[0028]比色卡制作:取5份冬虫夏草原粉(0.3g/份)，分另Ij加入Omg、1.5mg、3.6mg、7.5mg、15mg微粉娃胶与之混合。将混合物与碳酸钾150mg，氢氧化钾200mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水1mL，混勾，离心，取上清液ImL于1mL比色管中，加无水乙醇ImL, 0.4M钼酸铵试液lmL，混匀，反应1min后，加入0.833M草酸溶液lmL，观察实验现象。在柔和的日光下迅速用照相机拍下每个微粉硅胶梯度的比色管颜色，同一梯度值拍摄5张。把每个微粉硅胶梯度的相片在电脑图像处理软件进行处理，利用图像处理软件调试图片的RGB值，使得图片的色彩和比色管中的颜色值一致即可。在每个梯度的图片中标注其微粉硅胶的百分含量，然后输出打印，即得0%、0.5%、1.20Z0、2.5%、5.0%连续标准比色卡。
[0029]将市售冬虫夏草纯粉片研磨粉碎，取0.3g置于镍坩祸中，加入试剂盒中的试剂A350mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水10mL，混勾，离心，取上清液ImL于1mL比色管中，加试液D ImL,试液B ImL,混勾，反应1min后，加入试液C ImL,观察实验现象发现反应后颜色呈中黄色，将颜色同试剂盒中的比色卡的颜色进行比对，找出其颜色对应的梯度范围，可判断该产品中的微粉硅胶大致百分比含量为2.5%。
[0030]实施例2
[0031]市售冬虫夏草产品(冬虫夏草纯粉片)中微粉硅胶准确定量检测:
[0032]分别取试剂E 0mg、0.9mg、2.4mg、3.6mg、4.5mg、6mg、9mg、12mg 8 份，置于镍i甘祸中，另取I份研磨成粉的待测冬虫夏草产品0.3g。
[0033]往9个样品中分别加入试液A 350mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水10mL，混匀，离心，取上清液Iml加入4ml水稀释5倍，摇匀。取稀释后的溶液Iml于1mL比色管中，加试液D ImL,试液B ImL,混勾，反应1min后，加入试液C lmL。
[0034]利用紫外分光光度计测定以上9个样品在410nm处紫外吸收值，分别为0.4421，
0.5200,0.6968,0.8266,0.8717，1.097，1.329，1.675，1.146。
[0035]根据标准品吸收值建立微粉硅胶的含量与吸收值的函数关系为:y =30.61x+0.442，相关系数R = 0.998 ;建立的标准曲线见图1。
[0036]将冬虫夏草产品吸收值1.146代入方程即可计算得微粉硅胶的精确含量为2.
【主权项】
1.一种快速检测冬虫夏草产品中微粉硅胶的试剂盒，包括试剂瓶、比色卡、比色管，其特征在于，所述的试剂瓶共5个，分别含有试剂A、试剂B、试剂C、试剂D和试剂E ; 所述的试剂A的配制方法为:将分析纯的碳酸钾与氢氧化钾按照3:4质量进行均匀混合即得； 所述的试剂B的配制方法为:取钼酸6.5g，加水14mL与25%的氨水14.5mL，振摇使溶解，冷却，在搅拌下缓缓加入已冷却的32mL65%硝酸与40mL水的混合液中，静置48h，滤过，取滤液即得； 所述的试剂C的配制方法为:取草酸7.5g于10mL容量瓶中，用少量水溶解，稀释、定容至刻度，即得； 所述的试剂D为无水乙醇； 所述的试剂E为微粉硅胶标准品； 所述的比色卡制作方法为: 1)取5份冬虫夏草原粉，每份0.3g，置于镍i甘祸中，分别加入0mg、l.5mg、3.6mg、7.5mg、15mg微粉娃胶与之混合； 2)将混合物与碳酸钾150mg，氢氧化钾200mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水1mLjg匀，离心，取上清液ImL于1mL比色管中，加无水乙醇lmL，0.04M钼酸铵试液lmL，混匀，反应1min后，加入ImL0.833M草酸溶液； 3)按照不同百分含量微粉硅胶在试管中显现出来的颜色制成比色卡。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的比色卡从左到右的颜色依次为:淡黄色、浅黄色、米黄色、中黄色、柠檬黄色，代表相应的冬虫夏草中添加微粉硅胶的浓度为0%、0.5%Λ.2%,2.5%和 5%03.一种鉴别冬虫夏草产品中是否添加微粉硅胶的方法，其特征在于，利用如权利要求1所述的试剂盒，包括以下步骤: 将冬虫夏草产品研磨粉碎，取0.3g置于镍坩祸中，加入试剂A 350mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水10mL，混勾，离心，取上清液ImL于1mL比色管中，加试液D lmL，试液BlmL，混匀，反应1min后，加入试液C lmL，观察实验现象，并将颜色同试剂盒中的比色卡的颜色进行比对，找出其颜色对应的梯度范围，即可确定该产品中的微粉硅胶百分比含量范围。4.一种鉴别冬虫夏草产品中是否添加微粉硅胶的方法，其特征在于，利用如权利要求1所述的试剂盒，使用分光光度计测定其紫外吸收值，建立标准曲线，通过标准曲线方程对待测冬虫夏草产品中混入的微粉硅胶比例进行定量分析。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)分别取试剂E 0mg、0.9mg、2.4mg、3.6mg、4.5mg、6mg、9mg、12mg 8 份，置于镍i甘祸中，另取I份研磨成粉的待测冬虫夏草产品0.3g ; (2)往步骤(I)的9个样品中分别加入试液A350mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水10mL，混匀，离心，取上清液Iml加入4ml水，摇匀，取稀释后的溶液Iml于1mL比色管中，加试液D ImL,试液B ImL,混勾，反应1min后，加入试液C ImL ； (3)利用紫外分光光度计测定以上9个样品在410nm处紫外吸收值； (4)建立微粉硅胶的百分比含量与紫外吸收值的函数关系；(5)将冬虫夏草产品吸收值代入方程计算得微粉硅胶的精确百分比含量。
【专利摘要】本发明公开了一种检测冬虫夏草产品中微粉硅胶的试剂盒及检测冬虫夏草产品中微粉硅胶的方法。所述试剂盒包括试剂瓶、比色卡、比色管，其中，所述的试剂瓶共5个，分别含有试剂A、试剂B、试剂C、试剂D和试剂E；所述方法包括半定量检测方法和定量检测方法。本发明所述试剂盒能够稳定显色，排除很多干扰；所述半定量检测方法不需要任何其他试剂，不需要任何检测仪器，在微粉硅胶实际添加范围内有很好的适应性。同时该试剂盒能够对微粉硅胶的含量进行准确定量分析。
【IPC分类】G01N21/33, G01N21/78
【公开号】CN105158239
【申请号】CN201510448080
【发明人】李文佳, 段志辉, 刘铸, 李文庆, 艾中, 钱正明
【申请人】广东东阳光药业有限公司, 宜昌山城水都冬虫夏草有限公司
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年7月27日