本发明涉及一种保健食品的制备方法，尤其涉及一种灵芝破壁孢子粉的制备方法。
背景技术：
免疫力是机体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、细菌等），处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞的能力。人体免疫系统功能主要表现为三个方面：1）防御功能：机体排斥外来抗原性异物，抵抗感染。当防御功能过高时，会出现过敏反应，过低则会患免疫缺陷症；2）稳定功能；机体免疫系统维持内环境相对稳定，及时清除体内损伤、衰老、变性的血细胞和抗原—抗体复合物，而对自身成分保持免疫耐受；3）免疫监视作用：机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变和病毒干扰细胞的一种生理保护作用。人体的免疫力大多取决于遗传基因，但是外界环境如饮食、睡眠、运动、压力等也会影响身体的免疫系统机能。免疫力低下的人易被细菌、病毒、真菌等微生物感染或易患疾病，因此提高免疫力能提高人类抵抗各种病毒、细菌的防疫能力，增强对各种疾病的自然治愈力。人体有许多免疫组织和器官，如胸腺、淋巴、脾脏、白细胞等来对抗侵入人体的病原。人体免疫力的高低受多种因素影响，其中营养因素起着十分重要的作用，它是维持人体正常免疫功能和健康的物质基础。机体营养不良将会导致免疫系统功能受损，使机体对病原的抵抗力下降，从而有利于感染的发生和发展。通过均衡营养来改善人体的免疫状况，增强对疾病的抵抗能力，对预防疾病的发生有十分重要的意义。
现代社会发展迅速，人们生活工作压力不断增加，气候环境等因素不断恶化更加剧了人们免疫力的负担。免疫力低下成为现下社会的一个普遍性问题。一份南京市不同职业人群健康状况的调查显示，南京市区18-60岁1987名对象中，免疫力低下者占42.98%，男性占22.04%，女性占20.94%。孟雪萍自行设计健康状况调查问卷，对1191名高校教师进行调查，其中符合WHO健康标准265人，占22.25%。免疫力低下828人，占69.52%，以31-50岁为高发年龄段，主要症状为注意力不集中、疲劳、头痛或头晕等。WHO一项全球性调查结果表明，全世界真正健康的人仅占5%，75%的人处于健康和患病之间的过度状态。日本国立公共卫生院最近在政府的支持下，进行了一次有史以来规模最大的有关疲劳的专题调查研究，在5000余名15-65岁人士中，表示感到“非常疲劳”的竟高达60%，其中因工作量大，家务重、精神紧张的占44%，还有36%说不出原因。由此可见，免疫力低下已成为一个全球性的健康问题，提高免疫力刻不容缓。
现在人们的生活和工作压力都很大，这种压力会使人体产生一种抑制因子。这种抑制因子会直接影响到免疫细胞的正常工作，当人体免疫功能失调，或者免疫系统不健全时，下列问题就会反复发作；感冒、扁桃体炎、哮喘、支气管炎、肺炎、腹泻等，所以千万不可小觑。目前市场上已有多种增强免疫力的保健食品获国家批准，这些产品采用的原料既有枸杞子提取物、当归提取物、牛膝提取物、黄芪提取物等植物原料，也有维生素C、维生素B6、维生素B12、牛初乳粉、复合氨基酸粉、乳清蛋白、牛磺酸等非植物原料的；产品剂型包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、饮料等。虽然市场上销售的剂型和原料种类繁多，但是随着如今免疫力低下的人群逐年增加，现有的具有增强免疫力功能的保健食品远不能满足免疫力低下人群的需求，因此增强免疫力的保健食品有很大的发展空间。
免疫系统的作用，主要是识别“非己”，排斥“非己”。它主要有三大功能：第一是防止病原微生物（细菌和病毒等）侵入机体，减少疾病的发生。第二是消灭机体内的“异己分子”，医学上称为免疫监视。第三是自稳作用，能清除体内的垃圾，保持体内环境的清洁平衡。免疫力低下就会加重机体的消耗，所以一般有体重减轻，营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现。长此以往会导致身体和智力发育不良，易诱发重大疾病。因此提高免疫力十分重要。
灵芝被历代医家视为滋补强壮、扶正固本、延年益寿之珍品。灵芝中富含的活性成分具有多种免疫调节作用。灵芝孢子粉为灵芝子实体成长过程中散发的孢子聚集而成，与母体灵芝相比含有更多的活性物质。
技术实现要素：
本发明的目的：提供一种灵芝破壁孢子粉的制备方法，以灵芝破壁孢子粉为原料，原料安全性高，功效确切，具有增强免疫力功能。
为了实现上述目的，本发明的技术方案是：
一种灵芝破壁孢子粉的制备方法，该方法至少包括如下步骤：
步骤1：将灵芝破壁孢子粉过筛，得细粉，备用。
步骤2：按配方称量灵芝破壁孢子粉细粉，待用。
步骤3：将灵芝破壁孢子粉细粉装袋。
步骤4：将装袋后的灵芝破壁孢子粉细粉外包装。
步骤5：由质检员进行成品检验。
步骤6：检验合格后入库。
上述的灵芝破壁孢子粉的制备方法，其中，在所述的步骤1中，所述的灵芝破壁孢子粉过80目筛。
上述的灵芝破壁孢子粉的制备方法，其中，在所述的步骤3中，装袋的灵芝破壁孢子粉细粉为1g/袋。
上述的灵芝破壁孢子粉的制备方法，其中，在所述的步骤1至步骤3中，灵芝破壁孢子粉在洁净度为三十万级的洁净卫生区内制备。
本发明能有效提高服用者的免疫功能，适用于免疫力低下人群，生物利用度高，服用、携带方便，投入市场后潜力巨大，具有良好的市场前景。
附图说明
图1是本发明一种灵芝破壁孢子粉的制备方法的流程图。
具体实施方式
以下结合附图进一步说明本发明的实施例。
请参见附图1所示，一种灵芝破壁孢子粉的制备方法，该方法至少包括如下步骤：
步骤1：将灵芝破壁孢子粉过筛，得细粉，备用。
步骤2：按配方称量灵芝破壁孢子粉细粉，待用。
步骤3：将灵芝破壁孢子粉细粉装袋，内包装材料符合GB/T 21302包装用复合膜、袋通则的规定。
步骤4：将装袋后的灵芝破壁孢子粉细粉外包装，外包装材料符合 GB/T 6543运输包装用单瓦楞纸箱和双瓦楞纸箱的规定。
步骤5：由质检员进行成品检验。
步骤6：检验合格后方可入库。
在所述的步骤1中，所述的灵芝破壁孢子粉过80目筛。
在所述的步骤3中，装袋的灵芝破壁孢子粉细粉为1g/袋。
在所述的步骤1至步骤3中，灵芝破壁孢子粉在洁净度为三十万级的洁净卫生区内制备。
本发明标志性成分为：粗多糖。以灵芝破壁孢子粉为原料，同时参考《保健食品检验与评价技术规范》中的“功效成分和特征成分检测项目表”，故确定粗多糖为本发明的标志性成分。
本发明选用粉剂作为产品剂型。本发明以灵芝破壁孢子粉为原料，因原料为固体粉末，故宜制成固体制剂。其中粉剂工艺较简单，易生产，成本低，剂量容易控制，运输携带方便。因此，选用粉剂作为本发明的剂型。
灵芝孢子是灵芝（Ganoderma lucidum karst.）的生殖细胞，它浓缩聚集有灵芝的全部生物活性成分，灵芝孢子含有大量的有机锗、多糖和三萜类，这3种天然营养素已被证实能有效地增强人体免疫能力和调节身体各部分机能，具有抑制肿瘤、抗病毒、保肾护肝、降糖降脂和延缓衰老等功效。灵芝在《本草纲目》中列为上品，其子实体、菌丝、孢子均可食用。灵芝孢子有两层耐酸耐碱的坚硬壁状结构，经过破壁的灵芝孢子更利于人体的吸收利用。现代研究证实，破壁灵芝孢子粉对机体免疫功能具有良好的调节作用。
灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫调节作用的实验研究：实验选用健康昆明种雄性小鼠240只，体重18-22g，分为6大组，每大组40只，第1、2大组小鼠进行细胞免疫功能检测，包括ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化实验和迟发型变态反应实验；第3大组，进行体液免疫功能检测，包括抗体生成细胞数测定和血清溶血素测定；第4、5大组进行巨噬细胞吞噬功能测定，包括腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和碳廓清实验；第6大组进行NK细胞活性测定。根据人口服推荐用量，每大组小鼠均设高、中、低剂量组，剂量分别为600、300、150mg/kg•BW(相当于人体推荐量的20、10、5倍)，另设一个阴性对照组，每个剂量组10只动物。以蒸馏水为溶剂将样品配制成30.0、15.0、7.5mg/ml浓度溶液，按0.2ml/10g•BW 的体积给予相应剂量组动物灌胃，阴性对照组予以等体积的蒸馏水，每天灌胃1次，连续灌胃30天。观察受试物对小鼠细胞免疫、体液免疫、巨噬细胞等功能的影响。实验结果显示：各剂量组小鼠的脾淋巴细胞增殖转化能力明显高于阴性对照组，且差异显著（p<0.01或p<0.05），表明该受试物具有促进小鼠的淋巴细胞增殖、转化的作用；高、低剂量组小鼠的左右耳片重量差值明显高于阴性对照组，且差异显著（p<0.01或p<0.05），表明该受试物具有促进小鼠的迟发型变态反应的作用；高、中剂量组小鼠的溶血空斑数明显高于阴性对照组，且差异显著（p<0.01或p<0.05）,表明该受试物具有促进小鼠的抗体生成细胞增殖的作用；高剂量组抗体积数明显高于阴性对照组，且差异显著（p<0.05），表明该受试物具有提高小鼠血清溶血素水平的作用；各剂量组小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬指数均显著大于阴性对照组，且差异显著（p<0.05），表明该受试物可以增强小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬功能；各剂量组小鼠碳廓清实验的吞噬指数均显著大于阴性对照组，且差异显著（p<0.01），表明该受试物具有促进小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清功能的作用。上述结果表明，灵芝破壁孢子粉对小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能和巨噬细胞的吞噬功能都有明显的促进作用。提示：灵芝破壁孢子粉具有增强免疫力的功能。
灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫功能影响的实验研究：实验选用清洁级小白鼠，雄性，随机分为4组，设3个剂量组，即低、中、高（0.25、0.5和1.5g/kg）剂量组；同时设蒸馏水对照组。各组动物经口灌胃1次/天，连续进行30天。进行血清血溶素测定、抗体生成细胞检测、迟发型变态反应实验、脾淋巴细胞转化实验、碳廓清实验、巨噬细胞吞噬能力测定、NK细胞活性测定。实验结果显示：中、高剂量组溶血空斑数和抗体积数均显著高于蒸馏水对照组，且差异显著（p<0.05）；中、高剂量组ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力明显高于蒸馏水对照组，且差异显著（p<0.05）；高剂量组小鼠的耳肿胀度明显高于蒸馏水对照组，且差异显著（p<0.05）；中、高剂量组与蒸馏水对照组相比，碳廓清能力明显增强，且差异显著（p<0.05）；中、高剂量组与蒸馏水对照组相比，巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均显著升高，且差异显著（p<0.05）；中、高剂量组与蒸馏水对照组相比，NK细胞活性也明显增强，且差异显著（p<0.05）。上述结果表明，灵芝破壁孢子粉对小鼠的体液免疫功能、细胞免疫功能、巨噬细胞的吞噬功能和NK细胞活性都有明显的促进作用。提示：灵芝破壁孢子粉具有增强免疫力功能。
灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫功能影响的研究：实验取健康雄性小鼠40只，体重18-22g，将小鼠按体重随机分为低、中、高（33.3、333.3、1000mg/kg•bw）3个剂量组和1个对照组，每组10只，每日经口灌胃，灌胃容积为20ml/kg•bw，对照组灌双蒸水，连续进行15天。进行迟发型变态反应实验、血清溶血素测定。实验结果显示：各剂量组小鼠耳廓肿胀度明显大于对照组，中、高剂量组有明显统计学差异（p<0.01）；各剂量组小鼠的血清半数溶血值均高于对照组，中、高剂量组有明显统计学差异（p<0.05，p<0.01）。以上结果表明，灵芝破壁孢子粉具有提高机体免疫力的作用。
灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫功能影响的研究：实验选取清洁级雌性小鼠，体重18-22g，分为6个剂量组（83、167、250、333、500、1500mg/kg）和一个对照组，连续灌胃30天，进行增强免疫力相关实验。实验结果显示；与对照组相比，167、250、333、500、1500mg/kg剂量组均能提高脾淋巴细胞的增殖能力和小鼠左后足趾部厚度差值，且差异显著（p<0.05）；与对照组相比，250mg/kg 剂量组能显著提高小鼠血清溶血素抗体积数值，且差异显著（p<0.05）；与对照组相比，167、250、333、500、1500mg/kg剂量组均能提高小鼠溶血空斑数，且差异显著（p<0.05）；与对照组相比，500mg/kg 剂量组能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率，且差异显著（p<0.05）；与对照组相比，250、333、500、1500mg/kg剂量组均能提高NK细胞活性，且差异显著（p<0.05）。以上结果表明，灵芝破壁孢子粉具有增强机体免疫力作用。
对增强免疫力的破壁灵芝孢子粉保健胶囊（以灵芝为主要原料，辅以维生素C的保健食品）进行试验评价，选用SPF级雄性Balb/c小鼠，进行增强免疫力功能评价实验。试验设333mg/（kg•bw）、667 mg/（kg•bw）、1000 mg/（kg•bw）组（分别相当于人体推荐量的10,20,30倍）及对照组，进行增强免疫力相关实验。实验结果：对小鼠体重的影响，三个剂量组中期体重和结束体重与对照组比较，均无显著性差异（p＞0.05）；对小鼠脏器/体重比值的影响，各剂量分别与对照组相比，其脾脏/体重比值、胸腺/体重比均无显著差异（p＞0.05）；对小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响，高剂量组足跖肿胀度高于对照组有显著差异（p＜0.05）；ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验（MTT法）中，中、高剂量组光密度差值高于对照组有显著差异（p＜0.01）；对小鼠抗体生成细胞的影响，高剂量组与对照组相比，其抗体生成细胞数增多有显著性差异（p＜0.01）；对小鼠NK细胞活性的影响，中、高剂量组分别与对照组相比，其NK细胞活性率显著提高均有显著性差异（p＜0.01）。据以上结果可知破壁灵芝孢子粉保健胶囊具有增强免疫力的功效。提示灵芝破壁孢子粉具有增强免疫力的功能。
综上所述，灵芝破壁孢子粉能够通过增强体液免疫功能、细胞免疫功能、巨噬细胞的吞噬功能和NK细胞活性来提高机体免疫力。灵芝在《可用于保健食品的真菌菌种名单》中，药典规定灵芝的用量为6-12g/d，本产品灵芝破壁孢子粉推荐日服用量是2g，是安全有效服用剂量。
综上所述，本发明能有效提高服用者的免疫功能，适用于免疫力低下人群，生物利用度高，服用、携带方便，投入市场后潜力巨大，具有良好的市场前景。
以上所述仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构变换，或直接或间接运用附属在其他相关产品的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。