专利名称：一种脂肪酶催化合成克林霉素脂肪酸酯的方法
技术领域：
本发明涉及一种脂肪酶催化合成克林霉素脂肪酸酯的方法。
背景技术：
克林霉素脂肪酸酯是由克林霉素2号位羟基与脂肪酸或脂肪酸酯进行酯化或转酯化合成得到；而盐酸克林霉素棕榈酸酯是目前克林霉素脂肪酸酯中唯一经FDA批准的临床常用的抗生素。克林霉素棕榈酸酯是克林霉素的前体药物，在体外无抗菌活性，在体内经酯酶水解形成克林霉素而发挥抗菌活性，克林霉素的抗菌机理与大环内酯类抗生素相似，通过与细菌核糖核蛋白体50s亚单位结合，抑制肽链的延长和细菌蛋白质的合成；同时清除细菌表面A蛋白和绒毛状外衣，使其易被吞噬和杀灭而达到抑制细菌作用。临床上盐酸克林霉素主要治疗厌氧细菌的感染，亦可治疗原生动物疾病，如疟疾。它是痤疮的常用外用处方药，并可有效治疗抗药性金黄色葡萄球菌。但克林霉素味道极苦，而克林霉素棕榈酸酯作为前体药物则苦味显著降低适合口服。克林霉素棕榈酸酯化学名是6-(1-甲基-反-4-丙基-L-2-吡咯烷甲酰氨基)-1-硫代-7 (S)-氯-6, 7,8- 二脱氧-L-苏式-a -D-半乳羊批喃糖苷2_掠榈酸酯盐酸盐，分子式C34H63ClN2O6S,分子量699.87，结构式如下:
权利要求
1.一种制备克林霉素脂肪酸酯的方法，包括下述步骤:在脂肪酶的催化作用下，使克林霉素与脂肪酸和/或脂肪酸酯进行反应，得到所述克林霉素脂肪酸酯。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述克林霉素与脂肪酸和/或脂肪酸酯的摩尔比为1: 0.1 1: 10，优选1: 2 1: 5。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于:所述脂肪酶的用量为克林霉素质量的0.01 10倍，优选I 5倍。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于:所述反应的反应温度为20 80°C，优选40 60°C ;反应时间为0.05 72小时，优选24 48小时。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于:所述反应的反应介质为含水量不高于0.5%的有机溶剂；所述有机溶剂具体选自下述至少一种:乙腈、丙酮、石油醚、甲苯、正己烷、环己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于:所述克林霉素选自下述至少一种:盐酸克林霉素、克林霉素游离碱、克林霉素醇化物和3，4_缩酮化克林霉素。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于:所述脂肪酸和/或脂肪酸酯选自下述至少一种:棕榈酸、棕榈酸乙烯酯、棕榈酸甲酯、棕榈酸乙酯、癸酸、癸酸甲酯、癸酸乙酯、月桂酸、月桂酸甲酯、月桂酸乙酯、肉豆蘧酸、肉豆蘧酸甲酯、肉豆蘧酸乙酯、硬脂酸、硬脂酸甲酯、硬脂酸乙酯、油酸、油酸甲酯、油酸乙酯或以上混合物；优选棕榈酸、棕榈酸乙烯酯、棕榈酸甲酯、棕榈酸乙酯或其混合物。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于:所述脂肪酶选自下述任意一种:南极假丝酵母脂肪酶，褶皱 假丝酵母脂肪酶，猪胰脂肪酶，南极假丝酵母脂肪酶B，米黑根毛霉脂肪酶和疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于:所述反应在摇床中进行，所述摇床的转速为0-1000r/min。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于:所述方法还包括对得到的克林霉素脂肪酸酯进行纯化的步骤。
全文摘要
本发明公开了一种脂肪酶催化合成克林霉素脂肪酸酯的方法。该方法包括下述步骤在脂肪酶的催化作用下，使克林霉素与脂肪酸和/或脂肪酸酯在20～80℃的条件下，反应0.05～72小时，反应液经过分离纯化得到克林霉素脂肪酸酯。其中，克林霉素与脂肪酸和/或脂肪酸酯的摩尔比为1∶0.1～1∶10；脂肪酶的用量为克林霉素质量的0.01～10倍。本发明首次实现了克林霉素脂肪酸酯的酶催化合成，避免了该产品在化学方法合成中对克林霉素中3，4位羟基的保护和脱保护过程，减少了工艺流程，具有催化效率高、选择性好、稳定性好等特点。
文档编号C12P19/64GK103194511SQ20131007063
公开日2013年7月10日 申请日期2013年3月6日 优先权日2013年3月6日
发明者李致贤, 戈钧, 林萌萌, 张一飞, 卢滇楠, 刘铮 申请人:清华大学