专利名称：：食品中大肠菌群的快速检测方法
技术领域：
：本发明涉及菌群的检测，特别涉及一种食品中大肠菌群的检测方法。
背景技术：
：在食品行业，大肠菌群的含量是一项重要的卫生指标。目前传统国家标准方法(GB)采用9管发酵，48-72小时才可以出结果，存在滞后现象，检测效率低。改进后的方法如荧光方法(SN)、显色培养基方法、膜过滤方法，这几种方法需要24-48小时可以出结果，仍不能达到快速检测的目的。另外，免疫学方法，虽然8小时可以出结果，但检出限有限，同时检测成本高，一旦菌体发生变异，检测结果就不准确；分子生物学方法，虽然12小时可以出结果，明显提高了检测灵敏度，但是该方法检测成本较贵、操作繁杂、对操作员的技术要求高，不利于推广。因此，开发适宜生产需要、操作简单的快速大肠菌群检测方法十分必要。在所有方法中利用半乳糖苷酶作为标记物检测大肠菌具有较好的应用潜力。可以保证建立的快速检测方法具有操作简单、低成本等优点，同时该方法也存在很大的挑战，如何达到国家标准方法的检出限，如何降低检出所消耗的时间，提高检出速率等。
发明内容本发明的目的在于，提供一种食品中大肠菌群的快速检测方法，利用β-半乳糖苷酶作为标记物检测调味品中的大肠菌群，能以较高的检出速率达到国家标准方法的检出限。为解决以上技术问题，本发明的技术方案是，一种食品中大肠菌群的快速检测方法，包括如下步骤1)对样品进行菌体分离富集，去除干扰物；2)将分离的菌体悬浮于增菌增酶培养液中，在39°C42°C下恒温培养67小时；3)在培养后的菌体悬液中加入包含发光试剂底物、大肠菌群温和裂解液的发光检测试剂进行发光值检测，根据发光值判断大肠菌群数量；所述增菌增酶培养液包括以体积比1001混合的组分A、组分B，组分A为每IOOOml蒸馏水中含有胰蛋白胨0.52g，氯化钠25g，磷酸二氢钾68g，氢氧化钠12g，组分B为每IOOmL蒸馏水中含有β-半乳糖苷酶诱导物0.050.2g，亚致死细菌快速修复物36g，细菌快速增长剂25g。本技术方案中，通过步骤1)对样品进行前处理，使样品中的菌体分离富集，去除影响检测的干扰物；通过步骤2)，对分离得到的菌体进行增菌增酶培养因此又加入一能有效诱导β“半乳糖苷酶表达的物质，使菌体快速增殖的同时，半乳糖苷酶也得到高效表达，从而提高检测速率。其中，所述β-半乳糖苷酶诱导物为乳糖、异丙基硫代半乳糖苷或者半乳糖中的任一种。其中，所述亚致死细菌快速修复物为甘油、葡萄糖、丙酮酸钠、抗坏血酸、维生素E中的任一种或多种。其中，所述细菌快速增长剂为三磷酸腺苷、肌酐，肌苷或者牛血清提取物中的任一种或多种。其中，组分A中还包括自由基清除剂Ig3g、十二烷基磺酸钠0.03g0.06g。其中，所述自由基清除剂为活性炭、可溶性淀粉、半胱氨酸、二苯胺、巯基乙醇或α-生育酚中的任一种。其中，所述发光检测试剂包括发光试剂底物、发光增强剂、大肠菌温和裂解液。其中，所述大肠菌温和裂解液为细胞膜破坏试剂，所述细胞膜破坏剂为EDTA、Nisin、Tween-80、硫酸粘菌素B、曲拉通、CATB中的任一种。其中，所述发光试剂底物为AMPGD、铕试剂、荧光素-β-半乳糖苷中的任一种。其中，所述发光增强剂为季铵盐高聚物。其中，步骤1)中，所述菌体分离富集为将样品利用无菌生理盐水稀释540倍，用真空过滤法滤过30μm聚丙烯滤膜，取滤后液过0.2-0.45μm混合醋酸纤维素滤膜，再利用2050ml无菌生理盐水洗涤2-3次，菌体截留在混合醋酸纤维素滤膜上。其中，组分A在121°C下灭菌15分钟后再与组分B混合。其中，步骤3)中的发光值检测为将50μ1100μ1的增菌增酶培养后的菌体悬液与50100μ1发光检测试剂反应1050分钟，利用发光光度计于530nm590nm处检测发光值，将检样发光值与阴性对照样发光值比对。本发明的食品中大肠菌群的快速检测方法具有如下优点本发明通过对样品进行菌体分离富集，去除干扰菌体生理状态、影响半乳糖苷酶与检测用酶底物反应的物质；通过高效增菌增酶培养液对菌体悬液在适当的培养条件下进行培育，使快速增菌的同时增加半乳糖苷酶的量；通过添加大肠菌群温和裂解液使半乳糖苷酶(胞内酶)释放到培养液中，提高酶的得率和活力，从而提高检出速率。本发明的检测方法检测速度快，8小时内即可准确检出大肠菌群存在与否，远快于国家标准方法(48-72小时)，而且检测成本低廉，检测成本为3元/样品。图1是本发明食品中大肠菌群的快速检测方法的流程图。具体实施例方式本发明的基本构思是，利用半乳糖苷酶作为标记物对调味品中的大肠菌群进行检测，对待侧样品先利用菌体分离富集技术收集菌体，去除干扰菌体生理状态、影响β“半乳糖苷酶与检测用酶底物反应的物质；以高效增菌增酶培养液对分离后的菌体进行培养，使菌体在快速增菌的同时增加β“半乳糖苷酶的量，提高检出速率和提高灵敏度。参见图1，图1是本发明食品中大肠菌群的快速检测方法的流程图。本发明的食品中大肠菌群分离富集方法包括如下步骤Si、对样品进行菌体分离富集；此步骤中，利用菌体分离富集技术对样品进行菌体分离富集，使菌体从样品中分离出来，去除干扰菌体生理状态、影响β-半乳糖苷酶与检测用酶底物反应的物质。S2、对分离后的菌体以增菌增酶培养液进行修复、增菌增酶培养；在此步骤中，以增菌增酶培养液对分离富集得到的菌体进行培育，使菌体在快速增菌的同时增加半乳糖苷酶的量，具体步骤为将截留细菌的膜用无菌镊子夹取，放入装有增菌增酶培养液的试管中，在39-42°C的恒温培养箱中培养6-7小时。其中，增菌增酶培养液组成与制备过程如下培养液组分A胰蛋白胨0.5g，氯化钠2g，自由基清除剂lg，十二烷基磺酸钠0.03g，磷酸二氢钾6g，氢氧化钠lg，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，在121°C下灭菌15分钟，室温保存供使用。培养液组分Bβ_半乳糖苷酶诱导物0.05g，亚致死细菌快速修复物3g，细菌快速增长剂2g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取100μ1到IOml培养液组分A中。S3、对培育后的菌体加入发光检测试剂进行发光值检测；在此步骤中，对培育后的菌体进行发光值检测。具体步骤为取培养完毕的菌悬液，置于发光检测仪的检测孔中，加入发光检测试剂反应一段时间，而后在振荡器上摇勻振荡，进行发光检测，测定样品的发光值。利用已知大肠菌群阴性样的发光值，计算6h检样发光值与阴性对照样发光值的比值Tl，当比值Tl少于或等于1.2(阀值A)时，判断为大肠菌群阴性，当比值Tl大于1.2时，需进行培养7小时检测，计算7h检样发光值与阴性对照样发光值的比值T2，若T2与Tl的比值K少于或等于1.1(阀值B)，则判断为大肠菌群阴性，若T2与Tl的比值K大于1.1，则判断为大肠菌群阳性，并与国标法进行比对。其中阀值A、B的理论值应为1，但检测过程中发光值会有轻微的波动，故将阀值设为略高于1。其中阀值A为1.2、阀值B为1.1，是由大量检测数据经统计学分析得出。下面，以具体实施例对本发明的食品中大肠菌群的快速检测方法进行说明。实施例一1、菌体分离富集用电子天平移取IOg黄豆酱样品(样品代号为1)到含有灭菌玻璃珠的90ml无菌生理盐水中，振荡摇勻，取该样品稀释液IOml过30μm聚丙烯滤膜，去除大颗粒酱渣，滤后液过0.25μm混合醋酸纤维素滤膜，用无菌生理盐水对截留在膜上的菌体反复冲洗三次，去除干扰菌体生理状态、影响β“半乳糖苷酶活性及检测反应体系的物质。2、以增菌增酶培养液对菌体进行增菌增酶培养将截留细菌的膜用无菌镊子夹取，放入装有IOml增菌增酶培养液的试管中，在40°C的恒温培养箱中培养67小时。其中，增菌增酶培养液组成与制备过程如下培养液组分A胰蛋白胨lg，氯化钠3g，可溶性淀粉lg，十二烷基磺酸钠0.05g，磷酸二氢钾7g，氢氧化钠lg，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，在121°C下灭菌15分钟，室温保存供使用。培养液组分B异丙基硫代半乳糖苷0.05g,甘油3g，三磷酸腺苷2g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取100μ1到IOml培养液组分A中。3、检测过程取孵育完毕的菌悬液100μ1，置于发光检测仪96孔板中相应检测孔中，加入50μ1发光检测试剂反应20分钟，在振荡器上摇勻振荡1分钟后，进行发光检测，发光检测的波长为560nm，检测积分时间为0.5秒，测定样品的发光值，6h检样发光值为2508。其中发光检测试剂包括AMP⑶、聚合度为4000的季铵盐高聚物和EDTA混合试剂，AMP⑶作为发光试剂底物，聚合度为4000的季铵盐高聚物作为发光增强剂，EDTA作为大肠菌温和裂解液。已知大肠菌群阴性样的发光值为2745，计算得出6h检样发光值与阴性对照样发光值的比值Tl为0.91，Tl少于1.2(阀值A)，因此，可判断为大肠菌群阴性，与国标法进行比对，检测结果正确。检测结果参见表1。实施例二1、菌体分离富集用电子天平移取IOg蚝油样品(样品代号为2)到含有灭菌玻璃珠的90ml无菌生理盐水中，振荡摇勻，取该样品稀释液IOml过30μm聚丙烯滤膜，滤后液过0.25μm混合醋酸纤维素滤膜，用无菌生理盐水对截留在膜上的菌体反复冲洗二次。2、以增菌增酶培养液对菌体进行增菌增酶培养将截留细菌的膜用无菌镊子夹取，放入装有IOml增菌增酶培养液的试管中，在40°C的恒温培养箱中培养67小时。其中，增菌增酶培养液组成与制备过程如下培养液组分A胰蛋白胨1.5g，氯化钠2g，二苯胺3g，十二烷基磺酸钠0.04g，磷酸二氢钾8g，氢氧化钠lg，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，在121°C下灭菌15分钟，室温保存供使用。培养液组分B半乳糖0.lg，丙酮酸钠4g，肌酐3g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取100μ1到IOml培养液组分A中。3、检测过程取孵育完毕的菌悬液50μ1，置于发光检测仪96孔板中相应检测孔中，加入50μ1发光检测试剂反应20分钟，在振荡器上摇勻振荡1分钟后，进行发光检测，发光检测的波长为550nm，检测积分时间为0.5秒，测定样品的发光值，6h检样发光值为3330。其中发光检测试剂包括铕试剂、Msin、聚合度为8000的季铵盐高聚物，铕试剂作为发光试剂底物、Msin作为大肠菌温和裂解液、聚合度为8000的季铵盐高聚物作为发光增强剂。已知大肠菌群阴性样的发光值为2745，计算得出6h检样发光值与阴性对照样发光值的比值Tl为1.21，Tl大于1.2(阀值A)，需进行培养7小时检测，7h检样发光值为3480，计算得出7h检样发光值与阴性对照样发光值的比值T2为1.20，T2与Tl的比值K为0.99，少于1.1(阀值B)，因此，可判断为大肠菌群阴性，与国标法进行比对，检测结果正确。检测结果参见表1。实施例三1、菌体分离富集用电子天平移取IOg蚝油样品(样品代号为3)到含有灭菌玻璃珠的90ml无菌生理盐水中，振荡摇勻，取该样品稀释液IOml过30μm聚丙烯滤膜，滤后液过0.4μm混合醋酸纤维素滤膜，用无菌生理盐水对截留在膜上的菌体反复冲洗二次。2、以增菌增酶培养液对菌体进行增菌增酶培养将截留细菌的膜用无菌镊子夹取，放入装有IOml增菌增酶培养液的试管中，在42°C的恒温培养箱中培养67小时。其中，增菌增酶培养液组成与制备过程如下培养液组分A胰蛋白胨0.5g，氯化钠2g，活性炭3g，十二烷基磺酸钠0.045g,磷酸二氢钾6g，氢氧化钠1.5g，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用；培养液组分B乳糖0.15g，抗坏血酸4g，肌酐3g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取100μ1到IOml组分A培养液中。3、检测过程取孵育完毕的菌悬液80μ1，置于发光检测仪96孔板中相应检测孔中，加入包含80μ1铕试剂、聚合度为9000的季铵盐高聚物和Tween-80的发光检测试剂反应40分钟，在振荡器上摇勻振荡1分钟后，进行发光检测，发光检测的波长为570nm，检测积分时间为0.5秒，测定样品的发光值，6h检样发光值为6884。已知大肠菌群阴性样的发光值为2745，计算得出6h检样发光值与阴性对照样发光值的比值Tl为2.51，Tl大于1.2(阀值A)，需进行培养7小时检测，7h检样发光值为11454，计算得出7h检样发光值与阴性对照样发光值的比值T2为3.94，T2与Tl的比值K为1.57，大于1.1(阀值B)，因此，可判断为大肠菌群阳性，与国标法进行比对，检测结果正确。检测结果参见表1。实施例四1、菌体分离富集用电子天平移取IOg蚝油样品(样品代号为4)到含有灭菌玻璃珠的90ml无菌生理盐水中，振荡摇勻，取该样品稀释液IOml过30μm聚丙烯滤膜，滤后液过0.35μm混合醋酸纤维素滤膜，用无菌生理盐水对截留在膜上的菌体反复冲洗二次。2、以增菌增酶培养液对菌体进行增菌增酶培养将截留细菌的膜用无菌镊子夹取，放入装有IOml增菌增酶培养液的试管中，在42°C的恒温培养箱中培养67小时。其中，增菌增酶培养液组成与制备过程如下培养液组分A胰蛋白胨2g，氯化钠2g，半胱氨酸3g，十二烷基磺酸钠0.06g,磷酸二氢钾7g，氢氧化钠2g，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用；培养液组分B乳糖0.15g，维生素E5g，牛血清3g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取100μ1到IOml组分A培养液中。3、检测过程取孵育完毕的菌悬液70μ1，置于发光检测仪96孔板中相应检测孔中，加入100μ1包含荧光素_β_半乳糖苷、聚合度为10000的季铵盐高聚物和硫酸粘菌素B的发光检测试剂反应50分钟，在振荡器上摇勻振荡1分钟后，发光检测的波长为580nm，检测积分时间为0.5秒，测定样品的发光值，6h检样发光值为4255。已知大肠菌群阴性样的发光值为2745，计算得出6h检样发光值与阴性对照样发光值的比值Tl为1.55，Tl大于1.2(阀值A)，需进行培养7小时检测，7h检样发光值为5243，计算得出7h检样发光值与阴性对照样发光值的比值T2为1.80，T2与Tl的比值K为1.16，大于1.1(阀值B)，因此，可判断为大肠菌群阳性，与国标法进行比对，检测结果正确。检测结果参见表1。实施例五1、菌体分离富集用电子天平移取IOg蚝油样品(样品代号为5)到含有灭菌玻璃珠的90ml无菌生理盐水中，振荡摇勻，取该样品稀释液IOml过30μm聚丙烯滤膜，滤后液过0.3μm混合醋酸纤维素滤膜，用无菌生理盐水对截留在膜上的菌体反复冲洗三次。2、以增菌增酶培养液对菌体进行增菌增酶培养将截留细菌的膜用无菌镊子夹取，放入装有IOml增菌增酶培养液的试管中，在40°C的恒温培养箱中培养67小时。其中，增菌增酶培养液组成与制备过程如下培养液组分A胰蛋白胨0.Sg,氯化钠4g，α-生育酚2g，十二烷基磺酸钠0.06g,磷酸二氢钾6g，氢氧化钠lg，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用；培养液组分B异丙基硫代半乳糖苷0.2g，葡萄糖4g，三磷酸腺苷4g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取100μ1到IOml组分A培养液中。3、检测过程取孵育完毕的菌悬液80μ1，置于发光检测仪96孔板中相应检测孔中，加入100μ1包含铕试剂、聚合度为12000的季铵盐高聚物和曲拉通的发光检测试剂反应45分钟，在振荡器上摇勻振荡1分钟后，发光检测的波长为590nm，检测积分时间为0.5秒，测定样品的发光值，6h检样发光值为2526。已知大肠菌群阴性样的发光值为2745，计算得出6h检样发光值与阴性对照样发光值的比值Tl为0.92，Tl小于1.2(阀值A)，因此，可判断为大肠菌群阴性，与国标法进行比对，检测结果正确。检测结果参见表1。实施例六1、菌体分离富集用电子天平移取IOg蚝油样品(样品代号为6)到含有灭菌玻璃珠的90ml无菌生理盐水中，振荡摇勻，取该样品稀释液IOml过30μm聚丙烯滤膜，滤后液过0.45μm混合醋酸纤维素滤膜，用无菌生理盐水对截留在膜上的菌体反复冲洗二次。2、以增菌增酶培养液对菌体进行增菌增酶培养将截留细菌的膜用无菌镊子夹取，放入装有IOml增菌增酶培养液的试管中，在42°C的恒温培养箱中培养67小时。其中，增菌增酶培养液组成与制备过程如下培养液组分A胰蛋白胨1.8g，氯化钠2g，巯基乙醇2g，十二烷基磺酸钠0.08g，磷酸二氢钾7g，氢氧化钠1.5g，溶解于IOOOml蒸馏水，取IOml分装到试管中，121°C灭菌15分钟，室温保存供使用；培养液组分B乳糖0.2g，丙酮酸钠6g，肌苷5g，溶于IOOmL蒸馏水，过滤除菌，取100μ1到IOml组分A培养液中。3、检测过程取孵育完毕的菌悬液90μ1，置于发光检测仪96孔板中相应检测孔中，加入100μ1包含荧光素-β-半乳糖苷、聚合度为11000的季铵盐高聚物和CATB的发光检测试剂反应25分钟，在振荡器上摇勻振荡1分钟后，发光检测的波长为590nm，检测积分时间为0.5秒，测定样品的发光值，6h检样发光值为15201。已知大肠菌群阴性样的发光值为2745，计算得出6h检样发光值与阴性对照样发光值的比值Tl为5.54，Tl大于1.2(阀值A)，需进行培养7小时检测，7h检样发光值为28201，计算得出7h检样发光值与阴性对照样发光值的比值T2为9.70，T2与Tl的比值K为1.75，大于1.1(阀值B)，因此，可判断为大肠菌群阳性，与国标法进行比对，检测结果正确。检测结果参见表1。表1实施例一实施例六的大肠菌群检测结果与国标法检测结果对照表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注表1中，结果1代表本发明方法实施例一到实施例六的检测结果；结果2代表采用国家标准检测法对实施例一到六的样品进行检测的结果。从以上实施例可以得出，本发明的检测方法，检测结果准确，检测速度快。以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。权利要求一种食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，包括如下步骤1)对样品进行菌体分离富集，去除干扰物；2)将分离的菌体悬浮于增菌增酶培养液中，在39℃～42℃下恒温培养6～7小时；3)在培养后的菌体悬液中加入发光检测试剂进行发光值检测，根据发光值判断大肠菌群数量；所述增菌增酶培养液包括以体积比100∶1混合的组分A、组分B，组分A为每1000ml蒸馏水中含有胰蛋白胨0.5～2g，氯化钠2～5g，磷酸二氢钾6～8g，氢氧化钠1～2g，组分B为每100mL蒸馏水中含有β-半乳糖苷酶诱导物0.05～0.2g，亚致死细菌快速修复物3～6g，细菌快速增长剂2～5g。2.如权利要求1的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，所述半乳糖苷酶诱导物为乳糖、异丙基硫代半乳糖苷或者半乳糖中的任一种。3.如权利要求1的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，所述亚致死细菌快速修复物为甘油、葡萄糖、丙酮酸钠、抗坏血酸、维生素E中的任一种或多种。4.如权利要求1的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，所述细菌快速增长剂为三磷酸腺苷、肌酐，肌苷或者牛血清提取物中的任一种或多种。5.如权利要求1的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，组分A中每1000ml蒸馏水中还含有自由基清除剂lg3g、十二烷基磺酸钠0.03g0.06g。6.如权利要求5的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，所述自由基清除剂为活性炭、可溶性淀粉、半胱氨酸、二苯胺、巯基乙醇或a“生育酚中的任一种。7.如权利要求1的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，所述发光检测试剂包括发光试剂底物、发光增强剂、大肠菌温和裂解液。8.如权利要求7的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，所述大肠菌温和裂解液为细胞膜破坏试剂，所述细胞膜破坏剂为EDTA、Nisin,Tween-80、硫酸粘菌素B、曲拉通、CATB中的任一种。9.如权利要求7的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，所述发光试剂底物为AMPGD、铕试剂、荧光素-半乳糖苷中的任一种。10.如权利要求7的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，所述发光增强剂为季铵盐高聚物。11.如权利要求1的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，步骤1)中，所述菌体分离富集为将样品利用无菌生理盐水稀释540倍，用真空过滤法滤过30i!m聚丙烯滤膜，取滤后液过0.2-0.45um混合醋酸纤维素滤膜，再利用2050ml无菌生理盐水洗涤2-3次，菌体截留在混合醋酸纤维素滤膜上。12.如权利要求1的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，组分A在121°C下灭菌15分钟后再与组分B混合。13.如权利要求1的食品中大肠菌群的快速检测方法，其特征在于，步骤3)中的发光值检测为将50ill100ill的增菌增酶培养后的菌体悬液与50100ill发光检测试剂反应1050分钟，利用发光光度计于530nm590nm处检测发光值，将检样发光值与阴性对照样发光值比对。全文摘要本发明公开一种食品中大肠菌群的快速检测方法，包括如下步骤1)对样品进行菌体分离富集，去除干扰物；2)将分离的菌体悬浮于增菌增酶培养液中，在39℃～42℃下恒温培养6～7小时；3)在培养后的菌体悬液中加入发光检测试剂进行发光值检测，根据发光值判断大肠菌群数量；所述增菌增酶培养液包括以体积比100∶1混合的组分A、组分B，组分A为每1000ml蒸馏水中含有胰蛋白胨0.5～2g，氯化钠2～5g，磷酸二氢钾6～8g，氢氧化钠1～2g，组分B为每100mL蒸馏水中含有β-半乳糖苷酶诱导物0.05～0.2g，亚致死细菌快速修复物3～6g，细菌快速增长剂2～5g。本发明检测结果准确、检测速度快。文档编号C12Q1/34GK101831485SQ20101017322公开日2010年9月15日申请日期2010年5月11日优先权日2010年5月11日发明者严守雷,吴俊,潘思轶,缪素娜,邓少雅,黄文彪申请人:佛山市海天调味食品有限公司;佛山市海天(高明)调味食品有限公司