专利名称：一种饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种生物酶制剂，具体的涉及一种饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法。
背景技术：
我国是一个农业大国，养殖业非常发达，因此，生产制造含各种生物酶制剂的复合型饲料应用于畜牧业，对于促进动物生长、节约粮食、减少污染、保护环境具有深远的意义。现有技术中，生物酶制剂种类一般包括1.内源性酶，与消化道分泌的消化酶相似的酶(淀粉酶，蛋白酶，脂肪酶等)；2.外源性酶，消化道不能分泌的类似酶(如纤维素酶，果胶酶，半乳糖苷酶，β-葡聚糖酶，木聚糖酶和植酸酶等)。其中最重要的酶制剂，目前已得到充分肯定的酶制剂主要是阿拉伯木聚糖酶(戊聚糖酶)，β-葡聚糖酶和植酸酶。这三种酶制剂是通过消除日粮中的某些抗营养因子而改善动物的生产性能。阿拉伯木聚糖酶是研究最充分，并在当前已被广泛地商业性用于饲养系统的酶制剂。饲料原料的非淀粉多糖小麦，燕麦，稻谷，麸皮，米糠，统糠等都含有较多的木聚糖。大麦，黑麦，啤酒糟等含有较多的β-葡聚糖酶.这类多聚糖统称为水溶性非淀粉多糖(NSP)。
现有技术中，对复合酶制剂酶特性的测定往往仅限于对其组成成分的单酶活性(简称酶活)的测定，而缺乏对其综合特性的复合测定。现有技术中，也仅公开了对部分单酶酶活特性的测定方法，例如对木聚糖酶的酶活特性的测定方法，而没有对组配后的生物酶复合制剂特性的测定方法，实践中也不能全面地了解组配后的复合酶制剂综合特性，尤其是不能准确了解其组配、及其与底物混合后的加工特性，因此无法为筛选畜禽、鱼虾等饲料用复合酶制剂的配方，及其生产加工提供科学有效的依据。
发明内容
本发明的目的在于，针对现有生物酶特性测定技术的不足，提供一种由简到繁、用来优化筛选复合酶制剂的饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，为畜禽、鱼虾等饲料用复合酶制剂的配方及其生产提供科学有效的依据。
本发明为实现上述目的所采用的技术方案是一种饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其包括如下步骤1)测试拟组成复合酶的各单酶制剂的特性，并根据测试结果绘制图表；2)将拟组成复合酶的各单酶制剂中的两种或多种进行分组后混合，测试该组配后该各单酶活性、能量及蛋白价值的变化，并根据测试结果绘制图表；3)比较步骤1)及2)的结果，选择相对特性数值变化较小的组配，将其加入到不同底物中测试，并根据测试结果绘制图表；4)变换底物的浓度，并根据测试结果绘制图表；5)采用图表对比法比较步骤1)～4)的测试结果，选择适合加工的单酶制剂、组配及其浓度。
前述的饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其特征在于，所述的步骤1)，还包括如下步骤11)制备单酶溶液；12)测试并记录单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；13)测试并记录单酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；14)测试并记录底物浓度变化对单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；15)测试并记录加工工艺对单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；所述步骤12)～15)的顺序不分先后。
前述的饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其特征在于，所述的步骤2)，还包括如下步骤21)测试并记录该组配酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；22)测试并记录该组配酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；23)测试并记录底物浓度变化对该组配酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；24)测试并记录加工工艺对该组配酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；所述步骤21)～24)的顺序不分先后。
本发明的有点在于本发明提供的方法，可以通过对各种单酶组分及配比的复合酶制剂的能量和蛋白价值等产品特性进行检测，特别是通过测试、对比，可以准确了解复合酶制剂的组配、及其与底物混合后的加工特性，从而作为针对性地设计和筛选饲料用复合酶组合的科学依据，达到节约生物酶材料、提高饲料利润率的目的。
图1是本发明实施例1提供的饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法的流程图；图2是本发明实施例1中，温度对木聚糖酶活性的影响图。
图3pH对木聚糖酶活性影响图；图4底物浓度对木聚糖酶活性的影响；图5是经不同温度处理后木聚糖酶活性存留情况图；图6是木聚糖酶贮存期间酶活存留情况图；图7是木聚糖酶在不同加工阶段酶活变化情况图；图8是本发明实施例2中，温度对蛋白酶活性的影响图；图9是pH对中性蛋白酶活性的影响图；图10是底物浓度对中性蛋白酶活性的影响图；图11是中性蛋白酶经不同温度处理后酶活变化图；图12是中性蛋白酶贮存期间酶活存留情况图；图13是加工工艺对中性蛋白酶活性的影响图。
具体实施例方式
参见图1，本发明提供的通用饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其流程包括如下步骤1)测试拟组成复合酶的各单酶制剂的特性，并根据测试结果绘制图表；2)将拟组成复合酶的各单酶制剂中的两种或多种进行分组后混合，测试该组配后该各单酶活性、能量及蛋白价值的变化，根据测试结果绘制图表；3)比较步骤1)及2)的结果，选择相对特性数值变化小的组配，将其加入到不同底物中测试，并根据测试结果绘制图表；4)变换底物的浓度，并根据测试结果绘制图表；5)采用图表对比法比较步骤1)～4)的测试结果，选择适合加工的单酶制剂、组配及其浓度。
前述的饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，所述的步骤1)，还包括如下步骤11)制备单酶溶液；12)测试并记录单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；13)测试并记录单酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；14)测试并记录底物浓度变化对单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；15)测试并记录加工工艺对单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；所述步骤12)～15)的顺序不分先后。
前述的饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，所述的步骤2)，还可以包括如下步骤21)测试并记录该组配酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；22)测试并记录该组配酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；23)测试并记录底物浓度变化对该组配酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；24)测试并记录加工工艺对该组配酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；所述步骤21)～24)的顺序不分先后。
其优选的实施例1参见图2～图7，提供一种禽(鸡、鸭等)用系列复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其包括如下步骤1)测试拟组成复合酶的各单酶制剂的特性，并根据测试结果绘制图表，本实施例中，拟组成复合酶的各单酶制剂包括蛋白酶、α-淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶。
2)将拟组成复合酶的各单酶制剂中，即蛋白酶、α-淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶中的两种或多种进行分组后混合，分别测试该组配后该各单酶活性、能量及蛋白价值的变化，根据测试结果绘制图表；3)比较步骤1)及2)的结果，选择相对特性数值变化小的组配，本实施例中为蛋白酶、α-淀粉酶、木聚糖酶两两之间的组配，将其加入到不同底物中测试，并根据测试结果绘制图表；参见表1，本实施例中，底物分别为玉米型日粮、玉米型日粮(高浓度)、小麦型日粮、小麦型日粮(高浓度)、小麦/玉米混合型日粮、小麦/玉米混合型日粮(高浓度)。
4)变换底物的浓度，并根据测试结果绘制图表；5)采用图表对比法比较步骤1)～4)的测试结果，选择适合加工的单酶制剂、组配及其浓度，本实施例中优选的单酶制剂、组配结果为蛋白酶、α-淀粉酶、木聚糖酶，如表2所示。
前述的步骤1)，还包括如下步骤11)制备蛋白酶、α-淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶的单酶溶液；12)测试并记录前述各单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；
13)测试并记录前述各单酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；14)测试并记录底物浓度变化对前述各单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；15)测试并记录加工工艺对前述各单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；所述步骤12)～15)的顺序不分先后。
前述的步骤2)，还可以包括如下步骤21)测试并记录该蛋白酶、α-淀粉酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶中的两种或多种组配酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；22)测试并记录前述各组配酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；23)测试并记录底物浓度变化对前述各组配酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；24)测试并记录加工工艺对前述各组配酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；所述步骤21)～24)的顺序不分先后。
表1产品名称、产品代号、适用动物及生长阶段
表2禽用复合酶制剂系列产品酶组配及其酶活性指标单位U/g
注表4中蛋白酶活性系酸性蛋白酶和中性蛋白酶活性之和。
本实施例所使用的内切阿拉伯木聚糖酶(EC 3.2.1.8)是由Trichoderma longibrachiatum经液体深层发酵，分离、提纯、浓缩、干燥后制成的饲料专用单酶制品。为了更有效地应用该木聚糖酶，现分别对其pH稳定性、热稳定性、底物浓度等酶学性质进行研究。
首先制备待测内切阿拉伯木聚糖酶溶液，然后进行下列测试并记录测试结果、绘制图表。
首先测试并记录该单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表，所得图表见附图2。经测试，温度对酶反应速度有很大的影响，并且每种酶都有自己的最适温度。因此，在不同温度(20℃、30℃、40℃、50℃、55℃、60℃、70℃、80℃和90℃)其它条件相同的情况下(pH5.3、底物浓度1％)，测定木聚糖酶的活性。
由图2看到木聚糖酶在不同的反应温度下测定的酶活，其活性变化较大，40℃时酶活大于82％，在30℃时酶活仍然大于55％，反应温度在高于60℃后，酶活急剧下降，在60℃到70℃之间酶活从94％下降到60％，这说明，木聚糖酶的活性对反应温度的变化有些敏感。因此，此产品提供的酶活的最适范围温度在40～60℃间，最佳反应温度为55℃，本试验的测定结果基本反应了此产品的的酶活随温度变化的特性。
在实际应用中，由于动物胃肠道内的温度在38～40℃间，从结果来看，此时木聚糖酶活性在80％左右。一方面，虽然动物胃肠道内酶的作用效果可因酶的作用时间较长从而可弥补酶活低的不足，另一方面，可以通过适当提高木聚糖酶在饲料中的添加量来解决这一问题。
再来测试pH对木聚糖酶活性的影响pH也对酶反应速度有很大影响。分别将底物和对应的缓冲稀释液的pH调整到3.0、4.0、5.0、5.3、6.0、6.5、7.0、8.0和9.0，然后在其它条件相同的情况下(温度55℃、底物浓度1％)分别测其酶活，所得图表见附图3。
由图3看出，木聚糖酶在pH＝4～6之间保持较高的活性，平均90％以上，在之外的范围酶活急剧下降，pH＝4的时候，酶活接近80％，但pH＝3时酶活仅为15％，在pH＝6.5时，酶活为55％，在pH＝7时，酶活为23％左右，当pH＝9时，基本上检不出酶的活性。
此酶的酶活最适的pH范围在4～6之间，最佳反应pH的为5.3，本试验的测定结果反应了此酶的酶活随pH变化的特性，说明此酶在偏酸性的条件下有较好的表现。在实际应用中，由于动物胃肠道内的pH偏酸性，所以此木聚糖酶在动物胃肠道内的条件下能够发挥较好的作用。
第三步测试底物浓度对木聚糖酶活性的影响将木聚糖底物分别配制成0.2％、0.4％、0.6％、0.8％和1.0％五个浓度，在保证底物过饱和其它条件相同的情况下(温度55℃、pH5.3)，加入相应量的酶稀释液测定酶活，所得图表见附图4。
由图4可以看出，木聚糖酶的活性随底物浓度的提高活性逐渐增强，在底物浓度达到0.6％(相当于最高活性时底物浓度的60％)时，木聚糖酶的活性基本稳定，并接近了酶活的最高值。这说明，木聚糖酶实际应用中，底物浓度较低时就有可能发挥出最高的活性。
第四步测试经不同温度加工处理后酶活存留情况将固体木聚糖酶在从55℃～100℃(水分含量≤8％)，每间隔5℃的条件下分别处理5分钟，然后测定(pH5.3、温度55℃、底物浓度1％)其酶活，所得图表见附图5。
由图5可以看到，木聚糖酶在干燥的状态下经过累积温度处理后，在不同温度下的酶活表现是先升高后下降，在70℃以前木聚糖酶的活性基本没有损失，70℃以后酶活开始损失，到85℃时酶活存留大于88％，100℃时酶活存留在75％左右。酶活在60-70℃间有升高的现象待进一步验证。
第五步测试其它酶制剂相互混合后对木聚糖酶的影响将木聚糖酶(X1222)分别与蛋白酶(P1222)和淀粉酶(A1222)按表1体积比混合后，常温下放置一个月后测定(pH5.3、温度55℃、底物浓度1％)其中木聚糖酶活性，结果表明蛋白酶和淀粉酶对木聚糖酶的活性并无影响。测试木聚糖酶在贮存期间酶活存留情况将固体木聚糖酶产品(水分含量≤8％)常温下保存，然后每隔两个月取样测定(pH5.3、温度55℃、底物浓度1％)其酶活，结果如图6。
由图6可看出，木聚糖酶在一年内酶活下降不到15％，尤其在前4个月内，酶活下降缓慢不到7.0％，随着时间的延长，酶活会逐渐下降，但速度较平缓。
表1其它酶制剂与木聚糖酶混合后木聚糖酶活性表
注1、表中X1222为固体木聚糖酶，P1222为固体蛋白酶，A1222为固体淀粉酶。2、水分含量小于8％。
第六步测试加工工艺对木聚糖酶活性的影响按照设计标准将1.0公斤活性为25,000U/g的木聚糖酶按1kg/吨的添加量加入小猪饲料后制粒，制粒的条件及温度(75℃左右)与商业饲料厂一致，在不同生产阶段(混合后、调制后、制粒后及打包口)分别取样并测定(pH5.3、温度55℃、底物浓度1％)木聚糖酶的活性，其测试结果见图7。
该木聚糖酶与饲料原料混合后其活性与设计标准相比有明显的下降，只有45％的活性保留下来，但此时并没有经过高温及压力的处理，说明此木聚糖酶与饲料混合后有55％的活性是在实验室的条件下不能检出的。经过高温(75℃左右)调制后，与设计标准相比，此木聚糖酶在饲料中的活性保留率只有37％左右，下降幅度较大，但与混合后相比，此木聚糖酶的活性保留率为82％(45.2对37.2％)，下降幅度仅为18％左右，说明高温(75℃左右)调制对此木聚糖酶的影响不大。制粒过程是高温及压力的结合，此过程对一般的木聚糖酶的活性影响巨大，但此木聚糖酶经过高温及高压的制粒过程后，与调制后相比，酶活的保留率仅下降了12％左右(37.2对32.8％)，与混合后相比，酶活在饲料中的保留率也只下降了27％左右(45.2对32.8％)。打包口的酶活保留率与制粒后的保留率基本一致(32.8对33.5％)。
采用图表对比法进行对比图2～图7分析，说明本实验饲料加工过程中的高温及高压的制粒过程对该木聚糖酶的影响是有限的，整个调制、制粒过程对此木聚糖酶酶活保留率的影响不大于26％(45.2对33.5％)，但此木聚糖酶与饲料原料混合的过程会影响在实验室用现有的方法测定酶活保留率(100对45.2％)，影响酶活测定的原因有诸多，如金属离子的干扰、酶与底物的作用、测定方法的灵敏度等因素。
最后分别对图2～图7进行两两或多幅对比分析阿拉伯木聚糖酶的综合特性；本发明实施例1所使用的内切阿拉伯木聚糖酶(EC 3.2.1.8)的酶学特性具有以下特点(1)酶活反应的最适温度在40～60℃间，最佳温度为55℃，在实际应用中，由于动物胃肠道内的温度在38～40℃间，从结果来看，此时木聚糖酶活性在80％左右；(2)pH在4～6之间，酶活平均在90％以上，最佳反应pH为5.3，在实际应用中，由于动物胃肠道内的pH偏酸性，所以此酶在动物胃肠道内能够发挥较好的作用；(3)酶的活性在底物浓度达到0.6％时活性已基本稳定，并接近最高值，说明此酶在底物浓度较低时就可能发挥出最高的活性；(4)此酶在干燥的状态下经过累积温度处理后，在70℃以前活性没有损失，到85℃时酶活存留大于88％，100℃时酶活存留在75％左右；(5)此木聚糖酶与蛋白酶和淀粉酶按比例混合后储存，测其样品中的木聚糖酶活性，结果表明蛋白酶和淀粉酶对木聚糖酶的活性没有影响；(6)在室温条件下储存半年，其酶活比较稳定，但随着时间的延长，酶活会逐渐下降，酶活平均月下降率为7.3％；(7)此木聚糖酶与饲料原料混合后其活性有明显的下降(100对45.2％)，但饲料加工过程中的制粒过程对该酶酶活的影响有限(45.2对33.5％)，说明此木聚糖酶具有耐高温抗高压，并能在体温下良好发挥作用等特点。影响酶活测定的原因有诸多，如金属离子的干扰、酶与底物的作用、测定方法的灵敏度等因素。
再提供本实施例中采用的中性蛋白酶的加工特性的测试方法。
首先测试温度对中性蛋白酶活性的影响分别在30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、60℃、70℃和80℃，而其它条件相同(pH7.5、底物浓度1％)的情况下测中性蛋白酶的酶活，结果作图如图8所示。
由图8看出，中性蛋白酶的随反应温度的变化其酶活变化较大，反应温度在40℃左右时，酶活表现最好，反应温度在35～45℃之间酶活表现达到了90％左右，反应温度超过50℃后，其酶活呈现直线下降趋势，且下降幅度较大。这说明，此中性蛋白酶的最适反应温度在35～45℃之间，且反应活性对反应温度的变化较为敏感。
其次测试pH对中性蛋白酶活性的影响分别配制pH3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、7.5、8.0和9.0的底物及相应的缓冲液，在其它条件相同(温度40℃、底物浓度1％)的情况下分别测定中性蛋白酶的活性，其结果如图9所示。
由图9看出，中性蛋白酶的活性在pH＝5～8间较好，pH＝6～7.5间最好。pH≤4时，中性蛋白酶活下降较快，pH≤3时已检测不出酶的活性。因此，此中性蛋白酶的最适pH为6～7.5。
第三步测试底物浓度对蛋白酶活性的影响将底物酪素分别配制成0.2％、0.4％、0.6％、0.8％和1.0％五个浓度，在保证底物过饱和并且其它条件相同的情况下(pH7.5、温度40℃)，加入酶稀释液测定酶活；测试结果如图10所示。
由图10看出，蛋白酶的活性随着底物浓度的升高逐渐增强，在底物浓度为0.4％时活性就已达到了最高活性的80％，0.6％时就基本接近了最高活性，这说明蛋白酶对底物的浓度比较敏感，在较低的浓度下就可以表现现较高的活性。
第四步测试经不同温度处理后中性蛋白酶活存留情况将固体蛋白酶(水分含量≤8％)从55℃～100℃，每间隔5℃的条件下分别处理5分钟后，测定(pH7.5、温度40℃、底物浓度1％)其酶活，结果如图11所示。
由图11可以看到，中性蛋白酶分别经过55℃到90℃处理后，酶活均处于较稳定状态，平均酶活在90％以上，90℃以后才急剧下降，酶活降到20％左右。
第五步测试中性蛋白酶在贮存期间酶活存留情况将固体中性蛋白酶产品(水分含量≤8％)常温下保存，然后每隔两个月取样测定(pH7.5、温度40℃、底物浓度1％)其酶活，结果如图12所示，中性蛋白酶产品在贮存的前6个月内酶活下降非常少，不到5％；随着时间延长酶活会逐渐降低，一年左右酶活下降约10％。说明此中性蛋白酶在常温下非常稳定。
第六步测试加工工艺对中性蛋白酶活性的影响按照设计标准，将2.5千克活性为40，000U/g的中性蛋白酶按2.5kg/吨的添加量加入小猪饲料后制粒，制粒的条件及温度(75℃左右)与商业饲料厂一致，在不同生产阶段(混合后、调制后、制粒后及打包口)分别取样并测定(pH7.5、温度40℃、底物浓度1％)中性蛋白酶的活性，其结果见图13。
与前述木聚糖酶有相似的结果，采用图表对比法对比图8与图13，此中性蛋白酶与饲料原料混合后其活性与设计标准相比有明显的下降(100对65％)，在实验室的条件下，此中性蛋白酶只有65％的活性能测定，即在没有经过高温及压力处理的情况下，45％的酶活已测不到，说明混合过程会影响酶活的测定，影响酶活测定的原因有很多，未来应注重这方面的研究。经过高温调制后，与设计标准相比，此中性蛋白酶在饲料中的活性保留率只有47％左右，下降幅度较大，但与混合后相比，此中性蛋白酶的活性保留率为68％(65对47％)，下降幅度为30％左右，说明高温调制对此中性蛋白酶的一定的影响，但不大。此中性蛋白酶经过高温及高压的制粒过程后，与调制后相比，酶活的保留率仅下降了19％左右(47对38％)，与混合后相比，酶活在饲料中的保留率也只下降了41％左右(65对38％)。打包口的酶活保留率与制粒后的保留率都为38％。
本实验说明饲料加工过程中的高温及高压的制粒过程对该中性蛋白酶的影响是有限的，整个调制、制粒过程对此中性蛋白酶活保留率的影响在40％左右，但此中性蛋白酶与饲料原料混合的过程会影响酶活保留率。
最后分别对图8～图13进行两两或多幅对比分析中性蛋白酶酶学特性，可以得到如下总结本实施例使用的内切中性蛋白酶(EC 3.4.21.62)的酶学特性具有以下特点(1)此酶酶活随反应温度的变化而变化，在40℃时，酶活表现最好，在35-45℃间酶活表现可达90％左右，说明此酶在动物胃肠道内的温度下能表现良好；(2)中性蛋白酶的活性在pH＝5～8间较好，pH＝6～7.5间最好。pH≤4时，中性蛋白酶活下降较快，此酶在偏酸性由于动物胃肠道内能够发挥较好的作用；(3)此酶在底物浓度为0.4％时即可达到最高活性的80％，0.6％时接近最高活性，说明此酶对底物的浓度比较敏感，在较低的浓度下可以表现较高的活性；(4)中性蛋白酶在干燥的状态下分别经过55℃到90℃处理后，平均酶活在90％以上，90℃以后急剧下降，90℃时酶活降底到20％左右；(5)中性蛋白酶在常温下贮存非常稳定，前3个月酶活下降不到5％；半年后酶活的保存率仍大于65％；(6)与木聚糖酶的结果相似，此酶与饲料混合后其活性有明显的下降(100对65％)，即在没有经过高温及压力处理的情况下，35％的酶活已测不到，说明混合过程会影响酶活的测定。经过高温调制后，与混合后相比，此酶的活性保留率为72％(65对47％)，经过高温高压制粒后，酶活在饲料中的保留率在60％左右(65对38％)。高温高压的制粒加工过程对该酶酶活的影响有限，说明此酶具有耐高温抗高压，并能在体温下良好发挥作用等特点。
综上所述，内切阿拉伯木聚糖酶和内切中性蛋白酶具有活性高，抗逆性强，底物专一性等特点，是符合饲料专用单酶要求的制品。
对本实施例中α-淀粉酶及其他单酶的测定，及对木聚糖酶、α-淀粉酶、蛋白酶等组配后的加工特性的测定，与对木聚糖酶单酶的测定方法相似。
实施例2提供一种畜(猪等)用系列复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其基本步骤与实施例1相同，其不同之处在于，其底物的选择如表3所示，其选择的适合加工的单酶制剂、组配结果为蛋白酶、α-淀粉酶、木聚糖酶及β-葡聚糖酶，如表4所示。
表3产品名称、产品代号、适用动物及生长阶段
表4猪用系列酶制剂产品酶活性指标单位U/g
注表5中蛋白酶活性系酸性蛋白酶和中性蛋白酶活性之和。
实施例3供一种水产(鱼、虾等)系列复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其基本步骤与实施例1及2相同，其不同之处在于，其底物的选择如表5所示，其选择的适合加工的单酶制剂、组配结果为蛋白酶、α-淀粉酶、木聚糖酶及β-葡聚糖酶，如表6所示。
表5产品名称、产品代号、适用动物及生长阶段
表6水产类饲用酶制剂系列产品酶活性指标单位U/g
注表2中蛋白酶活性系酸性蛋白酶和中性蛋白酶活性之和如本发明上述实施例所述的相同或近似方法，而的得到的其他复合酶制剂酶加工特性的测定方法，及采用本发明相同或近似方法的直接启示所得到其他复合酶制剂酶加工特性的测定方法，均在本发明保护范围之内。
权利要求
1.一种饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其特征在于，其包括如下步骤1)测试拟组成复合酶的各单酶制剂的特性，并根据测试结果绘制图表；2)将拟组成复合酶的各单酶制剂中的两种或多种进行分组后混合，测试该组配后该各单酶活性、能量及蛋白价值的变化，根据测试结果绘制图表；3)比较步骤1)及2)的结果，选择相对特性数值变化较小的组配，将其加入到不同底物中测试，并根据测试结果绘制图表；4)变换底物的浓度，并根据测试结果绘制图表；5)采用图表对比法比较步骤1)～4)的测试结果，选择适合加工的单酶制剂、组配及其浓度。
2.如权利要求1所述的饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其特征在于，所述的步骤1)，还包括如下步骤11)制备单酶溶液；12)测试并记录单酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；13)测试并记录单酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；14)测试并记录底物浓度变化对单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；15)测试并记录加工工艺对单酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；所述步骤12)～15)的顺序不分先后。
3.如权利要求1或2所述的饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其特征在于，所述的步骤2)，还包括如下步骤21)测试并记录该组配酶溶液的热稳定性，根据测试结果绘制图表；22)测试并记录该组配酶溶液的PH稳定性，根据测试结果绘制图表；23)测试并记录底物浓度变化对该组配酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；24)测试并记录加工工艺对该组配酶活性的影响，根据测试结果绘制图表；所述步骤21)～24)的顺序不分先后。
全文摘要
本发明公开了一种饲用复合酶制剂酶加工特性的测定方法，其包括如下步骤1)测试拟组成复合酶的各单酶制剂的特性，并根据测试结果绘制图表；2)将拟组成复合酶的各单酶制剂中的两种或多种进行分组后混合，测试该组配后该各单酶活性、能量及蛋白价值的变化，根据测试结果绘制图表；3)比较步骤1)及2)的结果，选择相对特性数值变化较小的组配，将其加入到不同底物中测试，并根据测试结果绘制图表；4)变换底物的浓度，并根据测试结果绘制图表；5)采用图表对比法比较步骤1)～4)的测试结果，选择适合加工的单酶制剂、组配及其浓度。本发明主要用来优化筛选复合酶制剂，为畜禽、鱼虾等饲料用复合酶制剂配方及其生产提供科学有效的依据。
文档编号C12Q1/25GK1974787SQ200610123888
公开日2007年6月6日 申请日期2006年12月1日 优先权日2006年12月1日
发明者于锋, 段红伟 申请人:东莞泛亚太生物科技有限公司