚胺的混合溶液中30min，使修饰电极表面羧基化；取40μl浓度为1×10^-6mol/l的探针ssdna溶液滴涂于修饰电极表面，在35℃下孵育2h，依次用ph为7.4的pbs和双蒸水对电极进行冲洗，除去未固定的探针ssdna，室温自然干燥后得dna传感器。

实施例3：

(1)il-gr-ldhns复合物的制备

将一定量的go加入到100ml含有200mgil的甲酰胺中，超声分散2h，得到go浓度为1.5mg/ml的il-go分散液；按2：1的摩尔比向其中加入mgcl2·6h2o和alcl3·9h2o，使总金属离子浓度为0.03mol/l，搅拌1h使金属盐完全溶解，在搅拌条件下，用浓度为0.5mol/l的氢氧化钠的甲酰胺溶液缓慢滴定至反应液的ph约为9.0～10.0，室温搅拌反应12h，之后在60℃条件下老化12h，反应液在8000rpm转速下离心10min，分别用乙醇和去离子水洗涤3次，室温自然干燥后即得离子液体功能化石墨烯-类水滑石纳米片复合物，记为il-gr-ldhns；

(2)il-gr-ldhns修饰玻碳电极的制备

按照按照实施例1中步骤(1)的方法和条件制备；

(3)dna传感器的制备

将il-gr-ldhns/gce浸入0.4mol/l1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和0.1mol/ln-羟基琥珀酰亚胺的混合溶液中30min，使修饰电极表面羧基化；取60μl浓度为1×10^-6mol/l的探针ssdna溶液滴涂于修饰电极表面，在45℃下孵育2h，依次用ph为7.4的pbs和双蒸水对电极进行冲洗，除去未固定的探针ssdna，室温自然干燥后得dna传感器。

实施例4：

(1)il-gr-ldhns复合物的制备

按照按照实施例1中步骤(1)的方法和条件制备；

(2)il-gr-ldhns修饰玻碳电极的制备

按照按照实施例1中步骤(2)的方法和条件制备；

(3)dna传感器的制备

将il-gr-ldhns/gce浸入0.4mol/l1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和0.1mol/ln-羟基琥珀酰亚胺的混合溶液中30min，使修饰电极表面羧基化；取20μl浓度为1×10^-6mol/l的探针ssdna溶液滴涂于修饰电极表面，在55℃下孵育2h，依次用ph为7.4的pbs和双蒸水对电极进行冲洗，除去未固定的探针ssdna，室温自然干燥后得dna传感器。

对比例1：

按照实施例1中步骤(3)的方法和条件，直接将探针ssdna固定在裸的gce表面。

对比例2：

(1)ldhns浆液的制备

按2：1的摩尔将mgcl2·6h2o和alcl3·9h2o加入到100ml甲酰胺中，使总金属离子浓度为0.03mol/l，搅拌1h使金属盐完全溶解，在搅拌的条件下，用浓度为0.5mol/l的氢氧化钠的甲酰胺溶液缓慢滴定至反应液的ph约为9.0～10.0，室温搅拌反应12h，之后在60℃条件下老化12h，反应液在8000rpm转速下离心10min，分别用乙醇和去离子水洗涤3次，浆状液记为ldhns；

(2)ldhns修饰gce的制备

按照实施例1中步骤(2)的方法和条件，配制浓度为3mg/ml的ldhns分散液，取12μl该分散液滴涂在处理好的gce表面，室温下自然晾干，得到ldhns/gce；

(3)dna传感器的制备

按照实施例1中步骤(3)的方法和条件，将探针ssdna固定在ldhns/gce表面。

对比例3：

(1)go修饰gce电极的制备

按照实施例1中步骤(2)的方法和条件，配制浓度为3mg/ml的go分散液，取12μl该分散液滴涂在处理好的gce表面，室温下自然晾干，得到go/gce；

(2)dna传感器的制备

按照实施例1中步骤(3)的方法和条件，将探针ssdna固定在裸的go/gce表面。

对比例4：

(1)go-ldhns复合物的制备

将一定量的go加入到100ml甲酰胺中，超声分散2h，得到浓度为1.0mg/ml的go分散液；按2：1的摩尔比向其中加入mgcl2·6h2o和alcl3·9h2o，使总金属离子浓度为0.03mol/l，搅拌1h使金属盐完全溶解，在搅拌条件下，用浓度为0.5mol/l的氢氧化钠的甲酰胺溶液缓慢滴定至反应液的ph约为9.0～10.0，室温搅拌反应12h，之后在60℃条件下老化12h，反应液在8000rpm转速下离心10min，分别用乙醇和去离子水洗涤3次，室温自然干燥后即得氧化石墨烯-类水滑石纳米片复合物，记为go-ldhns；

(2)go-ldhns修饰gce电极的制备

按照实施例1中步骤(2)的方法和条件，配制浓度为3mg/ml的go-ldhns分散液，取12μl该分散液滴涂在处理好的gce表面，室温下自然晾干，得到go-ldhns/gce；

(3)dna传感器的制备

按照实施例1中步骤(3)的方法和条件，将探针ssdna固定在go-ldhns/gce表面。

图1为对比例4步骤(1)所得go-ldhns(a)和实施例1步骤(1)所得il-gr-ldhns(b)的扫描电镜图。从图(a)中可以看出，ldhns生长在go衬底上，呈现出片状结构，有一定的聚集现象；当有il存在时，il-go-ldhns复合物中片状材料通过il连接在一起，呈现出连绵状，聚集现象基本消除，这有利于修饰电极的电子传递及传质过程。

图2为对比例1、对比例2、对比例3、对比例4和实施例1分别对应的gce、ldhns/gce、go/gce、go-ldhns/gce和il-gr-ldhns/gce在5mmoll^-1[fe(cn)6]^3-/4-和0.1moll^-1kcl的pbs(ph＝7.4)缓冲液中的cv结果。由图可知，由于go和ldhns本身都不导电，而且单独的ldhns和go都存在一定聚集现象，阻碍了氧化还原探针的电子传递，因而ldhns/gce和go/gce的cv曲线相对于裸的gce其氧化还原响应并没有明显的提高。当ldhns和go复合后，由于两种片状纳米材料相互抑制了其聚集，保持了更多的活性位点，因而go-ldhns/gce上的氧化还原电流有了明显的增加。il-gr-ldhns/gce则给出了明显增加的氧化还原信号，这主要是因为il的共价修饰不仅提高了纳米复合材料的表面积和活性位点，而且提高了材料的导电性和分散性，提高其电化学催化活性。

图3为对比例1、对比例2、对比例3、对比例4和实施例1对应的gce、ldhns/gce、go/gce、go-ldhns/gce和il-gr-ldhns/gce在5mmoll^-1[fe(cn)6]^3-/4-和0.1moll^-1kcl的pbs(ph＝7.4)缓冲液中的电化学阻抗结果。从图可以看出，由于go和ldhns本身都不导电，而且单独的ldhns和go都存在一定聚集现象，阻碍了电活性物质的传质过程，相对于裸电极来说，其电化学阻抗只有较小的减小，表明ldhns和go都有一定的电化学催化作用。当go-ldhns修饰电极后，两种片状纳米组分相互抑制了自身的聚集，提供了更大的比表面积和更多的活性位点，因而go-ldhns/gce的电化学阻抗进一步减小。经il-gr-ldhns对gce修饰后，il-gr-ldhns/gce的电化学阻抗进一步降低，表现出了最快的电子传递能力，表明离子液体功能化的纳米复合物提高了修饰电极的导电性和分散性，加速了[fe(cn)6]^3-/4-探针的电子转移。

实施例5：

分别将不同浓度互补dna滴加到对比例1、对比例2、对比例3、对比例4和实施例1对应的固定有探针ssdna的gce、ldhns/gce、go/gce、go-ldhns/gce和il-gr-ldhns/gce表面，在35℃下孵育50min进行杂交，杂交后依次用ph为7.4的pbs和双蒸水对修饰电极进行冲洗，去除为杂交的目标dna，完成dna分子在电极表面的杂交。

以固定有探针ssdna的不同修饰gce作为工作电极，铂丝电极为对电极，ag/agcl电极为参比电极，[fe(cn)6]^3-/4-为指示剂，检测底液为5mmoll^-1[fe(cn)6]^3-/4-和0.1moll^-1kcl的pbs(ph＝7.4)缓冲液，在电化学工作站测试不同修饰电极的cv和dpv曲线，扫描电位为-0.4～0.8v，扫描速度为100mv/s。观察峰型变化，记录还原峰电流值。

图4为实施例1对应的il-gr-ldhns/gce(a)、固定探针ssdna后(b)以及与目标dna杂交后(c)在[fe(cn)6]^3-/4-和kcl的pbs中的cv结果。可以看出，相对于il-gr-ldhns/gce(a)，固定探针ssdna后(b)，其氧化还原峰电流明显下降，主要原因是ssdna表面带负电荷的磷酸根骨架排斥带负电荷的[fe(cn)6]^3-/4-探针到达电极表面，表明探针ssdna已成功固定在修饰电极上。与目标dna杂交后(c)，峰电流进一步降低，这可归因于带负电荷的探针与杂交后带更多负电荷的磷酸盐骨架之间的静电排斥作用增强了，因而电化学响应更低。显然，这种峰电流变化与目标dna的选择性结合可以作为dna传感器的传感信号。

图5为实施例1对应的固定有探针ssdna的il-gr-ldhns/gce(a)、与非互补dna杂交(b)、与三碱基错配dna杂交(c)、与单碱基错配dna杂交(d)和完全互补dna杂交后(e)的dpv结果。可以看出，当固定有探针ssdna的il-gr-ldhns/gce与单碱基错配的dna杂交后(d)，其伏安响应和与完全互补dna杂交后(e)的结果相比，其峰电流信号有所增强。与此类似，探针ssdna与三碱基错配的dna杂交后(c)，峰电流信号进一步增强。当与完全非互补dna杂交后(b)，峰电流信号明显变大，但固定有ssdna的il-gr-ldhns/gce(a)给出了最大峰电流。这说明基于il-gr-ldhns/gce的dna传感器具有很高的选择性，可以区分出单碱基、三碱基错配和非互补dna。

图6为不同浓度目标ssdna与实施例1对应dna传感器杂交后的dpv响应结果(a-k):0，1.0×10^-16，1.0×10^-15，1.0×10^-14，1.0×10^-13，1.0×10^-12，1.0×10^-11，1.0×10^-10，1.0×10^-9，1.0×10^-8，1.0×10^-7moll^-1，插图为ipa与-lgc之间的线性关系图。由图看出，峰电流信号随着目标ssdna浓度的减小而变大，这是因为不同浓度的目标ssdna与探针ssdna杂交形成dsdna的量不同，对电子传递的阻碍作用也不同。信号越小表明在修饰电极表面形成越多的dsdna。插图为氧化峰电流值(ipa)与目标dna浓度(c)对数的负值(-lgc)之间的线性关系图，目标dna的浓度在10^-7～10^-16moll^-1范围之间，ipa与-lgc有良好的线性关系：ipa(μa)＝2.76lg(c/m)–30.15，(r²＝0.994)，并且检测限达2.63×10^-17moll^-1。表明本发明所得弧菌dna传感器具有很高的灵敏度。

表1为本发明所述il-gr-ldhns/gce弧菌dna传感器与其它dna传感器分析性能比较

从表1可看出，采用本发明所述的基于il-gr-ldhns/gce的电化学dna传感器与其它电化学dna传感器相比，线性范围明显增大，检测限显著降低，说明il-gr-ldhnse纳米复合膜促进了电子转移，增加了探针dna的固定量，降低了检出限。