专利名称：一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切地说本发明涉及一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂及其制备方法。
背景技术：
国际最新统计数据表明，世界上每12秒钟就有1位脑卒中新发病者，每21秒钟就有1人死于脑卒中。卒中，又称中风，即脑血管病，大致分为缺血性卒中(脑梗死)和出血性卒中。脑中风是中老年人常见病，发病率随着年龄增长而增长，近年来40岁以下人群亦有发病，且渐增，多有上升趋势。目前，脑中风肆虐全球，已成为威胁人体健康的头号杀手；由脑中风引起的后遗症也严重的影响了人们的生活质量。
目前，市售的治疗脑中风的药物有“二十五味珍珠丸”、“七十味珍珠丸”、“中风回春丸”、“再造丸”、“脑得生片”、“地奥心血康”、“普尔泰心血活力液”、“舒络清脑灵”，临床实践证明，它们都存在疗效差，治愈率低、疗程长等诸多缺陷。
中药在治疗脑中风及后遗症方面应用越来越多，目前市售的还有复方丹参片，复方丹参片由上海中药二厂于1975年研制，中国药典1977年版、1985年版、1995年版、2000年版和2005年版均有收载。在复方丹参片基础上研制出的剂型有复方丹参胶囊、复方丹参颗粒、复方丹参口服液、复方丹参滴丸、复方丹参气雾剂，虽然在临床上其疗效确切，但疗效慢，治愈期长，依然不能满足脑中风急重病者的需求。
基于现有技术的状况，医学工作者仍在不断地研究药效迅速、作用可靠、治愈率高、稳定性好的新的药物或剂型，为临床治疗脑中风提供新的用药途径。
发明内容
本发明的目的就是克服现有复方丹参药物剂型存在的缺陷，提供一种供注射用的治疗脑中风及后遗症的新药物剂型，即冻干粉针剂，其具有起效迅速、质量稳定、治愈率高、澄明度好和临床应用方便等特点。
本发明的一个目的就是提供一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂。
本发明的另一目的是提供一种制备所述的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂的方法。
本发明的目的是通过如下的技术方案实现的一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，其特征在于其每剂量单位中包含丹参总酚酸钠盐50-600mg三七总皂苷6-100mg冰片 3-24mg增溶剂10-300mg。
优选，本发明的一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，其特征在于其每剂量单位中包含丹参总酚酸钠盐50-300mg三七总皂苷10-80mg冰片 3-15mg增溶剂10-200mg。
本发明冻干粉针剂中的有效成分丹参总酚酸钠盐是由丹参经水煎、水提醇沉等一系列步骤制得。丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参的根，味苦，性微寒，具有活血化瘀，养血安神，凉血排痈和排毒生肌的功效，是中药活血化瘀的常用药物。丹参药材主含脂溶性的二萜类成分和水溶性的酚酸类成分，尚含有黄酮类、三萜类、甾醇等其他成分。水溶性酚酸类单体化合物的药理作用主要有抗血栓作用包括抗血小板作用、抗凝作用、抗血栓形成作用；改善血液循环作用；抗氧化损伤作用。本发明采用的丹参提取工艺，最大可能地提取了酚酸类有效成分，但酚酸类成分，性质不稳定，因此，本发明在丹参的提取与精制步骤中将其制成酚酸钠盐，提高了其稳定性。本发明冻干粉针剂的每剂量单位中，丹参总酚酸钠盐的含量为50-600mg，优选50-300mg，更优选80-200mg。
本发明冻干粉针剂中的有效成分三七总皂苷是由三七经醇提取、树脂吸附和萃取等一系列步骤制得。本发明冻干粉针剂的每剂量单位中，三七总皂苷的含量为6-100mg，优选10-80mg，更优选10-30mg。
本发明冻干粉针剂中的有效成分冰片，本发明冻干粉针剂的每剂量单位中，冰片的含量为3-24mg，优选3-15mg，更优选3-10mg。
本发明冻干粉针剂中的增溶剂可采用聚山梨酯-80、聚氧乙烯蓖麻油的一种或两种的任意混合物，其能使冰片在水中的溶解性提高，从而提高注射剂的澄明度。按本发明冻干粉针剂的每单位剂量计，增溶剂的含量为10-300mg，优选10-200mg，更优选30-100mg。
本发明冻干粉针剂还可以含有冻干赋形剂，其可以是右旋糖苷、甘露醇、乳糖、葡萄糖的一种或几种的任意混合物。
本发明还提供了制备所述的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂的方法，其包括以下步骤1.丹参提取物的制备取丹参药材300-600重量份，加水煎煮，将煎煮液滤过，浓缩滤液，加入乙醇使含醇量为40-60％，冷藏静置20-60小时，滤过，回收乙醇，浓缩，加入乙醇至含醇量为70-90％，冷藏静置20-60小时，滤过，回收乙醇，浓缩，将浓缩液调PH至1-2，用乙酸乙酯萃取1-4次，合并酯液，回收乙酸乙酯，得酯浓缩液，用15-25％碳酸钠溶液萃取该酯浓缩液1-4次，合并碱液，调PH至1-2，再用乙酸乙酯萃取该酸化液1-4次，合并酯液，回收乙酸乙酯制成流浸膏，调流浸膏的PH至6.5-7.0，减压干燥，即得；2.三七提取物的制备取三七药材100-300重量份，用乙醇提取，将提取液滤过，回收乙醇，浓缩，向浓缩液中加入蒸馏水，过大孔树脂柱，蒸馏水洗柱至流出液近无色，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至无醇味，再用水饱和正丁醇萃取1-4次，合并正丁醇层，回收正丁醇，得稠膏，减压干燥，即得；3.注射用冻干粉针剂的制备取冰片6-12重量份，用增溶剂30-180重量份增溶，取丹参、三七提取物加注射用水溶解，再与用增溶剂增溶的冰片混合，加针用活性炭，于30～60℃加热15～45分钟，抽滤后，加入冻干赋形剂，加注射用水，调PH值7.0-8.0，除菌滤过，分装，冻干，即得。
在上述的丹参提取物的制备步骤中，用于调节pH的试剂包括盐酸、氢氧化钠。
在上述的三七提取物的制备步骤中，所用的大孔树脂柱包括D101，D21、AB-8等型号的大孔树脂柱。
本发明的治疗脑中风及后遗症的注射用冻干粉针剂由于采取了特定的工艺步骤诸如对丹参采用了水煎煮、水提醇沉、盐化处理等步骤；对三七采取了醇提、树脂吸附和萃取等步骤，得到了含量较高的水溶性有效成分，同时提高了其稳定性，并且最后将其制成冻干粉针剂，又使其稳定性得到了显著提高。对冰片用少量增溶剂增溶，提高了其稳定性及其注射剂的澄明度。
本发明的治疗脑中风及后遗症的注射用冻干粉针剂具有以下优点质量稳定，避免了药品高热分解，产品质地疏松，加水迅速溶解，含水量低，澄明度高、不易氧化，有利于长期储存，产品剂量准确，外观优良，污染机会少。本发明的供注射用的冻干粉针剂改变了传统复方丹参中药的给药方式，药物直接进入肌肉或血液，发挥药效较快，作用可靠、便于临床应用，尤其是对急重症患者治疗更为有利。
具体实施例方式
下列实施例是为了进一步举例描述本发明，而不是以任何方式限制本发明。
实施例1一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂原料处方丹参360g 三七200g 冰片6g 聚山梨酯-80 60g 甘露醇800g取丹参药材，加水煎煮三次，第一次加8倍量水，煎煮2小时，第二、三次各加6倍量、5倍量水，每次煎煮1.5小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至每毫升含药材1.5-2g，加入乙醇使含醇量为50％，边加边搅拌，冷藏静置40小时，滤过，回收乙醇，浓缩至每毫升含药材1g左右，加入乙醇至含醇量为85％，边加边搅拌，冷藏静置40小时，滤过，回收乙醇，浓缩至每毫升含药材1g左右，浓缩液加适量盐酸调PH至1-2，用乙酸乙酯萃取4次，其用量分别为2、1、1、1倍，合并酯液，回收乙酸乙酯，得酯层浓缩液，用浓度15％碳酸钠溶液萃取酯浓缩液4次，其用量分别为酯浓缩液的1、1/2、1/4、1/4倍，合并碱液，立即加适量盐酸调PH至1-2，再用乙酸乙酯萃取酸化液4次，其用量分别为酸化液的2、1、1、1倍，合并酯液，回收乙酸乙酯制成流浸膏，流浸膏中加适量氢氧化钠调PH至6.8，减压干燥，即得；取三七药材，粉碎为粗粉，分别加8、6、6倍量75％乙醇提取三次，第一次1.5小时，二、三次为1小时，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩至每毫升含药材约3g，浓缩液加适量蒸馏水，过D101大孔树脂柱，蒸馏水洗柱至流出液近无色，再用70％乙醇洗脱，收集醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至无醇味，再用水饱和正丁醇萃取4次，其用量分别为2、1、1、1倍量，合并正丁醇层，回收正丁醇，得稠膏，减压干燥，即得；取冰片，加入聚山梨酯-80，取丹参、三七提取物加适量注射用水溶解，再与用聚山梨酯-80增溶的冰片混合，加0.1％针用活性炭，于60℃加热15分钟，抽滤后，加入甘露醇，加注射用水至2500ml，调PH值7.0-8.0，除菌滤过，分装，冻干，即得。
实施例2一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂原料处方 丹参500g 三七250g 冰片10g 聚山梨酯-8060g 甘露醇850g
取丹参药材，加水煎煮三次，第一次加6倍量水，煎煮2小时，第二、三次各加4倍量、3倍量水，每次煎煮1.5小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至每毫升含药材1.5-2g，加入乙醇使含醇量为60％，边加边搅拌，冷藏静置30小时，滤过，回收乙醇，浓缩至每毫升含药材1g左右，加入乙醇至含醇量为90％，边加边搅拌，冷藏静置50小时，滤过，回收乙醇，浓缩至每毫升含药材1g左右，浓缩液加适量盐酸调PH至1-2，用乙酸乙酯萃取4次，其用量分别为2、1、1、1倍，合并酯液，回收乙酸乙酯，得酯层浓缩液，用浓度25％碳酸钠溶液萃取酯浓缩液4次，其用量分别为酯浓缩液的1、1/2、1/4、1/4倍，合并碱液，立即加适量盐酸调PH至1-2，再用乙酸乙酯萃取酸化液4次，其用量分别为酸化液2、1、1、1倍，合并酯液，回收乙酸乙酯制成流浸膏，流浸膏中加适量氢氧化钠调PH至6.8，减压干燥，即得；取三七药材，粉碎为粗粉，分别加8、6、6倍量80％乙醇提取三次，第一次1.5小时，二、三次为1小时，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩至每毫升含药材约3g，浓缩液加适量蒸馏水，过AB-8大孔树脂柱，蒸馏水洗柱至流出液近无色，再用70％乙醇洗脱，收集醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至无醇味，再用水饱和正丁醇萃取4次，其用量分别为2、1、1、1倍量，合并正丁醇层，回收正丁醇，得稠膏，减压干燥，即得；取冰片，加入聚山梨酯-80，取丹参、三七提取物加适量注射用水溶解，再与用聚山梨酯-80增溶的冰片混合，加0.5％针用活性炭，于50℃加热45分钟，抽滤后，加入甘露醇，加注射用水至2500ml，调PH值7.0-8.0，除菌滤过，分装，冻干，即得。
药效学实施例以下通过药效学实验说明本发明的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂的效果对家兔颈总动脉血栓的作用取家兔24只，体重2.0～2.7kg，雌雄兼用，随机分为4组对照组、本发明实施例1的注射用冻干粉针剂(注射用复方丹参)高、中、低剂量组(60、30、15mg/kg)。各组每天给药1次，对照组静脉注射0.9％氯化钠溶液，给药容积为5ml/kg体重，其余各组按相等容积静脉注射给相应药物。连续七天给药，末次给药后10分钟，按文献方法对家兔实施颈总动脉血栓手术，术后2小时取出并称量所形成血栓的湿重。
试验结果表1所示家兔注射用复方丹参(60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg)，2小时后中、高剂量组动物形成的血栓重量明显减少，与对照组比较，有非常显著性差异。
表1注射用复方丹参对家兔颈总动脉血栓形成的影响(n＝6，x±s)
与对照组比较**p＜0.01对ADP诱导的家兔血小板聚集性的影响取家兔24只，体重2.0～3.0kg，雌雄兼用，随机分为4组正常对照组、本发明实施例1的注射用冻干粉针剂(注射用复方丹参)高、中、低剂量组(60、30、15mg/kg)。各组每天给药1次，对照组静脉注射0.9％氯化钠溶液，给药后10分钟耳缘静脉取血2mL，用3.8％枸橼酸钠(1∶9)抗凝，对照组血小板聚集率为50±10％聚集剂ADP浓度为2.2μM，常规制备PRP、PPP，用PAM-3型双通道血小板聚集仪测定各组血小板聚集率，并求出聚集抑制率。
聚集抑制率％＝(对照组聚集％-给药组聚集％)/对照组聚集％×100％以聚集率为指标进行组间比较，显著性检验。
试验结果如表2所示，家兔注射用复方丹参(60、30、15mg/kg)后10分钟，与正常对照组间比较，对ADP诱导的家兔血小板聚集有非常显著的抑制作用。
表2注射用复方丹参对ADP诱导的家兔血小板聚集性的影响(n＝6，x±s)
与对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响取大鼠50只，体重250～380g，雌雄各半，随机分成5组正常对照组、急性血瘀模型组、本发明实施例1的注射用冻干粉针剂(注射用复方丹参)高、中、低剂量组(100、50、25mg/kg)。各组每天给药1次。正常对照组和急性血瘀模型组每天静脉注射0.9％氯化钠溶液，给药容积为1ml/100g，其余各组按等容积注射给相应药物，连续给药7天，第六天除空白组外均皮下注射肾上腺素0.08mL/100g，共注射两次，间隔6小时。末次给药后1分钟，在水合三氯乙醛麻醉下，固定，开胸，心脏取血5mL，测各组各只动物血液流变学各项指标。
试验结果如表3a、3b所示，大鼠注射用复方丹参(100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg)，能显著降低全血粘度及血浆粘度，缩短红细胞电泳时间，与模型组比较，有显著或非常显著性差异。
表3a注射用复方丹参对血瘀大鼠血液流变学的影响(n＝10，x±s)
与对照组比较***p＜0.001与模型组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001表3b注射用复方丹参对急性血瘀模型大鼠血液流变学指标的影(n＝10，x±s)
与对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001与模型组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001对大鼠体外血小板粘附的影响取大鼠40只，体重250～380g，雌雄各半。按体重随机分为4组，分别为0.9％NaCl对照组，本发明实施例1的注射用冻干粉针剂(注射用复方丹参)高、中、低剂量组(100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg)静脉给药组。各给药组均于给药前用0.9％NaCl配制所需浓度药液，各组给药容积均为10ml/kg。连续7天静脉注射给药，末次给药后10min，在水合氯醛(350mg/kg)麻醉状态下，将大鼠仰卧固定于固定板上，剪开胸腔、用一次性注射器心脏取血2mL，以3.8％枸橼酸钠(1∶9)抗凝，500rpm/min离心5min，取10μL血浆加0.38mL草酸铵稀释液混匀后，取血小板悬液一滴注入记数池内静置10-15min，使血小板下沉，用10×40显微镜记数中央一个大方格内血小板数，乘以0.2×109即为每升血液中血小板数。另取1mL血浆置于粘附瓶内，置于粘附仪中17rpm/min离心15分钟，取出10μL同上述方法记数血小板数，计算出血小板粘附率血小板粘附率％＝(粘附前血小板数-粘附后血小板数)/粘附前血小板数×100％试验结果如表4所示，大鼠注射用复方丹参(100、50、25mg/kg)，对大鼠体外血小板粘附有明显的抑制作用，与对照组比较有非常显著性差异。
表4注射用复方丹参对大鼠体外血小板粘附性的影响(n＝10，x±s)
与对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.00权利要求
1.一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，特征在于其包含丹参总酚酸钠盐、三七总皂苷、冰片和增溶剂。
2.根据权利要求1的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，其每剂量单位中包含丹参总酚酸钠盐50-600mg三七总皂苷6-100mg冰片 3-24mg增溶剂10-300mg。
3.根据权利要求2的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，其每剂量单位中包含丹参总酚酸钠盐 50-300mg三七总皂苷 10-80mg冰片3-15mg增溶剂 10-200mg。
4.根据权利要求3的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，其每剂量单位中包含丹参总酚酸钠盐80-200mg，三七总皂苷10-30mg，冰片3-10mg，增溶剂30-100mg。
5.根据权利要求4的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，其中所述的增溶剂选自聚山梨酯-80、聚氧乙烯蓖麻油的一种或两种的任意混合物。
6.根据权利要求5的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，其还包含冻干赋形剂。
7.根据权利要求6的治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂，所述的冻干赋形剂选自右旋糖苷、甘露醇、乳糖、葡萄糖的一种或几种的任意混合物。
8.制备根据权利要求1-7的冻干粉针剂的方法，其包括以下步骤a.丹参提取物的制备取丹参药材，加水煎煮，将煎煮液滤过，浓缩滤液，加入乙醇使含醇量为40-60％，冷藏静置20-60小时，滤过，回收乙醇，浓缩，加入乙醇至含醇量为70-90％，冷藏静置20-60小时，滤过，回收乙醇，浓缩，将浓缩液调PH至1-2，用乙酸乙酯萃取1-4次，合并酯液，回收乙酸乙酯，得酯浓缩液，用15-25％碳酸钠溶液萃取该酯浓缩液1-4次，合并碱液，调PH至1-2，再用乙酸乙酯萃取该酸化液1-4次，合并酯液，回收乙酸乙酯制成流浸膏，调流浸膏的PH至6.5-7.0，减压干燥，即得；b.三七提取物的制备取三七药材，用乙醇提取，将提取液滤过，回收乙醇，浓缩，向浓缩液中加入蒸馏水，过大孔树脂柱，蒸馏水洗柱至流出液近无色，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至无醇味，再用水饱和正丁醇萃取1-4次，合并正丁醇层，回收正丁醇，得稠膏，减压干燥，即得；c.冻干粉针剂的制备取冰片，用增溶剂增溶，取丹参、三七提取物加注射用水溶解，再与用增溶剂增溶的冰片混合，加针用活性炭，于30～60℃加热15～45分钟，抽滤后，加入冻干赋形剂，加注射用水，调PH值7.0-8.0，除菌滤过，分装，冻干，即得。
全文摘要
本发明涉及一种治疗脑中风及后遗症的冻干粉针剂及其制备方法。该冻干粉针剂中包含丹参总酚酸钠盐、三七总皂苷、冰片和增溶剂。本发明的冻干粉针剂改变了传统复方丹参中药的给药方式，药物直接进入肌肉或血液，发挥药效较快，作用可靠、便于临床应用，尤其是对急重症患者治疗更为有利。
文档编号A61P9/10GK1989974SQ200510135220
公开日2007年7月4日 申请日期2005年12月29日 优先权日2005年12月29日
发明者刘玉辉, 谢瑞钢 申请人:刘玉辉