专利名称：食品中天然色素番茄红色素的检测方法
技术领域：
食品安全检测与分析背景技术19世纪中叶以前，人们都是用食用色素着色，自从1856年英国W.H PERKINS发明了第一个合成有机色素苯胺紫以后，相继合成了许多有机色素。由于这类色素色泽鲜艳，性质稳定，成本低廉，很快就取代了天然色素。随着科学的发展，人们发现许多合成色素对人体有害。除了其本身的化学性能危害人体健康，而且在合成过程中，还可能被砷、铝等有害物质所污染。因此，世界各国已先后禁止使用许多合成色素。据统计，世界各国曾作为食用的合成色素品种有100多种，但目前各国仍广泛使用的仅十几种，有的国家如挪威已完全禁止使用合成色素。随着人们崇尚天然、追求健康和安全第一的心理要求，以及中国进入WTO所面临的全球化经济的需要，食用天然色素的发展更加迅速。据资料统计，1971-1981年世界公开发表的食用色素专利为26个，其中87.5％是食用天然色素。天然色素因其独特功效和低毒性在食品和化妆品应用中显示出广阔的前景。
虽然绝大多数天然色素无毒和无副作用，安全性高，但是，天然并不等于绝对无毒，许多天然色素的毒性资料比较少，未能制订ADI值，即对其毒性还不清楚。为安全起见，限制其在食品中的含量是非常重要的。因此建立与国际接轨的检验方法一食品中天然色素的测定方法，创建具有我国特色的食品安全体系，对保护民族产业，提升我国食品工业以及此次涉及的相关行业标准水平的提升，对提高我国产品质量、积极参与国际竞争，防止贸易壁垒，尤其是保障我国人民生命健康，有着十分重大和深远的意义。
新疆地处欧亚大陆中温带极端干旱的荒漠地区，其独特的干旱自然生态环境孕育着许多独具特色的优势植物(如番茄、辣椒、红花和甜菜等)，天然色素资源十分丰富，具有巨大的研究和开发潜力。但对其开发力度不够，技术水平低下，没有发挥其应有的经济效益。其中一个重要的限制因素就是天然色素的检测方法比较落后，因此建立天人色素的检测体系对促进我国的食品安全和保障我国人民生命健康有重要的意义。
发明内容
食品中天然色素番茄红色素的检测技术采用反相高效液相色谱法测定番茄红素，从繁杂的类胡萝卜素组分中较好地分离番茄红素，并定量分析。这样既减少了光谱法由于两步处理而可能造成的误差，提高了其检测的准确性，又简化了前处理，而且由于整个处理及测定过程可控制在10min内完成，缩短了检测时间，适用于番茄红素提取开发研究，同时也有利于生产过程中对产品质量的监测，且适用于较大批量试样的测定。
其色谱测定条件为高效液相色谱仪(Waters)附紫外可见检测器，色谱柱SymmetryShield TMRP 18(3.9×150mm，i.d.5μm)，流动相V(乙腈)∶B(四氢呋喃)∶V(二氯甲烷)＝95∶3.4∶1.6，流速1.0ml/min，检测波长472nm，柱温25℃，进样量20μl。
图1番茄红素的结构式图2番茄红素的紫外吸收光谱3番茄红素的HPLC标准图谱具体实施方式
1样品制备称取2.0000克经粉碎均浆的样品至10ml离心管中，用4ml无水乙醇涡旋混合提取其叶黄素及水分，高速离心(5000转/分)1分钟，弃去上清液，同法操作5次。在弃去乙醇的离心管中加4ml氯仿涡旋混合，将溶液及残渣无损失地转入25ml容量瓶，加10ml氯仿，塞紧瓶塞振摇2分钟，避光静置15分钟，用氯仿定容至刻度，摇匀，溶液经0.45μm滤膜过滤后直接上机测定。
2最佳吸收波长的选择选择合适的吸收波长可较好地分离番茄红色素和其它的类胡萝卜素，3在流动相中的吸收波长按吸收强度依次为472nm、502nm、445nm；本实验最终确定检测波长为472nm，在此条件下能很好的测定番茄红素和β-类胡萝卜素。
3流动相的选择实验对不同流动相的不同配比进行了详细的研究，研究的流动相有V(乙腈)∶V(三氯甲烷)＝92∶8和80∶20和70∶30；V(乙腈)∶V(甲醇)∶V(二氯甲烷)＝75∶25∶0、70∶20∶10、60∶35∶5和85∶10∶5；V(乙腈)∶V(四氢呋喃)∶V(二氯甲烷)＝90∶10∶0、80∶10∶10、70∶20∶10、90∶5∶5以及95∶3.4∶1.6等，结果表明V(乙腈)∶V(四氢呋喃)∶V(二氯甲烷)＝95∶3.4∶1.6时，可以很好的分离出番茄红素。
4标准曲线绘制配制一定浓度的番茄红素的标准液，分别取20μl、15μl、10μl、5μl、3μl、2μl、1μl的上述标准溶液进样，以番茄红素的保留时间作定性分析，以其峰面积作定量分析，并根据番茄红素的质量-峰面积作标准曲线。
5方法的回收率试验取番茄丁样品，分别加入1ml，2ml，3ml的标准溶液(0.36mg/ml)，经上述方法处理后，用流动相定容。按上述色谱条件平行测定三次，计算番茄红素的加标回收率。番茄红素的回收率(％)＝[加标后测定量-加标前测定量]/添加标品的量。
6番茄红色素色谱测定条件高效液相色谱仪(Waters)附紫外可见检测器，色谱柱SymmetryShield TMRP 18(3.9×150mm，i.d.5μm)，流动相V(乙腈)∶B(四氢呋喃)∶V(二氯甲烷)＝95∶3.4∶1.6，流速1.0ml/min，检测波长472nm，柱温25℃，进样量20μl。
权利要求
食品中天然色素番茄红色素的检测方法采用反相高效液相色谱法测定番茄红素，可以从繁杂的类胡萝卜素组分中较好地分离番茄红素，并定量分析，整个处理及测定过程可控制在10min内完成。缩短了检测时间，适用于番茄红素提取开发研究，同时也有利于生产过程中对产品质量的监测，要求保护范围为素番茄红色素的检测方法与技术参数高效液相色谱仪(Waters)附紫外可见检测器，色谱柱SymmetryShield TMRP 18(3.9×150mm，i.d.5μm)，流动相V(乙腈)∶B(四氢呋喃)∶V(二氯甲烷)＝95∶3.4∶1.6，流速1.0ml/min，检测波长472nm，柱温25℃，进样量20μl。
全文摘要
食品中天然色素番茄红色素的检测方法隶属于食品安全检测技术领域，其主要技术问题就是探索简单、易行的检测技术，建立与国际接轨的检验方法——食品中天然色素的测定方法，创建具有我国特色的食品安全体系。食品中天然色素番茄红色素的检测技术采用反相高效液相色谱法测定番茄红素，从繁杂的类胡萝卜素组分中较好地分离番茄红素，并定量分析。这样既减少了光谱法由于两步处理而可能造成的误差，提高了其检测的准确性，又简化了前处理，而且由于整个处理及测定过程可控制在10min内完成，缩短了检测时间，适用于番茄红素提取开发研究，同时也有利于生产过程中对产品质量的监测，且适用于较大批量试样的测定。
文档编号G01N30/00GK101082610SQ20061008518
公开日2007年12月5日 申请日期2006年5月30日 优先权日2006年5月30日
发明者田丽萍 申请人:田丽萍