专利名称：动态高压微射流-冻融法制备中链脂肪酸纳米脂质体的制作方法
技术领域：
本发明涉及食品营养领域，具体涉及一种中链脂肪酸纳米脂质体的制备方法。
背景技术：
从营养生理学观点看，中链脂肪酸(medium-chain fatty acids，MCFAs)是指碳 元素为 8 的辛酸(octanoic acid ；C8:0)和碳元素为 10 的癸酸(decanoic acid ；C10:0)。 与在淋巴系统中吸收的长链脂肪酸(long-chain fatty acids，LCFAs)相比，中链脂肪酸 (MCFAs)具有吸收快、不易在体内积蓄、极易提供能量等许多独特的生理功能，主要表现为 ⑴中链脂肪酸(MCFAs)熔点低、分子量小，常温下为液态、能量值低；(2)不依赖L-肉毒碱 而直接透过线粒体双层膜，进入线粒体内进行氧化，为机体快速提供能量，可作为运动员、 手术后病人、有脂肪吸收障碍者的能量来源；(3)中链脂肪酸(MCFAs)不易在肝组织和脂肪 组织中蓄积，可增加饱腹感，具有保持肌肉而不增加脂肪组织的作用，可作为肥胖症者的营 养食疗剂；(4)中链脂肪酸(MCFAs) {可调节对脂多糖的免疫反应和提高免疫球蛋白A的分 泌表达，保护消化道，起到抗炎症作用，可用于短肠综合症病人的治疗。但短时间内摄入大 量中链脂肪酸(MCFAs)会导致恶心、呕吐、胃气胀、腹部疼痛性痉挛、腹泻等胃肠道不适症 状，还会刺激缩胆囊素或其它肠内激素的分泌。脂质体是一种具有细胞膜类似结构、可包裹亲水、亲脂和两亲性药物和营养因子 的优良载体。脂质体既可保护药物和营养因子，降低其毒副作用，达到缓释目的，又可提高 药物的靶向性和生物利用率。脂质体常用的制备方法有薄膜分散法、冻融法、逆向蒸发法、 乙醇注入法、高压均质法等。这些传统方法制备工艺简单，但经常引入大量有毒试剂，而且 不适于大规模的工业生产。云力LfliitMi^ (dynamic high-pressure microfluidization, DHPM) i一禾中冑 压均质技术，它利用液压泵使流体产生高压，在撞击腔内的微孔道中，流体被分散成两股或 多股细流进行强烈的高速撞击，在此过程中瞬间产生巨大的压力降，实现高速撞击、高频剪 切、气蚀、高频振动、瞬时压降等综合作用，在IOOMPa下，时间小于5s即可达到使物料细化、 乳化、均质和改性等目的。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足和中链脂肪酸(MCFAs)的弱点，提供一种安 全、功能性质优良的中链脂肪酸纳米脂质体，为脂肪吸收障碍者、手术后病人、运动员和肥 胖症者提供特殊营养补充。本发明即采用的技术方案是采用动态是压微射流技术结合冻融法制备中链脂肪 酸纳米脂质体，本发明的工艺步骤如下1、中链脂肪酸纳米脂质原材料中各组份及其重量百分比为中链脂肪酸 (MCFAs)O. 5% -2.0%，卵磷脂 4. 0% -8. 0%，胆固醇 0. 8% -1. 2%，吐温-801. 5% -2.5%，维生素E0. -0.3%，麦芽糖2.0% _5.0%，其余的是浓度为0. 05M的磷酸盐缓冲溶液 (PBS)为 81. 0% -91. 1% ；2、按上述重量比例分别称取中链脂肪酸(MCFAs)、卵磷脂、胆固醇、吐温_80和维 生素E，在40°C条件下，按Ig卵磷脂溶于20ml无水乙醇，完全溶解各组分；3、将步骤2所得溶液于真空旋转蒸发仪上除去无水乙醇，形成均勻薄膜；4、在pH7.4、0.05M的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中加入2. 0%-5. 0%的麦芽糖，按8% 脂质浓度(卵磷脂与胆固醇总量占缓冲溶液体积的百分比)将麦芽糖溶液加入步骤3形成 的薄膜，进行水合洗膜，形成粗脂质体悬浊液；5、用高压微射流均质机处理步骤4得到的粗脂质体悬浊液，压力为140MPa，处理 次数为4次，得中链脂肪酸(MCFAs)脂质体；6、将步骤5所得中链脂肪酸(MCFAs)脂质体在_80°C条件下冷冻0. 5h_l. 5h，取出 后在40°C水浴条件下融化15min，再次放入-80°C条件下冷冻，如此反复3次，即得中链脂肪 酸(MCFAs)纳米脂质体。本发明的有益效果是制备的中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质体，既克服了中链脂肪酸(MCFAs)功能上的 弱点，而且脂质体性质稳定，生物利用率更高的脂质体包封率为40% -50%，平均粒度为 90-110nm，分散系数小于0. 10，zeta电位为(_30mV) - (_50mV)，贮藏稳定性良好。
附图为制备中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质体的工艺路线示意图
具体实施例方式实施例1称取0. 45g中链脂肪酸(MCFAs)、2. 06g卵磷脂、0. 34g胆固醇、0. 62g吐温-80和 0. 04g维生素E，完全溶解于42ml无水乙醇中，在40°C水浴条件下真空旋转除去无水乙醇， 形成均勻薄膜。取30ml浓度为0. 05M、pH为7. 4的磷酸盐缓冲溶液(PBS)，加入0. 9g麦 芽糖，将所得麦芽糖溶液加入薄膜进行水合洗膜，形成的均勻悬浊液即为粗脂质体。将粗 脂质体加入到DHPM中，于140MPa条件下微流化处理4次，得到中链脂肪酸(MCFAs)脂质 体。将中链脂肪酸(MCFAs)脂质体放入-80°C条件下冷冻0.5h后取出，在40°C水浴条件下 融解15min，再次放入-80°C条件冷冻，如此反复3次即得到中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质 体。制得的中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质体为乳白色溶液，包封率为47. 28%，平均粒径为 95. 4nm，分散系数为 0. 075，zeta 电位为-43. 79mV。实施例2称取0. 90g中链脂肪酸(MCFAs)、4. 12g卵磷脂、0. 68g胆固醇、1. 23g吐温-80和 0. 08g维生素E，完全溶解于83ml无水乙醇中，在40°C水浴条件下真空旋转除去无水乙醇， 形成均勻薄膜。取60ml浓度为0. 05M、pH为7. 4的磷酸盐缓冲溶液(PBS)，加入1. Sg麦 芽糖，将所得麦芽糖溶液加入薄膜进行水合洗膜，形成的均勻悬浊液即为粗脂质体。将粗 脂质体加入到DHPM中，于140MPa条件下微流化处理4次，得到中链脂肪酸(MCFAs)脂质 体。将中链脂肪酸(MCFAs)脂质体放入-80°C条件下冷冻0.5h后取出，在40°C水浴条件下融解15min，再次放入-80°C条件冷冻，如此反复3次即得到中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质 体。制得的中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质体为乳白色溶液，包封率为46. 09%，平均粒径为 105. 3nm，分散系数为 0. 084，zeta 电位为-44. 07mV。实施例3称取0. 45g中链脂肪酸(MCFAs)、2. 06g卵磷脂、0. 34g胆固醇、0. 84g吐温-80和 0. 08g维生素E，完全溶解于42ml无水乙醇中，在40°C水浴条件下真空旋转除去无水乙醇， 形成均勻薄膜。取30ml浓度为0. 05M、pH为7. 4的磷酸盐缓冲溶液(PBS)，加入0. 9g麦 芽糖，将所得麦芽糖溶液加入薄膜进行水合洗膜，形成的均勻悬浊液即为粗脂质体。将粗 脂质体加入到DHPM中，于140MPa条件下微流化处理4次，得到中链脂肪酸(MCFAs)脂质 体。将中链脂肪酸(MCFAs)脂质体放入-80°C条件下冷冻l.Oh后取出，在40°C水浴条件下 融解15min，再次放入-80°C条件冷冻，如此反复3次即得到中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质 体。制得的中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质体为乳白色溶液，包封率为44. 57%，平均粒径为 102. 6nm，分散系数为 0. 072，zeta 电位为-40. 63mV。实施例4称取0. 90g中链脂肪酸(MCFAs)、4. 12g卵磷脂、0. 68g胆固醇、1. 64g吐温-80和 0. 16g维生素E，完全溶解于83ml无水乙醇中，在40°C水浴条件下真空旋转除去无水乙醇， 形成均勻薄膜。取60ml浓度为0. 05M、pH为7. 4的磷酸盐缓冲溶液(PBS)，加入1. Sg麦 芽糖，将所得麦芽糖溶液加入薄膜进行水合洗膜，形成的均勻悬浊液即为粗脂质体。将粗 脂质体加入到DHPM中，于140MPa条件下微流化处理4次，得到中链脂肪酸(MCFAs)脂质 体。将中链脂肪酸(MCFAs)脂质体放入-80°C条件下冷冻0.5h后取出，在40°C水浴条件下 融解15min，再次放入-80°C条件冷冻，如此反复3次即得到中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质 体。制得的中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质体为乳白色溶液，包封率为45. 62%，平均粒径为 81. 7nm，分散系数为 0. 084，zeta 电位为-39. 58mV。
权利要求
动态高压微射流 冻融法制备中链脂肪酸纳米脂质体，其特征在于，所述脂质体原材料各组分及其重量百分比为中链脂肪酸(MCFAs)0.5％ 2.0％，卵磷脂4.0％ 8.0％，胆固醇0.8％ 1.2％，吐温 80 1.5％ 2.5％，维生素E 0.1％ 0.3％，麦芽糖2.0％ 5.0％，其余的是浓度为0.05M的磷酸盐缓冲溶液(PBS)，为81.0％ 91.1％；制备步骤为(1)按上述重量百分比分别称取中链脂肪酸(MCFAs)、卵磷脂、胆固醇、吐温 80和维生素E，在40℃条件下，按1g卵磷脂溶于20ml无水乙醇，完全溶解各组分；(2)将步骤1所得溶液于真空旋转蒸发仪上除去无水乙醇，形成均匀薄膜；(3)在pH7.4、0.05M的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中加入2.0％ 5.0％的麦芽糖，按8％脂质浓度(卵磷脂与胆固醇总量占缓冲溶液体积的百分比)将麦芽糖溶液加入步骤2形成的薄膜，进行水合洗膜，形成粗脂质体悬浊液；(4)将步骤3得到的粗脂体加入到高压微射流均质机中，压力为140MPa，处理次数为4次，得中链脂肪酸(MCFAs)脂质体；(5)将步骤4所得中链脂肪酸(MCFAs)脂质体在 80℃条件下冷冻0.5h 1.5h，取后在40℃水浴条件下融化15min，再次放入 80℃条件下冷冻，如此反复3次，即得中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质体。
全文摘要
一种中链脂肪酸(MCFAs)纳米脂质体的制备方法，是以脂溶性MCFAs为原料，卵磷脂和胆固醇为壁材，采用动态高压微射流(DHPM)-冻融法，经溶解、混匀、真空除溶剂、水合洗膜、DHPM处理、反复冷冻-融解等过程制备MCFAs纳米脂质体。本发明制备的MCFAs纳米脂质体包封率为40％-50％，平均粒度为90-110nm，分散系数小于0.10，zeta电位为(-30mV)-(-50mV)，分布均匀，生物利用率高，贮藏稳定性良好。
文档编号A23P1/00GK101940321SQ20101024750
公开日2011年1月12日 申请日期2010年8月6日 优先权日2010年8月6日
发明者刘伟, 刘成梅, 刘玮琳, 梁瑞红, 王瑞莲, 郑会娟 申请人:南昌大学