专利名称：丹灯通脑口服制剂的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，属于对药品进行质量控制的技术领域。
背景技术：
中风是我们日常生活中的一种常见病，严重威胁着人民的身体健康。丹灯通脑制剂主要由丹参、灯盏细辛、川芎和葛根组成，具有活血化淤、祛风通络的作用。其中“丹灯通脑胶囊”和“丹灯通脑软胶囊”均刊登在国家地标升国标中成药部分经络-肢体-脑系分册。该药物在临床上应用多年，在治疗瘀血所致的中风，中经络证方面取得比较满意的治疗效果，但是经过研究发现，现有丹灯通脑制剂均存在着质量控制标准简单，产品质量不易控制等缺点。丹参、灯盏细辛均为丹灯通脑制剂中起主要作用的药物，而现有制剂质量标准并没对这两种药材进行薄层鉴别。另外，现有制剂质量标准中对葛根药材的薄层鉴别中，供试品药液的制备方法不够理想，在鉴别过程中分离度不好，斑点显色不够清晰。故现有质量控制方法不能有效控制这种丹灯通脑口服制剂的质量，从而将影响该制剂的临床疗效。
发明内容
本发明的目的在于提供一种丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，该口服制剂包括颗粒剂、胶囊剂和片剂，本发明针对现有质量控制标准简单、产品质量不易控制等缺点，增加并改进了丹参、灯盏细辛和葛根的薄层鉴别，提高了丹灯通脑口服制剂的质量控制标准，从而确保了该制剂的临床疗效。
本发明所述丹灯通脑口服制剂是这样构成的按照重量组份计算它主要由丹参500-600、灯盏细辛500-600、川芎500-600和葛根800-900按照下述方法制备而成川芎、葛根加水煎煮1-5次，滤过，合并滤液，滤液浓缩，加入乙醇，搅匀，加热至60℃，静置，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，85℃以下真空干燥成干膏；丹参加入50-90％乙醇浸渍1-5次，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，85℃以下真空干燥成干膏；灯盏细辛加入50-90％乙醇浸渍1-5次，滤过，滤液减压回收乙醇，放冷，滤过，滤液用硫酸溶液调节pH值至1-3，静置，滤取黄绿色沉淀物，用水洗涤至pH值为5～7，85℃以下烘干，与上述干膏混合，粉碎，过筛，加入辅料(也可不加辅料)，再用常规方法制成胶囊剂、片剂或颗粒剂。
所述质量控制方法主要包括性状、检查、鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括以川芎对照药材鉴别制剂中川芎药材、以葛根素对照品鉴别制剂中葛根药材、以丹参酮IIA对照品鉴别制剂中丹参药材、以野黄芩苷对照品鉴别制剂中灯盏细辛药材的薄层鉴别；含量测定为对制剂中葛根素的含量测定。
本制剂中川芎的鉴别方法是以川芎对照药材为对照，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂的薄层鉴别方法。
本制剂中葛根的鉴别方法是以葛根素对照品为对照，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂的薄层鉴别方法。
本制剂中丹参的鉴别方法是以丹参酮IIA对照品为对照，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂的薄层鉴别方法。
本制剂中灯盏细辛的鉴别方法是以野黄芩苷对照品为对照，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂的薄层鉴别方法。
鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇或乙腈＝1-9∶9-1混合液，加热回流提取，放冷，滤过，滤渣用上述混合液洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材，加乙醚，加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入甲醇，密塞，放置，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入乙醚，密塞，充分振摇，放置，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
(4)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入20-85％乙醇，加热回流提取，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加入水微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-3，用醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
更具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇或乙腈＝1-9∶9-1混合液10-50ml，加热回流10-60分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液2-10ml洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.2-1g，加乙醚5-50ml，加热回流0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5-5ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液各2-20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各0.5-5g，研细，置锥形瓶中，加甲醇10-50ml，密塞，放置0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各2-20μl，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加乙醚10-50ml，密塞，充分振摇，放置0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1-5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5-25μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加20-85％乙醇10-100ml，加热回流10-60分钟，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加水10-30ml微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-3，用醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各2-20μl分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
本制剂中葛根素的含量测定方法是以葛根素对照品为对照，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相的高效液相色谱法。
含量测定方法为葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；检测波长为200-500nm；流速0.8-1.2ml/min；柱温30-60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10-80％乙醇溶解，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入10-80％乙醇溶液，称定重量，加热回流提取，放冷，再称定重量，用10-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
更具体的含量测定方法为葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；检测波长为200-500nm；流速0.8-1.2ml/min；柱温30-60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10-80％乙醇制成每1ml含10-100μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加10-80％乙醇溶液10-100ml，称定重量，加热回流10-60分钟，放冷，再称定重量，用10-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-25μl，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
所述质量控制方法包括性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别(1)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇或乙腈＝1-9∶9-1混合液，加热回流提取，放冷，滤过，滤渣用上述混合液洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材，加乙醚，加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入甲醇，密塞，放置，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入乙醚，密塞，充分振摇，放置，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入20-85％乙醇，加热回流提取，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加入水微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-3，用醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；检查本发明的胶囊剂、片剂或颗粒剂应符合中国药典关于胶囊剂、片剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；检测波长为200-500nm；流速0.8-1.2ml/min；柱温30-60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10-80％乙醇溶解，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入10-80％乙醇溶液，称定重量，加热回流提取，放冷，再称定重量，用10-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
经研究发现，采用以下质量控制方法将更容易控制丹灯通脑口服制剂的质量，更利于保证本制剂的临床疗效。故所述质量控制方法还可包括性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别(1)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇或乙腈＝1-9∶9-1混合液10-50ml，加热回流10-60分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液2-10ml洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.2-1g，加乙醚5-50ml，加热回流0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5-5ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液各2-20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各0.5-5g，研细，置锥形瓶中，加甲醇10-50ml，密塞，放置0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各2-20μl，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加乙醚10-50ml，密塞，充分振摇，放置0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1-5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5-25μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加20-85％乙醇10-100ml，加热回流10-60分钟，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加水10-30ml微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-3，用醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各2-20μl分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；检查本发明的胶囊剂、片剂或颗粒剂应符合中国药典关于胶囊剂、片剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；检测波长为200-500nm；流速0.8-1.2ml/min；柱温30-60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10-80％乙醇制成每1ml含10-100μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加10-80％乙醇溶液10-100ml，称定重量，加热回流10-60分钟，放冷，再称定重量，用10-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-25μl，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
本发明的质量控制方法是经过大量的实验筛选才得到的最佳方案，以下实验研究为本发明的优选过程。
一、葛根素含量测定方法研究1、供试品溶液制备方法研究方法1取药品，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入30％乙醇溶液，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用30％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
方法2取药品，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
根据试验结果可知，采用方法1制备供试品溶液，葛根素提取更为完全。
2、流动相的选择流动相1以甲醇和2.5％醋酸不同比例的混合溶液为流动相。
流动相2以甲醇和3％醋酸不同比例的混合溶液为流动相。
流动相3以乙腈、甲醇和枸櫞酸溶液不同比例的混合溶液为流动相。
流动相4以甲醇和水不同比例的混合溶液为流动相。
流动相5以乙腈和水不同比例的混合溶液为流动相。
结果以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；阴性样品色谱图在葛根素位置处无假阳性峰，葛根素和相近的杂质峰分离完全(分离度＞1.5)，即在该条件下葛根素与其他组分分离完全。最佳流动相为∶甲醇∶水＝25∶75。
3、重复性实验取药品，按本发明所述质量控制方法含量测定项下供试液的制备方法制备5份供试液，进样，测定峰面积，计算结果列入下表，葛根素平均含量为5.0275mg/g，RSD为0.72％。
制剂供试品中葛根素的重现性试验
根据结果可见，该法重现性良好。
4、回收率实验
采用加样回收法，精密称取已测定含量的制剂(平均含量5.0275mg/g)适量，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入葛根素对照品溶液(0.0505mg/ml)25.00ml，再加30％乙醇25.00ml，称定重量，回流提取30分钟，放冷，再称定重量，用30％乙醇补足减失的重量，摇匀，取上清液滤过(0.45μm)，制成供试品溶液。分别制备5份，测定，平均回收率为96.35％，RSD为0.60％。
供试品溶液中葛根素测定回收率试验
二、川芎薄层鉴别研究以川芎对照药材鉴别制剂中的川芎药材供试品溶液制备方法一取药品，研细，置锥形瓶中，加氯仿-甲醇(2∶1)混合液，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿溶解，作为供试品溶液；同法制备缺川芎阴性供试液。
供试品溶液制备方法二取药物，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇，称重，超声提取，放冷，补充失去的重量，滤过，精密量取续滤液，加甲醇稀释，过滤，即得；同法制备缺川芎阴性供试液。
展开剂选择分别以石油醚和醋酸乙酯不同比例的混合溶液；正己烷、醋酸乙酯不同比例的混合溶液为展开剂。
结果采用方法一制备供试品溶液，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，其分离度好，斑点显色清晰，阴性对照无干扰，方法重现性好。最佳展开剂为正己烷∶醋酸乙酯＝9∶1。
三、葛根薄层鉴别研究以葛根素对照品鉴别制剂中的葛根药材供试品溶液制备方法一取药物，研细，置锥形瓶中，加乙醇，密塞，放置2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液；同法制备缺葛根阴性供试液。
供试品溶液制备方法二取药物，研细，置锥形瓶中，加甲醇，密塞，放置2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；同法制备缺葛根阴性供试液。
供试品溶液制备方法三取药品，置锥形瓶中，加氯仿-甲醇(2∶1)混合液，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液洗涤，加入甲醇，振摇，使其充分溶解，滤过，残渣用甲醇洗涤，洗液与滤液合并，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；同法制备缺葛根阴性供试液。
供试品溶液制备方法四取药品，置锥形瓶中，加氯仿-甲醇(2∶1)混合液，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；同法制备缺葛根阴性供试液。
展开剂选择分别以氯仿、乙腈、水不同比例的混合溶液；氯仿、甲醇、水不同比例的混合溶液；氯仿、甲醇、水、冰醋酸不同比例的混合溶液为展开剂。
结果采用方法二制备供试品溶液，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，其分离度好，斑点显色清晰，阴性对照无干扰，方法重现性好。最佳展开剂为氯仿∶甲醇∶水＝5∶2.5∶0.25。
采用其他方法制备供试品溶液，鉴别结果分离度不好，斑点显色不清晰。
四、丹参鉴别研究以丹参酮IIA对照品鉴别制剂中的丹参药材供试品溶液制备方法一取药物，研匀，加氯仿浸渍1小时，过滤，滤液蒸干，残渣加氯仿溶解，过滤，即得；同法制备缺丹参阴性供试液。
供试品溶液制备方法二取药物，研细，置锥形瓶中，加乙醚，密塞，充分振摇，放置1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；同法制备缺丹参阴性供试液。
展开剂选择分别以苯、醋酸乙酯不同比例的混合溶液；甲苯、醋酸乙酯不同比例的混合溶液；正己烷、醋酸乙酯不同比例的混合溶液为展开剂。
结果采用方法二制备供试品溶液，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，其分离度好，斑点显色清晰，阴性对照无干扰，方法重现性好。最佳展开剂为甲苯∶醋酸乙酯＝20∶1。
五、灯盏细辛鉴别研究以野黄芩苷对照品鉴别制剂中的灯盏细辛药材供试品溶液制备方法一取药物，研细，加50％乙醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，水溶液用饱和的正丁醇提取2次，合并正丁醇，蒸干，残渣加甲醇，即得；同法制备缺灯盏细辛阴性供试液。
供试品溶液制备方法二取药物，研细，置锥形瓶中，加50％乙醇，加热回流提取，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加水微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至1-2，用醋酸乙酯提取2次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；同法制备缺灯盏细辛阴性供试液。
展开剂选择分别以冰醋酸、乙醇不同比例的混合溶液；醋酸乙酯、丁酮、甲醇、水不同比例的混合溶液为展开剂。
结果采用方法二制备供试品溶液，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，其分离度好，斑点显色清晰，阴性对照无干扰，方法重现性好。最佳展开剂为冰醋酸∶乙醇＝4∶1。
与现有技术相比，本发明针对现有质量控制标准简单、产品质量不易控制等缺点，增加并改进了丹参、灯盏细辛和葛根的薄层鉴别，所选用的方法分离度好，重现性好，回收率高，测量结果准确，提高了丹灯通脑口服制剂的质量控制标准，从而确保了该制剂的临床疗效。
具体实施例方式以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
本发明的实施例1性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别(1)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各2g，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇＝2∶1混合液25ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液5ml洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.5g，加乙醚10ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液15μl对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1g，研细，置锥形瓶中，加甲醇20ml，密塞，放置2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl及对照品溶液2μl分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝5∶2.5∶0.25为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各2g，研细，置锥形瓶中，加乙醚20ml，密塞，充分振摇，放置1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液15μl及对照品溶液5μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝20∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各2g，研细，置锥形瓶中，加50％乙醇30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加水20ml微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至1-2，用醋酸乙酯提取2次，每次15ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl及对照品溶液2μl分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；检查本发明的胶囊剂、片剂或颗粒剂应符合中国药典关于胶囊剂、片剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C18柱，以甲醇∶水＝25∶75为流动相；检测波长为250nm；流速1.0ml/min；柱温40℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于4000；精密称取葛根素对照品，加30％乙醇制成每1ml含40μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加30％乙醇溶液50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用30％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
本发明的实施例2
性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别(1)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1g，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶乙腈＝1∶9混合液10ml，加热回流10分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液2ml洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.2g，加乙醚5ml，加热回流0.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.51使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1∶9为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1g，研细，置锥形瓶中，加20％乙醇10ml，加热回流10分钟，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加水10ml微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-2，用醋酸乙酯提取1次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20μl及对照品溶液10μl分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1∶9为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；含量测定葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C8柱，以乙腈∶水＝10∶90为流动相；检测波长为200nm；流速0.8ml/min；柱温30℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10％乙醇制成每1ml含10μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加10％乙醇溶液10ml，称定重量，加热回流10分钟，放冷，再称定重量，用10％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
本发明的实施例3性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；
对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别(1)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各0.5g，研细，置锥形瓶中，加甲醇10ml，密塞，放置0.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20μl及对照品溶液10μl分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶乙腈∶水＝1∶10∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各1g，研细，置锥形瓶中，加乙醚10ml，密塞，充分振摇，放置0.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液25μl及对照品溶液15μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10∶5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；检查本发明的胶囊剂、片剂或颗粒剂应符合中国药典关于胶囊剂、片剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C4柱，以甲醇∶水＝90∶10为流动相；检测波长为500nm；流速1.2ml/min；柱温60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加80％乙醇制成每1ml含100μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加80％乙醇溶液100ml，称定重量，加热回流60分钟，放冷，再称定重量，用80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各25μl，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
本发明的实施例4性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；
对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别(1)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各5g，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇＝9∶1混合液50ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液10ml洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿5ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材1g，加乙醚50ml，加热回流5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液各20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝6∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各5g，研细，置锥形瓶中，加甲醇50ml，密塞，放置5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液15μl及对照品溶液8μl分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝10∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各5g，研细，置锥形瓶中，加85％乙醇100ml，加热回流60分钟，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加水30ml微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至1-3，用醋酸乙酯提取5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液15μl及对照品溶液8μl分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；检查本发明的胶囊剂、片剂或颗粒剂应符合中国药典关于胶囊剂、片剂或颗粒剂项下的有关规定。
本发明的实施例5性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别分别取胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂各5g，研细，置锥形瓶中，加乙醚50ml，密塞，充分振摇，放置5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯3ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20μl及对照品溶液10μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝30∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；检查本发明的胶囊剂、片剂或颗粒剂应符合中国药典关于胶囊剂、片剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C18柱，以乙腈∶水＝70∶30为流动相；检测波长为365nm；流速1.0ml/min；柱温50℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加50％乙醇制成每1ml含70μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂中的内容物、片剂或颗粒剂，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加50％乙醇溶液80ml，称定重量，加热回流40分钟，放冷，再称定重量，用50％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
权利要求
1.一种丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，该口服制剂包括颗粒剂、胶囊剂和片剂，由丹参、灯盏细辛、川芎和葛根组成，其特征在于所述质量控制方法主要包括性状、检查、鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括以川芎对照药材鉴别制剂中川芎药材、以葛根素对照品鉴别制剂中葛根药材、以丹参酮IIA对照品鉴别制剂中丹参药材、以野黄芩苷对照品鉴别制剂中灯盏细辛药材的薄层鉴别；含量测定为对制剂中葛根素的含量测定。
2.按照权利要求1所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于本制剂中川芎的鉴别方法是以川芎对照药材为对照，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂的薄层鉴别方法。
3.按照权利要求1所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于本制剂中葛根的鉴别方法是以葛根素对照品为对照，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂的薄层鉴别方法。
4.按照权利要求1所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于本制剂中丹参的鉴别方法是以丹参酮IIA对照品为对照，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂的薄层鉴别方法。
5.按照权利要求1所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于本制剂中灯盏细辛的鉴别方法是以野黄芩苷对照品为对照，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂的薄层鉴别方法。
6.按照权利要求1、2、3、4或5所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇或乙腈＝1-9∶9-1混合液，加热回流提取，放冷，滤过，滤渣用上述混合液洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材，加乙醚，加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入甲醇，密塞，放置，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入乙醚，密塞，充分振摇，放置，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入20-85％乙醇，加热回流提取，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加入水微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-3，用醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
7.按照权利要求6所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇或乙腈＝1-9∶9-1混合液10-50ml，加热回流10-60分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液2-10ml洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.2-1g，加乙醚5-50ml，加热回流0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5-5ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液各2-20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂各0.5-5g，研细，置锥形瓶中，加甲醇10-50ml，密塞，放置0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各2-20μl，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加乙醚10-50ml，密塞，充分振摇，放置0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1-5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5-25μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加20-85％乙醇10-100ml，加热回流10-60分钟，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加水10-30ml微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-3，用醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各2-20μl分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
8.按照权利要求1所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于本制剂中葛根素的含量测定方法是以葛根素对照品为对照，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相的高效液相色谱法。
9.按照权利要求1或8所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于含量测定方法为葛根素 照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；检测波长为200-500nm；流速0.8-1.2ml/min；柱温30-60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10-80％乙醇溶解，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入10-80％乙醇溶液，称定重量，加热回流提取，放冷，再称定重量，用10-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
10.按照权利要求9所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于具体的含量测定方法为葛根素 照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；检测波长为200-500nm；流速0.8-1.2ml/min；柱温30-60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10-80％乙醇制成每1ml含10-100μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加10-80％乙醇溶液10-100ml，称定重量，加热回流10-60分钟，放冷，再称定重量，用10-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-25μl，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
11.按照权利要求1所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法包括性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别(1)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇或乙腈＝1-9∶9-1混合液，加热回流提取，放冷，滤过，滤渣用上述混合液洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材，加乙醚，加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入甲醇，密塞，放置，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入乙醚，密塞，充分振摇，放置，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置锥形瓶中，加入20-85％乙醇，加热回流提取，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加入水微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-3，用醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇溶解，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；检查本发明的胶囊剂、片剂或颗粒剂应符合中国药典关于胶囊剂、片剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定葛根素 照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；检测波长为200-500nm；流速0.8-1.2ml/min；柱温30-60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10-80％乙醇溶解，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入10-80％乙醇溶液，称定重量，加热回流提取，放冷，再称定重量，用10-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
12.按照权利要求11所述丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法包括性状对于胶囊剂产品内容物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于片剂药物显浅黄棕色至深棕褐，味苦、涩；对于颗粒剂产品为浅黄棕色至深棕褐色的颗粒；味甜，微苦、涩；鉴别(1)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加氯仿∶甲醇或乙腈＝1-9∶9-1混合液10-50ml，加热回流10-60分钟，放冷，滤过，滤渣用上述混合液2-10ml洗涤，合并洗涤液，蒸干，残渣加氯仿0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.2-1g，加乙醚5-50ml，加热回流0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5-5ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液各2-20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(2)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂各0.5-5g，研细，置锥形瓶中，加甲醇10-50ml，密塞，放置0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各2-20μl，分别条带状点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇或乙腈∶水＝1-10∶1-10∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯200-500nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；(3)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加乙醚10-50ml，密塞，充分振摇，放置0.5-5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5-3ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1-5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各5-25μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶醋酸乙酯＝10-30∶0.5-5为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)分别取胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂各1-5g，研细，置锥形瓶中，加20-85％乙醇10-100ml，加热回流10-60分钟，滤过，滤液挥至无醇味，残渣加水10-30ml微热溶解，趁热滤过，冷却，滤液用盐酸调pH值至0.5-3，用醋酸乙酯提取1-5次，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取野黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各2-20μl分别点于同一聚酰胺膜上，以冰醋酸∶乙醇＝1-9∶9-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；检查本发明的胶囊剂、片剂或颗粒剂应符合中国药典关于胶囊剂、片剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定葛根素照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶水＝10-90∶90-10为流动相；检测波长为200-500nm；流速0.8-1.2ml/min；柱温30-60℃；理论板数按葛根素峰计算应不低于3000；精密称取葛根素对照品，加10-80％乙醇制成每1ml含10-100μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂的内容物、片剂或颗粒剂，研细，精密称取0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加10-80％乙醇溶液10-100ml，称定重量，加热回流10-60分钟，放冷，再称定重量，用10-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-25μl，注入液相色谱仪测定含量；该口服制剂中，胶囊剂中含葛根以葛根素计，不得少于35mg/g；片剂中含葛根以葛根素计，不得少于30mg/g；颗粒剂中含葛根以葛根素计，不得少于4mg/g。
全文摘要
本发明提供了一种丹灯通脑口服制剂的质量控制方法，所述质量控制方法主要包括性状、检查、鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括以川芎对照药材、葛根素对照品、丹参酮IIA对照品、野黄芩苷对照品为对照的薄层鉴别；含量测定为对制剂中葛根素的含量测定；与现有技术相比，本发明增加并改进了丹参、灯盏细辛和葛根的薄层鉴别，所选用的方法分离度好，重现性好，回收率高，测量结果准确，提高了丹灯通脑口服制剂的质量控制标准，从而确保了该制剂的临床疗效。
文档编号A61K9/20GK1823899SQ200510200889
公开日2006年8月30日 申请日期2005年12月29日 优先权日2005年12月29日
发明者叶湘武, 张梅 申请人:贵州益佰制药股份有限公司