下层基片上设有检测池出口 10和填料进料口 9，检测池出口 10在样品检测池正下方且与样品检测池大小一致，并连通出样口 8。填料进料口 9在填充柱床通道的正下方，用于填充固相萃取填料用，填充完后用盖板11封住填料进样口。
[0027]芯片材料可以为PMMA、PDMS或能以它们为模板的各种聚合物以及它们的复合体，填充通道内填充有正向吸附的固相萃取填料。微流通道7宽度为1-5_。
[0028]表面增强拉曼检测基底可以采用如下步骤制作:
[0029]I)首先合成金纳米粒子，将200ml质量分数为0.01 %的HAuC14水溶液加热至沸腾，迅速加入1.4ml质量分数为I %柠檬酸钠水溶液，约Imin后溶液颜色从先前的淡黄色变成黑色，2?3min后又变成棕红色，继续保持微沸40min，停止反应，水浴冷却。即得到综红色粒径约为55nm Au纳米粒子。
[0030]2)取1000 μ L上述Au纳米粒子4500rpm/min下离心8min，移去上清，即得到体积约为10 μ L的浓缩粒子。吸取上述样品5 μ L滴加在洁净硅片上，空气中自然干燥；即可得到表面增强拉曼检测基底。
[0031]芯片制作步骤如下:
[0032]I)先设计好的芯片结构图，如图1所示，导入二氧化碳激光光刻机软件内，按照设计图光刻出所需的PMMA材料的芯片部件，
[0033]2)在中层基片的筛板槽中放入固定尺寸的聚合物筛板，用于防止填料在流体经过时候被冲走；
[0034]3)按照设计图顺序，将上中下上层基片固定好，利用热压机，按照设定升温程序进行键合，键合完毕等待降温后取出芯片；
[0035]4)将正向固相萃取填料(聚酰胺粉)装入5ml注射器内，然后利用注射器将填料通过芯片下层的填料进料口注入芯片通道内；
[0036]5)最后在填料进料口周围滴加一层薄薄的三氯甲烷，将盖板放置上去压实十秒钟，然后放置五分钟。
[0037]6)将制作好的表面增强拉曼检测基底利用胶水在检测池底部，即可完成整个检测芯片的制作。
[0038]实施例2
[0039]检测步骤:
[0040]I)将芯片进样口朝上，利用注射器取Iml含有柠檬黄色素的橙汁饮料，通过进样口缓慢注入芯片内，废液通过出样口由于重力作用往下滴落，同时由于坝结构阻挡不会流入检测池内，防止表面增强拉曼检测基底被样品废液污染。
[0041]2)在利用注射器依次缓慢注入洗涤液(Iml水溶液和Iml乙醇溶液)用于洗涤固相萃取柱，将固相萃取柱上杂质洗涤下来；
[0042]3)将芯片翻转，进样口朝下，利用注射器注入洗脱液(0.5ml, I %乙醇氨溶液)将样品洗脱下来，洗脱液漫过坝结构，流入检测池内与表面增强拉曼基底接触。
[0043]4)放置10秒后，将芯片放入激光拉曼光谱仪镜头下方，对焦后直接进行检测，即可得到样品谱图(见图3)。
【主权项】
1.一种集成固相萃取柱的表面增强拉曼检测芯片，其特征在于，该芯片包括上、中、下三层基片， 中层基片设有微流通道(7)、样品检测池(6)和筛板槽(3)，微流通道(7) —端设有样品入口(5)，另一端靠近样品检测池(6)并设出样口(8)，在出样口⑶和样品检测池(6)之间一个坝(4)，样品入口(5)和出口(8)之间设两个筛板槽(3)，筛板槽内放入用于防止填料被流体冲走的筛板；其中二个筛板槽中间的微流通道形成填料填充通道； 上层基片设有进样口(I)、底面设有表面增强拉曼检测基底(2)，其中表面增强拉曼检测基底⑵对准中层基片的样品检测池(6)，进样口⑴对着中层基片微流通道的样品入口(5)； 下层基片上设有检测池出口(10)，检测池出口(10)位于样品检测池正下方且连通中层的出样口 (S)。2.如权利要求1所述的一种集成固相萃取柱的表面增强拉曼检测芯片，其特征在于:微流通道(7)宽度为l-5mm。3.如权利要求1所述的一种集成固相萃取柱的表面增强拉曼检测芯片，其特征在于:下层基片上还设有用于填充固相萃取填料用的填料进料口(9)。4.如权利要求3所述的一种集成固相萃取柱的表面增强拉曼检测芯片，其特征在于:填料进料口(9)底部设有盖板(11)。5.如权利要求1所述的一种集成固相萃取柱的表面增强拉曼检测芯片，其特征在于:坝(4)的底面与中层和下层基片交界面等高。6.一种表面增强拉曼检测方法，包括如下步骤: 1)提供权利要求1至5任一项所述的集成固相萃取柱的表面增强拉曼检测芯片； 2)将芯片进样口(I)朝上，利用注射器取待测液体，通过进样口(I)缓慢注入芯片内，废液由于重力作用通过出样口(8)往下滴落； 3)利用注射器依次缓慢注入洗涤液用于洗涤固相萃取柱，将固相萃取柱上杂质洗涤下来； 4)将芯片翻转，进样口(I)朝下，利用注射器注入洗脱液将样品洗脱下来，洗脱液漫过坝(4)，流入检测池内与表面增强拉曼检测基底(2)接触； 5)放置一段时间后，将芯片放入激光拉曼光谱仪镜头下方，对焦后直接进行检测，得到样品谱图。
【专利摘要】本发明公开了一种集成固相萃取柱的表面增强拉曼检测芯片，该芯片包括上、中、下三层基片，中层基片设有微流通道(7)、样品检测池(6)和筛板槽(3)，微流通道(7)一端设有样品入口(5)，另一端靠近样品检测池(6)，在样品入口和样品检测池之间设有一个坝(4)和两个筛板槽(3)；上层基片设有进样口(1)、底面设有表面增强拉曼检测基底(2)，其中表面增强拉曼检测基底(2)对准中层基片的样品检测池(6)，进样口(1)对着中层基片微流通道的样品入口(5)；下层基片上设有检测池出口(10)，检测池出口(10)位于样品检测池正下方且连通中层的出样口(8)。本发明实现了待测样品的在线拉曼检测和SPE操作的一体化。
【IPC分类】G01N21/65, G01N1/40
【公开号】CN105466905
【申请号】CN201510706113
【发明人】陈启振, 曾勇明, 刘国坤
【申请人】厦门市普识纳米科技有限公司
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2015年10月27日