一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方的制作方法

本发明涉及药用植物组织培养领域，尤其涉及一种碱性蒲公英快速繁殖培养基。

背景技术：

碱性蒲公英为药用蒲公英的一种，为清热解毒中药，用于治疗乳痈、疔疮、肿瘤、目赤、喉痛等。药理实验表明，蒲公英具有抗菌消炎、利胆保肝和免疫促进作用。近年来的商品药材调查表明，碱地蒲公英为蒲公英的主流品种之一。目前主要采用野外采集供应市场需求，随着人们对碱性蒲公英的不断研究和产品开发，必将会出现供不应求的现象。本发明利用植物组织培养进行碱性蒲公英的种苗培养，公开了三个培养阶段的培养基配方，为蒲公英的研究与种苗的生产提供了技术支持。目前还没有碱性蒲公英组织培养的相关报道。

技术实现要素：

为了达到碱性蒲公英组织培养快速繁殖的目的，本发明提供了一种碱地蒲公英快速繁殖的培养基的配方。

为了达到上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明是一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：

a.萌发培养基：ms+6-ba0.05-0.5mg/l+ga30.2-1.0mg/l+蔗糖10~40g/l

b.增殖培养基：ms+6-ba0.2-0.8mg/l+naa0.05-0.2mg/l+蔗糖15~40g/l

c.生根壮苗培养基：1/2ms+naa0.3-1.0mg/l+ac0.1-0.5g/l+蔗糖20~50g/l。

优选的，所述的一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：

a.萌发培养基：ms+6-ba0.1-0.3mg/l+ga30.3-0.8mg/l+蔗糖25-35g/l

b.增殖培养基：ms+6-ba0.4-0.6mg/l+naa0.05-0.15mg/l+蔗糖25~35g/l

c.生根壮苗培养基：1/2ms+naa0.4-0.6mg/l+ac0.2-0.4g/l+蔗糖30~45g/l。

优选的，所述的一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：

a.启动培养基：ms+6-ba0.2mg/l+ga30.5mg/l+蔗糖30g/l

b.增殖培养基：ms+6-ba0.5mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30g/l

c.生根壮苗培养基：1/2ms+naa0.5mg/l+ac0.3g/l+蔗糖40g/l。

优选的：ga3为赤霉素、6-ba为6-苄氨基腺嘌呤、naa为萘乙酸、ac为活性炭。

优选的：三个培养阶段的培养基ph均为6.4-7.0。

优选的：启动培养所使用的外植体为碱地蒲公英种子。

优选的：三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基。

本发明的有益效果是：利用本发明的培养基配方进行碱性蒲公英种苗的生产，具有生产能力强、培养周期短、增殖系数高、种苗抗性强等特点，由于采用组织培养的无性繁殖技术，不但能够保持母本的优良性状，而且能够获得脱毒种苗，可以作为原种使用，所使用的培养基原料市场上较容易采购、培养基配制简单。

附图说明

图1是本发明碱地蒲公英种子萌发图。

图2是本发明碱性蒲公英增殖培养情况图。

图3是本发明碱性蒲公英在组培瓶中生根情况图。

具体实施方式

为了加深对本发明的理解，下面将结合附图和实施例对本发明作进一步详细描述，该实施例仅用于解释本发明，并不对本发明的保护范围构成限定。

如图1-3所示，本发明是一种碱地蒲公英快速繁殖培养基配方，培养基配方包括以下三个培养阶段所使用的培养基的配方：

a.萌发培养基：ms+6-ba0.05-0.5mg/l+ga30.2-1.0mg/l+蔗糖10~40g/l

b.增殖培养基：ms+6-ba0.2-0.8mg/l+naa0.05-0.2mg/l+蔗糖15~40g/l

c.生根壮苗培养基：1/2ms+naa0.3-1.0mg/l+ac0.1-0.5g/l+蔗糖20~50g/l。

其中：所述ga3为赤霉素、6-ba为6-苄氨基腺嘌呤、naa为萘乙酸、ac为活性炭；

所述三个培养阶段的培养基ph均为5.8~6.0；

所述启动培养所使用的外植体为碱地蒲公英种子；

所述三种培养基均为以琼脂为支撑物的固体培养基。

实施例1

（1）外植体：碱性蒲公英种子

（2）萌发培养：将种子进行消毒，消毒采用浓度为75%酒精消毒30s、0.1%升汞8min，消毒后接种到灭菌后的启动培养基中，培养基配方为ms+6-ba0.2mg/l+ga30.5mg/l+蔗糖30g/l+琼脂5.5g/lph6.4；

（3）增殖培养：将种子萌发后的小苗1-3厘米去掉种壳和根须，接种到已灭菌了的增殖培养基上培养，培养基配方为ms+6-ba0.5mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30g/l+琼脂5.5g/lph6.8；

（4）生根培养：壮苗培养25~35d后，将高度1cm以上的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为：1/2ms+naa0.4-0.6mg/l+ac0.2-0.4g/l+蔗糖30~45g/l+琼脂5.5g/l，ph7.0，45~60d完成生根培养，组培苗的高度3~5cm，根长2~3cm；

（5）培养环境条件：光照强度与周期：1800~2000lx、14h/d；温度25±1℃；湿度40~60%。

实施例2

（1）外植体：碱性蒲公英种子

（2）萌发培养：将种子进行消毒，消毒采用浓度为75%酒精消毒30s、0.1%升汞8min，消毒后接种到灭菌后的萌发培养基中，培养基配方为ms+6-ba0.1mg/l+ga30.3mg/l+蔗糖25g/l+琼脂5.5g/lph6.4；

（3）增殖培养：将种子萌发后的小苗（1-3厘米）去掉种壳和根须，接种到已灭菌了的增殖培养基上培养，培养基配方为ms+6-ba0.4mg/l+naa0.05mg/l+蔗糖25g/l+琼脂5.5g/lph6.8；

（4）生根培养：壮苗培养25~35d后，将高度1cm以上的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为：1/2ms+naa0.4mg/l+ac0.2g/l+蔗糖30g/l，ph7.0。45~60d完成生根培养，组培苗的高度3~5cm，根长2~3cm；

（5）培养环境条件：光照强度与周期：1800~2000lx、14h/d；温度25±1℃；湿度40~60%。

实施例3

（1）外植体：碱性蒲公英种子

（2）萌发培养：将种子进行消毒，消毒采用浓度为75%酒精30s、0.1%升汞8min，消毒后接种到灭菌后的萌发培养基中，培养基配方为ms+6-ba0.3mg/l+ga30.8mg/l+蔗糖35g/l+琼脂5.5g/lph6.4；

（3）增殖培养：将种子萌发后的小苗（1-3厘米）去掉种壳和根须，接种到已灭菌了的增殖培养基上培养，培养基配方为ms+6-ba0.6mg/l+naa0.15mg/l+蔗糖35g/l+琼脂5.5g/lph6.8；

（4）生根培养：壮苗培养25~35d后，将高度1cm以上的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为：1/2ms+naa0.6mg/l+ac0.4g/l+蔗糖45g/l，ph7.0，45~60d完成生根培养，组培苗的高度3~5cm，根长2~3cm；

（5）培养环境条件：光照强度与周期：1800~2000lx、14h/d；温度25±1℃；湿度40~60%。