一种菌种发酵茶叶的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种菌种发酵茶叶的制备方法，先是利用茶叶驯化培养基对灵芝菌种驯化，将驯化灵芝菌接种到茶叶上，使得茶叶进行发酵，发酵过的茶叶烘干既得到产品。本发明将灵芝菌与茶叶有机结合，使得茶叶中含有灵芝的有效成分，提高的茶叶的保健性能，并且改善了茶叶苦涩的口感。
【专利说明】一种菌种发酵茶叶的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种茶叶的制备方法，具体为菌种发酵茶叶的制备方法。
【背景技术】
[0002] 茶作为日常饮品，其保健单一，并且粗茶的保健功能尤为明显，但是粗茶口味苦 涩。另外，茶叶还通过与其他保健食材一起饮用，而有些名贵的保健品是无法制成饮片使 用，这就影响了保健功能的推广。比如一些菌类，其保健性能是众所周知，因此如何将菌类 的保健品与茶叶有机结合在一起，是保健茶叶发展的一个方向。
【发明内容】
[0003] 针对上述技术问题，本发明提供一种菌种发酵茶叶的制备方法，将保健菌类和茶 叶有机结合在一起，具体的技术方案为： 菌种发酵茶叶的制备方法，包括以下步骤： (1) 灵芝菌种驯化 在茶叶驯化培养基上接种灵芝菌，进行菌株驯化培养，经过驯化培养后，选取发育良好 的菌株作为种菌进行繁殖得到驯化灵芝菌； (2) 茶叶接种发酵 将茶叶铺平喷水，茶叶含水率为8(Γ84%，将驯化灵芝菌接种到茶叶上，1L茶叶接种驯 化灵芝菌疒15mL，保温25?28°C发酵11?15天，菌丝布满茶叶； (3) 茶叶烘干 将发酵过的茶叶在45飞0°C下烘干。
[0004] 其中，茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶8(Γ85份、酵母菌 0. 5~1份、马铃薯淀粉5飞份、黄豆饼粉2~3份、葡萄糖1~2份、硫酸镁1~1. 5份、磷酸二氢钾 1. 5?2份、琼脂2(Γ25份、水4(Γ43份，以上原材料混合后保温25?28°C发酵10小时；发酵结 束后，进行灭菌，制得茶叶驯化培养基制备。
[0005] 茶叶驯化培养基，分为三种茶叶驯化培养基，分别为初级茶叶驯化培养基，由以下 原材料按照重量份数组成，茶叶5(Γ65份、酵母菌0. 5~0. 6份、马铃薯淀粉5~5. 3份、黄豆饼 粉2~2. 3份、葡萄糖1~1. 3份、硫酸镁1~1. 2份、磷酸二氢钾1. 5~1. 7份、琼脂2(Γ22份、水 40?41份； 二级茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶65~75份、酵母菌 0. 6、. 8份、马铃薯淀粉5. 3?5. 7份、黄豆饼粉2. 3?2. 7份、葡萄糖1. 3?1. 8份、硫酸镁 1. 2?1. 4份、磷酸二氢钾1. 6?1. 8份、琼脂22?24份、水40?43份； 三级茶叶驯化培养基由以下原材料按照重量份数组成，茶叶75?85份、酵母菌0. 8?1 份、马铃薯淀粉5. 6飞份、黄豆饼粉2. 7~3份、葡萄糖1. 8~2份、硫酸镁1. Γ1. 5份、磷酸二 氢钾1. 8?2份、琼脂23?25份、水42?43份。
[0006] 初级茶叶驯化培养基用于接种第一代灵芝菌； 选取发育良好的菌株，接种到二级茶叶驯化培养基进行驯化繁育； 再选取发育良好的菌株，接种到三级茶叶驯化培养基，进一步驯化； 选取发育良好的菌株作为驯化完成的驯化灵芝菌，为制备菌种发酵茶叶使用。
[0007] 三种茶叶驯化培养基中的茶叶量逐渐增加，营养物质逐渐减少，逐步驯化灵芝菌 种，最终得到繁殖能力、适应能力都较好的菌株，经过驯化的灵芝菌种能适应以茶叶为主要 基质的培养基。
[0008] 茶叶驯化培养基中的原材料中的茶叶为粗茶。粗茶，即老茶叶，与新茶相对，粗茶 含有较高浓度的茶多酚等物质，能提高菌种驯化速度。
[0009] 步骤（2)所采用的茶叶，为新茶或粗茶，粗茶含较高的茶多酚、茶丹宁等物质，茶 多酚是一种天然抗氧化剂，能抑制自由基在人体内造成的伤害，有抗衰老作用；还能阻断亚 硝胺等致癌物对身体的损害。茶丹宁则能降低血脂，防止血管硬化，保持血管畅通，维护心、 脑血管的正常功能。茶多糖能缓解和减轻糖尿病症状，具有降血脂，降血压等作用。但是粗 茶口感较为苦涩，而新茶较为清香。因此针对不同需求，可以制备以新茶或者粗茶为原料的 菌种发酵茶叶。
[0010] 步骤（2)所述的茶叶还喷洒有辅助营养剂，有助于菌种的培养。辅助营养剂由葡 萄糖、蛋白胨组成，加入水中喷洒，每升水中添加葡萄糖2(T45g、蛋白胨3~15g。
[0011] 本发明提供的菌种发酵茶叶，与传统的茶叶相比，具有更高的保健价值，灵芝中的 灵芝多糖是灵芝的主要有效成分之一，具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖、抗氧化、降血脂与 抗衰老作用。本发明将灵芝菌与茶叶有机结合，使得茶叶中含有灵芝的有效成分，提高的茶 叶的保健性能，并且改善了茶叶苦涩的口感。
【具体实施方式】
[0012] 结合实施例说明本发明的【具体实施方式】。
[0013] 实施例1 以粗茶为原料，制备菌种发酵粗茶，包括以下步骤： (1)制备茶叶驯化培养基 茶叶驯化培养基，分为三种茶叶驯化培养基，分别为初级茶叶驯化培养基，由以下原材 料按照重量份数组成，茶叶65份、酵母菌0. 56份、马铃薯淀粉5. 3份、黄豆饼粉2份、葡萄 糖1份、硫酸镁1. 1份、磷酸二氢钾1. 5份、琼脂21份、水41份； 二级茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶70份、酵母菌0. 6份、马 铃薯淀粉5. 7份、黄豆饼粉2. 7份、葡萄糖1. 3份、硫酸镁1. 4份、磷酸二氢钾1. 6份、琼脂 23份、水43份； 三级茶叶驯化培养基由以下原材料按照重量份数组成，茶叶85份、酵母菌1份、马铃薯 淀粉5. 6份、黄豆饼粉2. 8份、葡萄糖2份、硫酸镁1. 4份、磷酸二氢钾2份、琼脂23份、水 43份。
[0014] 使用的茶叶均为粗茶。以上每种茶叶驯化培养基原材料分别混合后保温25~28°C 发酵10小时；发酵结束后，进行灭菌，制得三种茶叶驯化培养基制备。
[0015] (2)灵芝菌种驯化 初级茶叶驯化培养基用于接种第一代灵芝菌； 选取发育良好的菌株，接种到二级茶叶驯化培养基进行驯化繁育； 再选取发育良好的菌株，接种到三级茶叶驯化培养基，进一步驯化； 选取发育良好的菌株作为驯化完成的驯化灵芝菌，为制备菌种发酵茶叶使用。
[0016] (3)茶叶接种发酵 将粗茶铺平，喷水，水中加入辅助营养剂，辅助营养剂由葡萄糖、蛋白胨组成，每升水中 添加葡萄糖35g、蛋白胨15g。保证茶叶含水率为8(Γ84%，将驯化灵芝菌接种到茶叶上，1L 茶叶接种驯化灵芝菌15mL，保温25~28°C发酵12天，菌丝布满茶叶。
[0017] (4)茶叶烘干 将发酵过的茶叶在45飞0°C下烘干，即制得菌种发酵茶叶。
[0018] 实施例2 以粗茶为原料，制备菌种发酵粗茶，包括以下步骤： (1)制备茶叶驯化培养基 茶叶驯化培养基，分为三种茶叶驯化培养基，分别为初级茶叶驯化培养基，由以下原材 料按照重量份数组成，茶叶50份、酵母菌0. 6份、马铃薯淀粉5份、黄豆饼粉2份、葡萄糖1 份、硫酸镁1. 2份、磷酸二氢钾1. 7份、琼脂20份、水41份； 二级茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶75份、酵母菌0. 6份、马 铃薯淀粉5. 6份、黄豆饼粉2. 3份、葡萄糖1. 8份、硫酸镁1. 2份、磷酸二氢钾1. 8份、琼脂 24份、水42份； 三级茶叶驯化培养基由以下原材料按照重量份数组成，茶叶85份、酵母菌1份、马铃薯 淀粉6份、黄豆饼粉3份、葡萄糖2份、硫酸镁1. 4份、磷酸二氢钾1. 8份、琼脂23份、水42 份。
[0019] 使用的茶叶均为粗茶。以上每种茶叶驯化培养基原材料分别混合后保温25~28°C 发酵10小时；发酵结束后，进行灭菌，制得三种茶叶驯化培养基制备。
[0020] (2)灵芝菌种驯化 初级茶叶驯化培养基用于接种第一代灵芝菌； 选取发育良好的菌株，接种到二级茶叶驯化培养基进行驯化繁育； 再选取发育良好的菌株，接种到三级茶叶驯化培养基，进一步驯化； 选取发育良好的菌株作为驯化完成的驯化灵芝菌，为制备菌种发酵茶叶使用。
[0021] (3)茶叶接种发酵 将粗茶铺平，喷水，水中加入辅助营养剂，辅助营养剂由葡萄糖、蛋白胨组成，每升水中 添加葡萄糖45g、蛋白胨3g。保证茶叶含水率为8(Γ84%，将驯化灵芝菌接种到茶叶上，1L茶 叶接种驯化灵芝菌l〇mL，保温25~28°C发酵13天，菌丝布满茶叶。
[0022] (4)茶叶烘干 将发酵过的茶叶在45飞0°C下烘干，即制得菌种发酵茶叶。
[0023] 实施例3 以粗茶为原料，制备菌种发酵粗茶，包括以下步骤： (1)制备茶叶驯化培养基 茶叶驯化培养基，分为三种茶叶驯化培养基，分别为初级茶叶驯化培养基，由以下原材 料按照重量份数组成，茶叶60份、酵母菌0. 5份、马铃薯淀粉5. 2份、黄豆饼粉2份、葡萄糖 1份、硫酸镁1. 2份、磷酸二氢钾1. 5份、琼脂22份、水41份； 二级茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶75份、酵母菌0. 8份、马 铃薯淀粉5. 5.份、黄豆饼粉2. 4份、葡萄糖1. 8份、硫酸镁1. 4份、磷酸二氢钾1. 6份、琼 脂23份、水42份； 三级茶叶驯化培养基由以下原材料按照重量份数组成，茶叶80份、酵母菌0. 9份、马铃 薯淀粉5. 8份、黄豆饼粉3份、葡萄糖2份、硫酸镁1. 5份、磷酸二氢钾2份、琼脂23份、水 43份。
[0024] 使用的茶叶均为粗茶。以上每种茶叶驯化培养基原材料分别混合后保温25~28°C 发酵10小时；发酵结束后，进行灭菌，制得三种茶叶驯化培养基制备。
[0025] (2)灵芝菌种驯化 初级茶叶驯化培养基用于接种第一代灵芝菌； 选取发育良好的菌株，接种到二级茶叶驯化培养基进行驯化繁育； 再选取发育良好的菌株，接种到三级茶叶驯化培养基，进一步驯化； 选取发育良好的菌株作为驯化完成的驯化灵芝菌，为制备菌种发酵茶叶使用。
[0026] (3)茶叶接种发酵 将粗茶铺平，喷水，水中加入辅助营养剂，辅助营养剂由葡萄糖、蛋白胨组成，每升水中 添加葡萄糖20g、蛋白胨15g。保证茶叶含水率为8(Γ84%，将驯化灵芝菌接种到茶叶上，1L 茶叶接种驯化灵芝菌7mL，保温25~28°C发酵15天，菌丝布满茶叶。
[0027] (4)茶叶烘干 将发酵过的茶叶在45飞0°C下烘干，即制得菌种发酵茶叶。
[0028] 实施例4 以新茶为原料，制备菌种发酵粗茶，包括以下步骤： (1)制备茶叶驯化培养基 茶叶驯化培养基，分为三种茶叶驯化培养基，分别为初级茶叶驯化培养基，由以下原材 料按照重量份数组成，茶叶55份、酵母菌0. 5份、马铃薯淀粉5. 2份、黄豆饼粉2份、葡萄糖 1. 3份、硫酸镁份、磷酸二氢钾1. 5份、琼脂20份、水40份； 二级茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶65份、酵母菌0. 68份、马 铃薯淀粉5. 7份、黄豆饼粉2. 7份、葡萄糖1. 3~1. 8份、硫酸镁1. 2份、磷酸二氢钾1. 6份、 琼脂22份、水40份； 三级茶叶驯化培养基由以下原材料按照重量份数组成，茶叶85份、酵母菌1份、马铃薯 淀粉5. 9份、黄豆饼粉2. 9份、葡萄糖1. 8份、硫酸镁1. 4份、磷酸二氢钾1. 8份、琼脂23份、 水42份。
[0029] 使用的茶叶均为粗茶。以上每种茶叶驯化培养基原材料分别混合后保温25~28°C 发酵10小时；发酵结束后，进行灭菌，制得三种茶叶驯化培养基制备。
[0030] (2)灵芝菌种驯化 初级茶叶驯化培养基用于接种第一代灵芝菌； 选取发育良好的菌株，接种到二级茶叶驯化培养基进行驯化繁育； 再选取发育良好的菌株，接种到三级茶叶驯化培养基，进一步驯化； 选取发育良好的菌株作为驯化完成的驯化灵芝菌，为制备菌种发酵茶叶使用。
[0031] (3)茶叶接种发酵 将新茶铺平，喷水，水中加入辅助营养剂，辅助营养剂由葡萄糖、蛋白胨组成，每升水中 添加葡萄糖20g、蛋白胨9g。保证茶叶含水率为8(Γ84%，将驯化灵芝菌接种到茶叶上，1L茶 叶接种驯化灵芝菌7mL，保温25~28°C发酵13天，菌丝布满茶叶。
[0032] (4)茶叶烘干 将发酵过的茶叶在45飞0°C下烘干，即制得菌种发酵茶叶。
[0033] 实施例5 以新茶为原料，制备菌种发酵粗茶，包括以下步骤： (1)制备茶叶驯化培养基 茶叶驯化培养基，分为三种茶叶驯化培养基，分别为初级茶叶驯化培养基，由以下原材 料按照重量份数组成，茶叶65份、酵母菌0. 5份、马铃薯淀粉5份、黄豆饼粉2. 3份、葡萄糖 1. 2份、硫酸镁1份、磷酸二氢钾1. 6份、琼脂21份、水40份； 二级茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶75份、酵母菌0. 8份、马 铃薯淀粉5. 6份、黄豆饼粉2. 3份、葡萄糖1. 6份、硫酸镁1. 2份、磷酸二氢钾1. 7份、琼脂 23份、水40份； 三级茶叶驯化培养基由以下原材料按照重量份数组成，茶叶80份、酵母菌1份、马铃薯 淀粉6份、黄豆饼粉2. 7份、葡萄糖2份、硫酸镁1. 5份、磷酸二氢钾1. 8份、琼脂23份、水 43份。
[0034] 使用的茶叶均为粗茶。以上每种茶叶驯化培养基原材料分别混合后保温25~28°C 发酵10小时；发酵结束后，进行灭菌，制得三种茶叶驯化培养基制备。
[0035] (2)灵芝菌种驯化 初级茶叶驯化培养基用于接种第一代灵芝菌； 选取发育良好的菌株，接种到二级茶叶驯化培养基进行驯化繁育； 再选取发育良好的菌株，接种到三级茶叶驯化培养基，进一步驯化； 选取发育良好的菌株作为驯化完成的驯化灵芝菌，为制备菌种发酵茶叶使用。
[0036] (3)茶叶接种发酵 将新茶铺平，喷水，水中加入辅助营养剂，辅助营养剂由葡萄糖、蛋白胨组成，每升水中 添加葡萄糖45g、蛋白胨3g。保证茶叶含水率为8(Γ84%，将驯化灵芝菌接种到茶叶上，1L茶 叶接种驯化灵芝菌7mL，保温25~28°C发酵11天，菌丝布满茶叶。
[0037] (4)茶叶烘干 将发酵过的茶叶在45飞0°C下烘干，即制得菌种发酵茶叶。
[0038] 实施例6 以新茶为原料，制备菌种发酵粗茶，包括以下步骤： (1)制备茶叶驯化培养基 茶叶驯化培养基，分为三种茶叶驯化培养基，分别为初级茶叶驯化培养基，由以下原材 料按照重量份数组成，茶叶50份、酵母菌0. 5份、马铃薯淀粉5. 3份、黄豆饼粉2份、葡萄糖 1份、硫酸镁1. 2份、磷酸二氢钾1. 5份、琼脂22份、水40份； 二级茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶60份、酵母菌0. 6份、马 铃薯淀粉5. 6份、黄豆饼粉2. 5份、葡萄糖1. 5份、硫酸镁1. 3份、磷酸二氢钾1. 7份、琼脂 23份、水42份； 三级茶叶驯化培养基由以下原材料按照重量份数组成，茶叶75份、酵母菌0. 9份、马铃 薯淀粉5. 7份、黄豆饼粉2. 8份、葡萄糖1. 9份、硫酸镁1. 4份、磷酸二氢钾1. 9份、琼脂24 份、水42份。
[0039] 使用的茶叶均为粗茶。以上每种茶叶驯化培养基原材料分别混合后保温25~28°C 发酵10小时；发酵结束后，进行灭菌，制得三种茶叶驯化培养基制备。
[0040] (2)灵芝菌种驯化 初级茶叶驯化培养基用于接种第一代灵芝菌； 选取发育良好的菌株，接种到二级茶叶驯化培养基进行驯化繁育； 再选取发育良好的菌株，接种到三级茶叶驯化培养基，进一步驯化； 选取发育良好的菌株作为驯化完成的驯化灵芝菌，为制备菌种发酵茶叶使用。
[0041] (3)茶叶接种发酵 将新茶铺平，喷水，水中加入辅助营养剂，辅助营养剂由葡萄糖、蛋白胨组成，每升水中 添加葡萄糖30g、蛋白胨7g。保证茶叶含水率为8(Γ84%，将驯化灵芝菌接种到茶叶上，1L茶 叶接种驯化灵芝菌13mL，保温25~28°C发酵12天，菌丝布满茶叶。
[0042] (4)茶叶烘干 将发酵过的茶叶在45飞0°C下烘干，即制得菌种发酵茶叶。
[0043] 对六个实施例所制得的茶叶进行检测，其活性有效成分如下表。
[0044] 茶含量测定用分光光度法测定。
[0045] 灵芝多糖测试采用分光光度法，以无水葡萄糖为对照品，检测波长为490nm。
[0046] 灵芝酸的含量测定采用紫外分光光度法，以灵芝酸C2为对照品，饱和NaHC03溶 液为溶剂，测定波长260nm。
[0047] 表1茶叶活性成分(重量百分比）
【权利要求】
1. 菌种发酵茶叶的制备方法，其特征在于：该制备方法包括以下步骤： (1) 灵芝菌种驯化 在茶叶驯化培养基上接种灵芝菌，进行菌株驯化培养，经过驯化培养后，选取发育良好 的菌株作为种菌进行繁殖得到驯化灵芝菌； (2) 茶叶接种发酵 将茶叶铺平喷水，茶叶含水率保持在8(Γ84% ; 将驯化灵芝菌接种到茶叶上，1L茶叶接种驯化灵芝菌疒15mL，保温25~28°C发酵11~15 天，菌丝布满茶叶； (3) 茶叶烘干 将发酵过的茶叶在45飞0°C下烘干。
2. 根据权利要求1所述的菌种发酵茶叶的制备方法，其特征在于： 所述的茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶5(Γ85份、酵母菌 0. 5~1份、马铃薯淀粉5飞份、黄豆饼粉2~3份、葡萄糖1~2份、硫酸镁1~1. 5份、磷酸二氢钾 1. 5?2份、琼脂20?25份、水40?43份； 以上原材料混合后保温25~28°C发酵10小时； 发酵结束后，进行灭菌，制得茶叶驯化培养基制备。
3. 根据权利要求2所述的菌种发酵茶叶的制备方法，其特征在于： 所述的茶叶驯化培养基，分为三种茶叶驯化培养基，分别为初级茶叶驯化培养基，由以 下原材料按照重量份数组成，茶叶5(Γ65份、酵母菌0. 5~0. 6份、马铃薯淀粉5~5. 3份、黄豆 饼粉2~2. 3份、葡萄糖1~1. 3份、硫酸镁1~1. 2份、磷酸二氢钾1. 5~1. 7份、琼脂2(Γ22份、 水40?41份； 二级茶叶驯化培养基，由以下原材料按照重量份数组成，茶叶65~75份、酵母菌 0. 6、. 8份、马铃薯淀粉5. 3?5. 7份、黄豆饼粉2. 3?2. 7份、葡萄糖1. 3?1. 8份、硫酸镁 1. 2?1. 4份、磷酸二氢钾1. 6?1. 8份、琼脂22?24份、水40?43份； 三级茶叶驯化培养基由以下原材料按照重量份数组成，茶叶75?85份、酵母菌0. 8?1 份、马铃薯淀粉5. 6飞份、黄豆饼粉2. 7~3份、葡萄糖1. 8~2份、硫酸镁1. Γ1. 5份、磷酸二 氢钾1. 8?2份、琼脂23?25份、水42?43份。
4. 根据权利要求3所述的菌种发酵茶叶的制备方法，其特征在于： 所述的初级茶叶驯化培养基用于接种第一代灵芝菌； 选取发育良好的菌株，接种到二级茶叶驯化培养基进行驯化繁育； 再选取发育良好的菌株，接种到三级茶叶驯化培养基，进一步驯化； 选取发育良好的菌株作为驯化完成的驯化灵芝菌，为制备菌种发酵茶叶使用。
5. 根据权利要求2~4任一项所述的菌种茶叶的制备方法，其特征在于： 所述的原材料中的茶叶为粗茶。
6. 根据权利要求1所述的菌种发酵保健茶叶的制备方法，其特征在于： 步骤（2)所采用的茶叶，为新茶或粗茶。
7. 根据权利要求1所述的菌种发酵茶叶的制备方法，其特征在于：步骤（2)所述的茶叶 还喷洒有辅助营养剂，辅助营养剂由葡萄糖、蛋白胨组成，加入水中喷洒，每升水中添加葡 萄糖20?45g、蛋白胨3?15g。
【文档编号】A23F3/10GK104186746SQ201410383424
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年8月6日 优先权日:2014年8月6日
【发明者】汪月霞 申请人:镇江市丹徒区茗缘茶叶专业合作社