专利名称：一种辅助治疗原发性肝癌的中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物，具体来说是一种辅助治疗原发性肝癌的中药组合物，本发明还涉及该中药组合物的制备方法。
背景技术：
原发性肝癌是一种常见的恶性肿瘤之一，它有发作快、转移快、死亡率高、生存期短的特点，严重危害人类的健康和生命，人们称之为“癌王”。目前治疗它的方法主要是手术、放疗和化疗，其他还有免疫调节和中药治疗。但因各种方法的疗效都不理想，而趋向各种疗法的配合，采取综合治疗。这样可以减轻患者病痛、提高生活质量、延长寿命等。中医治疗原发性肝癌是通过辨病和辨证而施治。有些肝癌病人中医辨证为“瘀毒蕴结证”。治疗的药物有西黄丸、小金丹等；有时也可配合放化疗法，可使部分病人症状改善、痛灶缓解率提高。
鉴于目前没有更好疗效的治疗恶性肿瘤的药物和方法，所以仍需求一种结合化疗更好辅助治疗原发性肝癌的内服中药。本发明人经过动物试验和多年临床验证意外地发现了一种结合化疗有效治疗原发性肝癌的中药组合物，从而完成了本发明。
发明内容
本发明的目的就是发明内容提供一种可以结合化疗有效辅助治疗原发性肝癌的中药组合物。
本发明的另外一个目的就是提供该中药组合物的制备方法。
中医认为肝癌是因瘀毒蕴结所致，在这种中医认识的基础上，确立治疗法则为化瘀解毒、消肿散结和益气补血。本发明的组合物就是在该治疗法则的指导下，选用中药进行组合。选用山慈菇和莪术为君药，因为山慈菇甘寒，具有散结化瘀和消肿的功效，莪术辛温，具有行气破血和消肿止痛的功效。
在本发明的一种实施方案中，本发明所述组合物的有效成分是由山慈菇、莪术为君药，消肿散结止痛中药作臣药，以及益气补血中药作佐药。优选这些组份的用量为山慈菇5-8％、莪术15-25％、消肿散结止痛中药22.1-36.5％和益气活血中药35-55％。
其中所述的消肿散结止痛中药是指具有消肿散结和止痛功效的中药材，例如，但不限于马钱子、蜂房、鸦胆子、人工牛黄、僵蚕、冰片等。优选消肿散结止痛中药为马钱子、蜂房、鸦胆子、人工牛黄、僵蚕、冰片。其中马钱子具有消肿散结和通络止痛的功效，蜂房具有攻毒消肿的功效，鸦胆子具有清热燥湿解毒的功效，人工牛黄具有化瘀清心的功效，僵蚕具有解毒祛风的功效，冰片消肿止痛。它们之间的比例为马钱子、蜂房、鸦胆子、人工牛黄、僵蚕、冰片之间的重量比为13∶50∶50∶12∶80∶3。
其中所述的益气补血药是指具有益气和补血功效的中药材。这些中药材可以是，例如但不限于丹参、黄芪、当归等，优选丹参、黄芪、当归，其中丹参具有活血化瘀的作用，黄芪补气，当归活血补血。它们之间的比例为丹参、黄芪和当归之间的重量比为1∶2∶1。
本发明中药组合物优选其有效成分的制备原料及其用量为山慈菇5-8％、莪术15-25％、马钱子1-3％、蜂房5-8％、鸦胆子5-8％、人工牛黄1-2％、僵蚕10-15％、丹参10-15％、黄芪15-25％、当归10-15％和冰片0.1-0.5％。
更优选，本发明中药组合物的有效成分的制备原料及其用量为山慈菇6.8％、莪术21.7％、马钱子1.8％、蜂房6.8％、鸦胆子6.8％、人工牛黄1.6％、僵蚕10.8％、丹参10.8％、黄芪21.7％、当归10.8％和冰片0.4％。
制备本发明中药组合物的有效成分的原料及其用量最佳为山慈菇50克、莪术160克、马钱子13克、蜂房50克、鸦胆子50克、人工牛黄12克、僵蚕80克、丹参80克、黄芪160克、当归80克和冰片3克。
本发明中药组合物的有效成分的制备可以是将上述中药原料一起水煎，过滤，得到上述原料的水提液；或者可以将上述原料用60-95％的乙醇回流提取，回收乙醇制得醇提物。更优选将人工牛黄和冰片研成细粉，将马钱子、60-70％莪术和山慈菇研成细粉，将当归与30-40％莪术提取挥发油和水煎液，将黄芪、丹参、鸦胆子、蜂房、僵蚕粉碎成粗粉，用60-95％乙醇提取，回收乙醇，与当归和部分莪术的水溶液合并得到浓缩浸膏，然后混合上述药粉、挥发油和浓缩浸膏得到。
本发明中药组合物的有效成分优选如下制备将人工牛黄和冰片研成细粉；马钱子、69％的莪术与山慈菇研成细粉；将当归与31％的莪术用水蒸馏，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；其余的黄芪、丹参、鸦胆子、蜂房、僵蚕粉碎成粗粉，用60％乙醇渗漉，收集渗漉液；将渗漉液回收乙醇，与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩并干燥成浸膏粉，加入马钱子、山慈菇和莪术的细粉和适量淀粉，混合，加入人工牛黄、冰片和上述挥发油，混匀。
本发明的中药组合物可以将其有效成分和/或药学上可接受的辅料一起制成各种常用剂型，如片剂、胶囊、颗粒剂、丸剂、口服液等。
本发明的中药组合物具有化瘀解毒、消肿散结和益气补血的功效，可用于配合化疗治疗原发性肝癌。
实施例1本发明口服液的制备称取下列重量的原料山慈菇50克、莪术150克、马钱子10克、蜂房50克、鸦胆子50克、人工牛黄10克、僵蚕100克、丹参100克、黄芪100克和当归100克；将水煎煮两次，过滤，合并滤液，浓缩，加入矫味剂蜂蜜和稀释剂水制成口服液。
实施例2本发明胶囊剂的制备称取下列重量的原料山慈菇50克、莪术160克、马钱子13克、蜂房50克、鸦胆子50克、人工牛黄12克、僵蚕80克、丹参80克、黄芪160克、当归80克和冰片3克；将人工牛黄和冰片研成细粉；马钱子、110克的莪术与山慈菇研成细粉；将当归与49克的莪术用水蒸馏，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；其余的黄芪、丹参、鸦胆子、蜂房、僵蚕粉碎成粗粉，用60％乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液；将渗漉液回收乙醇，与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩并干燥成浸膏粉，加入马钱子、山慈菇和莪术的细粉和适量淀粉，混合，制粒，在60℃烘干，放冷，加入人工牛黄、冰片和上述挥发油，混匀，装入胶囊，制成1000粒。
实施例3本发明片剂的制备称取下列重量的原料山慈菇80克、莪术250克、马钱子30克、蜂房80克、鸦胆子80克、僵蚕150克、丹参150克、黄芪250克和当归150克；将人工牛黄研成细粉；马钱子、172克的莪术与山慈菇研成细粉；将78克莪术、蜂房80克、鸦胆子80克、僵蚕150克、丹参150克、黄芪250克和当归150克用70％的乙醇回流提取，回收乙醇，得到浓缩浸膏，将浓缩浸膏中加入上述药粉，再加入50％乙醇制粒，再加入0.5％硬脂酸镁，压片。
实施例4本发明丸剂的制备称取下列重量的原料山慈菇60克、莪术200克、马钱子20克、蜂房70克、鸦胆子70克、人工牛黄15克、僵蚕130克、丹参130克、黄芪200克、当归130克和冰片4克；将人工牛黄和冰片研成细粉；马钱子、138克的莪术与山慈菇研成细粉；将当归与62克的莪术用水蒸馏，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；其余的黄芪、丹参、鸦胆子、蜂房、僵蚕粉碎成粗粉，用60％乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液；将渗漉液回收乙醇，与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩并干燥成浸膏粉，加入马钱子、山慈菇和莪术的细粉，混合，加入人工牛黄、冰片和上述挥发油，混匀，每100g加入炼蜜100-120g制成小蜜丸或大蜜丸。
实施例5本发明的口服液按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料山慈菇50克、莪术150克、马钱子10克、蜂房50克、鸦胆子50克、人工牛黄10克、黄芪100克和当归100克。
以下通过试验阐述该中药组合物的功效。
试验材料药物本发明胶囊0.27g/粒。临用前用水配成相应浓度混悬液。
动物ICR纯系小鼠和C57纯系小鼠，分别由上海Sippr-BK试验动物供应有限公司和中科院上海药物研究所，饲养于福州医学院基础部动物实验室。
实验例1抗癌试验1.小鼠S180取ICR纯系小鼠每批50只，21±3g，性别相同。按体重随机分为5组，每组10只。其中3组作为治疗组，于接种瘤块前3日分别给予本发明胶囊的混悬液4％、2％、1％、0.4ml/10kg，灌胃，每日一次，连续10日。一组作为阳性对照组，于接种S180的第3-5日分别灌胃环磷酰腺(CTX)50mg/kg。另一组为阴性对照组，以水0.4ml/10g替代灌胃。疗程结束次晨将小鼠处死，剖瘤称重，按下列公式计算抑瘤率抑瘤率(％)＝(阴性对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/阴性对照组平均瘤重×100％结果显示，本发明中药组合物0.4-1.6g/kg，接种S180前三天，接种后9天连续灌胃及12天确有显著抑制瘤块增长作用。其中大剂量组的抑瘤率三批分别为5 3.34％、56.68％和62.69％。与阴性对照组比较差异有显著意义(P＜0.001)。
2.小鼠子宫颈癌U14分组与给药和S180试验相同。但疗程延长2天。接种瘤块后继续给药11天，次晨剖取瘤块称重统计。结果显示本发明中药组合物对U14瘤重增长有非常显著的抑制作用。其中大剂量级抑瘤率达50.4-56.22％(P＜0.001)，小剂量组最低抑瘤率达28.31％(P＜0.01)。试验重复性好。
3.小鼠Lewis肺癌取C57纯系雄性小鼠50只，18.5±1.5g。随机分为5组，每组10只，按常规给每只小鼠左腋下接种Lewis肺癌小块后，阳性对照于1.5天，灌胃CTX50mg/kg一次，治疗组每日分别灌胃0.4、0.8和1.6g/kg，连续10日，阴性对照只灌胃水0.4mg/kg，12天。处死所有小鼠，剖取瘤块，称量进行统计。结果显示本发明中药组合物对小鼠Lewis肺癌的生长有显著的抑制作用。剂量为0.4-1.6g/kg，连续灌胃10日。抑瘤率达20.77-49.78％(P＜0.05)。
4.黑色素瘤雌性C57纯系小鼠50只，体重19±2.0g，随机分为5组，每组10只，分别给药情况与Lewis肺癌相似，但疗程延长至接种肿瘤后20天。并于第21天剖取瘤块称重。结果显示，在剂量0.4-1.6g/kg连续应用时，有明显抑瘤作用(P＜0.05)。
5.体外抑瘤试验分别采用台阶酚兰排染法和中性红活染法对悬浮培养和帖壁生长的4种人癌细胞进行观察，计算半数抑瘤浓度(TC50)。试验前药液经除菌漏斗(孔径0.22μ)过滤，取滤液加入微孔板，每孔0.18ml培养液加2μl药液(对照组加灭菌生理盐水)，每剂量组3孔，与药物接触24小时后计算抑瘤率。并按直接回归求IC50。结果显示，本发明中药组合物除菌滤液对所试胃癌、肝癌、白血病细胞的生长有一定的直接抑瘤作用。
实验例2对小鼠血液白细胞计算和免疫器官重量的影响ICR纯系雄鼠50只，17.5-19g随机分为5组，每组10只。阳性对照组给环磷酰胺50mg/kg，于第1日、第5日各灌胃一次。阴性对照组以水代药。有2组分别给本发明中药组合物0.8g/kg和1.6g/kg，给药10天。另一组用CTX50mg/kg、第1、5天灌胃加0.8g/kg，用药10天。
结果显示单用本发明中药组合物对白细胞、胸腺、脾无明显抑制，而阳性对照组则显著抑制，联合用药，则明显对抗抑制。
实验例3碳粒廓清试验雄性ICR纯系小鼠50只，18-23g，随机分为5组，每组10只。各组用药量同试验(二)。连续给药8天，末次给药后1小时，尾静脉注射胶体碳溶液(1.6％、Lmg/10g)。分别经1和5分钟，取血20ml，加入0.1％碳酸钠2ml中静置6小时，放入大于21分光光度计测OD值，计算K值(廓清指数)。结果显示本发明中药组合物对小鼠碳廓清单没有明显效应，CTX则抑制明显。
实验例4小鼠血清溶血素形成试验ICR纯系小鼠雄性50只，17-20g，随机分为5组，每组10只。给药方案同试验(三)。于给药的第三天，每鼠腹腔注射10％SRBC0.2ml免疫，阳性对照组以免疫次日起给予CTX灌胃5天。各组于末次给药后1小时眼眶取血，分离血清，并以生理盐水300倍稀释，取稀释的血清5％SRBC和10％肠鼠血清各0.5ml混匀，空白对照组以生理盐水取代血清。37℃湿育30分钟后离心5分钟，取上清液测OD50，半数溶血素HC50＝样品OD值/半数溶血OD值×血清稀释倍数。计算各管溶血素浓度。结果显示CTX明显抑制血清溶血素生成，本发明中药组合物则没有明显抑制。两药联合应用，对血清溶血素的生产有抑制作用存在，但有减弱。
实验例5迟发超敏反应ICR纯系小鼠雄性50只，18-21g，随机分为5组，每组10只。给药方案同试验(四)。治疗组预先灌胃给药3天，然后给所有受试鼠左后足垫皮下注射10％SRBC50μl免疫。治疗组继续给药8天，阳性对照组灌胃CTX20mg/kg5天。免疫后第8天，于末次给药后1小时再以10％SBC左右足垫注射攻击，用千分卡测量攻击前以及攻击后6小时左后足垫的厚度，并以二者之差值为指标进行统计。结果显示CTX对DTH反应显著抑制。本发明中药组合物无明显影响。二者合用，其抑制作用缓解(P＜0.001)。
实验例6植物血凝素诱导的淋巴细胞增值取ICR纯系小鼠雄性40只，18-21g，随机分为5组，每组8只。按试验(二)给药方案给药10天。于末次给药后1小时处死。在无菌条件下取一小块脾组织于Hamk液中，用玻璃匀浆器制成匀浆，过滤后混悬液于含肝素6UI/ml、青霉素100IU/ml、链霉素100IU/ml、0.3％谷胺酰胺和10％小牛血清的RPMI 1640溶液中，调整细胞浓度为2×107/ml，每管加入脾细胞悬液2ml，PHA100μg/ml，塞紧管口，于37℃培养48小时，加入HS-TDRVuDI/ml后，继续培养24小时。离心取出清液，加入生理盐水冲洗，再以2％三氯醋酸、95％乙醇、己醚溶液并抽滤后，在60℃烘干。加入含5ml闪烁液的瓶中，以液闪法测CPm值。结果显示阳性对照组药CTX显著抑制PHA诱导的脾淋巴细胞作用，本发明中药组合物则无抑制。二药合用，抑制亦不增强。
实验例7本发明中药组合物辅助治疗原发性肝癌的临床试验一般资料收治原发性肝癌病人325例。随机分为中药组，介入化疗组和中药加介入化疗组。三组在性别、年龄、中医辨证、临床分组和生活质量诸方面均有可比性(P＞0.05)。
病例选择标志1.符合原发性肝癌诊断a肝组织病理学诊断原发性肝或肝外组织的组织学检查证实为肝细胞肝癌患者。
b临床诊断AFP＞400ng/ml，持续4周以上，并排除妊娠、活动性肝病、生殖腺胚胎源性肿瘤和转移性肝癌；影像学检查有明确肝内实质性占位病变，排除血管瘤和转移性肝癌，并有下列条件之一，AFP＞200mg/ml，或无黄疸而AKP/r-GT明显增高；或远处有明确转移病先灶、血性腹水，查出癌细胞者，或明确的乙型肝炎标记阳性的肝硬化。
2.符合中医的“瘀毒蕴结”证的辨证标准右胁下积块，按之质硬，右胁肋胀痛或刺痛；或有低热、口干、口苦、舌有瘀斑或紫暗，舌苔白或薄黄，脉眩滑；或强数或眩细。
3.纳入符合原发性肝癌诊断并符合瘀毒蕴结证者10-17岁患者，肝功能基本正常，生活质量在卡氏记分60分以上者；自愿接受本发明中药组合物治疗者，并排除孕妇、哺乳期妇女患者；生活不能自理者，有严重心、脑、肾肝病患者；治疗一个月内接受手术和放、化疗者；肝癌患者，病灶不能测量者等。
安全性检测(血象便常规、心电图及肾功能检查)及疗效性检测(临床症状用B超或CT检查肿瘤大小、肝功能、甲胎蛋白、生活质量、免疫指标和化疗减毒作用)等。并观察不良反应是否发生。
试验方法将符合标准的325例病人随机分为3组。中药组125例用本发明中药组合物，每次5粒，每日4次。化疗对照组100例。按管化疗(氢胺咯啶750mg/ml、卡铂200mg/ml、阿霉素60mg/ml、栓塞剂用40％碘油8-10ml，第二个月重复使用)。中药加化疗组用药同上述两药，均2个月为1疗程，疗程中不用其他药物疗法。疗程结束，再观察一个月复查。
疗效判定标准瘤体的客观标准完全缓解(CR)，可见肿瘤完全消失并持续1个月以上。部分缓解(PR)肿瘤两个最大相同互垂直径乘积缩小达50％以上，增大不足25％，并持续一个月以上。进展(PD)肿瘤两个最大相互垂直径增大超过25％。
试验结果a 瘤体客观疗效中药组125例，PR8例，SD83例，PD34例；中药加化疗组CR1例，PR51例，SD35例，PD13例；化疗组PR29例，SD28例，PD43例，三组相比，中药加化疗组疗效优于单纯中药组和化疗组。
b 症状缓解中药加化疗组优于单纯中药组和化疗组。病人的生活质量也是如此。中药对肝癌患者免疫功能有一定的保护作用，能对抗化疗药对免疫功能的抑制，中药也能够降低AFP的水平。
c.在试验中，用中药的患者不良反应相对轻和少。
权利要求
1.一种辅助治疗原发性肝癌的中药组合物，它是由有效成分和/或药学上可接受的载体组成，其特征在于它所含的有效成分是由下列原料制成的山慈菇5-8％、莪术15-25％、消肿散结止痛中药22-37％和益气活血中药35-55％。
2.按照权利要求1所述的中药组合物，其中所述的消肿散结止痛中药选自马钱子、蜂房、鸦胆子、人工牛黄、僵蚕、冰片中的一种或多种，它们之间的重量比为13∶50∶50∶12∶80∶3。
3.按照权利要求1所述的中药组合物，其中所述的益气活血中药选自丹参、黄芪和当归中的一种或多种，它们之间的重量比为1∶2∶1。
4.按照权利要求1-3中任何一项所述的中药组合物，其中制备有效成分的原料及其用量为山慈菇5-8％、莪术15-25％、马钱子1-3％、蜂房5-8％、鸦胆子5-8％、人工牛黄1-2％、僵蚕10-15％、丹参10-15％、黄芪15-25％、当归10-15％和冰片0.1-0.5％。
5.按照权利要4所述的中药组合物，其中制备有效成分的原料及其用量为山慈菇6.8％、莪术21.7％、马钱子1.8％、蜂房6.8％、鸦胆子6.8％、人工牛黄1.6％、僵蚕10.8％、丹参10.8％、黄芪21.7％、当归10.8％和冰片0.4％。
6.按照权利要求5所述的中药组合物，其中制备有效成分的原料及其用量为山慈菇50克、莪术160克、马钱子13克、蜂房50克、鸦胆子50克、人工牛黄12克、僵蚕80克、丹参80克、黄芪160克、当归80克和冰片3克。
7.按照权利要求1-6中任何一项所述的中药组合物，它是胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、口服液。
8.权利要求4-6中任何一项所述的中药组合物的制备方法，它包括将上述中药原料一起水煎，过滤，得到上述原料的水提液。
9.权利要求4-6中任何一项所述的中药组合物的制备方法，它包括将上述原料用60-95％的乙醇回流提取，回收乙醇制得醇提物。
10.权利要求4-6中任何一项所述的中药组合物的制备方法，它包括将人工牛黄和冰片研成细粉，将马钱子、60-70％莪术和山慈菇研成细粉，将当归与30-40％莪术提取挥发油和水煎液，将黄芪、丹参、鸦胆子、蜂房、僵蚕粉碎成粗粉，用60-95％乙醇提取，回收乙醇，与当归和部分莪术的水溶液合并得到浓缩浸膏，然后混合上述药粉、挥发油和浓缩浸膏得到。
11.按照权利要求10所述的制备方法，它包括将人工牛黄和冰片研成细粉；马钱子、莪术与山慈菇研成细粉；将当归与剩余的莪术用水蒸馏，收集挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；其余的黄芪、丹参、鸦胆子、蜂房、僵蚕粉碎成粗粉，用60％乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液；将渗漉液回收乙醇，与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩并干燥成浸膏粉，加入马钱子、山慈菇和莪术的细粉和适量淀粉，混合，制粒，在60℃烘干，放冷，加入人工牛黄、冰片和上述挥发油，混匀，装入胶囊，制成1000粒。
全文摘要
本发明公开了一种辅助治疗原发性肝癌的中药组合物及其制备方法。该中药组合物所含的有效成分是选用山慈菇、莪术、消肿止痛中药和益气活血中药制成。本发明的组合物可以是片剂、胶囊、丸剂、颗粒剂和口服液。本发明的中药组合物具有化瘀解毒、消肿散结和益气补血的功效，可用于配合化疗治疗原发性肝癌。
文档编号A61K9/00GK1488392SQ0314619
公开日2004年4月14日 申请日期2003年7月28日 优先权日2003年7月28日
发明者郑伟达 申请人:郑伟达