抗微生物组合物以及其在食品保存中的用图_2

文档序号:9691889阅读:来源:国知局
面,本发明涉及组合物,如抗微生物组合物或食物防腐剂,其包含、基 本上由以下组成或由以下组成:
[0062] (i)1125-31875U/100g葡萄糖氧化酶(GOD),优选 1500-25500U/100g G0D;
[0063] (ii)30000-1562500U/100g乳过氧化物酶(LP),优选40000-1250000U/100g LP;
[0064] (iii) 1 · 275-6 · 25wt % 的硫氰酸根(SCN),优选 1 · 7-5 · Owt % 的SCN;以及
[0065] (iv)0-37.5wt%的葡萄糖,优选0_30wt%的葡萄糖。
[0066] 在一种实施方式中,此组合物包含0.075至2.125,优选0.1至1.7wt %的G0D。在另 一种实施方式中,此组合物包含〇 · 03至1 · 57wt%的LP,优选0 · 04至1 · 25wt%的LP。在一种优 选实施方式中,此组合物包含〇. 075-2.125wt %的GOD,优选0.1-1.7wt %的GOD,以及0.03-1 · 57wt % 的 LP,优选 0 · 04-1 · 25wt % 的 LP。
[0067]按照另一个方面,本发明涉及一种组合物,如抗微生物组合物或食物防腐剂,其包 括、基本上由以下组成、或由以下组成:
[0068] (i)0 · 075-2 · 125wt% 的葡萄糖氧化酶(GOD),优选0 · 1-1 · 7wt% 的GOD;
[0069] (i i) 0 · 03-1 · 57wt % 的乳过氧化物酶(LP),优选0 · 04-1 · 25LP;
[0070] (iii) 1 · 275-6 · 25wt % 的硫氰酸根(SCN),优选 1 · 7-5 · Owt % 的SCN;以及
[0071] (iv)0-37.5wt%的葡萄糖,优选0_30wt%的葡萄糖。
[0072] 以下详细描述如上所述的特别优选的组合物,其包含:
[0073] -0 · 5-1 · Owt %,优选0 · 75wt % 的GOD; I · 0-1 · 5wt %,优选I · 25wt % 的LP; 3-7wt %, 优选5wt%的SCN;25_35wt%,优选30wt%的葡萄糖;或
[0074] -0 · 5-1 · Owt %,优选0 · 75wt % 的GOD ; 1 · 0-1 · 5wt %,优选 1 · 25wt % 的LP; 1 · 4-2wt%,优选1.7wt%的SCN;15_25wt%,优选20wt%的葡萄糖;或
[0075] -1.4-2¥七%,优选1.7¥七%的600;0.03-0.05¥七%,优选0.04¥七%的1^;1.4-2¥七%, 优选1.7*1:%的301'1;小于1¥1:%,优选(^1:%葡萄糖。
[0076]在一种实施方式中,如本文所描述的组合物包含至少0.05wt %的葡萄糖,优选至 少O.lwt% 的葡萄糖,如例如 0·05、0·1、0·2、0·3、0·4、0·5、1、2、3、4、5、7、10、15、20、25、30、 或35wt %的葡萄糖。在一种实施方式中,如本文所描述的组合物包含0.05至37.5wt %的葡 萄糖,优选〇. 1至35wt%的葡萄糖。
[0077]葡萄糖氧化酶(3-D-葡萄糖:氧1-氧化还原酶;G0D)是氧化还原酶,其催化葡萄糖, 尤其是β-D-葡萄糖至过氧化氢和D-葡糖酸-δ-内酯的氧化。鉴于其,当在本文中提及葡萄糖 时,尽管不是排外地,优选指β-D-葡萄糖。如在本文中所使用的,术语葡萄糖氧化酶是指功 能性葡萄糖氧化酶、二聚体以及包括需要的氧化还原辅因子(例如FAD),即,具有可检测的 催化活性的葡萄糖氧化酶。GOD可以获自各种微生物的和非微生物的来源,其中其分离自青 霉属、曲霉属(尤其是黑曲霉)和酵母属或重组获得。在一种优选实施方式中,GOD获自黑曲 霉,优选发酵获得的。优选地,GOD具有10000至20000U/g的活性,更优选15000U/g或约 15000U/g。如本文所定义的,GOD的一个单位是每分钟氧化1微摩尔β-D-葡萄糖的酶量(mg), 通过在37°C和pH 7下在500nm处的吸收差所测得。在一种优选实施方式中,如本文所描述的 GOD活性是10至20U/mg G0D,最优选15U/mg GOD或约15U/mg G0D。在一种实施方式中,GOD可 以获自 Amano Enzyme Inc. 〇
[0078] 乳过氧化物酶(过氧化氢氧化还原酶;LP)是酶的血红素过氧化物酶家族的成员, 并且通过过氧化氢来催化许多无机和有机底物的氧化。如在本文中所使用的,术语乳过氧 化物酶是指功能性乳过氧化物酶,包括所需要的血红素辅因子,即具有可检测的催化活性 的乳过氧化物酶。LP可以获自各种微生物的和非微生物的来源,其中其分离自牛乳或重组 获得的。优选地,LP具有500000至1500000U/g的活性,更优选1000000U/g或约1000000U/g。 如本文所定义的,LP的一个单位是在pH 5.0和37°C下由ABTS(2,2'-连氮基二(3-乙基苯并 噻唑啉-6-磺酸))的氧化所引起的吸光度(A412)/分钟的初始增加,表示为每mg的乳过氧化 物酶样品。在一种优选实施方式中,如本文所描述的LP活性是500至1500U/mg LP,最优选 1000U/mg LP或约 1000U/mg LP。在一种实施方式中,LP可以获自 Amano Enzyme Inc.。
[0079] 硫氰酸根(thiocyanate ),还被称为氰基次磺酰胺(cyanosulf anide)或SCN'是硫 氰酸的共辄碱。硫氰酸根是阴离子。根据本发明的组合物可以包含硫氰酸根阴离子,但还可 以包含硫氰酸盐,优选硫氰酸钾或硫氰酸钠,最优选硫氰酸钠。在一种优选实施方式中,如 本文所描述的组合物包含硫氰酸盐。如本文中所指定的硫氰酸根的浓度或量优选指硫氰酸 盐,优选硫氰酸钠盐的浓度或量。
[0080]应当理解的是,当提及wt%时,其是被视为这样的浓度,其被确定为成分的量,单 位为克/100克包含上述成分的组合物(即Wt/wt% )。另外,当提及ppm(份/百万份)时,其同 样基于重量。例如,IOOppm等于O.Olwt%、或100mg/kg。
[0081 ]如在本文中所使用的,如上所述,基本上由LPS成分GOD、LP、SCN'以及可选的葡萄 糖组成的组合物是指这样的组合物,其并不含有另外的活性组分。尤其是,上述组合物并不 含有另外的酶或底物,其催化、导致、产生或有助于生成OSCN'上述组合物也不含有另外的 抗微生物组分,或至少并不含有在它们存在于组合物中的浓度下充当抗微生物组分的另外 的组分。这样的组分的实例包括但不限于卤素离子如例如碘离子或溴离子,乳铁传递蛋白 (乳铁蛋白,Iactoferrin),溶菌酶,不同于LP的过氧化物酶(例如髓过氧化物酶),不同于 GOD的氧化还原酶(其导致生成过氧化氢(例如半乳糖氧化酶)),抗生素等。
[0082]在一种实施方式中,本发明涉及如本文所描述的组合物,进一步含有一种或多种 (惰性)赋形剂或(惰性)填充剂或载体。如在本文中所使用的,在另外的成分的上下文中,术 语惰性的是指这样的成分,其不具有或以其它方式影响在如本文所描述的组合物中LPS成 分的抗微生物作用。因此,相对于如本文所描述的组合物的抗微生物作用,赋形剂或填料是 中性的。在一种优选实施方式中,如本文所描述的组合物进一步包含蔗糖。
[0083]如本文所描述的组合物基本上是抗微生物组合物。当提到如本文所描述的组合物 的抗微生物作用时,应当理解的是,上述作用可以包括预防或延缓微生物繁殖(即促进微生 物停滞),以及替代或另外地杀死微生物。抗微生物作用可以使得微生物不能够繁殖、吸收 营养物或释放代谢物。通过举例的方式,如本文所述的抗微生物作用可以是抑菌和/或杀菌 作用。应当理解的是,当提到如本文所描述的食物防腐剂时,这样的食物防腐剂是被视为抗 微生物组合物。
[0084] 因此,在一种实施方式中,本发明涉及抑菌和/或杀菌组合物,其包含、基本上由以 下组成、或由以下组成:
[0085] (i)1125-31875U/100g葡萄糖氧化酶(GOD),优选 1500-25500U/100g G0D;
[0086] (ii)30000-1562500U/100g乳过氧化物酶(LP),优选40000-1250000U/100g LP;
[0087] (iii) 1 · 275-6 · 25wt % 的硫氰酸根(SCN),优选 1 · 7-5 · Owt % 的SCN;以及
[0088] (i V) 0-37 · 5wt %的葡萄糖,优选0_30wt %的葡萄糖。
[0089] 在一种实施方式中,该组合物包含0.075至2.125,优选0.1至1.7wt %的G0D。在另 一种实施方式中,该组合物包含〇. 03至1.57wt%的LP,优选0.04至1.25wt%的LP。在一种优 选实施方式中,该组合物包含〇. 075-2.125wt %的GOD,优选0.1-1.7wt %的GOD,以及0.03-1 · 57wt % 的 LP,优选 0 · 04-1 · 25wt % 的 LP。
[0090]按照另一种实施方式,本发明涉及抑菌和/或杀菌组合物,其包含、基本上由以下 组成或由以下组成:
[0091] (i)0 · 075-2 · 125wt% 的葡萄糖氧化酶(GOD),优选0 · 1-1 · 7wt% 的GOD;
[0092] (i i) 0 · 03-1 · 57wt % 的乳过氧化物酶(LP),优选0 · 04-1 · 25LP;
[0093] (i i i) 1 · 275-6 · 25wt % 的硫氰酸根(SCN),优选 1 · 7-5 · Owt % 的 SCN;以及
[0094] (i V) 0-37 · 5wt %的葡萄糖,优选0_30wt %的葡萄糖。
[0095] 如本文所描述的组合物的抗微生物作用针对各种细菌,革兰氏阳性和革兰氏阴性 细菌,病毒、酵母、和霉菌。在一种优选实施方式中,如本文所描述的组合物的抗微生物作用 针对细菌,革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌。因此,在一个方面,本发明涉及本文所描述的组 合物用于杀死和/或抑制如下文所定义的微生物种类的生长和/或繁殖的用途。
[0096] 例如但并非限制,本文所描述的组合物可有效地对抗以下细菌:不动杆菌属、嗜水 气单胞菌、短芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、洋葱伯克霍尔德氏 菌、空肠弯曲杆菌、黄褐二氧化碳嗜纤维菌、干燥棒杆菌、阴沟肠杆菌、大肠杆菌、流感嗜血 杆菌、幽门螺杆菌、产酸克雷伯氏菌、肺炎克雷伯氏菌、军团菌属、单核细胞增生李斯特氏 菌、藤黄微球菌、耻垢分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、奈瑟氏球菌属、铜绿假单胞菌、绿脓假单胞 菌、沙门氏菌属、生痰月形单胞菌、索氏志贺氏菌、产气消化球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链 球菌、粪链球菌、变异链球菌、沃林氏菌属、野油菜黄单胞菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌。
[0097] 例如但并非限制,本文所描述的组合物可有效地对抗以下病毒:单纯疱疹病毒、免 疫缺陷病毒、呼吸道合胞病毒、艾柯病毒11 (Echovirus 11)、流感病毒。
[0098] 例如但并非限制,本文所描述的组合物可有效地对抗以下酵母菌和霉菌:白色念 珠菌、黑曲霉、香蕉炭疽病菌、胶孢炭疽菌、芒果蒂腐病菌、串珠镰刀菌、尖孢镰刀菌、深红类 酵母菌、纯黄丝衣菌(Byssochlamys fulva)、核盘霉。
[0099] 如本文所描述的抗微生物作用,如如本文所描述的组合物的抑菌或杀菌效应以及 食品保存能力可以直接或间接地通过本领域中已知的技术来确定。通过举例的方式,可以 进行平板计数,其中可以随着时间的推移来监测微生物演化(例如微生物的集落形成单位 (CFU)/食品量)。还可以通过测量有效的抗微生物产物次硫氰酸根(hypothiocyanate) (0SCPO (其是通过LPS的作用产生的)的生成(浓度或浓度演化)间接量化如本文所描述的 抗微生物活性。oscrr的浓度可以与抗微生物效果直接相关。可以通过本领域中已知的技术 如比色测定(例如Nbs测定,其基于通过OSCrr离子,将有色(5,5)_二硫代二-2-硝基苯甲酸 (Nbs)氧化至无色(Nbs)2),来测量0SCN-。
[0100] 在一种实施方式中,本发明涉及如本文所描述的组合物或其用途,其中所述组合 物防止、延迟和/或抑制微生物繁殖和/或生长,优选如本文别处所描述的微生物的繁殖和/ 或生长。在一种实施方式中,相比于没有添加如本文所定义的组合物的繁殖和/或生长,如 本文所描述的组合物预防、延缓或抑制微生物生长至少10 %,优选至少20 %、30 %、40 %、 50%、60%、70%、80%、90%、100%、或更大,如更优选200%、300%、400%、500%或更大。 如在本文中所使用的,预防、延迟或抑制微生物生长一定百分比是指为达到特定微生物浓 度(例如CFU/ml或CFU/g)所需要的时间的增加。例如,10 %的延迟意味着它需要10 %的更长 时间来达到特定微生物浓度。此实施方式例如是指抑菌效果,如如本文所描述的组合物的 抑菌效果。
[0101]在进一步的实施方式中,本发明涉及如本文所描述的组合物或其用途,其中所述 组合物杀死微生物,优选如本文别处所描述的微生物。在一种实施方式中,如本文所描述的 组合物杀死至少10%,优选至少20%、30%、或40 %,更优选至少50 %、60 %、或70%,最优选 至少80%或90%,如95、96、97、98、99%或更大。此实施方式例如是指微生物杀灭效果,如如 本文所描述的组合物的杀菌效应。
[0102] 在一种实施方式中,本发明涉及如本文所描述的组合物,其中在LP和G0D(均以单 位表示)之间的比率是1:1至1000:1,优选1.5:1至850:1,如2:1至700:1、5:1至300:1、或10: 1至 100:1,更优选20:1至75:1,甚至更优选25:1至50:1,如30:1、35:1、40:1、或45:1。
[0103] 在另一种实施方式中,本发明涉及如本文所描述的组合物,其中在GOD和LP(两者 均以mg为单位表示)之间的比率是1:30至100:1,优选1:20至70:1,如1:10至50:1、1:5至20: 1、1:3至 10:1、或1:2至5:1,更优选1:1 至3:1,甚至更优选1.35:1 至2.5:1,如1.4:1、1.6:1、 1.8:1、2.0:1、2.2:1、或2.4:1〇
[0104] 在另一种实施方式中,本发明涉及如本文所描述的组合物,其中在GOD(表示为单 位)和SCN-(以g为表示)之间的比率是100:1至30000:1,优选180:1至25000:1,如200:1至 20000:1、400:1 至15000:1、或600:1 至10000:1,更优选800:1 至6000:1,甚至更优选900:1至 5100:1,如1000:1、2000:1、3000:1、4000:1、或5000:1。
[0105] 在另一种实施方式中,本发明涉及如本文所描述的组合物,其中在LP(表示为单 位)和SCN-(以g为表示)之间的比率是5000:1至1250000:1,优选4800:1至1225500:1,如 5000:1至 1000000:1、10000:1至 750000:1、或 15000:1 至 500000:1,更优选 20000:1至 300000 :1,甚至更优选23000:1 至250000:1,如25000:1、50000:1、100000:1、150000:1、或 200000:1〇
[0106] 在一种优选实施方式中,本发明涉及如本文所描述的组合物,其中在LP和GOD(均 以单位来表示)之间的比率是25:1至50:1,以及在LP(以单位来表示)和SCr(以g表示)之间 的比率是23000:1 至250000:1。
[0107] 可以以任何方式,如干燥组合物、液
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